酶学特性

摘要： 为研究蒙古马耐粗饲料的优良特点,试验以蒙古马盲肠内容物为研究对象,旨在筛选、分离出高效的蒙古马源纤维素分解菌株,并对分离菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法和摇瓶发酵法分离菌株并鉴定菌株类型。最后,通过测定纤维素酶活力分析菌株在不同pH、温度、碳源和氮源条件下的酶学特性。研究从蒙古马盲肠内容物中分离筛选到具有较高降解纤维素能力的解淀粉芽孢杆菌H3(Bacillus amyloliquefaciens H3)。菌株H3分泌纤维素酶的最适p H为4.8,在p H 3.0~8.0范围内,其酶活力相对稳定;在温度为65°C,酶活力最高,当温度为40~50°C时,该酶活力维持在80%左右,稳定性强。此外,H3发酵所需的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为2%的蛋白胨+酵母粉复合物(1:1),它具有相对较高的纤维素酶活力,有深入开发的潜力。

摘要： 单宁酶在食品、饲料和制药等领域具有巨大应用潜力。本研究通过对柿树单宁酶基因PsnTanA进行密码子优化,使得该基因的GC含量由60.2%调整到57.1%,CAI值由0.62调整到0.76,优化前后基因序列的一致性为78.3%。单宁酶PsnTanA经大肠杆菌BL21表达后,重组酶PsnTanA在40°C和pH 7.0下表现出最大活性,比酶活力为1.53 U/mg,表观分子量约为39 kD。多种金属离子抑制了重组酶PsnTanA的活力,并随着金属离子浓度的增大而增强,其中Cu;和Fe;表现出的抑制效应最为明显,部分有机试剂也表现出类似的现象。以没食子酸正丙酯为底物时,单宁酶PsnTanA的Km值和Vmax值分别为1.43 mmol/L和3.28 mmol/(L·min)。除此之外,研究发现单宁酶PsnTanA能够有效降解高粱、茶和绿豆单宁等底物。本研究不仅丰富了现有单宁酶资源,也为进一步为单宁酶在食品和饲料中的应用提供了必要的理论支撑。

摘要： 目的:本研究旨在发掘和研究一种新的低温酸性内切-1,4-β-木聚糖酶TgXyn2并研究其酶学特性,为其在食品等轻工业生产中的实际应用提供理论依据。方法:利用pCold-TF表达质粒在大肠杆菌中异源表达,纯化后检测其酶学特性,并通过同源建模分析其三维结构。结果:该酶的最适温度为35°C,最适pH为5.0,K_(m)为1.287μmol L^(−1),V_(max)为2.083μmol min^(−1)mg^(−1);同源建模结果表明,TgXyn2由2个反向平行的β-折叠和1个α-螺旋构成,是典型的糖苷水解酶GH11家族木聚糖酶。结论:本文研究的TgXyn2具有良好的酶学特性,在食品等行业具有较好的应用潜力。

摘要： 【目的】从不同品种烟叶原料中分离筛选高产纤维素酶细菌菌株,为提高烟叶原料使用价值提供优秀菌种资源。【方法】采用稀释涂布法从37份片烟样品中分离纯化菌株,利用刚果红染色法结合摇瓶复筛进行筛选,测定菌株纤维素酶活性,通过形态学观察与16S rRNA序列鉴定功能菌的系统发育学地位,并对功能菌所产纤维素酶进行酶学性质研究。【结果】筛选到1株烟用纤维素酶活性高的菌株FX-1,其在37°C发酵48 h纤维素酶酶活力最高,达56.261 U·mL^(−1)。FX-1菌体呈杆状,可产芽孢,革兰氏阳性,其16S rRNA序列与Bacillus subtilis相似度最高(100%),系统发育树中与枯草芽孢杆菌位于同一分支中,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。通过酶学性质分析,酶反应的最适温度为60°C,最适pH为5.0,在温度30~55°C或pH值3.0~7.0保温30 min后仍有较高活力,相对酶活有90%以上,具有良好的热稳定性和耐酸能力。【结论】从37份片烟样品中筛选获得1株高产纤维素酶菌株FX-1,初步鉴定为枯草芽孢杆菌。FX-1所产纤维素酶的反应条件较宽,酶学性质稳定,在烟草行业中具有良好的产业化开发利用前景。

