水蛭素

摘要： 文章介绍了日本医蛭、宽体金线蛭、茶色蛭和菲牛蛭4种药用的水蛭及其水蛭的生物学特性和药用功能,特别介绍了水蛭素及其药用价值和动力学研究。

摘要： 目的研究广西特色壮药金边蚂蟥活性组分水蛭素对尿酸诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)氧化应激反应及凋亡的影响。方法以CCK8和流式细胞术筛选的最适宜的尿酸浓度,作为模型诱导浓度。以CCK8和流式细胞术筛选最适宜的水蛭素的作用浓度和作用时间。将NRK-52E分为正常组、模型组(1.2 mmol/L尿酸)、药物干预组(1.2 mmol/L尿酸+10 mmol/L水蛭素)、阳性药物组(1.2 mmol/L尿酸+2 mmol/L别嘌醇);以流式细胞术检测各组细胞的活性氧(ROS)含量和凋亡率;以电镜拍照观察细胞线粒体结构变化;以JC-1荧光探针检测线粒体膜电位的变化。结果与正常组比较,模型组细胞ROS含量和凋亡率显著升高(P<0.05),线粒体形态紊乱且膜电位降低;和模型组比较,药物干预组和阳性药物组的细胞ROS含量和凋亡率显著降低(P<0.05),线粒体结构的紊乱程度有所改善且膜电位升高。结论水蛭素可能通过提高细胞抗氧化能力,缓解线粒体损伤,减少尿酸引起的肾小管细胞凋亡。

摘要： 目的观察水蛭素对人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)成骨分化的影响。方法BMSCs细胞分为正常培养的对照组、成骨诱导的诱导组以及加入不同浓度(1、10、20 ATU/mL)处理的水蛭素组。MTT检测细胞增殖并筛选水蛭素最适作用浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡。RT-PCR和Western blot分别检测成骨基因Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达。BCIP/NBT染色法检测细胞中的碱性磷酸酶水平。茜素红染色检测矿化结节。检测VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的mRNA和蛋白表达。结果骨髓间充质干细胞经成骨诱导细胞增殖显著增加,中高浓度的水蛭素可以不同程度促进成骨诱导的BMSCs细胞增殖(P<0.05),并筛选出20 ATU/mL作为水蛭素的使用浓度。水蛭素抑制成骨诱导的BMSCs细胞凋亡,上调Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达,增加碱性磷酸酶水平,促进细胞中矿化结节的生成,并提升BMSCs细胞中VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的表达(P<0.05)。结论水蛭素可能通过上调VEGF/Notch1信号通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化。

摘要： 目的:探讨水蛭素对糖尿病肾病大鼠脂代谢紊乱及血液流变学的影响。方法:选择70只雄性SD大鼠(无特定病原体级),采用随机法分为空白组(10只)、造模组(60只)。造模组以高糖高脂喂养联合链脲佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型,选取50只造模成功的大鼠随机分为模型组、贝那普利组、水蛭素(低、中、高)组。灌胃给药15周后,收集大鼠血液标本,检测大鼠脂代谢指标(血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白)及血液流变学指标(全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、纤维蛋白原)。结果:与空白组相比,模型组大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白值及血液流变学指标均显著升高(P <0.05),高密度脂蛋白值显著降低(P <0.05);与模型组相比,水蛭素中、高剂量组大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白值及血液流变学指标均显著改善(P <0.05)。结论:水蛭素可以改善糖尿病肾病大鼠模型脂代谢紊乱及血液流变学。

摘要： 在中国,水蛭是一种珍贵的中药,具有很强的药用价值和研究价值。在世界范围内,水蛭的药用价值同样得到了认可,欧洲及埃及、印度都有水蛭治疗疾病的应用。对国内4种和国外9种主要药用水蛭进行介绍,对已发现的30种具有生物活性的水蛭多肽进行综述。这些多肽活性以抗凝活性为主,还涉及蛋白酶抑制、抗炎、水解酶等活性,以期为水蛭研究、应用提供参考。

