蚓激酶

摘要： 目的采用知识图谱及文献计量学方法总结蚓激酶相关研究的脉络、热点和发展趋势。方法检索2001年至2020年中国知网数据库(CNKI)中蚓激酶相关研究文献。应用CiteSpace软件对作者、机构和关键词进行共现、聚类、突现分析,并绘制知识图谱。结果共纳入文献508篇,发表4篇文献及以上的作者有13人,其中以扈荣良和张守峰发文最多;主要研究机构以黑龙江中医药大学为主。共有373个关键词被纳入,其中“蚓激酶”出现频次最高(274次),中心性最高(0.68);关键词聚类分析形成了12个聚类标签;共得到6个突现词,其中突现强度最大的关键词是“临床观察”(6.0717),突现时间最近的关键词是“疗效”(2010-2016年)。结论通过关键词共现、聚类、突现分析得到,蚓激酶相关研究的热点主要集中在药物制备工艺研究、细胞与分子基础研究、动物实验与临床研究三个方面。这些方面的深入研究需要影响力大的作者进行沟通交流,加强机构间的合作,并大力开展蚓激酶相关研究,加强领域内研究人员的科研培训,从而促进该领域的发展。

摘要： 研究应用芯片灌注模型成功模拟体内环境分析不同管径对血栓形成和溶解的影响,并通过荧光显微镜实时检测了溶栓药物对血栓溶解的作用。通过对比研究,发现血栓容易在细小管道内生成,且溶栓所需时间较长。两种不同溶栓药物纳豆激酶(NK)和蚓激酶(LK)对血栓的溶解情况有明显不同,在相同管径和流速条件下,NK和LK质量浓度均为2.5 mg/mL时溶解血栓时间分别为21、12 min;高质量浓度药物溶解血栓速度更快,且LK作用效果比NK较为显著。通过荧光标记,LK可同时减少纤维蛋白原和纤维蛋白,从而高效溶解血栓。

摘要： 综述中药地龙及其主要活性成分在脑缺血疾病方面的药理研究进展,为其进一步研究及临床应用提供理论指导。地龙属于动物类中药,具有活血化瘀、息风止痉、通络止痛及化痰散结之功,能显著改善异常的血液流变性,有消除脑络瘀滞痰浊之效,可改善脑卒中引起的肢体不遂、神志不清、头痛、眩晕等症状。

摘要： 目的:观察舒血宁注射液联合蚓激酶治疗脑梗死(CI)患者的效果.方法:选取CI患者98例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和研究组各49例.对照组采用蚓激酶治疗,研究组在对照组基础上采用舒血宁注射液治疗,比较两组疗效、治疗前后美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分,以及血清血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、白细胞介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:研究组治疗总有效率为91.84％(45/49),高于对照组的73.47％(36/49),差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组NIHSS评分均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组血清VEGF水平高于治疗前,且研究组高于对照组,两组sVCAM-1、IL-18和TNF-α水平低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:舒血宁注射液联合蚓激酶治疗CI患者可提高治疗总有效率和VEGF水平,降低sVCAM-1、IL-18、TNF-α水平以及NIHSS评分,效果优于单纯蚓激酶治疗.

摘要： 蚓激酶(LK)是一组纯化于蚯蚓的蛋白水解酶,具有纤维蛋白溶酶原激活物及纤维蛋白溶酶活性,可直接或间接降解纤维蛋白,并通过降纤和降低血液黏度发挥血栓溶解和防止血栓形成的药理活性.目前,临床上应用LK治疗血栓性疾病,集中于缺血性脑卒中.联合常规治疗手段,LK可改善急性缺血性脑卒中患者的血液流变学,降低纤维蛋白原含量,提高神经功能评分和生活质量,疗效好且安全;另外,LK联合阿司匹林可降低缺血性脑卒中的复发率.因此,LK在治疗和预防缺血性脑卒中具有一定的潜能.本文对LK的药理活性及临床治疗缺血性脑卒中的文献进行综述,以期为LK的进一步的开发利用提供理论支撑.