摘要： 厌氧真菌依赖其侵袭性生长特性和强大的纤维降解酶体系,在饲料消化过程中发挥着重要作用。自20世纪70年代厌氧真菌被首次准确定性和描述以来,学界对这种独特的真菌的了解也越来越深入。详细了解厌氧真菌的生物学特性对理解其在肠道微生态环境中发挥的作用及其对宿主健康和生产性能的影响,以及它们相关的生物技术开发方面至关重要。本文从生命周期、酶学特性和代谢特性3个方面对厌氧真菌的生物学特性进行了概述,以期为相关研究工作提供一定的参考和帮助。

摘要： 【目的】从采自新疆天山的无柄灵芝菌(G.resinaceum)中筛选获得1株高产漆酶的LZ02菌株,对其产酶条件进行优化,研究部分酶学性质。【方法】采用单因素实验,对其产酶条件优化并研究其酶学特性,采用双向电泳检测酶蛋白。【结果】LZ02菌株产漆酶的最佳碳源为2.5%麦麸+1%葡萄糖,最佳氮源为干酪素;Cu^(2+)、Mg^(2+)、Fe^(2+)、Zn^(2+)和Ca^(2+)的添加对LZ02产漆酶有一定的促进作用,而Co^(2+)具有明显的抑制作用;藜芦醇和愈创木酚抑制产酶并使产酶高峰由第3 d推后至第9 d,添加没食子酸和ABTS对产酶影响不大,单宁酸对产酶有抑制作用。LZ02菌漆酶最适反应温度为60°C,且在80°C仍具有漆酶活性;在40°C,pH 4.0~5.0,酶活性最稳定;最适反应pH为3.0,Mn^(2+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)、Ba^(2+)和K^(+)对酶稳定性有一定的促进作用,Co^(2+)、Cd^(2+)、Cr^(2+)和Pb^(2+)对酶的稳定性具有明显的破坏作用;对菌体及发酵液进行了双向电泳检测,测定其等电点为4.1;获得了1个纯化酶蛋白质谱序列,该蛋白与Ganoderma Lucidum来源的Laccase高度同源。【结论】无柄灵芝菌(G.resinaceum)漆酶的合成和分泌受到营养水平、培养条件、生长阶段以及培养基中诱导剂的严格调控,木质素或木质素相关的芳香类化合物、N源和C源也能调节漆酶的合成;漆酶活性对不同种类、不同浓度的金属离子以及诱导剂的响应不尽相同,其具有较复杂的生理功能及调控机制。

摘要： 采用N端截短方式对Bacillus subtilis 168来源普鲁兰酶进行蛋白结构改造,构建不同形式的截短突变体,考察N端结构对酶学特性的影响。利用基因工程的手段分别删去CBM41结构域N端前2、4和6个氨基酸,获得突变体M1(ΔN2)、M2(ΔN4)和M3(ΔN6)。3种突变体最适反应温度(40-45°C)和最适pH(6.0)均与WT一致,WT、M1、M2和M3的T_(m)值分别为48.57°C、50.03°C、48.43°C和49.50°C,M1、M2和M3的比活力均高于野生型,是WT的1.18、1.60和2.44倍,WT、M1、M2和M3的K_(m)值分别为23.89、29.01、17.29和19.08 mg/mL。上述结果表明,通过截短普鲁兰酶N端氨基酸可获得性质得到改良的突变体,为提高该酶的热稳定性、比活力和底物结合能力提供新的方法和思路。