摘要： 目的探讨水蛭素对缺血性脑卒中大鼠脑组织微血管新生及缺氧诱导因子(HIF)-血管内皮生长因子(VEGF)-Notch通路的影响。方法将120只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、阳性对照组、水蛭素低剂量组(0.5 mg/kg)和水蛭素高剂量组(1.0 mg/kg),每组20只。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),以尼莫地平为阳性对照药物(1 mg/kg),阳性对照组及水蛭素各剂量组连续腹腔注射7 d,应用Longa法对各组大鼠进行神经功能学评分,干/湿重法测定脑组织含水量,2,3,5-氯化三苯基四氯唑(TTC)染色观察脑组织梗死体积,免疫组化法测定梗死灶周围微血管密度(CD31)表达情况,免疫印迹法(Western Blot)检测脑组织HIF-VEGF-Notch通路相关蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠神经功能评分增高(P<0.01),脑组织含水量及脑梗死体积增大(P<0.01),脑组织中CD31阳性细胞表达及HIF-1α、VEGF、Notch1的蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。水蛭素低剂量组、水蛭素高剂量组神经功能评分、脑含水量及梗死体积低于模型组(P<0.05或P<0.01),大鼠脑组织CD31阳性细胞表达及HIF-1α、VEGF、Notch1蛋白表达较模型组升高(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭素可改善缺血性脑卒中大鼠神经功能,促进脑组织微血管新生,其作用可能与激活HIF-VEGF-Notch信号通路相关。

摘要： 目的研究水蛭素对气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化模型大鼠肺泡炎症及纤维化的影响及作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组、水蛭素干预组(低、中、高浓度)、泼尼松组。对照组气管内注射生理盐水,其余5组气管内注射博莱霉素构建肺纤维化动物模型,建模后d 2起,水蛭素干预组分别给予不同浓度水蛭素皮下注射,对照组给与生理盐水皮下注射,泼尼松组给予5mg·kg^(-1)醋酸泼尼松灌胃,d 28处死所有大鼠,取肺组织。HE和Masson染色观察肺部病理改变,qRT-PCR及Western blot分别检测collagenⅠ、α-SMA mRNA及蛋白表达水平,试剂盒检测羟脯氨酸含量,Western blot检测p38 MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达,ELISA实验检测肺组织TNF-α、IL-6的浓度。结果与模型组比较,经水蛭素干预后肺组织炎症反应、肺间质纤维化程度明显改善,羟脯氨酸含量,collagenⅠ、α-SMA mRNA及蛋白的表达水平明显下降,p-p38 MAPK、NF-κB p-p65、p-IκB蛋白表达降低,TNF-α、IL-6浓度下降。结论水蛭素可以有效抑制肺泡炎症和减轻肺纤维化的发展,其作用可能与调控p38 MAPK/NF-κB信号通路,减轻肺组织炎症反应,减少细胞外基质沉积有关。

摘要： 水蛭素是一种高效的天然凝血酶特异性抑制剂,具有抗凝血、抗血栓、促进微血管生成、抗纤维化、抗肿瘤、抗高尿酸血症、改善脑出血、抗动脉粥样硬化和改善糖尿病并发症等多种药理作用,可用于多种疾病的临床治疗。本文对近年来水蛭素药理作用相关的国内外文献进行分析和总结,为水蛭素的进一步研究和开发应用提供参考。

