脂肪酶

摘要： 脂肪酶作为一种绿色生物催化剂,在食品工业中有着广泛的应用。但其结构容易破坏,稳定性差,固定化脂肪酶是提高其稳定性的关键。采用微球酶、改性核桃壳固定化脂肪酶和LX-1000HA树脂固定化脂肪酶3种固定化方法,固定化猪肉内源性脂肪酶,利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)和电子鼻检测鸡肉经固定化猪肉内源性脂肪酶处理前后的风味变化,并分析鸡肉样品中挥发性成分的变化情况。结果表明:在同一条件下,3种脂肪酶固定化方法中以改性核桃壳固定化脂肪酶的活力最高,达169.8 U/mL;电子鼻结合HS-SPME-GC-MS技术共检测出53种挥发性成分,主要包括醛类、烯烃类、芳香族类、酯类、醇类和含硫化合物等,脂肪酶经固定化后可以有效改善鸡肉的风味。

摘要： 在养殖业的生产中,幼龄畜禽的消化问题一直是困扰养殖企业的一大问题,消化水平的高低取决于幼龄畜禽的生理条件,脂肪是最难以被幼龄畜禽消化吸收的营养物质。微生物来源的脂肪酶产量高,价格适中,在多个领域都有广泛应用,并且是国家法律批准使用的饲料添加剂。是否能够使用脂肪酶来改善幼龄畜禽的消化问题?针对这一问题,本文从脂肪酶的基本信息、行业现状、作用原理等出发,结合幼龄畜禽的生理条件进行分析,辅以相关研究作为应用案例,得出脂肪酶可以作为幼龄畜禽饲料添加剂的结论和预计的效果,为相关人士提供参考。

摘要： 近年来,酶催化合成聚酯由于具有反应条件温和、选择性高、无需保护-脱保护、环境友好、产物易降解等优点而越来越受到人们的关注。本文综述了脂肪酶催化缩聚合成脂肪族聚酯的研究进展,介绍了脂肪酶以及饱和脂肪族聚酯、不饱和脂肪族聚酯的酶催化合成,总结了酶催化聚合存在的问题并提出了相应的改进策略,可以为相关研究提供参考。

摘要： 以固定化脂肪酶TLIM作为催化剂,以文冠果油为原料进行水解反应制备低芥酸文冠果甘油酯。通过单因素实验考察了酶添加量、反应时间、反应温度、水油摩尔比对水解反应的影响,并采用正交实验对酶水解反应条件进行了优化。结果表明:固定化脂肪酶TLIM催化制备低芥酸文冠果甘油酯的最佳反应条件为酶添加量(质量分数)5%、反应温度45°C、反应时间5 h、水油摩尔比30∶1,在该条件下文冠果甘油酯中的芥酸含量达到4.86%。证明了文冠果油的芥酸分布在甘油三酯1,3位上,神经酸含量保持在1%左右。

摘要： n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)具有多种生理活性,其主要有3种存在形式,其中甘油酯型n-3 PUFA因其生物利用度高和不易被氧化而优于游离型和乙酯型。然而,目前鲜有对甘油酯型n-3 PUFA进行高纯度富集的方法。为了对甘油酯型n-3 PUFA的高值化更加深入的研究提供参考,综述了富集甘油酯型n-3 PUFA的3种常见方法(物理一步法、两步法和酶一步法)及优缺点。物理一步法可以避免产物氧化,但得率较低;两步法工艺复杂,并有可能产生环境污染;而酶一步法具有简单、高效等优点,成为学者们关注的焦点。现有脂肪酶对甘油酯型n-3 PUFA的富集能力有限,还需进一步发掘富集能力更强的选择性脂肪酶。

摘要： 目的:观察柴芩承气汤保留灌肠联合常规西医治疗急性胰腺炎的临床疗效。方法:选取武汉市中医医院88例胰腺炎患者,按随机数字表法分为对照组和观察组各44例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组基础上给予柴芩承气汤保留灌肠,治疗7天后比较两组的疗效,症状体征缓解时间,白细胞(White Blood Cell,WBC)、血清淀粉酶(Blood Amylase,AMS)、脂肪酶(Lipase,LPS)及C反应蛋白(C-reactiveProtein,CRP)水平情况。结果:治疗7天后,观察组总有效率高于对照组(P=0.016);观察组腹胀、腹痛缓解时间,肠鸣音及排便恢复时间与住院时间均小于对照组(P<0.01);治疗后,两组WBC细胞、血清AMS、血清LPS及CRP指标均较入院时下降,且观察组降低程度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:柴芩承气汤保留灌肠联合西医治疗急性胰腺炎临床疗效显著,可缩短症状体征缓解时间,有效改善机体炎症相关指标,无不良反应。

