缺氧/复氧

摘要： 目的探讨miR-204-5p对缺氧复氧诱导大鼠心肌细胞H9C2氧化应激的调控作用机制。方法体外培养大鼠胚胎心肌细胞H9C2,构建心肌细胞缺氧/复氧模型。实验分为空白组、缺氧复氧组、缺氧复氧+miR-con组、缺氧复氧+miR-204-5p组、缺氧复氧+miR-204-5p+pcDNA组、缺氧复氧+miR-204-5p+pcDNA-蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)组。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Westernblotting)检测miR-204-5p和PTP1B的表达。双荧光素酶报告基因实验和Westernblotting验证miR-204-5p和PTP1B的靶向调控关系。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测心肌细胞存活率。试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白(cTnT)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)水平变化。流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况。结果缺氧复氧处理可显著抑制心肌细胞miR-204-5p表达,促进PTP1B表达。PTP1B是miR-204-5p的靶基因,miR-204-5p可负性调控PTP1B的表达。缺氧复氧处理显著抑制细胞存活,降低SOD水平,提高LDH、ROS和MDA水平,促进细胞凋亡。过表达miR-204-5p可降低LDH、ROS和MDA水平,促进细胞存活,降低细胞凋亡;过表达PTP1B可部分削弱miR-204-5p过表达对缺氧复氧诱导心肌细胞凋亡和氧化应激的影响。结论miR-204-5p通过靶向下调PTP1B抑制心肌细胞氧化应激,促进细胞存活,抑制细胞凋亡,对心肌细胞发挥保护作用。

摘要： 目的探讨免疫蛋白酶体抑制剂MG132对缺氧/复氧(H/R)条件下心肌细胞的保护作用及其与核因子-κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated Bcells,NF-κB)信号通路的相关性。方法分离培养新生SD大鼠心肌细胞,建立心肌细胞H/R模型。将心肌细胞随机分为对照组、MG132组、H/R组和H/R+MG132组。应用CCK-8比色法检测各组细胞增殖与活力,用二硝基苯肼法测定培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性,用TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR法测定细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)mRNA水平,Western blot法测定细胞中p-IκB和p-P65的蛋白水平。结果与对照组相比,H/R组细胞活力降低,LDH活性和细胞凋亡增加,IL-1β、IL-6及TNF-αmRNA水平升高,p-IκB和p-P65蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比,H/R+MG132组细胞活力明显提高,LDH活性和细胞凋亡率降低,IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA水平降低,p-IκB和p-P65蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论心肌细胞的H/R过程能激活NF-κB,IL-1β、IL-6及TNF-α的表达也相应增加,导致细胞损伤;而MG132能抑制NF-κB的活化,继而降低NF-κB调控的IL-1β、IL-6及TNF-α的表达,减轻炎症反应,改善H/R损伤。

摘要： 目的研究金雀异黄酮(GEN)对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响及可能分子机制。方法本研究的起止时间为2018年10月至2019年11月。建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型(H/R组),以常规培养的细胞作为对照组;用浓度分别为5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L的GEN处理H9c2细胞后再进行H/R处理,记为GEN低、中、高浓度组;将小干扰RNA阴性对照(si-NC)、转胶蛋白-2(TAGLN2)小干扰RNA(si-TAGLN2)转染至H9c2细胞中再进行H/R处理,记为H/R+si-NC组、H/R+si-TAGLN2组;将空载体质粒(pcDNA)、TAGLN2过表达质粒(pcDNA-TAGLN2)转染至H9c2细胞中用20 mg/LGEN处理再进行H/R处理,记为H/R+GEN+pcDNA组、H/R+GEN+pcDNA-TAGLN2组。试剂盒检测丙二醛含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测TAGLN2蛋白表达;结果与对照组比较,H/R组H9c2细胞凋亡率[(25.36±2.14)%比(7.25±0.71)%]、丙二醛含量[(11.02±1.17)nmol/L比(3.54±0.34)nmol/L]、TAGLN2表达水平[(0.83±0.07)nmol/L比(0.39±0.03)nmol/L]升高,SOD、GSH-Px活性降低。与H/R组比较,GEN低、中、高浓度组H9c2细胞凋亡率[(19.68±1.87)%,(14.02±1.58)%,(10.22±1.03)%比(25.36±2.14)%]、丙二醛含量[(8.82±0.79)nmol/L,(6.33±0.61)nmol/L,(4.87±0.46)nmol/L比(11.02±1.17)nmol/L]、TAGLN2表达水平[(0.71±0.06),(0.59±0.05),(0.47±0.04)比(0.83±0.07)]降低,SOD、GSH-Px活性升高。与H/R+si-NC组比较,H/R+si-TAGLN2组H9c2细胞凋亡率[(12.48±1.24)%比(26.14±2.33)%]、丙二醛含量降低[(5.26±0.51)nmol/L比(11.46±1.13)nmol/L],SOD、GSH-Px活性升高。与H/R+GEN+pcDNA组比较,H/R+GEN+pcDNA-TAGLN2组H9c2细胞凋亡率[(22.65±2.41)%比(10.98±1.07)%]、丙二醛含量[(9.36±0.94)nmol/L比(4.88±0.48)nmol/L]降低,SOD、GSH-Px活性升高。结论GEN通过下调TAGLN2表达可保护H/R诱导的心肌细胞损伤。