摘要： 目的:探讨水蛭素联合阿托伐他汀对急性心肌梗死大鼠血管内皮功能的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:50只大鼠随机分为假手术组、模型组、水蛭素组、阿托伐他汀组和联合组,每组10只.采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死大鼠模型.水蛭素组、阿托伐他汀组和联合组大鼠分别灌胃给予水蛭素50 U·kg-1、阿托伐他汀10 mg·kg-1及水蛭素50 U·kg-1+阿托伐他汀10 mg·kg-1,假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水,连续给药4周.采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定大鼠心肌梗死面积,计算心肌梗死面积百分比,采用HE染色观察大鼠心肌组织病理形态表现,Western blotting法检测大鼠心肌组织中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中内皮素1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,部分细胞不完整,心肌坏死程度严重,有炎性细胞浸润;与模型组比较,水蛭素组、阿托伐他汀组和联合组大鼠心肌细胞排列较整齐,心肌坏死程度明显改善,炎性细胞浸润情况明显减轻.与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中VCAM-1和ICAM-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),血清中ET-1、vWF、TNF-α和IL-6水平明显升高(P<0.05),NO水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,水蛭素组、阿托伐他汀组和联合组大鼠心肌梗死面积百分比明显减小(P<0.05),心肌组织中VCAM-1和ICAM-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),血清中ET-1、vWF、TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05),NO水平明显升高(P<0.05);与水蛭素组和阿托伐他汀组比较,联合组大鼠心肌梗死面积百分比明显减小(P<0.05),心肌组织中VCAM-1和ICAM-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),血清中ET-1、vWF、TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05),NO水平明显升高(P<0.05).结论:水蛭素和阿托伐他汀对血管内皮损伤起保护作用,其作用机制可能与调节血管内皮活性物质分泌、抑制炎症反应和减少细胞黏附有关,联合治疗效果优于单用水蛭素或阿托伐他汀.

摘要： 水蛭素(hirudin)为特异性凝血酶抑制剂,根据其来源可分为天然水蛭素和重组水蛭素两类.水蛭素具有抗凝、抗血栓、抗纤维化、抗细胞凋亡、舒血管和提高随意皮瓣成活率等多种药理作用,对于血管瘤、肝癌、动脉粥样硬化症、肾病综合征、高尿酸血症、输卵管炎性阻塞和白内障等疾病均具有显著的治疗作用.对近年来水蛭素的相关研究进行综述,为其进一步研发提供参考.

摘要： 目的：探讨水蛭素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)和内皮细胞(HCAEC)生长的影响及剂量依赖关系,明确水蛭素抗再狭窄的有效性和可行性.rn 方法：用体外培养的HCASMC和HCAEC3-5代,加入96孔细胞培养板,设置调零孔、对照孔、加药孔(6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.2、0.1、0.05、0.025mg/mL不同浓度水蛭素共9组,每组6个复孔),培养48h后用噻唑蓝比色试验(MTT法)检测不同浓度水蛭素干预下两种细胞的活力和抑制率变化.rn 结果：与空白对照组相比,低浓度(0.025～0.1mg/mL)水蛭素在对HCASMC增殖的影响方面无统计学差异(P＞0.05),而中高浓度(0.2～6.25mg/mL)的水蛭素对HCASMC增殖的影响均有显著性差异(P＜0.05),且其抑制率随水蛭素浓度升高而增加.不同浓度水蛭素作用于HCAEC后,与空白对照组相比,0.025～3.13mg/mL的水蛭素在对HCAEC增殖的影响方面无显著性差异(P＞0.05),但0.05～0.2mg/mL的水蛭素对HCAEC有一定的促增殖作用;而高浓度(6.25mg/mL)的水蛭素在对HCAEC增殖的影响方面有统计学意义(P＜0.05),其抑制率达到44.6％.rn 结论：中高浓度水蛭素可呈剂量依赖性抑制HCASMC的生长,低中浓度水蛭素对HCAEC无明显抑制作用,且能在抗血栓的同时保护HCAEC甚至促进HCAEC生长.

摘要： 目的：探讨水蛭素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)和内皮细胞(HCAEC)生长的影响及剂量依赖关系,明确水蛭素抗再狭窄的有效性和可行性.rn 方法：用体外培养的HCASMC和HCAEC3-5代,加入96孔细胞培养板,设置调零孔、对照孔、加药孔(6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.2、0.1、0.05、0.025mg/mL不同浓度水蛭素共9组,每组6个复孔),培养48h后用噻唑蓝比色试验(MTT法)检测不同浓度水蛭素干预下两种细胞的活力和抑制率变化.rn 结果：与空白对照组相比,低浓度(0.025～0.1mg/mL)水蛭素在对HCASMC增殖的影响方面无统计学差异(P＞0.05),而中高浓度(0.2～6.25mg/mL)的水蛭素对HCASMC增殖的影响均有显著性差异(P＜0.05),且其抑制率随水蛭素浓度升高而增加.不同浓度水蛭素作用于HCAEC后,与空白对照组相比,0.025～3.13mg/mL的水蛭素在对HCAEC增殖的影响方面无显著性差异(P＞0.05),但0.05～0.2mg/mL的水蛭素对HCAEC有一定的促增殖作用;而高浓度(6.25mg/mL)的水蛭素在对HCAEC增殖的影响方面有统计学意义(P＜0.05),其抑制率达到44.6％.rn 结论：中高浓度水蛭素可呈剂量依赖性抑制HCASMC的生长,低中浓度水蛭素对HCAEC无明显抑制作用,且能在抗血栓的同时保护HCAEC甚至促进HCAEC生长.

