一种双标法检测精子线粒体膜电位和活性氧的方法

摘要

本发明公开了一种双标法检测精子线粒体膜电位和活性氧的方法，特点是包括待精液自然液化后，取5‑10万条精子加入到37℃预热的500μL精子培养缓冲液中混匀，并置于37℃水浴箱中加入10uL精子线粒体膜电位和活性氧联合染液，混匀37℃避光孵育，5‑30分钟内上流式细胞仪机检测的步骤；最后分别收集三种颜色荧光信号：绿色、橙色和红色；采用流式细胞仪自带软件分析结果，根据绿色和橙色荧光情况，确定线粒体膜电位高低；根据红色荧光情况，确定活性氧含量情况，优点是实现了一次性完成精子线粒体膜电位和活性氧的检测，且操作简单、快速、重复性好。