摘要： 目的:探讨麦冬皂苷D对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制。方法:体外培养心肌细胞H9c2,实验分为心肌细胞未行任何干预的对照组、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D组(H/R+OpD组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)过表达组(H/R+OpD+PI3K组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+pcDNA空载体对照组(H/R+OpD+pcDNA组)。噻唑蓝法检测心肌细胞存活率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,试剂盒法检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力,酶联免疫吸附试验检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测各组心肌细胞中PI3K的表达量。结果:与对照组相比,H/R组心肌细胞中CK-MB、TNF-α、IL-1β、LDH和MDA含量、凋亡率和PI3K的表达量均明显升高,心肌细胞存活率和SOD活力明显降低(P均0.05)。结论:麦冬皂苷D对心肌细胞缺氧复氧损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制PI3K基因的表达有关。

摘要： 目的探讨飞燕草素葡萄糖苷(DPg)对缺氧复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的影响及其机制。方法2018年4月至2019年10月,用H9C2细胞建立心肌细胞H/R损伤模型,用常规培养的细胞作为对照组;用终浓度为50μmol/L、100μmol/L、1000μmol/L的DPg培养液处理H9C2细胞24 h,而后进行H/R处理,分别记为H/R+50μmol/LDPg组、H/R+100μmol/LDPg组、H/R+1000μmol/LDPg组;抗微小RNA-106a(anti-miR-106a)阴性对照(anti-miR-con)、anti-miR-106a质粒转染至H9C2细胞后进行H/R处理记为H/R+anti-miR-con组,H/R+anti-miR-106a组。miR-106a阴性对照(miR-con)、miR-106a分别转染至H9C2细胞中同时用100μmol/L的DPg处理24 h,而后进行H/R处理,记为H/R+DPg+miR-con组,H/R+DPg+miR-106a组。MTT法检测细胞活性;蛋白质印迹法(Westernblotting)检测活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-106a表达水平。结果与对照组相比,H/R组心肌细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高[(18.35±1.83)%比(7.05±0.71)%],cleaved-caspase-3表达水平显著升高,miR-106a表达水平显著升高[(3.56±0.36)比(1.00±0.11)](P<0.05);DPg处理的心肌细胞存活率显著升高;且100μmol/LDPg组于H/R组,细胞凋亡率显著降低[(10.25±1.03)%比(18.35±1.83)%],cleaved-caspase-3表达水平显著降低,miR-106a表达水平显著降低[(1.53±0.15)比(3.56±0.36)](P<0.05)。miR-106a低表达抑制H/R引起的心肌细胞凋亡;高表达miR-106a逆转了DPg对H9C2细胞增殖促进和凋亡抑制的作用。结论DPg可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,保护H/R引起的心肌细胞损伤;其机制可能与miR-106a有关。

摘要： 目的:探究黄芪多糖(APS)通过调控高迁移率族蛋白1/Toll样受体4/核转录因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路对大鼠缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞自噬及凋亡的抑制作用。方法:建立H9C2心肌细胞H/R损伤模型并分为4组:对照组、H/R组、APS组和HMGB1抑制剂组。CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖能力;酶联免疫吸附试验检测细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量;透射电镜观察细胞自噬小体的形成;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡;实时定量PCR检测细胞HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测细胞HMGB1、TLR4、NF-κB p65、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、P62、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(MAP1LC3,缩写为LC3)-Ⅱ蛋白表达水平。结果:与对照组相比,H/R组细胞增殖能力明显减弱,凋亡及自噬水平明显增加,细胞内可见大量自噬小体形成,HMGB1、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β、IL-6含量,Bax、caspase-3、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均明显升高,Bcl-2、P62表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与H/R组相比,APS组、HMGB1抑制剂组细胞增殖能力均明显增加,凋亡及自噬能力均明显降低,细胞内自噬小体数量减少,HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β、IL-6含量,Bax、caspase-3、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均明显降低,Bcl-2、P62蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:APS能够修复H9C2心肌细胞的H/R损伤,可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,抑制细胞凋亡和自噬活性。

