线粒体膜电位

摘要： 目的探索不同冻存保护剂对2周龄未性成熟小鼠睾丸生精细胞冻存的影响。方法取2周龄雄性小鼠两步酶法制备睾丸细胞悬液(TCS),根据DMEM/F12培养基中不同浓度二甲基亚砜(DMSO)、蔗糖、海藻糖的组合将冻存保护剂分为5组:A组含10%DMSO和10%胎牛血清(FBS);B组含10%DMSO、0.1 mol/L蔗糖和10%FBS;C组含10%DMSO、0.1 mol/L海藻糖和10%FBS;D组含15%DMSO、0.1 mol/L蔗糖0.1 mol/L海藻糖和10%FBS;E组含10%DMSO、0.1 mol/L蔗糖、0.1 mol/L海藻糖和10%FBS。将5组睾丸细胞采用程序化冻存于液氮中,2月后进行复苏。台盼蓝检测细胞活性,计算各组细胞冻存后的细胞活率和复苏率,流式细胞仪检测睾丸生精细胞的凋亡和线粒体膜电位变化,以新鲜的2周龄小鼠睾丸生精细胞作为对照组。结果与冻存前比较,冻存复苏后各组的细胞活率均显著下降(P<0.05),且冻存组中E组细胞活率下降程度最低[(83.03±1.61)%]、细胞复苏率最高[(87.37±1.66)%](P<0.05)。细胞凋亡比较中,冻存复苏后各组细胞凋亡率均显著高于对照组[(18.77±0.95)%](P<0.05),其中A组细胞凋亡率最高[(57.08±2.40)%],E组细胞凋亡率最低[(29.62±1.95)%](P<0.05)。线粒体膜电位比较中,各组复苏后细胞线粒体膜电位均低于冻存前,除E组外,其余4组均显著低于对照组(P<0.05),在冻存的5组中E组下降程度最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同冷冻保护剂对未性成熟小鼠睾丸生精细胞冻存效果有显著影响,其中含10%DMSO、0.1 mol/L蔗糖、0.1 mol/L海藻糖及10%HBS组合冷冻剂方案是冻存未性成熟小鼠睾丸生精细胞较适宜的冷冻保护剂方案。

摘要： 目的探讨促排卵期间精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)联合检测对辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)妊娠结局的预测作用。方法2020年4月至2021年5月,在海军军医大学第一附属医院生殖医学中心行体外受精或卵细胞质内单精子注射治疗的患者中,在女方促排卵期间接受精子DFI和(或)MMP检测并符合纳入标准的病例共116个周期。最近一次检测时间大多安排在促排卵起始日、夜针日或取卵日。采用流式细胞仪检测荧光来计算精子DFI值与MMP值。DFI值≤15%为正常值组,15%~30%为临界值组,≥30%为异常值组;DFI正常值和临界值的所有病例均检测MMP值,MMP值0.05)。DFI正常值组、临界值组与异常值组的取卵周期分别为44、33和39个,3组间比较优质胚胎率[54.4%(198/364)、56.5%(130/230)与39.5%(83/210),χ^(2)=15.550,P<0.01]、胚胎种植率[48.9%(44/90)、42.4%(25/59)与25.0%(15/60),χ^(2)=8.709,P<0.05]和中晚期妊娠率[70.6%(36/51)、44.4%(16/36)与30.6%(11/36),χ^(2)=14.471,P<0.01],差异均有统计学意义。进一步两两比较,DFI正常值组的优质胚胎率、胚胎种植率和中晚期妊娠率均高于DFI异常值组;DFI正常值组的中晚期妊娠率高于DFI临界值组;DFI临界值组的优质胚胎率和胚胎种植率均高于DFI异常值组。MMP异常值组和正常值组的取卵周期分别为26和51个,MMP异常值组与正常值组的优质胚胎率[46.0%(57/124)与57.7%(271/470),χ^(2)=5.424,P<0.05]、胚胎种植率[18.2%(8/44)与58.1%(61/105),χ^(2)=19.867,P<0.01]和中晚期妊娠率[24.0%(6/25)与74.2%(46/62),χ^(2)=18.667,P<0.01]比较,MMP异常值组均低于正常值组。采用多因素Logistic回归分析矫正混杂因素后,结果提示,DFI值(OR=0.892,95%CI:0.801~0.995,P<0.05)和MMP值(OR=1.068,95%CI:1.009~1.132,P<0.01)是影响中晚期妊娠率的独立影响因素,DFI值越高,中晚期妊娠率越低;MMP值越低,中晚期妊娠率越低。结论在女方促排期间检测的精子DFI值与优质胚胎率、胚胎种植率和中晚期妊娠率有显著相关性;DFI值正常或临界的患者中,MMP异常也会显著降低胚胎种植率和中晚期妊娠率;DFI值和MMP值两者联合检测可预测ART妊娠结局。