摘要： 选用脂肪酶Lipase G“Amano”50和蛋白酶Protease M“Amano”SD分步水解黄油制备天然咸奶味香基。结果表明,以乳清粉为辅底物,当酶解温度为45°C,反应体系pH为6.5,脂肪酶Lipase G“Amano”50的添加量为1.5%,酶解时间为5 h,蛋白酶Protease M“Amano”SD添加量为0.15%,酶解时间为7 h时,所得奶香基料具有浓郁、愉悦的咸奶香味。将此奶香基料用于饼干制作,可赋予饼干浓郁的咸奶风味,回味悠长,说明其具有良好的耐温性。

摘要： 目的探讨重症肺炎患者血清降钙素原(PCT)、脂肪酶(LPS)、D-二聚体(D-D)及氨基末端脑钠肽(NT-BNP)水平与心肌损害程度的关系。方法2017年4月至2020年12月我院收治的96例重症肺炎患者,其中合并心肌损害者62例(心肌损害组),未合并心肌损害者34例(非心肌损害组),同期我院健康体检者50例(健康对照组)。检测并比较三组血清心肌损害指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白T(cTnT)及PCT、LPS、D-D、NT-BNP水平;分析重症肺炎患者合并心肌损害的危险因素;分析血清PCT、LPS、D-D、NT-BNP水平与心肌损害指标的相关性。结果心肌损害组、非心肌损害组、健康对照组血清LDH、CK-MB、CK、cTnT及PCT、LPS、D-D、NT-BNP水平均依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);血清PCT、LPS、D-D、NT-BNP是重症肺炎患者心肌损害的独立危险因素(P<0.05);重症肺炎患者血清PCT、LPS、D-D、NT-BNP水平与LDH、CK-MB、CK、cTnT均呈正相关(P<0.05)。结论重症肺炎患者血清PCT、LPS、D-D、NT-BNP水平与心肌损害程度密切相关,可作为患者心肌损伤的可靠预测指标。

摘要： 目的探讨不同剂量的生长抑制素治疗急性胆囊炎的临床效果。方法选取2019年12月—2020年10月在河北省第七人民医院治疗的64例急性胆囊炎患者,按照随机数字表法将所有患者分为2组,每组32例。生长抑素高剂量组给予生长抑素6 mg静滴,生长抑素低剂量组给予生长抑素3 mg静滴,2组均1次/d,7 d为1个疗程。观察两组治疗后的临床效果及脂肪酶(LPS)、前白蛋白(PA)和抵抗素水平。结果治疗后,生长抑素高剂量组患者治疗有效率为81.3%(26/32),生长抑制素低剂量组为59.4%(19/32),生长抑素高剂量组显著高于生长抑素低剂量组(P<0.05)。治疗后,2组患者LPS、抵抗素水平均明显降低(P均<0.05),但生长抑素高剂量组显著低于生长抑素低剂量组(P<0.05);2组患者PA水平均明显升高(P均<0.05),但生长抑素高剂量组显著高于生长抑素低剂量组(P<0.05)。结论不同剂量生长抑制素治疗急性胆囊炎均有一定效果,但是较高剂量的生长抑制素可以显著降低LPS和抵抗素水平,提高PA水平,临床疗效更好。

摘要： 目的探究生长抑素联合硫酸镁治疗重症急性胰腺炎患者的临床效果及对淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)、炎症因子水平的影响。方法将我院收治的50例重症急性胰腺炎患者依据单双号随机分为参照组和联合组,各25例。参照组使用生长抑素治疗,联合组使用生长抑素联合硫酸镁治疗。比较两组患者的治疗效果。结果联合组的治疗总有效率显著高于参照组(P<0.05)。治疗后,两组的AMS、LPS、CRP、IL-6及TNF-α水平均低于治疗前,且联合组低于参照组(P<0.05)。治疗后,两组的APACHEⅡ评分均降低,且联合组低于参照组(P<0.05)。联合组的腹痛消失时间、发热消失时间、胃肠道功能恢复时间及住院时间均短于参照组(P<0.05)。联合组的并发症总发生率明显低于参照组(P<0.05)。结论生长抑素联合硫酸镁治疗重症急性胰腺炎患者的临床效果明显优于单独使用生长抑素治疗,前者能够有效降低AMS、LPS及炎症因子水平,快速缓解临床症状,缩短病程,降低并发症发生率。

