菌株鉴定

摘要： 目前绿原酸的主要来源为天然植物中提取,但天然植物中绿原酸含量较低且提取工艺复杂,导致绿原酸生产效率较低,因此有必要寻找新的、高效的制备绿原酸方法.本研究以金银花叶、红薯叶、薄荷叶、蒲公英叶和杜仲叶为材料,采用组织块法开展合成绿原酸的内生菌分离筛选,并利用高效液相色谱(HPLC)对筛选出内生菌的发酵产物进行分析,最终从植物样本中分离到具有合成绿原酸能力的5株内生菌,其中菌株XJ-1的绿原酸产量为9.9μg/mL.形态特征和16S rDNA序列分析表明,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).对发酵培养基进行初步优化,优化后的发酵培养基主要成分为:果糖30 g/L、柠檬酸铵5 g/L、玉米浆6 g/L,所得绿原酸的产量达到24.02μg/mL,为优化前的2.43倍.本研究为开发微生物发酵法生产绿原酸提供了基础数据支持.

摘要： 采用ITS鉴定法和形态学方法对野生美味扇菇1509菌株进行鉴定,优化其菌丝培养条件.结果表明,菌株1509最适碳源为果糖,最适氮源为蛋白胨,最适无机盐为MgSO_(4).正交试验结果表明,野生菌株1509的最适培养基配方为果糖20.0 g·L^(-1)、蛋白胨2.0 g·L^(-1)、MgSO_(4)0.75 g·L^(-1)、CaCl_(2)0.5 g·L^(-1)、KH_(2)PO_(4)1 g·L^(-1)、VB_(1)10 mg·L^(-1)、琼脂20 g·L^(-1).经人工驯化、栽培出菇获得美味扇菇子实体,测定子实体的粗多糖、粗蛋白质、钙、铁、VC、VE以及17种氨基酸含量;其中钙含量高达133.96 mg·100^(-1)g^(-1),含有7种人体必需氨基酸,必需氨基酸含量满足理想蛋白均衡值.

摘要： [目的]筛选适合我国北方冬春季秸秆降解的高效低温纤维素降解菌株。[方法]在低温地区采集土壤,10°C初筛耐低温菌株,通过刚果红染色液法进行复筛,利用DNS法测定CMC酶活性。将筛得菌株和实验室自存菌株结合拮抗试验构建复合菌系,测定复合菌系CMC酶活性,测定秸秆降解率,并对代表性菌株进行产酶条件优化,对最终确定的复合菌系中的菌株进行分子生物学鉴定。[结果]10°C低温培养初筛得到55株耐低温菌株,刚果红染色法复筛得到8株具有明显水解圈的单菌株,其中包括细菌3株、真菌2株、放线菌3株,其中纤维素酶活性最高达到47.0 U/mL;根据拮抗试验构建了2个复合菌系,其纤维素酶活性分别达到31.0和53.0 U/mL;秸秆降解试验中,实验室和沙袋法的复合菌系2对秸秆的降解率分别达31.8%和45.1%,显著高于复合菌系1和对照组;对JGDZTX3进行产酶条件优化,确定最佳氮源为牛肉膏,培养温度为10°C,培养时间为4 d,初始pH为7,在此条件下CMC酶活性达到66.5 U/mL,这4个条件对产酶均有显著影响(P<0.05);对复合菌系2的4个未知菌株进行鉴定,鉴定结果分别为白蚁菌、葡萄球菌、长柄木霉、芬莱氏链霉菌。[结论]通过该试验筛选得到的耐低温可降解纤维素复合菌系有较强的纤维素分解能力,在北方低温地区有良好的应用前景。

摘要： 从堆肥中筛选到一株高活性纤维素酶产生菌B4,通过观察菌株的形态、研究生理生化特征和分析16SrDNA序列,对菌株进行种的鉴定;以单因素和正交实验相结合筛选菌株的最佳产酶发酵条件。结果表明:菌株B4为革兰氏阳性菌,菌体呈长杆状、芽孢椭圆中生,经16S rDNA序列比对分析鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。最佳固体发酵培养基为:玉米芯粉25 g、七水硫酸镁0.1 g、氯化钙0.1 g、土温200.6 g、麸皮8 g、蛋白胨0.5 g、硫酸铵0.2 g、氯化钠0.6 g、土温800.2 g、磷酸二氢钾0.5 g、糖蜜0.5 g、水125 mL;最佳理化发酵条件为:温度34°C、pH 6.0、接种量1.5%(OD_(600)=1.0)。在最佳条件下发酵24 h,发酵最高酶活达18.74 U/g。通过研究可为纤维素酶制剂研究和开发提供菌株来源。