摘要： 目的:研究玉竹多糖(Polygonatum odoratum polysaccharides,POP)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导大鼠胸大动脉平滑肌细胞(A7r5)衰老的保护作用。方法:采用水提醇沉法提取POP,并通过苯酚-硫酸法测得POP中总糖含量。应用D-gal建立A7r5细胞衰老模型,采用MTT法、β-gal染色、活性氧(ROS)、JC-1染色法检测POP对D-gal诱导A7r5细胞衰老的保护作用。结果:POP多糖得率为8.23%,总糖含量为76.48%±0.036%。MTT结果显示POP在400μg/mL处理A7r5细胞24 h可促进细胞增殖,细胞存活率为174.89%±3.30%。40 mg/mL D-gal处理A7r5细胞48 h可降低细胞存活率至65.93%±1.63%。POP浓度为100μg/mL时对D-gal诱导A7r5细胞存活率下降的保护作用最为显著,与对照组相比细胞存活率可达到226.87%±12.58%(P<0.001)。POP可减少Dgal诱导A7r5细胞产生的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)含量,抑制衰老细胞中ROS水平,增加JC-1荧光染色阳性细胞数,保护线粒体膜电位稳定。结论:POP可以抑制氧化应激,抑制D-gal诱导A7r5细胞衰老,具有良好的体外抗衰老作用。

摘要： 目的:初步探索鸡屎藤苷酸(PA)诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭的可能机制。方法:选取SGC-7901胃癌细胞为研究对象,利用CCK-8法进行浓度梯度实验确定后续实验浓度,利用流式细胞术检测0、20、40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率以及线粒体膜电位变化情况,BrdU法和Transwell小室实验SGC-7901胃癌细胞的增殖活性以及侵袭能力,qRT-PCR检测抑癌基因P53、P21的mRNA相对表达水平,Western Blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-Myc和转移相关蛋白VEGF、波形蛋白表达水平。结果:CCK-8梯度浓度试验发现PA浓度从40μg/mL开始对SGC-7901胃癌细胞活性产生了明显抑制作用(P<0.05),后续以20、40、80μg/mL为试验浓度;与0μg/mL的PA处理比较,40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、Cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平以及P53、P21相对表达量升高,线粒体膜电位、细胞增殖活性、侵袭率、c-Myc、VEGF、波形蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:PA可能通过降低线粒体膜电位促进线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,促进抗癌基因表达抑制细胞的恶性增殖,并抑制上皮间质转化降低侵袭能力。

摘要： 目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶亚基(CKS)2通过干预线粒体功能促进宫颈癌细胞增殖的机制。方法:对数生长期的宫颈癌SiHa细胞分为三组:空白对照组(不进行转染)、阴性对照组(转染Hs-NC siRNA)与CKS2 siRNA组(转染Hs-CKS2 siRNA),采用MTT法检测细胞增殖活性,Transwell检测细胞侵袭及转移,线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位,qPCR检测CKS2与线粒体整合蛋白2(Mfn2)mRNA水平,Western blot法检测Mfn2、CKS2蛋白水平。结果:转染后24、36 h,CKS2 siRNA组的细胞增殖指数、细胞侵袭及转移指数低于空白对照组、阴性对照组(均P<0.05);转染后24、36 h,CKS2 siRNA组的细胞线粒体膜电位水平高于空白对照组、阴性对照组(均P<0.05);转染后24、36 h,CKS2 siRNA组的CKS2与Mfn2 mRNA、蛋白相对表达水平低于空白对照组、阴性对照组(均P<0.05)。结论:抑制CKS2的表达可通过干预线粒体膜电位水平,抑制宫颈癌细胞Mfn2的表达,从而抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭与转移。

