固定化

摘要： 果胶酸裂解酶(PL,EC:4.2.2.2)广泛应用于果蔬汁澄清、纸浆漂白、苎麻脱胶等领域.本文以壳聚糖为载体,对多粘类芽孢杆菌来源的重组果胶酸裂解酶PpPel10a的固定化进行了探索.首先利用单因子试验考察壳聚糖浓度、戊二醛浓度、游离酶添加量、吸附时间和吸附温度对壳聚糖交联固定PpPel10a的影响,并通过响应面法进一步优化.结果 表明当壳聚糖浓度3.5％,戊二醛浓度3％,游离酶添加量8 mg/g,吸附时间5 h,吸附温度30°C时酶活回收率最高,达到87.3％.与游离的PpPel10a相比,固定化PpPel10a对pH和高温均呈现出更好的耐受性.重复使用7次后,固定化PpPel10a的酶活力仍能保留30％以上.此外,利用固定化PpPel10a处理苎麻纤维,通过电子显微镜扫描发现,与对照相比酶处理获得的纤维表面更加平滑且纤维分散度较高.这说明固定化的PpPel10a在苎麻纤维脱胶中具有一定的应用潜力.

摘要： 针对硫酸盐还原菌(SRB)处理含Cr^(6+)废水中重金属抑制菌生长活性的问题,采用交联-包埋法制备以羧甲基纤维素(CMC)、海藻酸钠(SA)和颗粒活性炭(GAC)为基础的固定化SRB颗粒。采用等温吸附模型和吸附动力学研究固定化颗粒对Cr^(6+)的吸附过程,结合SEM、FTIR和XPS的表征分析探讨颗粒作用机制。结果表明,以0.5%CMC、2%SA和3%GAC为载体制备的固定化SRB颗粒效果最佳,菌株在颗粒内孔室生长,并通过生物作用将Cr^(6+)还原成Cr^(3+),实现Cr^(6+)的去除。

摘要： 为解决杏鲍菇液体菌种不耐储存和不易运输等问题,通过筛选适宜的固定化载体种类及其质量浓度,分析液体菌种与固定化载体体积比、CaCl_(2)质量浓度、交联时间等对固定化小球形成的影响,优化固定化条件,研究杏鲍菇液体菌种细胞固定化技术;通过测定不同温度条件下保藏不同时间固定化菌种的成活率、菌丝生长速度、呼吸强度、纤维素酶活性等,明确固定化菌种的生物活性和保藏稳定性。结果表明,杏鲍菇液体菌种的细胞固定化最佳条件为:将海藻酸钠与聚乙烯醇(质量比3∶7)作为固定化载体,固定化载体质量浓度为80 g/L,液体菌种与固定化载体溶液体积比5∶5,CaCl_(2)质量浓度为20 g/L,交联时间6 h,制得的固定化菌种球形规则,传质性快,为15 min,机械强度适中,为60.1 g,菌丝增长率高达200.1%。固定化菌种在20、4°C条件下保藏30 d,随着保藏时间增加,成活率和菌丝生长速度无显著性变化,呼吸强度降低,纤维素酶活性升高,说明菌种仍具有较高的生物活性,利于固定化菌种生物活性稳定;-20°C保藏10 d成活率和菌丝生长速度分别降低50个百分点和72.73%,呼吸强度和纤维素酶活性显著降低,菌种生物活性降低,不利于菌种的保藏。

摘要： 为评估棉纤维固定化酵母生产乙醇的可行性,首先对棉纤维表面基团进行化学修饰,以提高载体对酵母细胞的吸附能力。其次分析了固定化发酵的稳定性,并从细胞数量角度定量分析固定化发酵和游离发酵的差异性。结果表明,经过F6-2试剂处理后的载体吸附效果有明显提升,其吸附比例达到83.1%,比未处理的固定化载体提高了15.9%。采用修饰的载体进行固定化发酵表现出较好的稳定性,发酵6批的平均转化率和产率分别为96.77%和5.22 g/(L·h),相比游离发酵,分别提高3%和51.7%。固定化发酵体系中,发酵6批后总酵母数为4.86×10^(8)CFU/mL,是游离发酵体系的2倍。结果表明,利用修饰的棉纤维进行固定化发酵具有明显的优势和应用可行性。