摘要： 目的:通过参加中国食品药品检定研究院组织的能力验证,比对不同检验方法对巧克力样品中沙门氏菌的检出及鉴定效果,找出不同检验方法对样品中不典型沙门氏菌分离及鉴定的特性,有效提升实验室对不典型沙门氏菌检验能力及质量控制水平。方法:实验中样品前处理按照考核方案作业指导书进行,沙门氏菌的分离按照《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》(GB 4789.4—2016)要求进行操作,通过BAX®system Q7快速筛查可疑样品,MALDI-TOF-MS定位可疑菌株,VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析系统确认阳性菌株,MLST技术对沙门氏菌阳性菌株进行分子生物学分型。结果:3个样品中两个样品检出沙门氏菌,样品CODE-0695检出鼠伤寒沙门氏菌,样品CODE-0050未检出沙门氏菌,样品CODE-0542检出肠道沙门菌双相亚利桑那亚种。结论:实验发现肠道沙门菌双相亚利桑那亚种在显色培养基上菌落形态及生化表征与常见沙门氏菌不一致,易漏检,实际工作中应加强对不典型沙门氏菌检验能力的建设。

摘要： 【目的】筛选并鉴定对芋头干腐病菌具有显著拮抗作用的芽孢杆菌,为有效防控芋头干腐病提供生防资源。【方法】采用稀释平板分离法从茶树根际土壤中分离芽孢杆菌;以芋头干腐病的优势病原菌茄镰刀菌(Fusarium solani)为靶标菌,采用平板对峙法筛选拮抗菌株,并测定拮抗菌株的抑菌范围;通过形态观察、生理生化特性测定和16S rDNA、gyrA、rpoB基因序列分析,对拮抗菌株进行种类鉴定。【结果】筛选到1株对芋头干腐病菌具有显著抑菌效果的菌株,命名为D-1。该菌株对供试的其他9种植物病原真菌和5种植物病原细菌也有显著的抑菌作用。D-1菌落圆形、乳白色、不透明、表面干燥皱褶、边缘不整齐、中央凹陷;生理生化特性测定结果与对照菌株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)FJ17-4的测定结果一致;测定的16S rDNA、gyrA和rpoB 3个基因序列与GenBank中B.velezensis对应序列的同源性均为100%;在分别基于16S rDNA、gyrA和rpoB基因序列构建的系统发育树上,该菌株与贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)各菌株聚类成一个分支。【结论】根据形态特征、生理生化特性和多基因序列分析结果,鉴定菌株D-1为贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis),该菌株抑菌活性强,抑菌谱广,在植物病害生物防治中具有应用潜力。

摘要： 功能特性和培养条件研究是植物根际促生菌(PGPR)工业化潜力挖掘和开发的关键。为了进一步对菌株开发利用,选取前期研究中从珠芽蓼(Polygonum viviparum)、洽草(Koeleria glauca)、红三叶(Trifolium pratense)及草地早熟禾(Poa pratensis)根际获得的5株菌株为材料,测定菌株溶磷、固氮、分泌吲哚乙酸(IAA)能力等特性,利用16S rRNA分子生物学技术,确定菌株分类学地位;测定菌株生长特性、温度耐受性、pH耐受性、产气特性、产酸特性,确定菌株适宜的培养条件。结果表明:菌株M1溶有机磷量最高,为170.37μg·mL^(−1),菌株Y3溶无机磷量最高,为308.50μg·mL^(−1);菌株Y1、Y3、Y5、M1、M6均具有分泌IAA的能力,分泌量在24.23~164.74μg·mL^(−1)。菌株Y1和Y3具有固氮能力,固氮酶活性分别为175.30和255.55 nmol·(h·mL)^(−1)(C_(2)H_(4))。通过对菌株生长特性测定,5株菌株在40 h均已进入生长稳定期,适宜的生长温度在25~31°C,适宜的生长pH范围为6.50~7.50,在LB培养基中生长无产气现象,生长过程中pH稳定在6.23~7.52,具有作为工业化发酵菌种的潜力。16S rDNA鉴定确定菌株Y5与Y3为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),Y1为蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides),M1为产黄假单胞菌(Pseudomonas synxantha),M6为猴假单胞菌属(Pseudomonas simiae)。本研究为菌株的工业化生产研究奠定了基础。