摘要： 目的探讨熊去氧胆酸(UDCA)对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制。方法取对数生长期的肝癌HepG2细胞分为0μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组,各组分别加入0、5、10μmol/L UDCA药液干预24 h。24 h后采用MTT法检测HepG2细胞增殖抑制率,倒置光学显微镜观察HepG2细胞的数量、形态变化,流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率和线粒体下降的膜电位,RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA相对表达量,Western blot检测Bcl-2蛋白相对表达水平。结果与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞增殖抑制率均升高(P均<0.05),且UDCA药物浓度越高抑制率越强;与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞数量减少,细胞脱落变圆,悬浮细胞相对增加;与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞凋亡率均增加(P均<0.05),线粒体下降的膜电位均增加(P均<0.05);与0μmol/L组比较,5μmol/L组和10μmol/L组HepG2细胞Bcl-2 mRNA相对表达量和蛋白相对表达水平均降低(P均<0.05)。结论UDCA可通过抑制HepG2细胞Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达水平,诱导线粒体膜电位下降,促进HepG2细胞凋亡。

摘要： 目的探讨过表达circRNA_LARP4(circ_LARP4)对鼻咽癌CNE2和5-8F细胞肿瘤干细胞样特性及线粒体膜电位的影响。方法鼻咽癌CNE2和5-8F细胞转染circ_LARP4过表达载体,qRT-PCR检测circ_LARP4过表达效率。克隆形成实验检测克隆形成率,肿瘤细胞成球实验检测成球数和成球直径,流式细胞术检测线粒体膜电位变化,试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测Ki67、P21、八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)、Nanog、ABCG2、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)的蛋白表达水平。结果与Control组比较,circ_LARP4组CNE2和5-8F细胞中circ_LARP4表达水平显著上调(均P<0.05),克隆形成率显著降低(均P<0.05),成球率和成球直径显著减少(均P<0.05),线粒体JC-1红/绿荧光比显著降低(均P<0.05),Ki67蛋白水平显著下调,p21蛋白水平显著上调(均P<0.05),OCT4、Nanog和ABCG2蛋白水平显著降低(均P<0.05),Bax/Bcl-2显著增高(均P<0.05),SOD含量显著降低,MDA含量显著升高(均P<0.05)。通过Starbase 2.0和dbDEMC2初步筛选出circ_LARP4在鼻咽癌中的可能靶分子miR-135b-5p和miR-195-5p,并初步发现二者可以逆转circ_LARP4对细胞增殖干性和凋亡的影响(P<0.05)。结论过表达circRNA_LARP4能够降低鼻咽癌CNE2和5-8F细胞的肿瘤干细胞样特性及线粒体膜电位。

摘要： 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)丁酸钠(NaBt)单独或联合X射线照射对人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:处于对数生长期的A549细胞分为对照组、NaBt组、4 Gy X射线照射组和NaBt联合4 Gy X射线照射组。照射后24和48 h,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;照射后6 h,采用流式细胞术检测各组细胞的线粒体膜电位(Δψm)和活性氧(ROS)水平;照射后24 h,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和p21 mRNA表达水平。结果:照射后24和48 h,与对照组、4 Gy X射线照射组和NaBt组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01);照射后48 h,与对照组比较,NaBt组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。NaBt单独或联合4 Gy X射线作用A549细胞6 h后,与对照组、4 Gy X射线照射组和NaBt组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞Δψm均明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,NaBt组和NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞中ROS水平均明显升高(P<0.05);与4 Gy X射线照射组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞中ROS水平升高(P<0.05)。NaBt单独或联合4 Gy X射线作用A549细胞24 h后,与对照组、4 Gy X射线照射组和NaBt组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞中caspase-3和p21 mRNA表达水平均明显升高(P<0.01);与对照组比较,NaBt组和4 Gy X射线照射组细胞中p21 mRNA水平均明显升高(P<0.01)。结论:NaBt可以诱导A549细胞凋亡,其机制可能涉及到线粒体凋亡通路的调控。