摘要： 目的探讨苦荞黄酮通过JHDM1D反义RNA1(JHDM1D-AS1)对缺氧/复氧心肌细胞损伤的影响及机制。方法将心肌细胞H9c2分为Con组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+苦荞黄酮低剂量组、H/R+苦荞黄酮中剂量组、H/R+苦荞黄酮高剂量组、H/R+pcDNA组、H/R+pcDNA-JHDM1D-AS1组、H/R+苦荞黄酮+si-NC组、H/R+苦荞黄酮+si-JHDM1D-AS1组;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western Blot)法检测蛋白表达;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测JHDM1D-AS1和miR-421的表达水平;双荧光素酶报告实验检测JHDM1D-AS1和miR-421的靶向关系。结果缺氧/复氧诱导的心肌细胞的凋亡率升高,Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低,SOD活性降低,MDA水平升高,JHDM1D-AS1表达水平降低,miR-421表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);不同剂量苦荞黄酮处理后,心肌细胞凋亡率降低,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高,SOD活性升高,MDA水平降低,JHDM1D-AS1表达水平升高,miR-421表达水平降低,且呈剂量依赖性(P<0.05)。过表达JHDM1D-AS1后,心肌细胞凋亡率降低,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高,SOD活性升高,MDA水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。JHDM1D-AS1靶向调控miR-421;抑制JHDM1D-AS1逆转了苦荞黄酮对缺氧/复氧心肌细胞损伤的影响。结论苦荞黄酮通过调控JHDM1D-AS1/miR-421抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。

摘要： 目的:探讨芪参益气滴丸含药血清对缺氧/复氧H9C2心肌细胞KATP通道开放及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:体外培养H9C2心肌细胞随机分为5组,即A:H9C2细胞组,B:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型组,C:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型+芪参益气组,D:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型+芪参益气+PI3K/AKT信号通路阻断剂(wort)组,E:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型+芪参益气+mitoKATP特异性阻断剂(5-HD)组,按照相应的条件进行给药干预。CCK-8法检测各组心肌细胞活性;Western blot法检测各组心肌细胞AKT、pAKT蛋白的表达。标准膜片钳全细胞记录方法记录电流,由Pclamp6.0软件采集和分析电流。结果:CCK-8检测结果显示:与A组相比,B组心肌细胞活性明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。全细胞膜片钳实验结果显示:与A组相比,B组外向电流显著增加,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与B组相比,C组的心肌细胞进一步增加外向电流,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与C组相比,D、E组电流明显降低,组间具有统计学意义(P<0.01)。结论:芪参益气滴丸通过激活缺氧/复氧H9C2心肌细胞中p-AKT蛋白的表达及KATP通道的开放,对心肌细胞起到保护作用。

摘要： 目的探讨丙泊酚(Pro)通过调控JNK/p38 MAPK通路对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响。方法将细胞分为对照(control)组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧/复氧+Pro低、中、高剂量(A/R+Pro-L、A/R+Pro-M、A/R+Pro-H)组、缺氧/复氧+Pro+p38 MAPK通路抑制剂(A/R+Pro+SB203580)组。用流式细胞测量术检测细胞的凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3和JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达;ELISA检测乳酸脱氢酶(LDH)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性。结果A/R组明显抑制细胞Bcl-2蛋白表达和OD、CAT活性,而促进细胞凋亡和Bax蛋白、cleaved caspase-3蛋白、LDH、MDA、p-JNK蛋白、p-p38 MAPK蛋白的表达(P<0.05)。与A/R组相比,A/R+Pro-L组、A/R+Pro-M组、A/R+Pro-H组明显促进细胞的Bcl-2蛋白表达和SOD、CAT活性,而抑制细胞凋亡和Bax蛋白、cleaved caspase-3蛋白、LDH、MDA、p-JNK蛋白、p-p38 MAPK蛋白的表达(P<0.05)。与A/R+Pro组相比,A/R+Pro+SB203580组明显促进细胞的Bcl-2蛋白表达和SOD、CAT活性,而抑制细胞凋亡、p-JNK蛋白、p-p38 MAPK蛋白、Bax蛋白、cleaved caspase-3蛋白表达和LDH、MDA活性(P<0.05)。结论Pro可能通过调控JNK/p38 MAPK通路减缓缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激。