摘要： 目的:探讨水蛭素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)和内皮细胞(HCAEC)生长的影响及剂量依赖关系,明确水蛭素抗再狭窄的有效性和可行性. 方法:用体外培养的HCASMC和HCAEC3-5代,加入96孔细胞培养板,设置调零孔、对照孔、加药孔(6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.2、0.1、0.05、0.025mg/mL不同浓度水蛭素共9组,每组6个复孔),培养48h后用噻唑蓝比色试验(MTT法)检测不同浓度水蛭素干预下两种细胞的活力和抑制率变化. 结果:与空白对照组相比,低浓度(0.025～0.1mg/mL)水蛭素在对HCASMC增殖的影响方面无统计学差异(P＞0.05),而中高浓度(0.2～6.25mg/mL)的水蛭素对HCASMC增殖的影响均有显著性差异(P＜0.05),且其抑制率随水蛭素浓度升高而增加.不同浓度水蛭素作用于HCAEC后,与空白对照组相比,0.025～3.13mg/mL的水蛭素在对HCAEC增殖的影响方面无显著性差异(P＞0.05),但0.05～0.2mg/mL的水蛭素对HCAEC有一定的促增殖作用;而高浓度(6.25mg/mL)的水蛭素在对HCAEC增殖的影响方面有统计学意义(P＜O.05),其抑制率达到44.6％. 结论:中高浓度水蛭素可呈剂量依赖性抑制HCASMC的生长,低中浓度水蛭素对HCAEC无明显抑制作用,且能在抗血栓的同时保护HCAEC甚至促进HCAEC生长.

摘要： 课题组前期试验表明,0.08％水蛭素能够显著提高冻后猪精液质量.为了研究其作用机理,用含不同浓度(0、0.04％、0.08％、0.12％)水蛭素的稀释液稀释美系长白公猪精液,0.5 mL细管分装冷冻,分别检测平衡后及冻融后精液中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性和mRNA表达量的变化.结果表明:(1)不含水蛭素的冷冻稀释液显著降低新鲜猪精液超氧化物歧化酶活性(P＜0.05),含有0.08％水蛭素的猪精液平衡及冻融后的超氧化物歧化酶mRNA表达量最高,但差异不显著(p＞0.05);(2)不含水蛭素的冷冻稀释液显著降低新鲜猪精液过氧化氢酶活性(P＜0.05),而含有0.08％水蛭素的冷冻稀释液显著提高冷冻保存猪精液过氧化氢酶活性(P＜0.05).总之,添加0.08％水蛭素对冷冻前后猪精液超氧化物歧化酶活性及rnRNA表达无显著影响,但显著提高冷冻前后猪精液过氧化氢酶活性(P＜0.05).