摘要： 脂肪酶作为一种绿色生物催化剂,在食品工业中有着广泛的应用。但其结构容易破坏,稳定性差,固定化脂肪酶是提高其稳定性的关键。采用微球酶、改性核桃壳固定化脂肪酶和LX-1000HA树脂固定化脂肪酶3种固定化方法,固定化猪肉内源性脂肪酶,利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)和电子鼻检测鸡肉经固定化猪肉内源性脂肪酶处理前后的风味变化,并分析鸡肉样品中挥发性成分的变化情况。结果表明:在同一条件下,3种脂肪酶固定化方法中以改性核桃壳固定化脂肪酶的活力最高,达169.8 U/mL;电子鼻结合HS-SPME-GC-MS技术共检测出53种挥发性成分,主要包括醛类、烯烃类、芳香族类、酯类、醇类和含硫化合物等,脂肪酶经固定化后可以有效改善鸡肉的风味。

摘要： 木瓜蛋白酶是来自于热带、亚热带水果番木瓜的蛋白酶,经固定化后可以增强其功能特性,有利于进一步开发与利用。固定化木瓜蛋白酶应用范围广泛,在多个领域中均有应用,但是同时也存在着研究水平较低、应用程度较浅的问题,因此还可以做更深入、全面的开发,将其优秀的酶学性质发挥到各个行业中。本文简述了木瓜蛋白酶的固定化方法及固定化木瓜蛋白酶在食品、医药等行业的应用,以期为木瓜蛋白酶今后的研究与利用提供参考。

摘要： 利用固定化海洋微藻进行海水水产养殖废水中氮、磷的去除能力研究。首先探讨了海洋微藻小球藻(Chlorella sp.)和绿色巴夫藻(Pavlova viridis)对高浓度氨氮的耐受性。其次研究了海藻的脱氮、除磷能力。结果表明:2~10 d微藻生长与对照比无抑制现象,表明两种海洋微藻对20~100 mg·L^(-1)氨氮具有强耐受力。固定化胶球中细胞密度对氮磷去除有影响,对氮去除的适宜藻细胞密度是250万·胶球^(-1),对磷高去除的细胞密度是1000万·胶球^(-1)。小球藻的脱氮除磷能力大于绿色巴夫藻,在50 mg·L^(-1)初始浓度下,5 d氨氮去除率为33.8%。5 d磷最高达到32.0%。去污结束时,藻细胞均有生长,固定化细胞1000万·胶球^(-1)增长率最低。本研究可为藻类净化海水养殖废水提供一定参考。

摘要： 本文利用新型无机晶体复合物磷酸铜作为载体,对裂解多糖单加氧酶cx-LPMO-B进行固定化,研究其固定化过程的最适条件,并对游离酶及固定化酶的酶学性质进行对比。结果显示:在搅拌条件下,向含有裂解多糖单加氧酶pH=7.40.01 mol/L的磷酸盐缓冲溶液中滴加硫酸铜,可形成酶-磷酸铜纳米花,即cx-LPMO-B-NF;在25°C、14 h、酶含量为0.3 g/L条件下制备得到的cx-LPMO-B-NF活性最高,固定化酶重复使用6次后仍能保持60%以上的酶活;扫描电子显微镜(SEM)及透射电子显微镜(TEM)发现cx-LPMO-B-NF结构呈现分散均匀且单一的盛开花朵状;固定化酶最适反应pH=4.0,最适反应温度50°C。固定化酶重复使用性显著增强,花状结构增加了其表面积,更加有利于对游离酶的固定化,反应条件较温和使其具有较高的工业化应用前景。