摘要： 目的评估2,4-二硝基苯酚(DNP)是否具有辐射增敏的能力。方法采用MTT法及细胞克隆形成实验检测不同浓度DNP对Hela、KB细胞增殖能力的影响;细胞克隆形成实验检测DNP对Hela、KB细胞的辐射增敏作用;流式细胞仪检测不同条件下Hela、KB细胞周期及线粒体膜电位变化,并利用透射电子显微镜观察自噬小体形成;western blotting检测自噬相关蛋白LC-Ⅰ、LC-Ⅱ的表达。结果DNP浓度越高对Hela、KB细胞的增殖抑制越明显;在200μmol/L的DNP作用下,Hela、KB细胞的SERD0分别为1.45、1.18;Hela、KB细胞经过4 Gy X线照射并联合200μmol/L DNP作用24 h后,G_(2)/M期细胞明显增多,线粒体膜电位显著降低;DNP能够促进Hela、KB细胞自噬小体形成;在DNP作用后Hela及KB细胞的LC-Ⅱ表达明显升高,与对照组相比LC-Ⅱ/LC-Ⅰ值也明显有所升高。结论DNP能够以浓度依赖的方式抑制肿瘤细胞增殖,并且具有辐射增敏作用。DNP可能是一种潜在的辐射增敏剂。

摘要： 为探究绿茶和红茶中的代表性组分对秀丽隐杆线虫在不同温度条件下的作用效果及机制,试验设置0.25、2.5、25μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和茶黄素(theaflavin,TF1),测定线虫在4°C和35°C条件下的存活率,进而测定在4°C、20°C和30°C条件下经25μmol/L EGCG和TF1孵育后线虫体内脂肪含量和线粒体膜电位的变化。结果显示,25μmol/L EGCG将热应激线虫的最大寿命和中位寿命分别提高了8.15%、22.44%,将冷应激线虫的最大寿命和中位寿命分别降低了20.25%、17.94%。25μmol/L TF1对热应激线虫的存活率无显著影响,将冷应激线虫的最大寿命和中位寿命分别提高了9.43%、19.01%。在4°C条件下,EGCG和TF1孵育均提高了线虫体内的脂肪含量,TF1孵育降低了线虫的线粒体膜电位水平。在20°C条件下,EGCG和TF1具有明显的降脂作用,长时间孵育可显著提高衰老线虫线粒体活性。在30°C条件下,EGCG和TF1提高了线虫体内的脂肪含量。以上结果表明,在低温条件下TF1通过促进线粒体产热而非脂肪动员提高了线虫的存活率,而EGCG孵育可诱导线虫死亡。

摘要： 目的：观察参附益心颗粒对心衰大鼠心肌组织ATP含量及线粒体膜电位的影响. 方法：采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法复制心肌梗死后心力衰竭大鼠模型.实验共设五组：假手术组、模型组、参附益心颗粒常用剂量组、高剂量组和氯沙坦组.其中假手术和模型组给予相同体积的蒸馏水灌胃,药物干预组将相应药物溶于蒸馏水后经口灌胃给药,4周后利用超声评价左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS);采用生物发光法检测左心室缺血危险区组织的ATP含量;同时以JC-1为荧光分子探针检测大鼠心肌线粒体膜电位的变化. 结果：与模型组比较,参附益心颗粒干预组心肌ATP含量及线粒体膜电位均显著升高,伴随心功能的改善(P＜0.01或P＜0.05). 结论：参附益心颗粒能够提高心衰大鼠心肌ATP含量、改善心脏功能,该作用可能与其抑制线粒体膜电位的降低有关.

