磷脂酶

摘要： 为探究磷脂酶基因家族在百合叶片中的表达情况,利用Illumina测序对百合正常叶片和叶烧病叶片进行转录组测序分析。测序共获得磷脂酶注释基因274个,分为PLA1、PLA2、PLB、PLC和PLD共5类。在KEGG、NR、COG和Swiss-prot等4个蛋白质数据库中都注释为磷脂酶基因的Unigene序列有34条,其中PLA2、PLB、PLC和PLD类磷脂酶基因参与醚脂类代谢、甘油磷脂代谢调控,在百合叶烧病发生过程中,PLA2基因与PLC基因表达量上调,PLB与PLD类既有上调表达基因也有下调表达基因。

摘要： 利用已鉴定磷脂酶基因同源筛选的方法对水稻全基因组范围的磷脂酶基因进行鉴定与筛选,有助于研究其家族基因的各种功能.通过对水稻全基因组进行分析,筛选鉴定磷脂酶家族成员,并对编码蛋白的跨膜区、等电点、分子量等理化性质以及进化、基因组定位、表达特征进行生物信息分析.结果表明:水稻磷脂酶家族基因分为3个亚组,亚组内基因表现出明显相似的结构及进化特征,且磷脂酶家族基因编码蛋白具有相同的3个保守基序,染色体上的磷脂酶家族基因表现出了明显的不均衡性,磷脂酶家族大部分基因表达量偏低,部分表现出了组织表达偏好性,少部分基因在水稻各个组织或生育阶段表达量比较高,可能同水稻发育相关.

摘要： 磷脂酶可水解膜双分子层的主要成分磷脂,在植物生长发育及逆境胁迫响应方面发挥着重要作用。磷脂酶在种子生长发育、贮藏和萌发阶段调控种子活力,影响植物遗传资源保存和农作物产量。文章归纳总结了磷脂酶在种子各阶段对其活力的影响,包括在种子生长发育期间调控淀粉合成影响种子活力的形成,在种子成熟阶段调控膜完整性影响种子的耐脱水能力,在贮藏期间可能调控细胞中的氧化损伤程度影响种子活力,在萌发阶段参与脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)信号传导,调控种子的萌发及幼苗建成。然而由于磷脂酶多样且复杂的生物学功能,其调控种子活力的机制仍不明确。利用基因编辑及多组学技术手段,深入研究磷脂酶调控种子活力的生物学功能及调控机制,不仅有助于阐明种子老化的分子机制,还可为种质创新提供有价值的基因资源,具有重要的理论和实践意义。

摘要： 以小桐子毛油为原料,应用复合磷脂酶通过单因素试验和正交试验开展酶法脱胶工艺研究.结果表明:在酶加量50μg/g、pH5.5、反应温度50°C、转速350 r/min、反应时间2 h的条件下,脱胶后油中的磷、金属、氮等微量杂质含量明显减少,脱胶效果明显.在试验研究的基础上,并对毛油酶法脱胶机理进行分析.

摘要： 冷胁迫是限制植物生长和分布,降低作物产量的重要环境因子.冷驯化是温带植物对抗冷胁迫的有效手段.本研究以具有耐寒能力的高山植物牛皮杜鹃(Rhododendron chrysanthum Pall.)作为研究对象,探究冷驯化前后牛皮杜鹃的基因表达和代谢通路的变化.基于转录组数据的测序结果:常温组和驯化组的总reads分别为103951和113093.将获得的unigene在KEGG、GO、KOG、Nr、Nt、Swissprot和Pfam数据库中进行比对注释,有78.67％的unigene在Nr数据库中获得了注释,比列最高.比较常温组和冷驯化组的差异表达基因为21489,其中上调和下调的基因分别为11213和10276个.GO功能分类表明差异表达基因主要富集在"DNA为模板的转录调控""信号转导""细胞氧化还原稳态""蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶""RNA结合"和"细胞";KEGG路径分析显示:差异表达基因富集在132条通路上.显著性最高的生物学过程包括:光合作用、ABC载体运输、氨基酸代谢和次生代谢物质合成等.结合差异表达分析,特别地关注了脂肪酸代谢及其信号转导通路的磷脂酶基因,筛选到了10个和脂肪酸去饱和有关的基因以及12个和磷脂酶相关的基因.研究结果对揭示牛皮杜鹃的耐寒分子机制有一定的参考意义.