摘要： 本文研究了脂肪酶预处理餐厨废水对厌氧膜生物反应器(AnMBR)运行状态和膜污染的影响.以外加酶浓度0.10％(以餐厨油脂量计)、预处理时间48h的餐厨废水为加酶组,以不加酶的反应器为对照组,探究了AnMBR连续运行过程中容积负荷、沼气产量、甲烷含量、挥发性脂肪酸(VFAs)浓度、酶活性、跨膜压差(TMP)和膜通量的变化.结果表明:外加酶预处理可以更快的提升反应器的容积负荷,当容积负荷升至18kg COD/(m3·d)时,加酶组的沼气产量为(600L/d)比反应器组(540L/d)提高了11.11％,加酶组的平均甲烷含量为60％,较反应器组(55％)提高了9.09％.酶促预处理可以增加脱氢酶和脂肪酶活性,降低废水的油脂含量从而减缓膜污染,整个运行周期中(90d),反应器组的膜清洗次数为5次,加酶组为3次.

摘要： 本文对实验室前期通过宏基因组文库筛选得到的一个全长为906bp的新型脂肪酶基因LIP906进行定向进化研究,通过易错PCR技术对其分子结构进行改造来提高脂肪酶的稳定性,使其能够尽快被应用.

摘要： 以枯草芽孢杆菌脂肪酶A(LipA)为研究对象.采用计算机理性设计与分子生物实验相结合的方法进行脂肪酶的热稳定性位点突变点理性设计.首先,从蛋白质热力学数据库ProtTherm中筛选出10个蛋白质的热力学信息组成新数据库作为评估理性设计软件(CUPSAT,I-Mutant3.0,SDM,ELASPIC,FoldX,Rosettaddg_monomer等6种蛋白质热稳定性预测软件)的数据库.

摘要： 疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)是一种耐热性好、位置特异性和区域选择性较强的脂肪酶,在洗涤剂、化妆品、生物化工等领域有良好的应用前景.但目前商品化的TLL多是固定化酶,在经分离纯化获得游离酶蛋白后还需要固定化,因而价格偏高,限制了广泛应用.本研究将来自疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因经密码子优化后全基因合成,并以毕赤酵母内源壁蛋白Gcw61p为锚定蛋白,构建了pHKA-Tll2-Gcw61展示型重组质粒.该重组质粒经限制性内切酶Pme I线性化后使用电转化到毕赤酵母GS115,经三丁酸甘油酯平板筛选后,获得水解酶活较高的重组毕赤酵母GS115/pHKA-Tll2-Gcw61.摇瓶发酵144h后,菌体酶活最高可达1964.76U/g.发酶液经初步纯化后经真空冷冻干燥,用于该脂肪酶酶学性质的研究.研究发现,重组TLL2其最适底物为对硝基苯酚己酸酯,最适作用温度为55°C,最适作用pH为9.0,在70°C中保存90min,酶活力仍保存70％以上,具有较高耐热的特性.Ca2+、Mn2+、Zn2+对酶有强烈的激活作用,Cu2+、Fe2+、Fe3+、K+、Li+、Na+、Co2+对酶有强烈抑制作用,Ba2+、Mg2+、Ni2+对酶影响不大.

摘要： 脂肪酶作为应用广泛的工业酶,利用NMR技术研究其结构、特异性及分子水平的动力学对基于工业用途的理性设计改造具有重要的理论及应用价值.通过利用毕赤酵母P.pastoris及大肠杆菌E.coli BL21trxB(DE3)表达系统分别表达同位素标记的有重要工业应用价值华根霉脂肪酶(RCL),对两表达系统进行了比较.结果表明两系统表达的13C,15N标记RCL有相同的二硫键组成及相似的NMR二维图谱,说明两系统都表达出了具有相似构象的蛋白.毕赤酵母表达系统表达的脂肪酶ppRCL比大肠杆菌表达的ecRCL表达量高1.7倍,但是标记效率低15％,并且ppRCL存在O-糖基化影响图谱质量.利用大肠杆菌E.coli BL21trxB(DE3)表达系统高效表达了主链2H,13C,15N标记,Ile(δ1),Leu及Val侧链1H,13C,15N标记的蛋白ecRCL,采集三维图谱完成了70％以上主链及侧链指认,为NMR溶液结构解析、特异性及催化反应动力学研究提供了基础.并提供了潜在的高效表达含二硫键的同位素标记蛋白的方法.

摘要： 手性聚合物由于其分子中手性碳或不对称因素的存在,使得这类聚合物在许多方面表现出了优异和特殊的性能.手性聚酯材料因其良好的生物相容性、生物降解性以及机械性能,而在生物材料、医药领域方面有着很好的应用前景.