摘要： 水蛭素(hirudin)是一种从药用水蛭(medici-nal leeches)中分离出来的天然凝血酶直接的、特异性抑制剂，通过与凝血酶结合成非共价复合物而发挥其抗凝作用不需要与内源性抗凝血酶Ⅲ和其他辅助因子就可以发挥作用，故多用于肝素诱导性血小板减少症(HIT)患者的抗凝治疗。水蛭素还可以于已经和纤维蛋白结核的凝血酶结合，从而发挥了抗血栓的作用。HamonM研究中证实水蛭素对已经形成的血栓也据有一定的溶栓作用。水蛭素的抗血小板作用，其可以降低血小板表面活性，抑制血小板聚集，降低血小板粘附性。其与凝血酶结合后可竞争性抑制凝血酶与血小板结合，从而抑制血小板聚集。

摘要： 本文将近年来水蛭和水蛭素的基础研究及其在整形外科领域的临床应用做一综述,为其进一步的研究和应用提供参考.水蛭是高度特化的环节动物,其吸血疗法已使用了3000多年.水蛭素是目前已知最强的高效、特异的天然凝血酶抑制剂,具有抗凝、防治血栓等药理作用.

摘要： 由于猪精液冷冻保存过程引起氧化应激损伤,而水蛭素具有抗氧化作用,为了研究水蛭素如何影响猪精液冷冻前后过氧化氢酶合成及表达,从而提高冻后猪精液质量,本研究用含不同浓度(0、0.04％、0.08％、0.12％)水蛭素的稀释液稀释美系长白公猪精液,0.5mL细管分装冷冻,分别检测平衡后及冻融后精液中过氧化氢酶的活性和mRNA表达量的变化.结果表明:(1)不含水蛭素的冷冻稀释液显著降低新鲜猪精液过氧化氢酶活性(P＜0.05),而含有0.08％水蛭素的冷冻稀释液显著提高冷冻保存猪精液过氧化氢酶活性(P＜0.05);(2)不含水蛭素的冷冻稀释液降低新鲜猪精液过氧化氢酶mRNA的表达,含有0.08％水蛭素的猪精液平衡及冻融后的过氧化氢酶mRNA表达量最高,但差异不显著(P＞0.05).总之,添加0.08％水蛭素显著提高冷冻前后猪精液过氧化氢酶活性(P＜0.05),但对过氧化氢酶mRNA表达的影响并不显著.

摘要： 为了改善猪精液低温保存方法,通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度的水蛭素(0、0.50、1.00、1.50、2.00 mg/mL),研究在4°C低温保存下其对猪精液品质的影响.采用PI荧光染色检测精子活率,计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活力,Diff-Quik染色检测精子畸形率,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整率以及低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整率.猪精液保存7d,每天检测上述指标,试验重复5次.结果表明,稀释液中添加一定浓度的水蛭素在一定时间内有利于维持精子的活率、活力,降低精子的畸形率,提高精子的顶体完整率和质膜完整率,并且水蛭素浓度越高,保存效果越好.因此,在本试验条件下,2.00 mg/mL是水蛭素在猪精液低温保存时的最佳添加浓度.

摘要： 检测水蛭素对人皮肤瘢痕成纤维细胞碱性成纤维细胞因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)、转化生长因子β1(transforming growthfactor beta 1,TGFβ1)表达的影响,并通过体外细胞实验和动物实验探讨水蛭素对皮肤瘢痕成纤维细胞生长抑制作用的机理和对皮肤瘢痕防治作用的机制.水蛭素抑制瘢痕可调节bFGF, TGFβ1分泌，由此抑制成纤维细胞的生长、增殖并进一步抑制瘢痕形成。水蛭素能抑制体外培养的皮肤瘢痕成纤维细胞的生长，且局部外用含水蛭素的膏剂可以抑制动物实验性皮肤瘢痕的增生，抗瘢痕膏剂的合理组方和临床药效观察有待今后进一步研究。