摘要： 念珠菌是一种寄生于人类黏膜表面的条件致病菌,是导致免疫功能低下人群侵袭性真菌感染的主要病原菌.目前,已知真菌的感染与多种因素相关,酶类在其中起关键作用,蛋白水解酶能够破坏宿主组织细胞,协助白念珠菌形成感染灶.磷脂酶可帮助粘附上皮细胞,渗透宿主细胞,有助于真菌的侵入.脂肪酶可为真菌生长获取营养,粘附宿主细胞组织,与其他酶协同作用,对宿主免疫炎症反应的启动加以阻断并通过溶解竞争菌群达到自我防御目的.溶血因子可使念珠菌破坏宿主的红细胞后获取铁元素,这种能力可为念珠菌提供营养物质.该文主要对白念珠菌黏附和侵袭宿主过程中关键的水解酶进行综述,为理解白念珠菌致病机制以及选择潜在的药物靶点提供指导.

摘要： 本文从酶法脱胶原理、酶法脱胶主要用的磷脂酶、酶法脱胶的工艺流程及酶法脱胶近些年的研究进展进行了阐述,分析了酶法脱胶在实际应用过程中的效果,一些酶法脱胶上的创新,以及酶法脱胶目前投入工厂实际应用还存在的问题,为大家提供一些理论支撑.

摘要： 在制浆造纸过程中,因树脂的存在,会产生一定的树脂障碍.传统去除树脂的方法由于在制浆过程中使用大量的化学品,故易造成设备磨损、腐蚀、制浆废水COD含量高等问题.对此,文章以脂肪酶/磷脂酶复配的复合酶水解三油酸甘油酯单一树脂模拟物,研究酶用量、时间、温度和pH值四个工艺参数对单一树脂模拟物处理效果的影响.实验结果表明:复合酶处理三油酸甘油酯单一模拟物的最适工艺条件为分别用0.5U/mg的脂肪酶和磷脂酶进行复配,pH值为7.5,温度为40°C,时间为120min,该优化工艺条件下水解率达73.22％.

摘要： [目的]探讨血清磷脂酶A2组ⅡA(phospholipase A2 groupⅡA,PLA2G2A)和凝血因子Ⅸ(coagulation factorⅨ,F9)对耐多药肺结核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)气阴两虚(deficiency of Qi and Yin,DQY)证的潜在诊断价值.[方法]选择MDR-TB肺阴虚(pulmonary Yin deficiency,PYD)证、MDR-TB阴虚火旺(hyperactivity of fire due to Yin deficiency,HFYD)证、MDR-TB DQY证患者和健康对照(healthy control,HC)者各15例,以ELISA检测每组PLA2G2A和F9的蛋白浓度,并利用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析PLA2G2A和F9作为MDR-TB DQY证潜在生物学标志物的临床价值.[结果]MDR-TB证候分布以DQY证患者数最多,其次是HFYD证,再者是DQY证,而阴阳两虚(deficiency of Yin and Yang,DYY)证患者数最少.DQY证组PLA2G2A的蛋白浓度均明显高于PYD证组、HFYD证组和HC组,差异有统计学意义(P<0.05);DQY证组F9的蛋白浓度明显低于HFYD证组,差异有统计学意义(P<0.05).ROC曲线结果显示,血清PLA2G2A有鉴别诊断MDR-TB DQY证的作用.[结论]血清PLA2G2A和F9在诊断MDR-TB DQY证方面具备一定临床价值,血清PLA2G2A可作为MDR-TB DQY证的潜在生物学标志物.

摘要： 酸处理是酶法脱胶的重要环节之一,金属离子对生物酶催化具有重要影响.本文系统研究了大豆油磷脂酶C脱胶过程中酸处理和常见金属离子的影响.酸处理优化条件为:用柠檬酸进行处理,柠檬酸浓度45％,酸处理温度80°C,酸处理时间20min.五种常见金属离子均对磷脂酶C有抑制作用,且尤以Fe3+和Cu2+的抑制效果最强.抑制效果与离子浓度有关.