摘要： 采用海藻酸钠包埋法和壳聚糖交联法固定化鳞杯伞产生的α-半乳糖苷酶,通过比较固定化酶和游离酶的最适pH、pH稳定性、最适温度、温度稳定性、保存时间及两种固定化酶对豆浆中低聚糖的水解作用及操作稳定性等,探究较适宜于鳞杯伞α-半乳糖苷酶的固定化载体。结果表明:鳞杯伞α-半乳糖苷酶最佳硫酸铵饱和度为80%;两种固定化方法酶活性保持率都达到了50%以上,且固定化酶的温度稳定性、pH稳定性、保存时间相比游离酶都有提升;比较两种固定化酶,壳聚糖固定化酶的温度、酸度稳定性及操作稳定性要优于海藻酸钠固定化酶,但保存时间和对豆浆中低聚糖的水解效率要低于后者,两种固定化酶重复使用3次后低聚糖水解率在85%以上,相比于海藻酸钠,壳聚糖更适宜作为鳞杯伞α-半乳糖苷酶的固定化载体。

摘要： 采用铜/锌复合金属磷酸盐晶体和海藻酸钙凝胶双重包覆技术对漆酶进行固定化,制得石榴状Alg@Cu_(3)/Zn_(3)(PO_(4))_(2)@Lac的凝胶微球.SEM,EDX和FTIR表征结果表明,在凝胶微球内部,漆酶被成功固定于由海藻酸钙凝胶包覆的铜/锌复合金属磷酸盐晶体内,铜/锌复合金属磷酸盐晶体镶嵌于海藻酸钙凝胶网格的孔隙中而呈石榴状.以2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)为底物,经酶学性质研究表明,在无机盐晶体和海藻酸钙凝胶的双重保护下,Alg@Cu_(3)/Zn_(3)(PO_(4))_(2)@Lac的耐热性、耐酸性以及储存稳定性比游离漆酶均有不同程度增强.将Alg@Cu_(3)/Zn_(3)(PO_(4))_(2)@Lac应用于双酚A(BPA)的降解,采用孔径约1 mm滤网实现快速回收,经6次循环利用,对BPA的降解率下降约14%,显示出比较稳定的重复利用性和便捷的可操作性,这主要得益于海藻酸钙和铜/锌无机盐晶体对漆酶蛋白分子的双重保护.

摘要： 本文以壳聚糖为载体,以戊二醛为交联剂,将果胶酶溶液固定化在壳聚糖上,用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)检测固定化后果胶酶的酶活.实验结果表明2g壳聚糖固定化16mL果胶酶(浓度为0.1g/L)固定时间为3h时,固定化果胶酶的酶活达到最大.将固定化的果胶酶投入造纸白水上清液(DCS水样)中,在5h内,pH升高了11％,电导率升高了2.2％,化学耗氧量(COD)降低了36％,阳离子需求量(CD)降低了24％.通过前后的GC-MS图对比,发现胶体物质含量减少,胶体物质分解的产物含量增加.

摘要： 谷氨酰胺合成酶(简称GS,glutamine synthetase;EC6.3.1.2)是一种控制氮代谢的酶,它不仅被细胞来合成蛋白质,也是用来运输氮,是生物体氮代谢的关键酶之一.本文对来源于谷氨酸棒杆菌ATCC13761中的GS基因ghA进行过定点突变,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中克隆表达得到GS';粗酶液经过镍柱纯化,用LX-1000EP树脂进行固定化,并比较其酶学性质.研究表明,定点突变后表达的GS'酶活力提高5倍.固定化酶和纯酶最适反应温度相同,但固定化酶最适pH往碱性方向偏移,对Mg+耐受浓度更高.

摘要： 碱性钙基膨润土是一种新型的阴离子型层状黏土材料,由于其特殊的阴离子交换性能,具有广阔的应用开发前景.为了进一步认识碱性钙基膨润土,拓宽其应用范围,本课题研究用氨基酸对其进行改性来制备氨基酸膨润土,并初步探索氨基酸膨润土为载体应用于脂肪酶的固定化.结果表明氨基酸膨润土是一种较好的固定化材料,酶与载体之间“柔性链”的长度对其酶活及重复使用性都有影响,以谷氨酸改性最好,用XRD及FTIR对谷氨酸膨润土固定化酶前后分别进行了表征,蛋白固载量及固定化酶的活力分别为6.3mg/g土和391.2U/g,重复使用六次可保持约68％的活力;非离子型表面活性剂可以激活酶,如曲拉通X-100和X-114,可使固定化酶活性提高约2倍,对固定化酶的最佳处理时间为1h.