摘要： 目的：通过测定心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS)及线粒体膜电位,探讨NO,NOS及线粒体膜电位对MIRI大鼠的作用以及针刺内关穴对MIRI大鼠的影响. 方法：将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)、电针内关穴组和电针环跳穴组,每组10只.采用冠脉结扎法造模,电针内关组和电针环跳组在造模前,分别给予电针刺激20min/d,共7d.采用硝酸还原酶化学比色法检测血清NO、NOS的含量,荧光技术法测心肌细胞线粒体膜电位的变化. 结果：模型组血清NO、NOS含量及线粒体膜电位较假手术组明显下降(P＜0.05);电针内关穴组血清NO、NOS含量较模型组、假手术组和电针环跳组明显升高(P＜0.01orP＜0.05);电针内关穴组线粒体膜电位较模型组、电针环跳穴组和假手术组明显升高(P＜0.01orP＜0.05);模型组与电针环跳穴组间无明显差异.(P＞0.05). 结论：电针内关穴可以有效改善心肌缺血再灌注损伤,对心肌产生保护作用.

摘要： 目的：研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞增殖,线粒体膜电位及Caspase-3蛋白表达的影响.rn 方法：镰形棘豆处理SMMC-7721细胞24h后,MTT法观察对细胞增殖的抑制作用;镰形棘豆总黄酮0.05,0.075,0.1 g·L-1 分别作用于SMMC-7721细胞后,流式细胞术检测线粒体膜电位,Western blot检测对凋亡相关蛋白Caspase-3蛋白表达的影响.rn 结果：结果表明,镰形棘豆总黄酮抑制SMMC-7721细胞的增殖并呈现浓度依赖性.作用SMMC-7721细胞后可以使细胞的线粒体跨膜电位明显降低,与药物浓度呈负相关.中、高剂量组的SMMC-7721细胞中Caspase-3蛋白表达明显升高(P＜0.01).rn 结论：镰形棘豆总黄酮诱导SMMC-7721细胞的凋亡可能是通过线粒体途径,并且与影响Caspase-3的表达有关.为镰形棘豆抗肿瘤的作用机制的实验和临床研究奠定理论和实验依据.

摘要： 目的：rn 研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞的线粒体膜电位及Caspase-3蛋白表达的影响.rn 方法：rn 镰形棘豆总黄酮0.05,0,075, 0,1 mg·mL-1分别作用于SMMC-7721细胞后,流式细胞术检测线粒体膜电位,Western blot检测对凋亡相关蛋白Caspase-3蛋白表达的影响.rn 结果：rn 镣形棘豆总黄酮作用SMMC-7721细胞后可以使细胞的线粒体跨膜电位明显降低,与药物浓度呈负相关.中、高剂量组的SMMC-7721细胞中Caspase-3蛋白表达明显升高(P＜0.01).rn 结论：rn 镰形棘豆总黄酮诱导SMMC-7721细胞的凋亡可能是通过线粒体途径,并且与影响Caspase-3的表达有关.为镰形棘豆抗肿瘤的作用机制的实验和临床研究奠定理论和实验依据.

摘要： 目的:观察刺参酸性粘多糖(SJAMP)体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的情况,并探讨SJAMP对HepG2细胞线粒体凋亡途径相关膜电位作用机制.方法:体外培养人肝癌细胞HepG2,用不同浓度的刺参粘多糖(0.25、1.0、4.0mg/L)干预人肝癌细胞HepG2.采用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的改变,Fura-2荧光显徼镜检测细胞钙离子浓度改变.在相同条件下干预人张氏细胞系以观察其对正常细胞的影响.结果:随着SJAMP剂量的增加,HepG2细胞内钙离子浓度有降低的趋势,各干预组的钙离子浓度均高于对照组,且差异具有显著性(p＜0.05);随着SJAMP剂量的升高,线粒体膜电位表现出相反的趋势,HepG2细胞各干预组的线粒体膜电位均高于对照组,且差异具有显著性(p＜0.05).而张氏细胞各干预组的改变并无统计学意义.结论:SJAMP通过降低细胞内钙离子浓度和细胞线粒体膜电位,可能会诱导线粒体通透性的改变,启动细胞凋亡途径.