摘要： 从连云港某废弃化工厂污染土壤中分离筛选高效石油烃降解菌株,研究菌株的生理生化特征并对其进行测序和种属鉴定,采用单因素试验对菌株降解柴油的环境因子进行分析。结果表明:从污染土壤中共分离出柴油降解菌株4株,经过测序及同源比对,与该4株菌株同源性最高的分别为阴沟肠杆菌(Enterobacter_cloacae,HY1),肺无色杆菌(Achromobacter_pulmonis,HY2),台湾假单胞菌(Pseudomonas_taiwanensis,HY3),铜绿假单胞菌(Pseudomonas_aeruginosa,HY4),同源性均达98%以上;4株菌株具备不同的产表面活性剂能力和柴油降解能力,其中菌株HY1和HY2对柴油的降解率最高,当柴油浓度为0.5%,处理时间为20 d时,二者对柴油的降解率均达37%以上;通过单因素试验对降解条件进行优化后,发现在柴油浓度为0.5%,降解时间为8 d时,菌株HY2和HY1最佳降解条件是初始pH为7,摇床转速为180 r/min,接种量为3%~4%,此时,二者对柴油的降解率分别为40.15%和43.87%。本研究可以丰富石油烃降解菌的菌种信息,为石油烃污染土壤修复提供菌种资源及数据支持。

摘要： 以婴儿和成人肠道来源的菌株K56和ET-22为研究对象,选取8株其他来源菌株作为参考,采用形态学、生理生化、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱、全基因组测序、多位点序列分型分析和单核苷酸多态性(single nucleotide polymophism,SNP)分析,建立了适用于菌株K56和ET-22的鉴定方法。结果表明,菌株K56和ET-22及参考菌株的基质辅助激光解吸/电离飞行时间鉴定比对值大于2,平均核苷酸一致性值(average nucleotide identity,ANI)达到95%以上,在种水平均鉴定为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei);对副干酪乳杆菌K56、ET-22和参考菌株的1701个共有核心基因开展基于全基因组测序的多基因序列位点分析,菌株K56和ET-22可与其他参考菌株有效区分,SNP分析表明不同培养代数间副干酪乳杆菌K56的SNP差异为103、ET-22的SNP差异为49,系统发育分析表明该方法可以有效区分副干酪乳杆菌K56、ET-22与其他参考菌株。益生菌的安全性和功能性均在菌株水平具有特异性,已成为业内新的科学共识。该研究建立的益生菌K56和ET-22菌株水平精准鉴定方法体系,对促进其在乳品行业的广泛应用具有重要意义。

摘要： 铱在贵州省都匀市雨花湖公园附近5~15厘米深土层的土壤和水域区泥底中采样,通过分离、筛选后得到了1株具有降亚硝酸盐(NO_(2)^(-))优势的菌株且命名为Y2;经过测序及形态学等分析,判断Y2为Bacillus aryabhattai,即阿氏芽孢杆菌。实验分析显示该菌在养殖水样和模拟水样中7天后NO2-的降低率分别为24.3%、63.6%,对水质净化有明显的效果。

摘要： 对定西市马铃薯生长期真菌性土传病害病原菌进行了分离鉴定,共鉴定到3种病原菌:球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)引起马铃薯炭疽病,大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起马铃薯黄萎病,立枯丝核菌(Rhizoefonia solani)引起马铃薯黑痣病.马铃薯黑痣病菌菌丝存在遗传分化现象,从定西市马铃薯产区采集茎部和薯块病样80份,经融合群测定.结果表明,80株菌株中与标准菌株AG3融合的占总数的70.0％、与AG4-HG-Ⅱ融合的占15.0％、与AG2-1融合的占7.5％.

摘要： 对定西市马铃薯生长期真菌性土传病害病原菌进行了分离鉴定,共鉴定到3种病原菌:球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)引起马铃薯炭疽病,大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起马铃薯黄萎病,立枯丝核菌(Rhizoefonia solani)引起马铃薯黑痣病.马铃薯黑痣病菌菌丝存在遗传分化现象,从定西市马铃薯产区采集茎部和薯块病样80份,经融合群测定.结果表明,80株菌株中与标准菌株AG3融合的占总数的70.0％、与AG4-HG-Ⅱ融合的占15.0％、与AG2-1融合的占7.5％.