摘要： 目的:观察蚓激酶(lumbrokinase)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织NADPH氧化酶4(NOX4)、黏着斑激酶(FAK)、Src激酶表达的影响,并探讨其潜在机制.方法:雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠50只,随机分为5组,每组10只,即假手术组、模型组、蚓激酶低、中、高剂量组(0.9×105、1.8×105、3.6×105 U·kg-1),术后第2天开始灌胃给药,假手术组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,连续14 d.免疫组化法检测转化生长因子β1(TGFβ1)、NOX4、FAK、Src蛋白表达变化,Western印迹法和RT-PCR法检测TGFβ1、NOX4、FAK、Src蛋白和mRNA表达变化.结果:与假手术组相比,模型组TGFβ1、NOX4、FAK、Src、α-SMA蛋白和mRNA水平显著升高(均P＜0.05).与模型组比较,免疫组化结果显示,蚓激酶组TGFβ1、NOX4、FAK、Src蛋白水平明显降低(F=10.57、7.086、11.23、7.750,均 P＜0.05);Western 印迹结果显示,蚓激酶组 TGFβ1、NOX4、FAK、Src、α-SMA 蛋白水平明显降低(F=8.873、11.18、6.902、8.679、5.672,均 P＜0.05);RT-PCR 结果显示,蚓激酶组TGFβ1、NOX4、FAK、Src mRNA水平明显降低(F=5.546、4.285、6.626、3.911、5.914,均P＜0.05).结论:蚓激酶可改善UUO模型大鼠肾间质纤维化(RIF),其机制可能与蚓激酶调控 TGFβ1、NOX4、FAK、Src、α-SMA 的表达有关.

摘要： 痔疮当以清热利湿、活血化瘀为主要治疗原则,地龙性味咸寒,清热利湿,活血通络,结合脾虚气陷证,以补中益气丸巩固治本。论文总结了中医文献中地龙治疗痔疮的记载,阐述了地龙有效成分治疗痔疮的作用机理,为该病的中医治疗提供新思路。

摘要： 蚓激酶,是从蚯蚓(地龙)中提取的一种蛋白水解酶,具有良好的纤维蛋白溶解活性,在抗血栓及缺血性心脑血管疾病中有着较好的疗效。目前开发的蚓激酶纳米靶向给药系统或蚓激酶与其他药物的联合应用,可进一步提高蚓激酶的生物利用度和安全性,已广泛应用于溶栓、抗肿瘤等疾病的治疗,疗效显著。本文就蚓激酶的相关组分及蚓激酶在溶栓、心脑血管、抗肿瘤、心脑血管保护等方面的药理作用进行综述,为其进一步的开发利用提供依据。

摘要： 目的:对比单纯尿激酶封管和尿激酶封管联合口服蚓激酶肠溶胶囊治疗维持性血液透析患者带隧道和涤纶套导管(tunnel cuffed catheter,TCC)功能不良发生率,评价口服蚓激酶肠溶胶囊联合尿激酶封管在TCC维持性血液透析患者当中的应用。方法:收集2018年1月—至2019年06月本院28例TCC维持性血液透析患者临床资料。使用自身对照研究方法,2018年1~6月患者出现导管功能不良时主要治疗方法为单纯尿激酶封管,相关治疗数据设为观察组。2019年1~6月患者出现导管功能不良时,主要治疗方法为尿激酶封管联合口服蚓激酶肠溶胶囊,相关治疗数据设为治疗组。比较观察组和治疗组导管功能不良发生率、凝血功能、血小板、血红蛋白水平。结果:导管功能不良发生率治疗组低于观察组(1.327%比2.568%,χ^(2)=8.785,P=0.003)差异有统计学意义,凝血功能(凝血酶原时间10.500±0.927比10.775±0.849,t=1.522,P=0.618;凝血活酶时间30.562±3.285比29.838±3.316,t=0.666,P=0.258;凝血时间11.487±0.870比11.475±0.927,t=0.194,P=0.890;国际化标准比值0.963±0.096比0.958±0.113,t=0.016,P=0.598)、血小板(234.880±16.217比233.250±19.337,t=4.200,P=0.531)、血红蛋白(118.630±5.902比118.880±7.160,t=4.062,P=0.880)治疗组和观察组差异无统计学意义。结论:蚓激酶肠溶胶囊联合尿激酶封管治疗TCC维持性血液透析患者导管功能不良疗效确切,可减少导管功能不良发生率,对凝血功能、血小板、血红蛋白影响较小,值得临床推广应用。