摘要： 采用大孔树脂吸附法固定化磷脂酶Lecitase@Ultra，用扫描电镜、红外光谱对固定化酶的结构进行表征，并研究了其稳定性。结果表明，DA-201吸附固定化磷脂酶Lecitase@Ultra的效果较好，得到固定化酶的酶活达1862U/g。经扫描电镜发现，酶分子吸附效果明显。红外光谱分析可知，酶经固定化后，二级结构发生变化，α-螺旋组成降低，β-折叠增多。磷脂酶Lecitase@Ultra经固定化后，其pH稳定性、热稳定性也有一定提高。

摘要： 以磷脂为唯一碳源的限制性培养基从富油土样中筛选得到136株产磷脂酶的微生物，摇瓶复筛获得一株磷脂酶活性较高的菌株，经16SrDNA分子鉴定该菌株属于无色杆菌属(Achromobacter sp.)。紫外线诱变处理后磷脂酶活力提高到39U/mL，较出发菌株提高了73.33％。经进一步紫外线-硫酸二乙酯(DES)复合诱变后，磷脂酶活力达到44U/mL，较原始菌株提高了95.56％。

摘要： 哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)广泛存在于海洋环境中，能引起世界范围内的海水鱼类及其他养殖动物发病，给水产养殖业造成巨大的经济损失。哈维氏弧菌的胞外分泌物如蛋白酶、溶血素、几丁质酶、脂酶和磷脂酶等毒力因子在致病过程中起到重要作用。磷脂酶广泛存在于各种生物体中，能水解甘油磷脂。病原菌产生的磷脂酶不仅可以通过水解宿主细胞膜上的磷脂引起宿主组织被破坏，磷脂酶水解产生的脂类还可以作为第二信使来调节信号传导途径对宿主产生影响。

摘要： 研究目的：环氧化酶(COX)是花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，有COX-1和COX-2两种同功酶。COX-1是一种结构型酶，起稳定机体功能的作用，如维持正常胃粘膜，肾脏血流和血小板聚集;COX-2是一种诱导型酶，正常生理状态下，COX-2存在于部分肾脏和脑组织中。在炎症、生长因子、致瘤基因、脂多糖和肿瘤促进剂刺激时，COX-2过度表达。近年来国外诸多研究表明，COX-2不仅是启动炎症反应的关键酶，而且还可通过多种致病机制参与肿瘤的发生和发展过程，因此可以作为预防、治疗肿瘤的靶分子。通过大鼠结肠癌模型及临床试验结果表明，对预防和治疗结肠癌，COX-2是一个非常有用的靶点。通过对其他脏器上皮癌，如乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌的研究，COX-2在这些肿瘤的发病机理上起着重要的作用。最近报告证明，服用非甾体抗炎药物(NSAIDs)的妇女患乳腺癌的风险减少，且患乳腺癌的风险随着NSAIDs服用剂量的增加而降低。rn 流行病学显示:日常生活中经常摄人鱼油的人群，乳腺癌发病率较低，与鱼油成分中所含3-n降低花生四烯酸的水平，下调COX-2的表达有关。同时通过大鼠乳腺癌模型及人类乳腺癌的研究证明，在人类转移性乳腺癌的发病机制中，COX-2过表达起着重要的作用。磷脂酶(PLA2)是花生四烯酸代谢的另一个关键酶，主要通过催化花生四烯酸及其代谢产物的释放参与调节细胞增殖。有研究报道，cPLA2的活性和表达在人结肠癌、胃癌和肝细胞癌中增高，这提示cPLA2与肿瘤发生相关，可能在细胞生长增殖中发挥重要作用。随着对PLA2家族认识的加深。人们发现cPLA2作为花生四烯酸生成的特异性关键酶，cPLA2在细胞增殖中的作用日益受到重视。rn 因此，本研究通过检测乳腺癌组织中的COX-2、cPLA2表达情况及其与患者临床病理特征之间的关系，探讨二者在乳腺癌发生发展过程中的作用，并为将来COX-2抑制剂在临床上用来预防和治疗乳腺癌提供依据。rn 实验方法：本实验搜集经病理证实的乳腺癌组织61例及乳腺腺病组织15例，人选病例均为女性，发病年龄范围36～69岁，发生淋巴结转移者34例。根据临床分期，乳腺癌Ⅰ期患者为8例，Ⅱ期患者为23例，Ⅲ期患者18例，Ⅳ期患者12例。所有患者术前未经任何抗癌治疗。标本取材后用10％中性福尔马林固定，石蜡包埋制成3μm切片，用于免疫组化染色。选用兔抗人COX-2多克隆抗体及SP免疫组化试剂盒和DAB显色剂，采用链霉素亲生物索一过氧化酶免疫组织化学方法检测COX-2及ePLA2在乳腺癌组织和腺病组织的表达情况。并分析乳腺癌组织中COX-2，cPLA2的表达强度与患者对应的各项临床病理特征之间的关系。免疫组化方法简述如下：rn 石蜡切片常规脱蜡、梯度水化后，蛋白酶K抗原修复，PBS冲洗3次，3％H2O2室温孵育，以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗片3次，每次5min。封闭液覆盖标本，室温30 min，不清洗。加一抗(1：100稀释)，4°C过夜，PBS洗片3次，每次5min。加二抗室温30 rain，PBS洗片3次，每次5min。加过氧化物酶复合物，室温30 min，PBS洗片3次，每次5min。DAB显色，苏木素复染，弱氨水返蓝，水洗，梯度酒精脱水，中性树胶封片。rn 实验结果：COX-2在乳腺癌组织中的表达：COX-2的表达位于乳腺肿瘤上皮细胞的胞浆内，肿瘤组织中大多数呈中度至高度表达，阳性表达率为86．80％。腺病组织大多数不表达。仅少数呈低表达，阳性表达率为20％，间质细胞及炎症细胞不着色。两者比较差异有显著性意义。COX-2在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系：COX-2的表达与年龄无明显相关性，而与淋巴结转移、临床分期呈正相关。cPLA2在乳腺癌组织中的表达：cPLA2主要着色于肿瘤上皮细胞，以胞浆染色为主，肿瘤组织中阳性表达率为81．9％。腺病组织大多数不表达，仅少数呈低表达，阳性表达率只有13．3％，两者比较差异有显著性意义。cPLA2在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系：cPLA2的表达与年龄无显著性差异，而与淋巴结转移、临床分期呈正相关。rn 结论：COX-2及cPLA2在乳腺癌组织中的表达明显上调，COX-2及cPLA2的表达与患者年龄无明显相关性，而与临床分期及淋巴结转移呈正相关。COX-2及cPLA2在肿瘤发生、发展中起重要作用，探讨它们与肿瘤的关系，不仅是为了揭示肿瘤发生的分子机理，更重要是应用COX-2抑制剂防治肿瘤。如将COX-2抑制剂用于乳腺癌高危人群的预防，或将COX-2抑制剂与芳香化酶抑制剂联合应用于乳腺癌的内分泌治疗。