摘要： 酶的固定化是指将酶束缚或限制于一定区域内,但仍保留其催化特性并可回收和重复使用的一类技术,固定化酶比游离酶具有如下优点:(1)固定化酶可重复使用,使酶的使用效率提高、使用成本降低;(2)固定化酶极易与反应体系分离,简化了提纯工艺,而且产品收率高、质量好:(3)固定化酶具有一定的机械强度,可以用搅拌或装柱的方式作用于底物溶液,便于酶催化反应的连续化和自动化操作.目前,酶的固定化方法主要有吸附法、共价结合法、包埋法及交交联法四大类.本文主要用包埋法和吸附法两种方法对WZZ003进行固定化研究,并从(R,S)-DMPM的催化反应和固定化后的转化率、反应批次、e.e值等方面说明了此种方法工业化应用的可能性.

摘要： 云芝(Trametes versicolor syn.Coriolus versicolor)具有免疫调节、抗肿瘤与降血糖生物活性,主要之生物活性成分为子实体醣肽、菌丝体胞内醣肽(EPS)与胞外醣肽(IPS).微生物固定化发酵系统具有下列之优点；提供高细胞密度培养、易于连续操作、简化下游分离回收程序、提供较适当之微环境条件、高单位容量生产力及可避免剪力造成之细胞伤害。丝瓜(Luffacylindrica)为葫芦科一年生攀援草本植物,丝瓜络为其干燥成熟果实去种子及外皮的维管束网状天然物,维管束网状结构可用于细胞固定化载体。本研究探讨不同胶体复合丝瓜络载体、接种量、批次馈料连续培养.对于固定化云芝LH-1菌丝体生产胞外醣肽与胞内醣肽影响。结果显示四种胶体(鹿角莱胶、洋莱胶、海藻胶及果胶)复合丝瓜络载体中，云芝液态培养所产生之EPS、IPS及生质量以洋菜胶最佳，其次为果胶。进一步以5种洋菜胶浓度(1‰-5％)复合丝瓜干瓤以最适化材料之制程,以3％洋菜胶复合丝瓜络最佳。于5％-20％接种菌量范围，云芝EPS、IPS及生质随者接种量之增加而增加。批次培养洋菜胶复合丝瓜络固定化云芝菌丝体，云芝EPS产量于培养第二天开始即显著增加，培养至第四天达最高峰，其后即开始减少,培养基pH与培养基可溶氧随着胞外醣肤产量增加而下降。批次馈料连续培养云芝EPS分别于培养第4-5天、9-10天及14-15天出现峰期,产量分别为8.39g/L、7.26g/L及7.19g/L。培养第四天时所得之云芝EPS最高产量8.39g/L，为未经菌丝体固定化之发酵产程云芝EPS产量3.94g/L之2.13倍。综合以上之结果显示，洋莱胶复合天然丝瓜络栽体固定化云芝菌丝体深层发酵，应用批次馈料可显著提高胞外醣肽之产量。

摘要： 采用大孔树脂吸附法固定化磷脂酶Lecitase@Ultra，用扫描电镜、红外光谱对固定化酶的结构进行表征，并研究了其稳定性。结果表明，DA-201吸附固定化磷脂酶Lecitase@Ultra的效果较好，得到固定化酶的酶活达1862U/g。经扫描电镜发现，酶分子吸附效果明显。红外光谱分析可知，酶经固定化后，二级结构发生变化，α-螺旋组成降低，β-折叠增多。磷脂酶Lecitase@Ultra经固定化后，其pH稳定性、热稳定性也有一定提高。

摘要： L-鸟氨酸存在于各种各样的生物体细胞中,是尿素循环的中间产物,在保健品、医药等行业起着不能替代的作用.本文利用酶法转化生产L-鸟氨酸,基于精氨酸酶能催化水解L-精氨酸生成L-鸟氨酸与尿素.