摘要： 对定西市马铃薯生长期真菌性土传病害病原菌进行了分离鉴定,共鉴定到3种病原菌:球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)引起马铃薯炭疽病,大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起马铃薯黄萎病,立枯丝核菌(Rhizoefonia solani)引起马铃薯黑痣病.马铃薯黑痣病菌菌丝存在遗传分化现象,从定西市马铃薯产区采集茎部和薯块病样80份,经融合群测定.结果表明,80株菌株中与标准菌株AG3融合的占总数的70.0％、与AG4-HG-Ⅱ融合的占15.0％、与AG2-1融合的占7.5％.

摘要： 对定西市马铃薯生长期真菌性土传病害病原菌进行了分离鉴定,共鉴定到3种病原菌:球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)引起马铃薯炭疽病,大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起马铃薯黄萎病,立枯丝核菌(Rhizoefonia solani)引起马铃薯黑痣病.马铃薯黑痣病菌菌丝存在遗传分化现象,从定西市马铃薯产区采集茎部和薯块病样80份,经融合群测定.结果表明,80株菌株中与标准菌株AG3融合的占总数的70.0％、与AG4-HG-Ⅱ融合的占15.0％、与AG2-1融合的占7.5％.

摘要： 马铃薯晚疫病是由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的世界范围内的马铃薯毁灭性病害.目前主要防治措施为使用化学农药,但单一使用化学药剂防治往往带来抗药性和农药残留问题.生物防治可有效控制病害的发生,且不会造成环境污染,应用前景广阔.试验在晚疫病菌复壮过程中,从污染的杂菌中分离获得一株抑制马铃薯晚疫病菌生长的菌株,进一步进行了生物学特性分析、分子生物学鉴定和抑菌测定.经测定20和28°C培养温度下,该菌可在GA、PDA、LB和黑麦-番茄汁培养基上良好生长;经16S rDNA序列分析,确定该菌株为链霉菌属(Streptomyces sp.)放线菌;对峙培养结果表明该菌对马铃薯晚疫病菌株XH05-5-4有显著的抑制效果,具有进一步研究的价值.

摘要： 马铃薯晚疫病是由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的世界范围内的马铃薯毁灭性病害.目前主要防治措施为使用化学农药,但单一使用化学药剂防治往往带来抗药性和农药残留问题.生物防治可有效控制病害的发生,且不会造成环境污染,应用前景广阔.试验在晚疫病菌复壮过程中,从污染的杂菌中分离获得一株抑制马铃薯晚疫病菌生长的菌株,进一步进行了生物学特性分析、分子生物学鉴定和抑菌测定.经测定20和28°C培养温度下,该菌可在GA、PDA、LB和黑麦-番茄汁培养基上良好生长;经16S rDNA序列分析,确定该菌株为链霉菌属(Streptomyces sp.)放线菌;对峙培养结果表明该菌对马铃薯晚疫病菌株XH05-5-4有显著的抑制效果,具有进一步研究的价值.

摘要： 马铃薯晚疫病是由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的世界范围内的马铃薯毁灭性病害.目前主要防治措施为使用化学农药,但单一使用化学药剂防治往往带来抗药性和农药残留问题.生物防治可有效控制病害的发生,且不会造成环境污染,应用前景广阔.试验在晚疫病菌复壮过程中,从污染的杂菌中分离获得一株抑制马铃薯晚疫病菌生长的菌株,进一步进行了生物学特性分析、分子生物学鉴定和抑菌测定.经测定20和28°C培养温度下,该菌可在GA、PDA、LB和黑麦-番茄汁培养基上良好生长;经16S rDNA序列分析,确定该菌株为链霉菌属(Streptomyces sp.)放线菌;对峙培养结果表明该菌对马铃薯晚疫病菌株XH05-5-4有显著的抑制效果,具有进一步研究的价值.

摘要： 马铃薯晚疫病是由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的世界范围内的马铃薯毁灭性病害.目前主要防治措施为使用化学农药,但单一使用化学药剂防治往往带来抗药性和农药残留问题.生物防治可有效控制病害的发生,且不会造成环境污染,应用前景广阔.试验在晚疫病菌复壮过程中,从污染的杂菌中分离获得一株抑制马铃薯晚疫病菌生长的菌株,进一步进行了生物学特性分析、分子生物学鉴定和抑菌测定.经测定20和28°C培养温度下,该菌可在GA、PDA、LB和黑麦-番茄汁培养基上良好生长;经16S rDNA序列分析,确定该菌株为链霉菌属(Streptomyces sp.)放线菌;对峙培养结果表明该菌对马铃薯晚疫病菌株XH05-5-4有显著的抑制效果,具有进一步研究的价值.