摘要： 纤连蛋白(FN)是参与乙型肝炎病毒感染和肝脏纤维化的重要分子.蚓激酶(LK)是从赤子爱胜蚓(Eisenia foetide)中提取的一组蛋白水解同工酶,能水解纤维蛋白治疗凝血相关疾病.从这组同工酶中分离纯化出单一活性成分,在体外可降解纤连蛋白,被命名为蚯蚓纤连蛋白水解酶(EFNase).然而,LK能否预防乙型肝炎病毒感染以及缓解因乙型肝炎导致的肝脏损伤等问题还不清楚.本研究以人肝癌细胞系HepG2.2.15为细胞模型,观察LK对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)或FN水平的影响;以C57BL/6J-HBV转基因小鼠为动物模型,探讨LK对小鼠血清中HBsAg、FN、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝脏病理改变的影响.结果表明,LK在体内外均能抑制HBsAg的生成,降低血清和肝脏FN.与生理盐水处理组相比,LK改善了肝脏的状态.这些数据为理解LK作为治疗乙型肝炎的潜在有效药物的治疗作用提供了有价值的信息.

摘要： 目的：探究蚓激酶作用机理,并鉴定蚓激酶原料药中活性蛋白种类.方法：通过纤维蛋白平板法、纤溶酶谱法显示蚓激酶活性,通过质谱对国内五家企业生产的蚓激酶原料药鉴定分析,确定其活性蛋白质组成.结果：纤维蛋白平板溶圈试验显示,蚓激酶纤维蛋白-纤溶酶原平板溶圈直径显著大于纤维蛋白平板溶圈直径;纤溶酶谱法结果显示,5家企业均存在纤溶成分,且企业之间略有差异;质谱鉴定结果显示,每家生产企业均鉴定到与溶纤活性相关的蛋白质组分,共15种蛋白质,其中包括5种溶纤酶与10种激酶.结论：蚓激酶确实具有直接降解纤维蛋白和激活纤溶酶原发挥间接溶纤效应的双重作用机理,并含有多种具有溶纤效应的活性蛋白.

摘要： 目的:建立广地龙药材中蚓激酶效价测定方法.方法:用纤维蛋白平板法对蚓激酶活性进行测定,并采用生物检定统计法的量反应平行线测定法计算效价,并对该方法进行方法学研究.结果:效价测定范围为5000-25000U/mL(r=0.9 938),精密度RSD为12.23％;重复性RSD为12.38％;平均回收率(n=9)90.20％,RSD为13.9 6％;供试品溶液在4～9°C下48h内稳定.结论:用纤维蛋白平板法测定蚓激酶效价,专属性强、准确度高,用量反应平行线法可控制测定方法的误差,能有效控制广地龙药材质量.

摘要： 蚓激酶在治疗血栓疾病的中表现出的巨大潜力已得到许多试验和临床的验证,然而,如何有效提取、高效生产这种产品仍有待进一步探讨.文章就蚓激酶近10年来的分离纯化技术、酶学性质、基因工程等方面研究进行了阐述.