摘要： 目的探索MSS4在缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾脏中的表达情况,以及在缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞中的作用。方法雄性成年SD大鼠分为假手术组和IRI组,分别予以假手术和肾脏缺血再灌注处理(双侧肾蒂夹闭45 min后再灌注),分别于术后0、12、24、48、72 h收集血液及肾组织标本。自动分析法检测各组大鼠血尿素氮、血肌酐水平,肾组织PAS染色评估肾小管损伤情况,Western blot检测肾脏组织中MSS4的表达水平,免疫荧光染色检测MSS4、Vimentin在肾组织中的定位及表达情况。大鼠肾小管上皮细胞(NKR-52E)分为对照组和复氧组,对照组正常培养,复氧组缺氧6 h后分别复氧0、12、24、48、72 h。免疫荧光检测各时间点MSS4和α-SMA的表达,大鼠肾小管上皮细胞转染siRNA MSS4后检测缺氧/复氧后α-SMA的表达变化。结果与假手术比较,IRI组血尿素氮、血肌酐及肾小管损伤评分术后12 h明显升高(P<0.05),72 h肾功恢复正常,肾小管损伤未完全恢复。MSS4的表达水平在IRI后48 h开始升高,72 h更明显(P<0.05)。肾组织免疫荧光染色显示MSS4与Vimentin均定位于肾小管上皮细胞,72 h表达水平明显高于假手术组(P<0.01)。细胞免疫荧光染色显示,与对照组比较,复氧组复氧72 h后MSS4及α-SMA的表达水平明显增加(P<0.05),转染siRNA MSS4后α-SMA的表达明显降低(P<0.01)。结论MSS4在IRI大鼠肾脏中表达增加,参与AKI后肾小管上皮细胞上皮间质转化的调控。

摘要： 目的：探讨缺氧复氧对心肌细胞wnt信号通路的作用及该通路的激动与抑制对心肌细胞凋亡的影响. 方法：分离培养新生SD大鼠原代心肌细胞,建立原代心肌细胞缺氧复氧模型.随机分为control组、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+agonist1组(H/R+A组)、缺氧复氧+DKK-1组(H/R+D组).应用RT-PCR技术检测wnt信号通路关键基因表达水平,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率. 结果：心肌细胞缺氧8h,复氧2h,相对于control组,wnt3a、β-catenin、c-mycmRNA表达升高(P＜0.05),H/R组低于H/R+A组(P＜0.05),高于H/R+D组(P＜0.05).流式细胞检测,H/R组早期及晚期凋亡率均高于control组(P＜0.05),低于H/R+A组(P＜0.05),高于H/R+D(P＜0.05). 结论：缺氧复氧激活wnt/β-catenin信号通路,抑制该通路可减少心肌细胞凋亡.

摘要： 目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。rn 方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.rn 结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。rn 结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。

摘要： 目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。rn 方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.rn 结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。rn 结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。

摘要： 目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。rn 方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.rn 结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。rn 结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。

摘要： 目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。rn 方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.rn 结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。rn 结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。

摘要： 本文对目前体外培养心肌细胞缺氧/复氧病理模型的制备方法进行了综述，认为现有的物理性缺氧法和化学性缺氧法皆存在着使细胞缺氧不均匀的缺陷。如果将物理性缺氧法和化学性缺氧法联合应用，将进一步增加各孔细胞缺氧的均匀性，为体外筛选防治心肌缺血再灌注样损伤有效药物提供更加良好的病理模型。

摘要： 本文对目前体外培养心肌细胞缺氧/复氧病理模型的制备方法进行了综述，认为现有的物理性缺氧法和化学性缺氧法皆存在着使细胞缺氧不均匀的缺陷。如果将物理性缺氧法和化学性缺氧法联合应用，将进一步增加各孔细胞缺氧的均匀性，为体外筛选防治心肌缺血再灌注样损伤有效药物提供更加良好的病理模型。

摘要： 本文对目前体外培养心肌细胞缺氧/复氧病理模型的制备方法进行了综述，认为现有的物理性缺氧法和化学性缺氧法皆存在着使细胞缺氧不均匀的缺陷。如果将物理性缺氧法和化学性缺氧法联合应用，将进一步增加各孔细胞缺氧的均匀性，为体外筛选防治心肌缺血再灌注样损伤有效药物提供更加良好的病理模型。