摘要： 目的：观察单次9h高压氧(hyper baric oxygenation,HBO）治疗对永久性大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO）大鼠线粒体膜电位和Caspase-3水平的影响. 方法：制作SD大鼠永久性MCAO模型,随机分为对照组(n＝36）和HBO组(n＝36）,HBO组大鼠于模型制备成功后3h予单次9hHBO治疗,压力0.2MPa.于模型成功后3h、13h、24h，行大鼠Garcia神经功能评分，于13h、24h分别将大鼠脑组织应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）法检测细胞凋亡，流式细胞仪检测缺血半暗带脑组织线粒体膜电位（MMP），ELISA法检测活性Caspase-3的水平。 结果：（1）两组大鼠在13h神经功能即有明显改善，HBO组恢复更明显，但无显著差异。（2）HBO组及对照组在13h、24h均可见凋亡细胞，但HBO组凋亡细胞数少于对照组。（3）HBO组的MMP水平在24h显著高于对照组。（4）HBO组的Caspase-3水平在24ｈ显著低于对照组。 结论：单次9h HBO超早期治疗可抑制线粒体膜电位降低，降低Caspase-3水平，减少细胞凋亡，可能是高压氧治疗脑梗死的机制之一。

摘要： 目的：研究雷公藤甲素诱导人正常肝细胞LO-2凋亡的可能机制. 方法：体外培养LO-2细胞,采用流式细胞术检测凋亡率、线粒体膜电位,Elisa法检测Caspase-3的活化程度. 结果：不同浓度雷公藤甲素处理LO-2细胞48h后,细胞的早期凋亡率与对照组相比有显著提高(P＜0.01);引起的线粒体膜电位的平均荧光强度分别为149.00±2152,196.00±6.93,231.67±6.57,与正常对照组281.67±5.51对比具有统计学差异(P＜0.01);诱导LO-2细胞Caspase-3活化程度分别为1.48±0.06,2.67±0.31,3.94±0.28. 结论：雷公藤甲素能促进LO-2细胞凋亡,其凋亡机制可能与降低线粒体膜电位,诱导细胞内Caspase-3活化有关.

摘要： 目的：从神经元电生理功能障碍探讨老年患者术后认知障碍的机制. 方法：选取2012年6月至2015年5月收治的40例因急性脑血管病住院患者作为发病组,另选同期40例老年全麻术后患者作为对照组.入院后给予常规治疗.在治疗开始前、治疗开始后2天、7天及14天分别利用荧光探针经过JC-1荧光染色对白细胞内线粒体进行染色标记后进行流式细胞仪测定线粒体膜电位.记录发病组患者治疗开始前及治疗后14天以及对照组相对应时间点的的事件相关电位P300及N200. 结果：与对照组相比,发病组治疗前、治疗后2天、7天线粒体膜电位下降细胞的比例比较对照组大,差别有统计学意义,p＜0.05;治疗后14天时两组比值基本相同,差异无统计学意义,p＞0.05.发病组P300和N200的潜伏期在治疗之前比对照组时间明显延长,p＜0.05,经治疗后14天发病组P300和N200的潜伏期比治疗之前明显缩短,p＜0.05;发病组P300和N200的波幅在治疗之前比对照组明显降低,差异有统计学意义,p＜0.05,经治疗后14天发病组P300和N200的波幅比治疗之前明显升高,差异有统计学意义,p＜0.05. 结论：综上所述,术后认知功能障碍患者线粒体膜电位活性显著下降,提示麻醉手术的强应激刺激导致神经元线粒体膜氧化应激可能导致神经元受到损害;事件相关电位P300、N200可作为早期反映术后认知功能障碍的神经电生理指标.