摘要： [目的]本研究旨在筛选油菜秸秆高效降解菌株并对其降解特性进行分析,为油菜秸秆的资源化利用提供科学依据。[方法]采用稀释涂布平板法、刚果红透明圈试验以及纤维素酶活性测定对菌株进行分离筛选;根据菌株的形态特征和ITS序列分析对菌株进行鉴定;结合扫描电镜技术,分析在降解过程中降解菌对油菜秸秆物理、化学性质的影响;设置盆栽试验模拟秸秆还田以综合探究菌株对油菜秸秆的降解特性;通过纤维素酶酶谱分析及质谱检测技术获得纤维素酶基因(celI)的序列信息,克隆该基因,再利用pPICZαA质粒和毕赤酵母X33进行异源表达;经镍柱纯化后对CelI的酶学性质进行分析。[结果]从腐烂油菜秸秆田土样中共分离纯化出8株真菌,其中菌株A15的透明圈直径/菌落直径比值最大,为3.0,且滤纸酶活性和内切葡聚糖酶活性均显著高于其他菌株,分别为16.13和8.16 U·g^(-1),经鉴定其为绿色木霉(Trichoderma viride);接种菌株A15固体发酵28 d后,油菜秸秆失重率达29.17%,纤维素及半纤维素含量分别下降至29.41%和17.18%,经过30 d的模拟秸秆还田盆栽试验,油菜秸秆失重率达57.50%;成功表达并纯化了菌株A15来源的GH7家族纤维素酶CelI,该蛋白相对分子质量约为72×10^(3),具有内、外切葡聚糖酶的双重活性,CelI的最适反应温度为50°C,且表现出良好的热稳定性,CelI的内切葡聚糖酶活性最适pH值为4,且Co^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)对其具有促进作用,而CelI的外切葡聚糖酶活性最适pH值为5,且Mn^(2+)对其具有显著激活作用,而Zn^(2+)、Fe^(3+)具有抑制作用。[结论]从腐烂油菜秸秆田土样中筛选到1株油菜秸秆降解真菌绿色木霉A15,其能高效产胞外纤维素酶,在油菜秸秆资源化利用方面具备良好的应用前景。

摘要： 本试验旨在对比研究酸性和中性木聚糖酶的酶学性质及其在小麦型饲粮中的降黏效果。饲养试验检测2种木聚糖酶(酸性和中性木聚糖酶)对胃肠液的耐受性;pH 3.5条件下测试2种木聚糖酶的相对活性;选用木聚糖纯品和谷物检测2种木聚糖酶的降黏效果;选取512只1日龄的817白羽肉公鸡,随机分为4组(每组8个重复,每个重复16只),对照组饲喂小麦型基础饲粮,试验组在小麦型基础饲粮中分别添加4 U/g中性木聚糖酶、2和4 U/g酸性木聚糖酶,试验期42 d。结果显示:1)相比中性木聚糖酶,酸性木聚糖酶对肉鸡胃肠液有更好的耐受性。2)在pH 3.5条件下,酸性木聚糖酶的相对活性比中性木聚糖酶高64.1%。3)对于高黏(黑麦)阿拉伯木聚糖,相比中性木聚糖酶,酸性木聚糖酶的降黏效果提升了42.9%。4)在小麦型饲粮中添加木聚糖酶提高了肉鸡的生长性能,其中4 U/g酸性木聚糖酶对生长性能的提高效果优于4 U/g中性木聚糖酶。5)对于饲喂小麦型饲粮的肉鸡,4 U/g酸性木聚糖酶组粗蛋白质表观消化率分别比2 U/g酸性木聚糖酶组、4 U/g中性木聚糖酶组和对照组提高了3.5%(P<0.05)、7.4%(P<0.05)和7.9%(P<0.05)。6)与4 U/g中性木聚糖酶组和对照组相比,在小麦型饲粮中添加4 U/g酸性木聚糖酶显著降低了肉鸡肌胃、空肠和回肠食糜黏度(P<0.05)。7)与对照组相比,在小麦型饲粮中添加4 U/g酸性木聚糖酶显著提高了肉鸡胃蛋白酶和胰蛋白酶的活性(P<0.05)。由此可见,酸性木聚糖酶在pH 3.5条件下有更高的活性,更能耐受动物胃肠液,具有更好的降低黏度效果;在小麦型饲粮中添加4 U/g酸性木聚糖酶能改善肉鸡的生长性能、粗蛋白质表观消化率、食糜黏度和消化酶活性,其效果优于同剂量的中性木聚糖酶。