摘要： 本实验从病死兔肺和肝脏分离培养出20株细菌,通过对病死兔的病理解剖、细菌分离培养、染色镜检、生化试验、PCR鉴定、动物实验进行鉴定,结果表明,分离到的菌株血清型分别为A3、A6和F3型多杀性巴氏杆菌,对兔具有较强的致病性.药敏试验结果表明,分离菌株对多粘菌素、丁胺卡那霉素、头孢噻肟、左旋氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、诺氟沙星和氟苯尼考等高敏.

摘要： 本实验从病死兔肺和肝脏分离培养出20株细菌,通过对病死兔的病理解剖、细菌分离培养、染色镜检、生化试验、PCR鉴定、动物实验进行鉴定,结果表明,分离到的菌株血清型分别为A3、A6和F3型多杀性巴氏杆菌,对兔具有较强的致病性.药敏试验结果表明,分离菌株对多粘菌素、丁胺卡那霉素、头孢噻肟、左旋氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、诺氟沙星和氟苯尼考等高敏.

摘要： 一种鉴定黑木耳菌株185的方法及用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列，它涉及了一种鉴定黑木耳菌株的方法及用于鉴定黑木耳菌株的基因序列。本发明解决了现有鉴定黑木耳菌株185的方法存在鉴定结果易受外界环境条件影响、需要筛选大量引物以及目前没有能够准确鉴定黑木耳菌株185的基因序列的问题。本发明鉴定黑木耳菌株185的方法按照如下步骤进行：一、提取总DNA，扩增；二、凝胶电泳；即可鉴定出待测菌株是否为黑木耳菌株185。本发明用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列长度为316bp。本发明的鉴定方法不受外界环境条件的影响，无需筛选大量引物。本发明用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列为黑木耳菌株185的特异性基因。

摘要： 一种应用于生物技术领域中的鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的专用RAPD引物，该引物的核苷酸序列为5-GAACCTGCGG-3或5-TCACGTCCAC-3；鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的鉴定方法，以样品总DNA为模板，利用引物的核苷酸序列为5-GAACCTGCGG-3或5-TCACGTCCAC-3中任一种进行PCR扩增，以琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，根据PCR扩增产物判定样品是否为地衣芽孢杆菌BL63516；利用引物5-GAACCTGCGG-3若在4500-6000bp位置产生一条特征条带则判定为阳性；利用引物5-TCACGTCCAC-3若在1460bp位置产生一条特征条带则判定为阳性鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的鉴定方法，利用引物的核苷酸序列5-TCACGTCCAC-3进行扩增。该发明多态性高、信息量大、操作简单、直观可靠、DNA用量少、纯度要求不高、随机引物没有严格的种属界限。

摘要： 一种鉴定黑木耳菌株185的方法及用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列，它涉及了一种鉴定黑木耳菌株的方法及用于鉴定黑木耳菌株的基因序列。本发明解决了现有鉴定黑木耳菌株185的方法存在鉴定结果易受外界环境条件影响、需要筛选大量引物以及目前没有能够准确鉴定黑木耳菌株185的基因序列的问题。本发明鉴定黑木耳菌株185的方法按照如下步骤进行：一、提取总DNA，扩增；二、凝胶电泳；即可鉴定出待测菌株是否为黑木耳菌株185。本发明用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列长度为316bp。本发明的鉴定方法不受外界环境条件的影响，无需筛选大量引物。本发明用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列为黑木耳菌株185的特异性基因。

摘要： 本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种用于鉴定金耳菌X9菌株或包含X9菌株的金耳菌株的SCAR标记。对金耳菌菌株，使用SCAR标记进行鉴定可将金耳菌X9菌株与其他金耳菌菌株区分开；对金耳菌株，在以SCAR标记鉴定时使用金耳菌株的无性芽孢、担孢子和担孢子培养物(芽孢)进行操作，可将包含X9菌株的金耳菌株与其他金耳菌株区分开。本发明SCAR标记在金耳菌X9菌株和包含X9菌株的金耳菌株中具有高度的特征性，检测结果稳定可靠。

摘要： 一种应用于生物技术领域中的鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的专用RAPD引物，该引物的核苷酸序列为5-GAACCTGCGG-3或5-TCACGTCCAC-3；鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的鉴定方法，以样品总DNA为模板，利用引物的核苷酸序列为5-GAACCTGCGG-3或5-TCACGTCCAC-3中任一种进行PCR扩增，以琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，根据PCR扩增产物判定样品是否为地衣芽孢杆菌BL63516；利用引物5-GAACCTGCGG-3若在4500-6000bp位置产生一条特征条带则判定为阳性；利用引物5-TCACGTCCAC-3若在1460bp位置产生一条特征条带则判定为阳性鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的鉴定方法，利用引物的核苷酸序列5-TCACGTCCAC-3进行扩增。该发明多态性高、信息量大、操作简单、直观可靠、DNA用量少、纯度要求不高、随机引物没有严格的种属界限。