摘要： 生物催化合成方法研究是当前备受关注的前沿领域.它具有选择性高、条件温和、反应速度快等优点,因而吸引了化学、化工、制药、材料等众多领域学者的兴趣.酶作为主要的生物催化剂,一直被认为是一种快速、专一、且只对一定底物或一类反应具有高度识别性的生物催化剂.最近的研究表明部分酶还具有催化多功能性,即它能够在主反应的活性位点催化第二种反应.如果将蛋白质工程和酶的催化多功能性相结合,可以极大地扩展生物催化剂在有机或生物合成中的应用.

摘要： 超临界CO2动态循环下,用脂肪酶催化辛酸与大豆油反应,进行富含中链脂肪酸的大豆油结构脂质的制备研究.确定了最佳条件为:酶用量为7％,反应压力为14MPa,反应温度为55°C,反应时间为14h.在此条件下辛酸的插入率可达到91.2％.

摘要： 在鼓泡式反应器无溶剂体系中,利用Lipozyme435脂肪酶催化大豆油甘油解制备甘油二酯,考察了酶添加量、底物摩尔比、反应温度、气流量、反应时间对反应的影响.结果表明,甘油解法合成甘油二酯的较好条件为:酶添加量4wt％(以大豆油和甘油总重为100wt％),底物摩尔比(甘油∶大豆油)20∶1,温度80°C,气流量10.6cm/min,反应时间2.5h.在此条件下,产物中甘油二酯含量为49.4wt％.酶在鼓泡式反应器中重复利用10次后仍具良好活性.通过分子蒸馏纯化后,大豆油DAG(SO-DAG)中DAG舍量达到63.5wt％.SO-DAG与原料大豆油的脂肪酸组成及含量没有显著的差别,但其热力学性质差异较大.SO-DAG的晶型以β型为主,还含有少量的β'型晶体;其晶体形态主要呈粒型聚集状及球状.

摘要： 以脂肪酶Novozym435为生物催化剂,催化合成了新型的脂溶性抗氧化剂α-亚麻酸芦丁酯.通过单因素实验得到最优工艺条件:丙酮作溶剂,酶添加量为15mg/mL,芦丁浓度为27.5mmol/L,醇酸摩尔比为1∶6,分子筛添加时间为反应8h后,反应时间为60h时酯化率最高为92.5％.建立了双底物酶催化酯化反应动力学模型,推算出动力学参数vmax=2.87mmol/L·h,米氏常数kmA=1556.6mmol/L、kmB=220.5mmol/L.

摘要： 本发明涉及使用酵母表面展示载体筛选具有改良的酶活性的脂肪酶的方法和通过该方法制备的该突变脂肪酶，更具体地涉及包含：1)将脂肪酶基因克隆到表面展示载体中，2)通过诱变PCR制备步骤1的脂肪酶的突变基因文库，3)将步骤2的突变脂肪酶基因文库和表面展示载体转化到宿主细胞中，和4)测量在转化的宿主细胞的表面展示的突变脂肪酶的活性并选择如此制备的突变脂肪酶的方法。本发明的方法可筛选具有改良的酶活性的脂肪酶。因此，其可有效用于各种领域，如食品和洗涤剂工业。

摘要： 本发明涉及脂肪酶固定化载体、固定化脂肪酶及其制备方法和应用。具体而言，本发明提供一种固定化脂肪酶用载体或使用该固定化酶用载体作为载体的固定化脂肪酶，所述固定化脂肪酶用载体含有种子残渣和粉末吸附剂，或由种子残渣和粉末吸附剂组成。本发明还涉及种子残渣和粉末吸附剂的混合物在制备固定化脂肪酶中的应用。本发明能够降低固定化脂肪酶的成本，所制备的固定化脂肪酶具有很高的活力。

摘要： 本发明涉及固定化脂肪酶以及固定化脂肪酶的制备方法。固定化脂肪酶包含阴离子交换树脂载体、酶蛋白、水分和保护剂，所述保护剂是低分子量的多羟基化合物。固定化脂肪酶的制备方法，包括：（1）提供脂肪酶酶液；（2）将阴离子交换树脂载体加入（1）所提供的酶液中并进行混合；（3）从步骤（2）所得的混合物中分离得到固定化酶，在步骤（1）和/或步骤（2）中添加保护剂，所述保护剂是低分子量的多羟基化合物，所述固定化酶不进行干燥处理。本发明的固定化脂肪酶不需要干燥也不需要任何物质处理，可直接用于酯化反应，反应速度快，酯化效果突出。本发明的制备方法中，载体不需要任何处理可直接用来吸附酶。