摘要： 探究固、液发酵方式在重组毕赤酵母单宁酶工程菌的形态、产酶量及酶学特性等方面的差异。研究发现,重组菌株在固、液发酵方式下表现出了较大差异。固态发酵条件下,重组菌株能够积累更多的生物量,当培养48 h后积累的生物量比液态发酵高22.3%;经电镜分析发现,固态条件下,重组菌株个体之间更容易出现聚集,并伴随着有生物膜的产生;在不同甲醇体积分数诱导下,固、液发酵的重组菌株的产酶量均出现了先升高后降低的趋势,而诱导两者最高产酶量的甲醇体积分数却存在差异,分别是2%和3%。进一步研究发现,固、液发酵条件下,重组菌株发酵的单宁酶酶学性质也存在一定差异,固、液态发酵单宁酶的最适反应温度分别为30°C和为20°C,且酶的热稳定性也有一定提高,其余酶学性质差异不显著。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳分析发现,固态发酵生产的单宁酶存在不同的修饰,这可能是造成上述性质差异的原因之一。综上所述,本研究探究了固、液发酵条件下,重组单宁酶毕赤酵母菌株生长及产酶特性的差异,为高效制备单宁酶提供了一定的理论指导。

摘要： 通过硫酸铵分级沉淀、透析等方法从白芥子中提取、分离和纯化得到芥子酶.结果显示,0～20％硫酸铵饱和度部分提取所得酶液比活力最大,为7.8 U/mg.利用葡萄糖试剂盒法和高效液相色谱测定酶活,对芥子酶酶学特性进行研究.结果表明,白芥芥子酶的分子量约为75 kDa,最适pH为7,最适温度为55°C;NaCl溶液对芥子酶活力有抑制作用;Vc能有效地促进酶活,添加0.1 mmol/L Vc时的酶活为对照组的4.8倍;酶浓度与酶活并非呈线性正相关关系;常压(0.1 MPa)下的米氏常数Km=1.265 mmol/L,最大反应速度Vmax=0.150 mmol/min.

摘要： 多酚氧化酶(PPO)和氢过氧化物酶(POD)是引起桑叶及其加工制品褐变的主要因子,本文研究了桑叶中的PPO和POD的酶学特性,结果表明:PPO和POD的酶学特性相似,最适pH均为7.0,酸碱对二者存在抑制作用,特别是碱性条件下;最适温度均为40°C,70°C下处理2m in二酶基本被钝化.因此,桑叶在加工过程中可采用高温短时热碱处理工艺来抑制PPO和POD的活性,从而减少其成品的褐变.

摘要： 目的：克隆、表达及纯化腾冲嗜热芽孢杆菌MB4中丙氨酸消旋酶，表征其酶学特性，探索酶蛋白活性通道中不保守氨基酸位点的作用机制。方法：利用PCR技术、分子筛层析法和动态光散射法及酶标仪及HPLC法，对相应物质进行检测分析。结果及结论：实验成功克隆、表达、纯化获得了腾冲嗜热菌MB4中一个丙氨酸消旋酶，酶学特性分析说明该酶蛋白是以二聚合形式存在、PLP辅酶依赖型、嗜热丙氨酸消旋酶；定点突变发现活性通道内层两个不保守氨基酸位点的经基基团可能与底物定位有关，因而突变后导致酶蛋白活性急剧下降。