摘要： 近年来,我国冠心病的患病率明显增加,随着生活水平的提高及生活方式的改变,患病年龄还呈现出年轻化的趋势.当前,炎症因子在冠心病的发病机制中所起的作用越来越受到研究者的重视,血浆ⅡA分泌型磷脂酶A2(ⅡA-sPLA2)是一个急性时相反应蛋白,作为一个炎症因子,在动脉粥样硬化的形成中起着重要作用.

摘要： 酶法脱胶是一种环境友好而高效的油脂加工工艺,越来越多的油脂加工企业日益关注这种新的脱胶工艺.本文阐述了磷脂酶C在大豆油脱胶过程中的应用现状及优势,为大豆油脂加工企业提供参考,对磷脂酶C酶法脱胶在大豆油精炼中的应用前景进行了展望.

摘要： 利用自制的磷脂酶A2,对多种不同品种和来源的,舍磷量不等的毛油进行酶法脱胶实验,并对现有的酶法脱胶工艺进行了改进,简化了工艺,节约了能源.根据小试的结果,进行了10t毛油的酶法脱胶中试,达到了预期的效果.

摘要： 本文利用纤维素分子中存在着大量的轻基，以环氧氯丙烷活化赋于活泼的环氧基，固定链霉菌发酵产PLD粗酶，探索了共价固定化该酶的方法。

摘要： 根据大型油厂生产车间的设置，着重讨论了大豆中非水化磷脂在预处理和浸出车间加工过程的变化过程，从理论和实践经验上探讨影响非水化磷脂含量的重要因素，提出降低毛油中非水化磷脂含量的措施，为后续的精炼生产提高品率，降低消耗。

摘要： 本发明提供了具有磷脂酶活性的新型多肽，编码它们的核酸和与它们结合的抗体，所述磷脂酶活性包括，例如，磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎蛋白活性，磷脂酸磷酸酶(PAP)和/或脂酰水解酶(LAH)活性。也提供包括应用这些磷脂酶的工业方法，如，油脱胶，以及包括应用这些磷脂酶的产品。