摘要： 为探讨培养的大鼠心肌细胞在缺氧(缺血)和缺氧-复氧(再灌注)状态下心肌细胞损伤和细胞凋亡情况,采用新生SD大鼠的培养心肌细胞,按不同处理分为缺氧-复氧损伤组(H/R组)、缺氧-复氧损伤组+SOD(H/R+SOD组)、缺氧预处理组(HP组)和正常对照组(Control组),进行以下指标观察:1.台盼蓝排斥法计算细胞存活率;2.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定;3.心肌细胞内丙二醛(MDA)含量;4.心肌细胞内游离钙测定;5.流式细胞仪分析细胞凋亡;6.透射电镜观察细胞超微结构.结果可见H/R组的心肌细胞存活率明显降低;而心肌细胞内MDA和游离钙含量则明显增高;培养液中心肌酶活性增高;心肌细胞凋亡率也明显高于HP组和H/R+SOD组.心肌细胞内钙的增加与细胞凋亡的数量呈正相关.H/R组细胞超微结构可见多数细胞呈胞浆浓缩、核固缩深染等改变,而其他各组则少见.说明了缺氧-复氧可加重心肌细胞损伤,伴着心肌细胞凋亡的增加;细胞内钙离子过多可能是促发心肌凋亡的因素.SOD和或缺氧预处理具有抗心肌细胞损伤和减轻心肌细胞凋亡的作用.

摘要： 为探讨培养的大鼠心肌细胞在缺氧(缺血)和缺氧-复氧(再灌注)状态下心肌细胞损伤和细胞凋亡情况,采用新生SD大鼠的培养心肌细胞,按不同处理分为缺氧-复氧损伤组(H/R组)、缺氧-复氧损伤组+SOD(H/R+SOD组)、缺氧预处理组(HP组)和正常对照组(Control组),进行以下指标观察:1.台盼蓝排斥法计算细胞存活率;2.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定;3.心肌细胞内丙二醛(MDA)含量;4.心肌细胞内游离钙测定;5.流式细胞仪分析细胞凋亡;6.透射电镜观察细胞超微结构.结果可见H/R组的心肌细胞存活率明显降低;而心肌细胞内MDA和游离钙含量则明显增高;培养液中心肌酶活性增高;心肌细胞凋亡率也明显高于HP组和H/R+SOD组.心肌细胞内钙的增加与细胞凋亡的数量呈正相关.H/R组细胞超微结构可见多数细胞呈胞浆浓缩、核固缩深染等改变,而其他各组则少见.说明了缺氧-复氧可加重心肌细胞损伤,伴着心肌细胞凋亡的增加;细胞内钙离子过多可能是促发心肌凋亡的因素.SOD和或缺氧预处理具有抗心肌细胞损伤和减轻心肌细胞凋亡的作用.

摘要： 本发明提供桂枝去桂加茯苓白术汤在减轻肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤中的应用，属于生物医药和分子生物学技术领域。本发明证明了桂枝去桂加茯苓白术汤对肾近端肾小管HK‑2细胞的H/R损伤具有保护作用，并进一步对其机制进行了研究，证实了GZQGFLBZS通过激活PI3K/Akt/eNOS通路和抑制MAPKs通路来保护HK‑2细胞免受H/R损伤，因此可作为H/R诱导的肾小管上皮细胞修复剂使用，进而可用于基础科学研究，具有良好的实际应用之价值。

摘要： 本发明公开了一种无复氧风险的便捷式缺氧操作台，包括主设备和主设备控制箱，所述主设备控制箱与主设备的一侧固定连接，所述主设备控制箱内依次设有控制器、存储器和电源，所述主设备控制箱的一侧固定连接有触摸屏，所述主设备远离主设备控制箱的一侧固定插设有水盘和温控装置。本发明中通过使用真空泵，可以在短短几分内将其中空气抽出达到真空状态，然后充入氮气，可以在短短几分钟左右实现缺氧环境，操作简便，快速，不仅极大的节约了氮气的使用，节省了实验时间，而且避免了缺氧后转移过程中的存在可能的复氧问题，同时本设备不仅在材质方面具有较好的品质，而且与市面上的缺氧操作台相比具有十分实惠的价格优势，对于普通实验人员或者经费不足的实验室来说能够轻松购买。