摘要： 目的：探讨建立一种新型的脂肪变性HepG2细胞模型的方法,并对细胞线粒体能量代谢障碍程度进行评价. 方法：予25％的胎牛血清和0.1％的医用脂肪乳DMEM培养基初步诱导12h后,进一步予油酸和棕榈酸组成的0.1mmol/L游离脂肪酸(FFA) DMEM培养基再次诱导12h,建立脂肪变性HepG2细胞模型,并设置对照组比较.诱导成功后,采用油红O染色观察细胞内脂滴沉积状况,并用全自动生化仪检测细胞上清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量和细胞内甘油三酯(TG)含量;采用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位的变化,采用磷钼酸比色法测定细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量,综合评测脂肪变性细胞线粒体能量代谢障碍的程度. 结果：与对照组比较,模型组细胞内橘红色脂滴大量形成,且TG含量明显升高(P＜0.01),ROS含量明显增高(P＜0.01),而线粒体膜电位及细胞内ATP含量显著降低(P＜0.01). 结论：采用25％胎牛血清、0.1％中/长链脂肪乳和0.1 mmol/L FFA分阶段诱导HepG2细胞,可以成功在体外建立脂肪变性细胞模型,该模型会引起细胞线粒体能量代谢紊乱,与NAFLD临床发病机制存在相似性.

摘要： 目的：应用流式细胞术检测脐静脉内皮细胞中的各项衰老指标.方法：体外培养人脐静脉内皮细胞,在传代过程中应用流式细胞术检测自发荧光、线粒体膜电位、细胞周期、活性氧的含量.结果：随着内皮细胞传代过程中代龄的增加,内皮细胞自发荧光增加、线粒体膜电位降低、活性氧含量逐渐增加,达到顶峰后下降.细胞随着代数的增多,脐静脉内皮细胞的细胞周期中,S期逐渐渐少,停留在G0/G1期增多.结论：细胞衰老过程中,细胞自发荧光物质增加,导致自发荧光增强,活性氧含量的增加与线粒体膜电位的降低成正相关,细胞随着代龄的增加细胞分裂减少,走向衰老和死亡.

摘要： 本发明公开了一种双标法检测精子线粒体膜电位和活性氧的方法，特点是包括待精液自然液化后，取5‑10万条精子加入到37°C预热的500μL精子培养缓冲液中混匀，并置于37°C水浴箱中加入10uL精子线粒体膜电位和活性氧联合染液，混匀37°C避光孵育，5‑30分钟内上流式细胞仪机检测的步骤；最后分别收集三种颜色荧光信号：绿色、橙色和红色；采用流式细胞仪自带软件分析结果，根据绿色和橙色荧光情况，确定线粒体膜电位高低；根据红色荧光情况，确定活性氧含量情况，优点是实现了一次性完成精子线粒体膜电位和活性氧的检测，且操作简单、快速、重复性好。

摘要： 本发明属于分析化学技术领域，提供了一种检测线粒体膜电位的荧光探针及其制备方法和应用。该线粒体膜电位荧光探针结构式为：，能够以4‑氟苯甲醛和哌嗪的反应产物与1,2‑二甲基‑喹啉碘盐反应获得。本发明提供的荧光探针具有低生物毒性、膜通透性好、合成方法简单、纯化步骤简便的特点，该探针能够应用于细胞成像，检测、标记或显示线粒体膜电位变化。

摘要： 本发明公开一种线粒体‑溶酶体迁移型膜电位荧光探针CSP，属于线粒体膜电位荧光探针技术领域。本发明一种线粒体‑溶酶体迁移型膜电位荧光探针CSP具有近红外聚集诱导荧光发射特性，利用其正电荷结构与线粒体负性膜电位的静电作用相结合，使探针靶向聚集于线粒体中；随着膜电位的降低，探针从线粒体中释放并迁移至溶酶体，通过探针与市售溶酶体特异性染料进行共定位荧光成像，利用二者的共定位系数随着膜电位的降低而升高的特性，从而实现对正常活细胞中线粒体膜电位的实时追踪，以及对死活细胞进行可视化区分应用。