摘要： 目的：克隆、表达、纯化原玻璃蝇节杆菌D-氨基酸氧化酶,研究其酶学性质；通过定点突变研究突变位点对其活性的影响。方法：利用PCR技术克隆目的基因,构建D-氨基酸氧化酶表达载体，通过Ni亲和层析法获得D-氨基酸氧化酶蛋白，以酶催化H2O2显色法分析其酶学活性。采用Site-directed mutagenesis技术构建定点突变体,并测定突变蛋白酶活力。结果：D-氨基酸氧化酶在pH9.37,30°C下酶活力最高，最适底物是D-Met；所构建的十五个突变体都有催化活性。结论：通过PCR成功克隆获得原玻璃蝇节杆菌D-氨基酸氧化酶基因，通过原核表达、纯化获得了D-氨基酸氧化酶，并分析了其酶学特性；定点突变所构建的15个突变体酶蛋白均有活性，其最适底物及最适pH有所变化。

摘要： 多酚氧化酶(Polyphenol oxidasc,PPO,EC 1.14.18.1 0r1.10.3.2)与果蔬加工制品的色泽、抗氧化能力关系密切。果蔬PPO酶学特性分析和活性控制越来越受到关注,为设计、开发番茄加工技术和工艺提供理论依据,该文采用光谱法,研究了红熟番茄(Lycopersicum esculentum Mill.cv918)果实PPO的酶学特性。研究结果表明红熟番茄果实PPO的最适反应pH值是6.0,反应温度是40°C,耐热性较好,50°C加热10min仍保有88％的活性。红熟番茄果实PPO对一元酚、二元酚和三元酚均有催化氧化能力,最适底物是儿茶酚,其最大反应速率和米氏常数分别是226.30 u/min和6.00 mmol/L。抗坏血酸、β-巯基乙醇或L-半胱氨酸可抑番茄PPO活性,十二烷基硫酸钠可显著增强其活性。

摘要： 采集淀粉厂附近土壤样本,从中分离出7株产普鲁兰酶的野生菌,经鉴定1株为枯草芽孢杆菌,其余6株均为蜡样芽孢杆菌.本研究进一步测定了7株野生菌的酶学特性,选择4号菌和6号菌作为进一步研究对象,分别探讨了这两株菌的发酵产酶过程,且分别优化了它们的产酶培养基,确定了它们的最适发酵条件.其中,4号野生菌的最佳产酶培养基和发酵条件为:可溶性淀粉30g/L、蛋白胨7.5g/L、七水合硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸铵5g/L、硫酸亚铁0.01g/L、温度40°C、装液量20ml、初始pH8.0;6号野生菌的最佳产酶培养基和发酵条件为:可溶性淀粉30g/L、蛋白胨5g/L,牛肉膏10g/L、七水合硫酸镁0.5g/L,磷酸二氢钾0.5g/L,硫酸铵5g/L,硫酸亚铁0.01g/L,温度35°C、装液量20ml、初始pH6.5.

摘要： 为利用微生物以解决鱼露的快速发酵问题,本实验采用平板透明圈法初筛、摇瓶复筛,从半年鱼露发酵液中筛选到一株产蛋白酶乳酸菌T1。考察其生理生化性质、酶学特性,并添加入鱼露发酵液中进行发酵试验。结果显示:经形态特征观察,初步鉴别T1乳酸菌为芽孢杆菌属(Bacillus sp.);其最适生长温度为32°C,pH为5.5;所产蛋白酶酶活最适温度为40°C,pH为7.0,最适条件下酶活力达72.2 U/mL;添加T1乳酸菌发酵45d时其TSN、AAN含量分别达到2.16g/100mL和0.89/100mL,接近国家一级鱼露标准,游离氨基酸总量为5070.28 mg/100mL,比同期自然发酵增加了1.05倍。T1乳酸菌对加速鱼露发酵有积极贡献。

摘要： 通过超高速离心收集细胞膜组分、表面活性剂溶解膜蛋白、硫酸铵沉淀、疏水作用层析、离子交换柱层析等纯化步骤,从氧化葡萄糖酸杆菌中获得具有D-阿拉伯糖醇脱氢酶活性的纯蛋白,该酶由两个大小不同的亚基组成,其表观相对分子质量分别约为80000Da和14000Da.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为25～30°C,最适pH值为5.5～6.0;考察底物特异性发现该酶不仅能催化D-阿拉伯糖醇,还可以催化山梨醇、甘露醇、赤藓糖醇、甘油和2,3-丁二醇等多元醇类物质的脱氢还原反应;二价离子Ca-2+可以显著促进该酶酶活的提升,而Cu2+、Fe3+、EDTA等对此酶活性均有抑制作用;通过提取分离得到该酶的辅因子,经HPLC鉴定为吡咯喹啉醌.