摘要： 本发明属于医药学技术领域，公开了一种心肌细胞缺氧‑复氧损伤的鉴定方法及系统，调控端粒酶线粒体转位，可以减轻线粒体损伤并改善心肌能量供应，从而起到心肌保护作用。本发明拟在原代培养乳鼠心肌细胞水平通过Shp‑2ShRNA干扰质粒和靶向线粒体hTERT过表达调节端粒酶的活性和分布，分析线粒体损伤缓解状况；明确端粒酶线粒体转位与线粒体功能之间的关系，分析其减轻心肌缺氧/复氧损伤的可能机制，为以端粒酶为靶点的心肌保护治疗策略提供基础依据。

摘要： 本实用新型涉及一种适用于缺氧‑复氧环境的程序性温控孵育器，其特征在于其包括：加热器、温控器和缺氧培养箱；加热器设置在缺氧培养箱内部，包括加热器箱体、加热冷却装置、温度检测装置；加热器箱体的上表面设置恒温加热槽；加热冷却装置包括帕尔贴、加热膜和散热风扇；加热膜设置在恒温加热槽的侧面，帕尔贴设置在恒温加热槽底部，散热风扇设置在帕尔贴的底部，且加热膜、帕尔贴和散热风扇均与温控器相连；温度检测装置包括温度传感器，温度传感器设置在恒温加热槽侧面，用于检测恒温加热槽的实际温度并发送到温控器；温控器设置在缺氧培养箱外部，用于控制加热器进行加热或冷却。本实用新型可以广泛应用于贴壁细胞的目标温度管理研究领域。

摘要： 本发明涉及药物技术领域，特别是涉及一种常春藤皂苷元衍生物在制备抗心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤药物中的应用，该类化合物在溶液中稳定，具有明显的抗心肌缺氧复氧损伤、尤其是心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤的保护活性，其中在80μmol/L时便能较好的保护心肌免受缺氧复氧损伤，并且在相同剂量下，衍生物具有较母核常春藤皂苷元具有更强的药理活性，因而为治疗抗心肌缺氧复氧损伤及心肌缺血再灌注损伤的的保护提供新的选择。

摘要： 本发明公开了一种治疗心肌缺氧复氧损伤的药物组合物及其制备方法和用途。该药物组合物由包括如下重量份的组分的原料制成：荭草苷8～17份、槲皮苷25～53份和牡荆素13～25份。本发明的药物组合物能够治疗心肌缺氧复氧损伤，效果显著。

摘要： 本发明涉及药物技术领域，特别是涉及一种α‑卡波林类衍生物在制备抗心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤药物中的应用，该类化合物在溶液中稳定，具有明显的抗心肌缺氧复氧损伤、尤其是心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤的保护活性，其中在100μmol/L时便能较好的保护心肌免受缺氧复氧损伤，因而为治疗抗心肌缺氧复氧损伤及心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤的保护提供新的选择。

摘要： 本发明涉及药物技术领域，特别是涉及一种常春藤皂苷元衍生物在制备抗心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤药物中的应用，该类化合物在溶液中稳定，具有明显的抗心肌缺氧复氧损伤、尤其是心肌缺血再灌注损伤的缺氧复氧损伤的保护活性，其中在80μmol/L时便能较好的保护心肌免受缺氧复氧损伤，并且在相同剂量下，衍生物具有较母核常春藤皂苷元具有更强的药理活性，因而为治疗抗心肌缺氧复氧损伤及心肌缺血再灌注损伤的的保护提供新的选择。

摘要： 本发明公开了一种治疗心肌缺氧复氧损伤的药物组合物及其制备方法和用途。该药物组合物由包括如下重量份的组分的原料制成：荭草苷8～17份、槲皮苷25～53份和牡荆素13～25份。本发明的药物组合物能够治疗心肌缺氧复氧损伤，效果显著。

摘要： 一种大小鼠缺氧复氧模型装置，涉及到大小鼠的实验装置，包括依次设置的供气单元、流量控制单元、气体混合单元和观察箱仓，其中，所述供气单元至少包括氧气供应部；所述气体混合单元与所述供气单元相通连，该气体混合单元用于混合包括氧气在内的多种气体；所述流量控制单元分别与所述供气单元与所述气体混合单元相通连且置于两者之间；所述观察箱仓与所述气体混合单元相通连，通过依次设置供气单元、流量控制单元、气体混合单元的方式，以此观察大小鼠在缺氧或者复氧情况下的状态；设计的模型装置填补了目前在大小鼠缺氧复氧实验上缺少有效模型的空白，为后续实验模型的设计及选用提供了依据。