摘要： 近数年统计,人类的死亡原因以癌症为首,其次是心脏病,脑血管障碍居后.心脏病的死亡原因包括心肌疾病和瓣膜症等等,其中心肌梗塞的死亡率高达九成.心肌梗塞是心脏的冠状动脉里凝结血块的硬块.脑血管障碍的死亡率中脑血栓所占的比例高达七成.蚓激酶的活性成分包括纤溶酶，纤溶酶原启动剂，钙调素(CaM)和钙调素结合蛋白，胆硷酯酶，过氧化氢酶，促髓系细胞增殖组分，蚓激酶不仅水解富含纤溶酶原的纤维蛋白，还水解不含纤溶酶原的纤维蛋白，不水解血浆中其它酶，包括纤溶酶原和白蛋白，其适用于缺血性脑血管疾病，缺血性心脏血管疾病，呼吸系统疾病，血栓后遗症，糖尿病，外周血管闭塞症等疾病的临床应用。

摘要： 目的：对比观察蚓激酶与银杏达莫联合应用与单纯应用银杏达莫治疗脑梗死的疗效。方法：选择2003年1月至2006年8月在南昌大学第二附属医院神经内科和中西医结合科收治的首次发病的急性脑梗死患者94例进行观察。随机分为2组,治疗组48例,在给与阿司匹林等常规治疗的基础上给与蚓激酶胶囊2粒(60万U)/次,3次/d；银杏达莫注射液20ml加入生理盐水250ml中静脉点滴,1次/d。对照组46例,在给与阿司匹林等治疗的基础上只给与银杏达莫注射液20ml加入生理盐水250ml中静脉点滴,1次/d。15天为一个疗程。结束时分别比较两组治疗前、后的病情改善程度、病残程度及血液流变学改变情况,根据治疗有效率及病残改善程度,血液流变学中血粘度、纤维蛋白原含量及血小板聚集率变化情况进行统计学处理，以判定疗效。结果：治疗组总有效率(总有效率为基本痊愈、显著进步、进步患者的总和)明显优于对照组(87.5％、65.2％、P0.05)。结论：蚓激酶与银杏达莫联合用于急性脑梗死的治疗可通过阻断缺血损伤的不同环节,改善血液流变学及脑循环,促进脑细胞代谢及神经功能恢复,提高治疗效果,减低致残率。

摘要： 应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因F238，并将其克隆至大肠杆菌质粒pET-22b(+)中，构建表达载体pET22b-F238。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，1.0 mmol/L IPTG、26°C条件下诱导8h，经SDS-PAGE证实蚓激酶成熟肽蛋白获得了表达，所表达的蛋白产物以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在，相对分子量与预期的28kDa相符。包涵体经变性、复性后，利用血纤维蛋白法对产物活性进行了测定。

摘要： 本研究将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了蚓激酶重组逆转录病毒载体,转染泌乳期奶牛乳腺小叶并获得暂时表达.利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104 CFU/ml.进而用病毒上清转染妊娠期奶牛乳腺小叶组织,产后奶样经FAPA法检测表明蚓激酶基因已经整合到奶牛乳腺组织,并能实现相对稳定的表达.

摘要： 本文采用TRIZOL试剂从蚯蚓体内提取总RNA,以Random9mers为引物反转录合成cDNA第一链,根据GeneBank上已发表的蚓激酶5′和3′末端保守序列设计引物,用PCR技术扩增到一条750bp左右的蚓激酶基因,并将其克隆到pUCm-T载体进行测序.利用生物信息学进行蛋白质构象预测,结果表明蚓激酶属酸性蛋白质、丝氨酸蛋白酶,含有丝氨酸活性中心,其蛋白质二级结构主要由β折叠构成.

摘要： 在稀有密码子的改造基础上,人工合成了849bp的蚓激酶F-Ⅲ-1全长cDNA序列,并以其为目的基因,构建了以山羊β-酪蛋白启动子为上游调控序列的乳腺组织特异性表达载体pBLK和pLN-bCP-LK.两种质粒分别以200μg、500μg、1000μg、2000μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,以纤维蛋白平板溶圈法(FAPA)检测该基因表达后奶样纤溶活性.结果表明,注射后3～78h,奶样有明显纤溶活性,其中6～16h活性最高.SPSS10.0分析结果表明,pBLK质粒的500μg与其他三个剂量溶圈直径之间差异显著,而其他三个剂量之间差异不显著;pLN-bCP-LK质粒的各剂量溶圈直径之间差异均不显著,且两种质粒的同剂量溶圈直径之间差异也不显著.以上结果表明,改造后的蚓激酶基因可以在泌乳期黑白花奶牛乳腺中实现瞬时表达,以500μg的注射剂量表达效果最佳.