摘要： 本发明公开了一种单个精子活性氧和精子线粒体膜电位检测系统，包括相配装的壳体和舱门，所述壳体内设置有放置盛装精液器皿的样品池，样品池的上方设置有能够激发器皿内单个精子荧光的激发机构，样品池的下方设置有对激发后的精子进行活性氧和线粒体膜电位检测的检测机构，壳体内设置有控制检测机构和激发机构工作的控制器；所述壳体的外部设置有与控制器输出端连接、方便查看检测结果的显示器。本发明采用激发光探头和光子级别光学检测模块实现了单个精子活性氧和精子线粒体膜电位水平的检测，具有灵敏、准确、自动、快速的优点。

摘要： 本发明涉及一种通过流式细胞仪同时检测线粒体膜电位和质量的荧光探针及其合成方法。针对现有荧光探针检测细胞内线粒体膜电位时需占用两个荧光通道、易与线粒体隔离等情况，本发明的探针在流式细胞仪上使用检测线粒体膜电位时，仅表现同一区段的激发波长范围，在同一荧光通道中检测，而且该探针在检测线粒体膜电位的同时可以检测线粒体的质量，达到联合评估线粒体的效果。

摘要： 本发明公开了一种线粒体膜电位检测试剂盒，包括外盒体和内盒体，所述内盒体底部的内侧壁设置有加热器，所述外盒体的内部设置有真空仓和加热仓，所述内盒体的内侧壁两端均设置有固定槽，所述固定槽的内侧壁固定连接有多个磁铁，所述固定槽的内壁设置有滑槽，所述内盒体的内部设置有多个测试板，所述侧视板的上侧壁开设有五个染色培养基，所述内盒体的外侧壁设置有限位机构，所述真空仓的顶部设置有复位机构，所述测试板的两端沿着滑槽的内侧壁上下滑动。本发明，通过加热器、测试板和染色培养基设置，实现了对细胞的无菌培养，经过加热器的加热作用，对内盒体染色培养基中的细胞的培养环境达到了高温灭菌的效果。

摘要： 本发明公开了一种双标法检测精子线粒体膜电位和活性氧的方法，特点是包括待精液自然液化后，取5‑10万条精子加入到37°C预热的500μL精子培养缓冲液中混匀，并置于37°C水浴箱中加入10uL精子线粒体膜电位和活性氧联合染液，混匀37°C避光孵育，5‑30分钟内上流式细胞仪机检测的步骤；最后分别收集三种颜色荧光信号：绿色、橙色和红色；采用流式细胞仪自带软件分析结果，根据绿色和橙色荧光情况，确定线粒体膜电位高低；根据红色荧光情况，确定活性氧含量情况，优点是实现了一次性完成精子线粒体膜电位和活性氧的检测，且操作简单、快速、重复性好。

摘要： 本发明属于分析化学技术领域，提供了一种检测线粒体膜电位的荧光探针及其制备方法和应用。该线粒体膜电位荧光探针结构式为：

摘要： 本发明公开一种线粒体‑溶酶体迁移型膜电位荧光探针CSP，属于线粒体膜电位荧光探针技术领域。本发明一种线粒体‑溶酶体迁移型膜电位荧光探针CSP具有近红外聚集诱导荧光发射特性，利用其正电荷结构与线粒体负性膜电位的静电作用相结合，使探针靶向聚集于线粒体中；随着膜电位的降低，探针从线粒体中释放并迁移至溶酶体，通过探针与市售溶酶体特异性染料进行共定位荧光成像，利用二者的共定位系数随着膜电位的降低而升高的特性，从而实现对正常活细胞中线粒体膜电位的实时追踪，以及对死活细胞进行可视化区分应用。

摘要： 本发明提供了一种线粒体膜电位荧光探针及其合成方法和应用。探针的结构式为：