摘要： 本发明提供了一株表达磷脂酶C的菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.8499。利用本发明所提供菌株和制备方法制备所得的磷脂酶C可以用于油脂精炼，脱胶效果良好，可以广泛应用于油脂精炼、添加剂、医药等领域。

摘要： 本发明提供了一种分离的表达磷脂酶C的地衣芽孢杆菌菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.7878。利用本发明所提供菌株和制备方法制备所得的磷脂酶C可以用于油脂精炼，脱胶效果良好，可以广泛应用于油脂精炼、添加剂、医药等领域。

摘要： 本发明提供了一种分离的表达磷脂酶C的短小芽孢杆菌菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.7879。利用本发明所提供菌株和制备方法制备所得的磷脂酶C可以用于油脂精炼，脱胶效果良好，可以广泛应用于油脂精炼、添加剂、医药等领域。

摘要： 本发明提供分离的、合成的或重组的核酸，由所述核酸编码的多肽，以及它们的应用。所述核酸包括本发明所述的核酸序列，编码具有磷脂酶活性的多肽。所述磷脂酶活性包括磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎储藏蛋白活性，以及脂酰水解酶活性。一方面，所述核酸编码缺少天然前导(信号)序列的磷脂酶。另一方面，所述核酸还包括异源核苷酸序列。该异源核苷酸序列编码前导(信号)序列或催化结构域。所述前导(信号)序列或催化结构域包括磷脂酶前导(信号)序列或催化结构域，或非磷脂酶前导(信号)序列或催化结构，或酵母前导(信号)序列。

摘要： 本发明提供了具有磷脂酶活性的新型多肽，编码它们的核酸和与它们结合的抗体，所述磷脂酶活性包括，例如，磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎蛋白活性，磷脂酸磷酸酶(PAP)和/或脂酰水解酶(LAH)活性。也提供包括应用这些磷脂酶的工业方法，如，油脱胶，以及包括应用这些磷脂酶的产品。

摘要： 本发明提供具有磷脂酶活性，包括，例如，磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎储藏蛋白活性，脂酰水解酶(LAH)活性的新型多肽，编码它们的核酸和结合它们的抗体。也提供包括应用这些磷脂酶的工业方法，如，油脱胶，以及包括应用这些磷脂酶的产品。

摘要： 本发明提供了一种具有溶血磷脂酶和/或磷脂酶活力的蛋白。本发明提供的蛋白具有与SEQ ID NO：3、4、5、6或19所示序列，或与SEQ ID NO：3、4、5、6或19所示序列具有至少90％同源性，且所述蛋白源自黑曲霉。本发明的蛋白不仅可以作为磷脂酶和/或溶血磷脂酶，而且，还可以用于同时需要磷脂酶和溶血磷脂酶的应用，例如，可以应用于L‑α‑甘油磷酸胆碱的制备。

摘要： 本发明公开了一种肉桂链霉菌产磷脂酶D的方法及磷脂酶D活性测定方法，属于食品生物技术领域。本发明通过筛选获得一株高产磷脂酶D的链霉菌，分类命名为肉桂链霉菌SP.005，保藏编号为CCTCC M 2019558。通过对该肉桂链霉菌进行斜面、种子、发酵三级培养，并在此条件下，生产磷脂酶D酶，经酶活测定方法，其酶活可达15.66U/mL以上，最后将发酵液经分离纯化制得磷脂酶D酶粉。该生产工艺不仅有效地提高了产量，且所生产出的磷脂酶D具有较高的磷酰基转移活性，可用于进行磷脂酰丝氨酸的高效生产。

摘要： 本发明公开了一种磷脂酶D的生产工艺以及磷脂酶D制品，涉及酶制剂领域。本发明提供的磷脂酶D的生产工艺采用含有葡萄糖4.5‑5.5g/L、蛋白胨4.5‑5.5g/L、酵母浸粉4.5‑5.5g/L、柠檬酸三钠4.5‑5.5g/L、KH2PO4 1.8‑2.2g/L以及MgSO4 0.48‑0.52g/L，pH6.8‑7.2的发酵培养液对链霉菌属菌株进行发酵培养生产磷脂酶D，该生产工艺通过发酵环节的液体发酵培养基和发酵参数进行优化配置，得到链霉菌属菌株发酵的最佳条件，该生产工艺不仅有效地提高了产量，且所生产出的磷脂酶D具有较高的酶活性。