摘要： 本文提出了加压CO2-乙醇-水体系沉淀蛋白质技术，拟以蚓激酶粗品为研究对象，探索该方法用于活性蛋白质的提取和分离的可行性。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及植物生产口服索玛鲁泰(Semaglutide)与蚓激酶降糖胶囊的应用。本发明利用植物例如生菜作为重组蛋白质生产的有效表达平台，利用简单以及高效的表达体系生产生物活性物质。随后将生产该活性物质的叶片冻干制成胶囊。此胶囊可以在常温保存而保持生物活性。利用Western Blot蛋白杂交法确定降糖活性蛋白成功表达。生物活性测试结果表明利用该平台技术生产的降糖胶囊显著降低了狗血液中的血糖浓度。

摘要： 本发明涉及乙肝治疗领域，更具体地，本发明涉及一种切割HBeAg的方法以及蚓激酶的N末端片段为IVGGIEAR的同工酶在制备用于治疗乙肝的药物中的用途。该同工酶能够有效地识别和切割HBeAg，因此可以单独地或者与拉米夫定联合地用于治疗乙肝疾病。

摘要： 本发明涉及一种诱导液及其制备方法，诱导液选用刺激性食材制备而成，该诱导液可促进水蛭和/或蚯蚓分泌并吐出水蛭素和/或蚓激酶。还提供水蛭素和/或蚓激酶的提取方法，利用所述诱导液从活体水蛭和/或蚯蚓提取水蛭素和/或蚓激酶，水蛭素和/或蚓激酶产量高，且最大限度保留水蛭素和蚓激酶的活性含量。还提供水蛭素蚓激酶口服液及其制备方法和应用，以所述诱导液诱导，让活体吸血水蛭分泌并吐出水蛭素，让赤子爱胜蚓分泌并吐出蚓激酶，并且保住了水蛭和蚯蚓中其它的药性成份。本发明专利克服了水蛭素和蚓激酶中含有大量杂质难于滤除的弊端，且无腥臭味，同时最大限度保留水蛭素和蚓激酶的活性含量和药性，简单易操作，抗栓溶栓疗效明显提高。

摘要： 本发明公开了一种重组蚓激酶的制备方法，包括如下步骤：1）将蚓激酶基因与载体连接，构成重组表达载体；2）将步骤1）得到的重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞，得到重组杆状病毒质粒；3）将重组杆状病毒质粒转染家蚕细胞，获得含有蚓激酶基因的重组病毒；4）将所述重组病毒接种家蚕，匀浆后纯化获得重组蚓激酶。本发明的方法，流程相对简单，充分利用低廉的蚕蛹生产蚓激酶，符合低碳经济理念，能结合产业化生产以满足市场的需要，有较为广阔的市场前景。

摘要： 本申请属于药物技术领域，尤其涉及一种蚓激酶口腔黏附片及其制备方法和应用。蚓激酶口腔黏附片的制备方法包括步骤：将0.6～4份的β‑环糊精衍生物溶解到溶剂中添加8～32份的蚓激酶制得蚓激酶环糊精包合物；将2～8份的润滑剂、2～8份的助流剂、2～8份的矫味剂、4～16份的透皮吸收促进剂与蚓激酶环糊精包合物混合后与40～160份的稀释剂Ⅰ、40～160份的干黏合剂、60～240份的交联高分子聚合物、60～240份的稀释剂Ⅱ混合，制片得到蚓激酶口腔黏附片。本申请制备的蚓激酶口腔黏附片为黏膜经皮给药，直接由口腔黏膜快速吸收入血，快速达到脑血管，快速缓解脑血管的缺血状态，尤其适用于急性期脑卒中的抢救性治疗。