摘要： 本发明提供了提供一种检测幽门螺杆菌的方法，同时通过简单的方法获得幽门螺杆菌CagA蛋白基因型信息。该方法包括(i)将来自受试者的血样与源自东亚型幽门螺杆菌CagA蛋白的肽和/或源自欧洲型幽门螺杆菌CagA蛋白的肽接触的步骤，和(ii)鉴定幽门螺杆菌菌株通过简单的方法使用受试者的血样通过检测幽门螺杆菌的方法进行，确定是否存在针对血样中所含肽的反应阳性抗体的步骤。

摘要： 本发明公开了一种产黄曲霉毒素菌株的鉴定培养基及其鉴定方法，包括下列重量的物质：马铃薯淀粉5-15g，葡萄糖15-30g，琼脂10-20g，甲基化β-环糊精5-15g，蒸馏水1L；所述的培养基的pH值为5-6。方法包括下列步骤：（1）培养基的制备：将上述组分加蒸馏水1L溶解煮沸，微凉后调节pH值为5-6，将培养基倒在培养皿中；（2）培养：待培养基凝固后，将需要鉴定的菌株接种在培养基上，28°C培养5天，在365nm的紫外灯下观察结果。本发明的培养基原料易得，提高功效，节约成本，具有极大的应用和推广价值；鉴定产黄曲霉毒素菌株的方法操作简单，不需要特殊的仪器设备，快速、简便、准确和可靠。

摘要： 本发明属于菌种质量鉴定技术领域，具体的说是一种金黄色大球盖菇菌株的指纹图谱鉴定方法及构建方法，其特征在于6对SSR标记构建的指纹图谱，由以下引物构成：DQGGSSR007、DQGGSSR031、DQGGSSR034、DQGGSSR037、DQGGSSR065、DQGGSSR088。该构建方法，包括以下步骤：S1、菌丝培养：将金黄色大球盖菇菌株转接到马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基(PDA)上，25°C培养15d后收集菌丝；S2、基因组DNA的提取：使用TSINGKE植物DNA提取试剂盒(TSP101‑200)提取上述菌丝的基因组DNA，紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和质量：本发明与常规形态学检测、拮抗试验、出菇试验相比，具有检测时间短，准确性高，重复性好的优点。检测所需的操作时间在24h以内，而常规的拮抗试验所需时间至少需要两周时间，出菇试验则需要至少3个月的时间。

摘要： 黑木耳菌株分子标记鉴定方法及黑木耳菌株HW5的特异性分子标记引物，它涉及一种黑木耳菌株鉴定方法及黑木耳菌株HW5的特异性分子标记引物。它解决了目前分子标记黑木耳菌株鉴定方法特异引物筛选量大、特异标记难以获得，且无法鉴定杂交后代和确定其遗传稳定性的问题。鉴定方法：一、提取菌丝体总DNA；二、ISSR-PCR分析；三、纯化并设计特异分子标记引物；四、PCR检测。黑木耳菌株HW5的特异性分子标记引物为R1-1和R1-2。本发明黑木耳菌株分子标记鉴定方法具有特异引物筛选量小、特异标记易获得的优点，而且本发明黑木耳菌株分子标记鉴定方法中获得的特异分子标记基因在单核杂交后代中完整、规律性分布。

摘要： 黑木耳菌株分子标记鉴定方法及黑木耳菌株HW5的特异性分子标记引物，它涉及一种黑木耳菌株鉴定方法及黑木耳菌株HW5的特异性分子标记引物。它解决了目前分子标记黑木耳菌株鉴定方法特异引物筛选量大、特异标记难以获得，且无法鉴定杂交后代和确定其遗传稳定性的问题。鉴定方法：一、提取菌丝体总DNA；二、ISSR-PCR分析；三、纯化并设计特异分子标记引物；四、PCR检测。黑木耳菌株HW5的特异性分子标记引物为R1-1和R1-2。本发明黑木耳菌株分子标记鉴定方法具有特异引物筛选量小、特异标记易获得的优点，而且本发明黑木耳菌株分子标记鉴定方法中获得的特异分子标记基因在单核杂交后代中完整、规律性分布。