摘要： 目的:探讨络风宁0号方不同配比对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)和内皮细胞(HCAEC)生长的影响及剂量依赖关系,明确中药复合物抗再狭窄的有效性和可行性,为中药药物涂层支架的研发提供实验数据支持. 方法:用体外培养的HCASMC和HCAEC3-5代,加入96孔细胞培养板,选择抑制HCASMC生长,而对HCAEC无抑制作用的浓度范围(0.2～3.13mg/mL)作为最佳的水蛭素浓度与1umol/L紫杉醇组成复合物干预两种细胞,培养48h后用噻唑蓝比色试验(MTT法)测定各孔吸光值(A值),选择对HCASMC抑制程度最大,而对HCAEC抑制程度最小且与单用紫杉醇相比能最大程度减轻对HCAEC抑制作用的浓度作为络风宁0号方的最佳配比. 结果:与单药紫杉醇组相比,复合药物组在对HCAEC增殖的影响方面未见显著性差异(P＞0.05),而对HCASMC的抑制率明显高于单药紫杉醇组(P＜0.05),且1umol/L紫杉醇+0.39mg/m1水蛭素组可明显降低单药紫杉醇对HCAEC的抑制率. 结论:选择1umol/L紫杉醇+0.39mg/ml水蛭素作为络风宁0号方的最佳配比,可最大限度抑制HCASMC增殖的同时对HCAEC有最小的抑制作用,具备抗再狭窄的有效性和可行性,为新型中药药物涂层支架的研发提供新的思路.

摘要： 本发明公开了一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺。其中采用汉逊多型宿主细胞株RB-11为出发菌株来构建适用于生产的含有水蛭素的汉逊酵母高表达工程菌株RBHV145-6，并通过培养、发酵来获得高纯度和高含量的水蛭素。在本发明中，水蛭素基因以多拷贝的形式拷贝到宿主细胞的染色体上，且拷贝数保持稳定，含有水蛭素基因的外源基因表达盒完全整合到宿主细胞染色体上，种子库细胞、传代40、80代后的细胞中均无游离质粒存在，外源蛋白的表达量和分泌效率比酿酒酵母高10倍，特别和国内的多型汉逊酵母相比水蛭素外源蛋白的表达量高35.8％，且没有过度糖基化现象，因此适合于大规模发酵生产目的蛋白。

摘要： 本发明公开了一种实验室使用活体水蛭提取水蛭素的装置及其方法，涉及水蛭素提取技术领域。所述装置包括顶部开口的箱体、中隔板、升降盖板和挤压板，中隔板设置于箱体中部，中隔板上均匀分布有条形凹槽，条形凹槽底部开设有若干出液孔；中隔板上方设置有升降盖板，升降盖板上设置有诱导液盛装槽，诱导液盛装槽与条形凹槽相适配；升降盖板上方设置有挤压板，挤压板底部设置有凸部，凸部与诱导液盛装槽相适配。条形凹槽两侧设置有第一电极，诱导液盛装槽两侧设置有第二电极，第一电极和第二电极接触后导通。条形凹槽和升降盖板可将水蛭活动范围进行限制，通过诱导液盛装槽有效对水蛭进行诱导，促使其分泌唾液；通过挤压、电刺激促使水蛭分泌腺液。

摘要： 本发明涉及一种诱导液及其制备方法，诱导液选用刺激性食材制备而成，该诱导液可促进水蛭和/或蚯蚓分泌并吐出水蛭素和/或蚓激酶。还提供水蛭素和/或蚓激酶的提取方法，利用所述诱导液从活体水蛭和/或蚯蚓提取水蛭素和/或蚓激酶，水蛭素和/或蚓激酶产量高，且最大限度保留水蛭素和蚓激酶的活性含量。还提供水蛭素蚓激酶口服液及其制备方法和应用，以所述诱导液诱导，让活体吸血水蛭分泌并吐出水蛭素，让赤子爱胜蚓分泌并吐出蚓激酶，并且保住了水蛭和蚯蚓中其它的药性成份。本发明专利克服了水蛭素和蚓激酶中含有大量杂质难于滤除的弊端，且无腥臭味，同时最大限度保留水蛭素和蚓激酶的活性含量和药性，简单易操作，抗栓溶栓疗效明显提高。

摘要： 本发明涉及一种药用原料成分的提取方法及设备，具体是涉及一种水蛭素提取瓶、水蛭素提取方法。具有高度为30cm，内径为20cm，外径为21cm的圆柱状玻璃瓶；玻璃瓶内部的中部设有环状卡台，卡台内嵌有可拆式筛网，筛网孔径为60目；玻璃瓶外侧距底部15cm处设有茶壶口形状的排出口。打开盖体，将活体水蛭放置于筛网之上1～3h后，水蛭全身发出粘液，自玻璃瓶顶部放入水，对水蛭进行冲洗，含粘液的水通过筛网进入玻璃瓶内底端，冲洗完成后，倾斜玻璃瓶，处于混合液上层的水通过排出口排出玻璃瓶的外部，下层物质留置于玻璃瓶中24h即呈块状，打开可拆式筛网，取出块状物质即可。本发明既对水蛭进行有效保护，又能使水蛭素提取的产量得到提升。

