丁酸钠联合电离辐射对肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制

摘要

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)丁酸钠(NaBt)单独或联合X射线照射对人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:处于对数生长期的A549细胞分为对照组、NaBt组、4 Gy X射线照射组和NaBt联合4 Gy X射线照射组。照射后24和48 h,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;照射后6 h,采用流式细胞术检测各组细胞的线粒体膜电位(Δψm)和活性氧(ROS)水平;照射后24 h,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和p21 mRNA表达水平。结果:照射后24和48 h,与对照组、4 Gy X射线照射组和NaBt组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01);照射后48 h,与对照组比较,NaBt组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。NaBt单独或联合4 Gy X射线作用A549细胞6 h后,与对照组、4 Gy X射线照射组和NaBt组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞Δψm均明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,NaBt组和NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞中ROS水平均明显升高(P<0.05);与4 Gy X射线照射组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞中ROS水平升高(P<0.05)。NaBt单独或联合4 Gy X射线作用A549细胞24 h后,与对照组、4 Gy X射线照射组和NaBt组比较,NaBt联合4 Gy X射线照射组细胞中caspase-3和p21 mRNA表达水平均明显升高(P<0.01);与对照组比较,NaBt组和4 Gy X射线照射组细胞中p21 mRNA水平均明显升高(P<0.01)。结论:NaBt可以诱导A549细胞凋亡,其机制可能涉及到线粒体凋亡通路的调控。