摘要： 通过超高速离心收集细胞膜组分、表面活性剂溶解膜蛋白、硫酸铵沉淀、疏水作用层析、离子交换柱层析等纯化步骤,从氧化葡萄糖酸杆菌中获得具有D-阿拉伯糖醇脱氢酶活性的纯蛋白,该酶由两个大小不同的亚基组成,其表观相对分子质量分别约为80000Da和14000Da.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为25～30°C,最适pH值为5.5～6.0;考察底物特异性发现该酶不仅能催化D-阿拉伯糖醇,还可以催化山梨醇、甘露醇、赤藓糖醇、甘油和2,3-丁二醇等多元醇类物质的脱氢还原反应;二价离子Ca-2+可以显著促进该酶酶活的提升,而Cu2+、Fe3+、EDTA等对此酶活性均有抑制作用;通过提取分离得到该酶的辅因子,经HPLC鉴定为吡咯喹啉醌.

摘要： 通过超高速离心收集细胞膜组分、表面活性剂溶解膜蛋白、硫酸铵沉淀、疏水作用层析、离子交换柱层析等纯化步骤,从氧化葡萄糖酸杆菌中获得具有D-阿拉伯糖醇脱氢酶活性的纯蛋白,该酶由两个大小不同的亚基组成,其表观相对分子质量分别约为80000Da和14000Da.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为25～30°C,最适pH值为5.5～6.0;考察底物特异性发现该酶不仅能催化D-阿拉伯糖醇,还可以催化山梨醇、甘露醇、赤藓糖醇、甘油和2,3-丁二醇等多元醇类物质的脱氢还原反应;二价离子Ca-2+可以显著促进该酶酶活的提升,而Cu2+、Fe3+、EDTA等对此酶活性均有抑制作用;通过提取分离得到该酶的辅因子,经HPLC鉴定为吡咯喹啉醌.

摘要： 本发明涉及植物的农业生物学特性的改善。更具体来说，本发明涉及在其叶绿体中包含将乙醇酸转化为苹果酸的酶活性的植物细胞。优选所述植物细胞包括：具有乙醇酸氧化酶活性的第一多肽、具有苹果酸合酶活性的第二多肽和具有过氧化氢酶活性的第三多肽；或者具有乙醇酸脱氢酶活性的第一多肽和具有苹果酸合酶活性的第二多肽。本发明还涉及包含上述植物细胞的植物，以及可从该植物获得的种子。本发明进一步涉及制备具有提高的水利用效率或提高的产量的转基因植物或植物细胞的方法。本发明涉及包含编码上述多肽的核酸的组合的多核苷酸以及包含该多核苷酸的载体，和它们的应用。

摘要： 本发明公开了一种基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶构建及应用。该选择性模拟酶为全氟溴辛烷PFOB增强的通过分子印迹技术构建的基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶PFOB‑MIP，基于金纳米颗粒的类氧化酶特性，利用氨基苯硼酸实现对糖类分子的结合与亲和力提升，并进一步结合分子印迹技术构建针对底物分子的选择性壳层，同时采用全氟溴辛烷作为氧供给池，从而构建出能对糖类进行选择性识别催化并具有更强催化活性的模拟氧化酶，并将其应用于血糖及食品中糖类的检测。