摘要： 本实用新型涉及搅拌桨技术领域，尤其涉及一种用于蚓激酶提取的高效搅拌桨，其包括中心轴，所述中心轴两侧对称设置有搅拌桨，中心轴通过第一驱动装置驱动旋转，搅拌桨通过第二驱动装置驱动旋转，中心轴和搅拌桨分别与固定座固定，搅拌桨以中心轴为中心旋转的同时以搅拌轴为中心同步旋转，增强了搅拌罐内部混合物流动，搅拌更充分。本实用新型包含搅拌耙和活动刮刀，活动刮刀与搅拌罐内部接触，与混合物之间形成挤压切割，进一步使混合物破碎，搅拌耙不断搅拌，破碎搅拌罐内部形成的黏团，本实用新型混合更均匀，使黏性的混合物更分散。

摘要： 一种蚓激酶粗提装置，包括研磨箱、混合桶和分离箱；研磨箱的底部连接混合桶的顶部，混合桶的底部连接分离箱的一端顶部；研磨箱的顶部安装有进料斗，研磨箱内设有磨浆机构；混合桶内安装有下料机构，下料机构连接磨浆机构；混合桶的底部连接分离箱，分离箱一端外壁开有出液口，分离箱的另一端外壁开有排渣口，分离箱的内壁间安装有分离机构。蚯蚓和提取液通过磨浆机构研磨成浆，然后进入混合桶内，通过下料机构缓慢流入分离箱内，从而使得浆液在混合桶内得到充分搅拌提取，浆液通过分离机构同步挤压过滤分离，残渣内的提取液充分挤出，避免提取液浪费，残渣通过排渣口排出，提取液从出液口流出，达到磨浆、分离连续进行的目的，提高粗提效率。

摘要： 本实用新型公开了一种蚓激酶复合肥的制粒装置，包括机体、罐体和顶盖，所述机体上方设置有所述罐体，所述罐体上方设置有所述顶盖，所述顶盖上方一侧设置有排气口。有益效果在于：本实用新型通过设置连接口、输气管、气泵和收集箱，能够使进入到排气口内的气味通过连接口进入到输气管内，并通过抽泵抽取输气管内的气味，并输送至收集箱内，进行统一收集处理，避免对工作环境造成影响，提高装置的实用性，通过设置导流板和橡胶垫，能够通过导流板降低肥料的流速，进而能够减少肥料对连接管的冲击力，避免连接管与出料口处的连接出现松动，方便使用，同时橡胶垫能够对肥料进行保护，避免肥料破碎。

摘要： 本实用新型公开了一种蚓激酶冷冻干燥装置，包括玻璃隔离罩、机箱、散热栅板、真空泵、真空管、制冷机、制冷管，所述玻璃隔离罩位于所述机箱顶部，两个所述散热栅板位于所述机箱两侧，所述真空泵位于所述机箱内部一侧，所述真空管位于所述机箱内部后侧，所述制冷机位于所述真空泵前方且位于所述机箱内部。本实用新型利用锥形甩干架和转动架来对需要冻干的蚓激酶进行放置，同时利用交流电磁圈产生的磁场来驱动转动架下的永磁块进行转动，从而来使得锥形甩干架来带动蚓激酶进行旋转，继而将蒸发出来的水分进行甩离甩干架，防止再次对蚓激酶进行浸湿。

摘要： 本实用新型公开了一种蚓激酶分离粗提装置，包括支撑机构，所述支撑机构上端设置有进料管，还包括设置在所述支撑机构上的用于对进料进行分离的分离机构，所述分离机构与所述支撑机构连接，所述支撑机构上端连接有压力管；所述支撑机构包括分离罐。本实用新型使原料在下落过程中逐步通过分离机构的第一过滤网、第二过滤网、第三过滤网进行分离提取，且通过压力管内连通气体增加对原料下落过程中的压力，使经过第一过滤网、第二过滤网、第三过滤网分离后的物质汇集在第一分离腔、第二分离腔、第三分离腔及分离罐的最低部，然后根据需要通过分离管、细液管对分离物进行提取利用，提高了对原料的分离效率和质量，便于对不同层次的物料进行充分利用。