摘要： 本发明公开了一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺。其中采用汉逊多型宿主细胞株RB-11为出发菌株来构建适用于生产的含有水蛭素的汉逊酵母高表达工程菌株RBHV145-6，并通过培养、发酵来获得高纯度和高含量的水蛭素。在本发明中，水蛭素基因以多拷贝的形式拷贝到宿主细胞的染色体上，且拷贝数保持稳定，含有水蛭素基因的外源基因表达盒完全整合到宿主细胞染色体上，种子库细胞、传代40、80代后的细胞中均无游离质粒存在，外源蛋白的表达量和分泌效率比酿酒酵母高10倍，特别和国内的多型汉逊酵母相比水蛭素外源蛋白的表达量高35.8％，且没有过度糖基化现象，因此适合于大规模发酵生产目的蛋白。

摘要： 本发明涉及由水蛭素和一种或多种亲脂化合物形成的水蛭素结合物，其中，所述亲脂化合物的辛醇/水分配系数大于1.8，而且与水蛭素化学相连，并涉及其制备和其应用。

摘要： 本发明公开了一种实验室使用活体水蛭提取水蛭素的装置及其方法，涉及水蛭素提取技术领域。所述装置包括顶部开口的箱体、中隔板、升降盖板和挤压板，中隔板设置于箱体中部，中隔板上均匀分布有条形凹槽，条形凹槽底部开设有若干出液孔；中隔板上方设置有升降盖板，升降盖板上设置有诱导液盛装槽，诱导液盛装槽与条形凹槽相适配；升降盖板上方设置有挤压板，挤压板底部设置有凸部，凸部与诱导液盛装槽相适配。条形凹槽两侧设置有第一电极，诱导液盛装槽两侧设置有第二电极，第一电极和第二电极接触后导通。条形凹槽和升降盖板可将水蛭活动范围进行限制，通过诱导液盛装槽有效对水蛭进行诱导，促使其分泌唾液；通过挤压、电刺激促使水蛭分泌腺液。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及水蛭特异性营养诱导液及天然水蛭素的提取方法。该水蛭特异性营养诱导液包括氯化钠、复合氨基酸、葡萄糖、反式‑4,5‑环氧基‑2‑癸烯醛和无菌水。本发明采用活体诱导喂饱菲牛蛭的方法，避免了水蛭大规模的采杀，使水蛭得到重复利用。采用喂食特异性营养诱导液代替全牛血和其它适口性差的诱导物质，既能诱导水蛭充分吸食，又减少了大量血液等杂蛋白混入，有利于后续天然水蛭素分离和纯化。

摘要： 一种水蛭素和生水蛭药酒，将400g‑600g水蛭提取的新鲜水蛭素和提取水蛭素后的生水蛭泡于30‑40度的500ML白酒中密封贮存，制成母液，然后将母液用白酒稀释成水蛭素和生水蛭药酒。本发明的白酒可以是各种度数的白酒，较理想的是40度以上的白酒，推荐采用50度以上的白酒。本发明的水蛭素和生水蛭药酒可以用于治疗血栓病、高血脂病、高血压病。

摘要： 一种水蛭素和干水蛭药酒，将400g‑600g水蛭提取的新鲜水蛭素和1000g‑2000g的干水蛭泡于30‑40度的500ML白酒中密封贮存，制成母液，然后将母液用白酒稀释成水蛭素和干水蛭药酒。本发明的白酒可以是各种度数的白酒，较理想的是40度以上的白酒，推荐采用50度以上的白酒。本发明的水蛭素和干水蛭药酒可以用于治疗血栓病、高血脂病、高血压病。