摘要： 本发明公开一种脂肪酶基因、重组表达载体、重组表达菌株、脂肪酶及其制备方法、及生物柴油的制备方法，其中，所述脂肪酶基因TLLsyn用于编码脂肪酶，所述脂肪酶基因TLLsyn的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供的脂肪酶基因TLLsyn，采用了毕赤酵母中的高频密码子替换原有的低频密码子，显著提高了人工合成的脂肪酶基因TLLsyn在毕赤酵母细胞中的表达量；此外，在脂肪酶的制备过程中，将人工合成的脂肪酶基因TLLsyn转入到毕赤酵母中，并结合目的基因的多拷贝构建，提高了脂肪酶基因TLLsyn在脂肪酶中的表达量，并提高了脂肪酶的酶活，其制备工艺简单且产量高，降低了脂肪酶的生产成本。

摘要： 本发明提供了一种酸性脂肪酶基因LipC及其编码的酸性脂肪酶的制备方法，属于基因工程技术领域。所述酸性脂肪酶基因LipC的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，利用包括酸性脂肪酶基因LipC的重组表达菌株制备酸性脂肪酶的方法，包括以下步骤：1)活化培养重组菌株C‑OB

摘要： 一种属于假单胞菌属(Pseudomonas)的细菌、该细菌所产生的具有如下性质的脂肪酶、该脂肪酶的制造方法及含该脂肪酶的洗涤剂组合物。;以三油酸甘油酯乳液为基质，其作用pH为3.5-12，最佳pH为10-12；其作用温度为30-80°C，最佳温度为55-65°C；以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法所测得的分子量为31000±2000；由等电点聚丙烯酰胺凝胶电泳法所测得的等电点为5.2±0.5。本发明的脂肪酶在各种市售的洗涤剂溶液中，又在与表面活性剂、蛋白酶等的洗涤剂成分共存时，具有较高的稳定性和活性，可以在洗涤条件下有效地去除油脂污垢，可增加洗涤剂的洗净力。

摘要： 本发明涉及使用酵母表面展示载体筛选具有改良的酶活性的脂肪酶的方法和通过该方法制备的该突变脂肪酶，更具体地涉及包含：1)将脂肪酶基因克隆到表面展示载体中，2)通过诱变PCR制备步骤1的脂肪酶的突变基因文库，3)将步骤2的突变脂肪酶基因文库和表面展示载体转化到宿主细胞中，和4)测量在转化的宿主细胞的表面展示的突变脂肪酶的活性并选择如此制备的突变脂肪酶的方法。本发明的方法可筛选具有改良的酶活性的脂肪酶。因此，其可有效用于各种领域，如食品和洗涤剂工业。

摘要： 本发明公开一种脂肪酶固定化载体、固定化脂肪酶及其制备方法、生物柴油的制备方法，涉及酶工程技术领域。所述脂肪酶固定化载体包括有机/无机杂化树脂。使用有机/无机杂化树脂作为脂肪酶固定化载体，针对脂肪酶亲极性和亲非极性的特点，所选树脂通过杂化，兼具有机材料与无机材料的优点，耐热性与附着性优异。通过因固化而生成的无机物如二氧化硅来“保护”树脂中耐热性弱的部分，因此可以获得较高的固定化率。本发明提出的脂肪酶固定化载体，能够有效维持脂肪酶分子的三维结构，减轻有机介质对脂肪酶分子结构的破坏，提高脂肪酶分子的稳定性；用于固定化脂肪酶具有环境耐受力强、催化效率高的优点。

摘要： 本发明公开了一种米黑根毛霉脂肪酶突变体及提高米黑根毛霉脂肪酶活性和/或甲醇耐受性的方法。本发明在米黑根毛霉脂肪酶成熟肽的β‑sheet二级结构中引入糖基化修饰，获得了高活性高甲醇耐受性的脂肪酶突变体。与改造前相比，本发明产生的突变酶P167N，L242N，R267N和P300N酶活分别提高了33.90，17.90，14.07和12.26倍。当在60％的甲醇溶液中孵育1h后，突变酶残余活力由改造前的19.10％提高到60％以上。本发明产生的突变酶实现高效利用废油脂一步甲醇法制备生物柴油，这不仅提高了反应效率，缩短了反应时间，还简化了反应工艺。

摘要： 本发明属于聚乳酸生产技术领域，具体公开了一种用于合成L‑丙交酯的化学修饰的脂肪酶，同时还公开了该脂肪酶的制备方法。本发明采用环氧油酸异丙酯对来源于南极假丝酵母的脂肪酶B进行化学修饰，得到了化学修饰的脂肪酶。所述化学修饰的脂肪酶的酶活性高，用于催化生成L‑丙交酯时产率显著提高。