摘要： 本研究借助海藻酸钙与纳米四氧化三铁(Ferric oxide nanoparticles,FONPs)混合物对酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)细胞进行固定化并用于发酵生产丁酸.通过对固定化细胞产酸能力、细胞相对活性、固定化率三方面的综合考察,最终确定固定化条件为:5％(w/v)海藻酸钠加载量、4％(w/v)氯化钙溶液、0.3％(w/v)纳米四氧化三铁加载量和10％(w/v)C.tyrobutyricum细胞加载量.以葡萄糖为碳源利用磁性海藻酸钙胶珠进行批次发酵研究中,获得5.57g/L的最大丁酸产量和0.36g/g的平均丁酸得率,可进行10次以上的重复批次发酵;本研究表明经制备的磁性海藻酸钙胶珠可应用于生物丁酸的制备.

摘要： 为了探索生物酶法制备生物柴油新工艺,克服现有工艺的不足,采用超顺磁性全细胞催化剂在自制的磁稳定流化床中对废油脂连续生产生物柴油进行了实验研究。考察了改变磁场强度、进料醇油摩尔比、催化剂用量及流量等因素对连续酯交换反应的影响,进而得到单级磁流化床酯交换反应的最佳工艺条件：磁稳态操作,醇油摩尔比为1：1,催化剂用量为原料油质量的12%,进料流量为42.6 mL/min。四级磁流化床连续系统最终转酯化率达到85%以上,连续反应200 h后四级出口的甲酯产率仍在80%以上。这说明全细胞催化剂在磁稳定流化床中活性较高,使用寿命较长,该系统具有良好的操作稳定性。

摘要： DNA序列信息对于人类遗传信息的解码和某些污染物致癌机理的研究具有重要作用,同时也推动了DNA测序技术的快速发展。在过去的30年里,DNA测序技术已经发展到了第四代,其中包括传统经典的 Maxam Gilbert's化学测序法和Sanger双脱氧链终止法等,还有已经得到广泛关注的高通量测序法、实时单分子测序法和以纳米孔为基础的直接DNA测序法[1-2]。由于多数DNA 测序法不能直接提供核苷酸结构信息,因此产生了不能忽视的读序误差。

摘要： 本发明涉及用于临时和/或永久固定应用以治疗骨折并将两个或两个以上骨碎片相互连接的外部模块化固定系统的长销(2)，包括具有第一端部(4)和相对的第二端部(5)并沿纵向轴线延伸的长杆(3)，所述第一端部(4)具有用于将所述第一端部(4)插入骨内的尖端，其特征在于，所述第一端部(4)为带有外螺纹的锥形，形成锥形螺纹端部，所述锥形螺纹端部沿纵向轴线的延伸由锥形端部的穿入深度确定，该深度仅受限于骨的皮质层。

摘要： 本发明提供了一种燃料电池，其能够防止固定在电极上的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和/或其衍生物被洗脱，且能够防止由于洗脱导致的性能劣化；以及该燃料电池的制造方法。一种生物燃料电池，其具有这样的结构，其中正极和负极经其间的质子导体彼此面对，该生物燃料电池经配置以使得酶用于从燃料提取电子，其中所述负极是由包括在表面上具有尺寸为2nm以上100nm以下的孔的碳和/或无机化合物且在碳和/或无机化合物上固定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和/或其衍生物的电极构成。碳粒子、碳片或碳纤维用作碳。生物碳、科琴黑、活性炭等用作碳粒子。根据需要，酶反应所需的酶也可经芘衍生物等固定在碳上。

摘要： 本发明提供一种新的二氧化碳的固定方法。本发明的二氧化碳的固定方法包括第一接触步骤和第二接触步骤，在所述第一接触步骤中，使含有氢氧化钠的溶液与含有二氧化碳的气体接触，在所述第二接触步骤中，在第一接触步骤之后，在所述溶液中添加第2族元素的氯化物和二价金属元素的氯化物中的至少一种。

摘要： 本发明提供一种新的二氧化碳的固定方法。本发明的固定方法包括使含有氢氧化钠且还含有第2族元素的氯化物和二价金属元素的氯化物中的至少一种的混合液与含有二氧化碳的气体接触的接触步骤，在所述接触步骤中，通过将所述气体送入所述混合液中，使所述混合液与所述气体接触。