摘要： 本发明涉及一种真菌纤维素酶酶活调控基因及其应用，核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.4所示；本发明还涉及真菌纤维素酶酶活调控基因编码的真菌纤维素酶酶活调控因子，氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.5所示；以及真菌纤维素酶酶活调控基因在制备特定酶活纤维素酶中的应用。本发明所述真菌纤维素酶酶活调控基因及其调控因子可用于调控真菌中纤维素酶的酶活，通过敲除盒取代该真菌纤维素酶酶活调控基因后，相比原初发菌株，纤维素酶比活力可改变20%左右，从而可以满足各行业对不同纤维素酶酶活的需求。

摘要： 本发明涉及一种真菌纤维素酶酶活调控基因及其应用，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；本发明还涉及真菌纤维素酶酶活调控基因编码的真菌纤维素酶酶活调控因子，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；以及真菌纤维素酶酶活调控基因在制备特定酶活纤维素酶中的应用。本发明所述真菌纤维素酶酶活调控基因及其调控因子可用于调控真菌中纤维素酶的酶活，通过敲除盒取代该真菌纤维素酶酶活调控基因后，相比原初发菌株，纤维素酶比活力可改变20%左右，从而可以满足各行业对不同纤维素酶酶活的需求。

摘要： 本发明涉及一种真菌纤维素酶酶系组成/特性调控基因的应用。将里氏木霉中的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段敲除后，插入尿苷筛选标记，然后经固态发酵后，制得高活性真菌纤维素酶系。本发明通过敲除盒取代该真菌纤维素酶酶活调控基因后，在固态发酵下，相比原初发菌株，外切葡聚糖甘酶比活力提高2.5倍，β-葡萄糖苷酶比活力提高3倍，调整了真菌胞外纤维素酶酶系，可以适用于不同领域的需求。

摘要： 本发明涉及植物的农业生物学特性的改善。更具体来说，本发明涉及在其叶绿体中包含将乙醇酸转化为苹果酸的酶活性的植物细胞。优选所述植物细胞包括：具有乙醇酸氧化酶活性的第一多肽、具有苹果酸合酶活性的第二多肽和具有过氧化氢酶活性的第三多肽；或者具有乙醇酸脱氢酶活性的第一多肽和具有苹果酸合酶活性的第二多肽。本发明还涉及包含上述植物细胞的植物，以及可从该植物获得的种子。本发明进一步涉及制备具有提高的水利用效率或提高的产量的转基因植物或植物细胞的方法。本发明涉及包含编码上述多肽的核酸的组合的多核苷酸以及包含该多核苷酸的载体，和它们的应用。

摘要： 本发明公开了一种基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶构建及应用。该选择性模拟酶为全氟溴辛烷PFOB增强的通过分子印迹技术构建的基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶PFOB‑MIP，基于金纳米颗粒的类氧化酶特性，利用氨基苯硼酸实现对糖类分子的结合与亲和力提升，并进一步结合分子印迹技术构建针对底物分子的选择性壳层，同时采用全氟溴辛烷作为氧供给池，从而构建出能对糖类进行选择性识别催化并具有更强催化活性的模拟氧化酶，并将其应用于血糖及食品中糖类的检测。

摘要： 本发明涉及利用酶的选择与具有使CO

摘要： 本发明涉及具有改善的酶学特性的胰蛋白酶变体，尤其涉及突变的胰蛋白酶，其包含导致对亲核底物的亲和力增加的至少在两个氨基酸位置处的氨基酸取代和/或导致水解活性降低的至少在两个氨基酸位置处的氨基酸取代。

摘要： 本发明壳聚糖酶的纯化、基因克隆及其酶学特性的鉴定是从被污染的酵母培养液中分离到一菌株，经鉴定为一种革兰氏阳性杆菌，其所分泌的主要蛋白产物经纯化后，测定了它的N-端氨基酸序列，与已知的几种内切壳聚糖酶十分类同。根据其同源DNA序列，通过PCR方法克隆了其全长基因。该菌株生长极快，其组成型分泌产物主要为内切壳聚糖酶。该酶通过疏水层析和分子筛两步即得到纯化。进一步研究了该酶的酶学性质及其催化壳聚糖降解为壳寡糖的条件。提高该壳聚糖酶的产率后，有望用于壳寡糖的生产，有实际应用价值。