摘要： 本发明提供一种新的二氧化碳的固定方法。本发明的二氧化碳的固定方法包括使含有氢氧化钠且还含有第2族元素的氯化物和二价金属元素的氯化物中的至少一种的混合液与含有二氧化碳的气体接触的接触步骤。

摘要： 本发明涉及包埋固定化载体的减容方法、包埋固定化载体、水质净化方法及包埋固定化载体的制造装置，尤其涉及减少净化观赏鱼等的饲养水的水质的含水凝胶的微生物包埋固定化载体的容积的技术。本发明的包埋固定化载体的减容方法在不降低保持于载体内的微生物的活性的情况下，维持均一的载体形状，同时，有效减少载体的容积。其是在固定化材料的内部包埋固定有微生物的包埋固定化载体的减容方法，包括：通过以使包埋固定化载体的表面温度成为10～40°C的方式进行送风干燥而减少该包埋固定化载体的容积。

摘要： 本发明公开了一种制备固定化酶或固定化蛋白质的方法以及固定化酶或固定化蛋白质。所述方法包括：将SpyCatcher共价结合在载体上；构建在N端或C端融合有SpyTag的目标酶或目标蛋白质；使共价结合有SpyCatcher的载体与融合有SpyTag的目标酶或目标蛋白质相互接触。所述固定化酶或固定化蛋白质包含载体、与所述载体共价结合的SpyCatcher、和在N端或C端融合有SpyTag的目标酶或目标蛋白质，所述目标酶或目标蛋白质通过所述SpyTag与所述SpyCatcher共价结合而固定在载体上。本发明还是涉及一种共价结合有SpyCatcher的载体及其用于从蛋白质混合物中将N端或C端融合有SpyTag的目标酶或目标蛋白质选择性固定化的用途。

摘要： 本发明涉及包埋固定化载体的减容方法、包埋固定化载体、水质净化方法及包埋固定化载体的制造装置，尤其涉及减少净化观赏鱼等的饲养水的水质的含水凝胶的微生物包埋固定化载体的容积的技术。本发明的包埋固定化载体的减容方法在不降低保持于载体内的微生物的活性的情况下，维持均一的载体形状，同时，有效减少载体的容积。其是在固定化材料的内部包埋固定有微生物的包埋固定化载体的减容方法，包括：通过以使包埋固定化载体的表面温度成为10～40°C的方式进行送风干燥而减少该包埋固定化载体的容积。

摘要： 本发明提供了一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法及仿生矿化固定化酶和辅因子，包括下列步骤：将酶液溶于磷酸盐缓冲溶液中，所述酶液中的目的酶带有组氨酸标签，将金属盐和辅因子加入酶液中，得到溶液A，其中所述金属盐中的金属离子可与所述磷酸根离子形成矿物，所述辅因子带有负电荷；将所述溶液A混合均匀后在室温下静置，得到沉淀B；将含有所述沉淀B的溶液A进行离心、洗涤，得到仿生矿化固定化酶及辅因子。本发明采用仿生矿化法同时将酶和辅因子固定在同一载体上，所得固定化酶和辅因子粒子形貌规则，粒径约为9～50μm且存在介孔结构；固定化酶和辅因子对高温、pH有很好的耐受性，重复使用和贮藏稳定性高，且该固定化解决了辅因子难以回收再利用的难题。

摘要： 本发明涉及一种微生物固定化载体、微生物固定化设备和微生物固定化方法；微生物固定化载体包括聚乙烯醇、海藻酸钠、活性炭、贝壳粉、硅藻土和淀粉；微生物固定化设备包括搅拌器、螺旋挤压装置、匀速传送带、切割器、交联反应池和热风循环烘箱；本发明的固定化载体制备方法简单、易行、固定化效果好，生产工艺技术成熟、集成化程度高、操作易于控制，可以满足工业化生产需求。本发明的微生物固定化方法可以实现对固体、液体微生物材料的固定，且固定化效率高，固定化效果好，生产成本低。