碱性成纤维细胞生长因子

摘要： 背景:由于耳结构的特殊性,耳郭损伤处皮肤通常活动度及组织再生能力差,愈合困难,因此如何加速创面愈合并获得理想的修复效果一直是外科领域探索的问题及研究热点。目的:探究三黄凝胶对耳郭皮肤缺损兔创面愈合、碱性成纤维细胞生长因子和白细胞介素17水平的影响。方法:取60只雄性新西兰兔,采用随机数字法分6组,每组10只,A组不做任何处理,在B-F组兔耳郭处制作一个直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,B组创面注射生理盐水,C组创面涂抹积雪苷霜软膏,D组创面涂抹三黄凝胶,E组创面注射PI3K/AKT激动剂740 Y-P,F组创面涂抹三黄凝胶并注射740 Y-P,2次/d,连续治疗30 d。观察并记录家兔耳郭创面愈合情况,苏木精-伊红染色观察耳郭组织病理形态,RT-PCR法检测家耳郭组织碱性成纤维细胞生长因子和白细胞介素17的mRNA相对表达,免疫印迹法检测家耳郭组织PI3K/AKT通路的蛋白表达。结果与结论:①经过治疗后,皮肤创面愈合速度加快,治疗30 d后,三黄凝胶与PI3K/AKT激动剂单独应用的创面愈合率高于积雪苷霜软膏,二者联合应用的创面愈合率最高;②苏木精-伊红染色显示,B组表皮明显增厚且出现血管扩张,可见大量炎性细胞浸润及纤维组织增生;与B组相比,C、D、E、F组形态明显改善,可见新生毛细血管及大量成纤维细胞和内皮细胞增殖,其中以F组改善最明显;③RT-PCR检测显示,耳郭皮肤损伤后,碱性成纤维细胞生长因子mRNA相对表达降低、白细胞介素17 mRNA相对表达升高,经过不同治疗后两因子mRNA相对表达有不同程度地改善,三黄凝胶与PI3K/AKT激动剂单独应用的改善作用均强于积雪苷霜软膏,二者联合应用的改善作用最强;④免疫印迹检测显示,耳郭皮肤损伤后,PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,经过不同治疗后4种蛋白表达均有不同程度地升高,三黄凝胶与PI3K/AKT激动剂单独应用的升高作用均强于积雪苷霜软膏,二者联合应用的升高作用最强;⑤结果表明,三黄凝胶可促进耳郭皮肤缺损创面的愈合,其作用机制可能与激活PI3K/AKT通路有关。

摘要： 背景:目前国内已有较多采用利妥昔单抗联合自体外周血干细胞移植治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的临床报道,但其作用机制还不是很明确。目的:对比分析利妥昔单抗联合自体外周血干细胞移植与利妥昔单抗治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的效果与相关因子水平的变化。方法:选择96例弥漫大B细胞淋巴瘤患者为研究对象,其中男62例,女34例,年龄20-75岁。48例采用利妥昔单抗联合化疗方案(对照组),另48例采用利妥昔单抗联合化疗、自体外周血造血干细胞移植方案(试验组),对比两组临床疗效、不良反应发生情况,随访记录患者生存期,治疗前、化疗6个疗程后及移植后6个月,检测两组血清血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子及白细胞介素17水平。结果与结论:①试验组患者均采集到了足够的外周血造血干细胞,回输CD34+细胞数为(3.6±0.6)×106/kg,回输后中性粒细胞植入时间为(11.1±1.2)d,血小板植入时间为(12.3±2.4)d;②试验组治疗有效率明显高于对照组(81%,56%,P0.05);⑤治疗前与化疗6个疗程后,两组间3种细胞因子水平比较差异无显著性意义;与治疗前比较,两组化疗6个疗程后的白细胞介素17水平升高(P<0.05),血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平降低(P<0.05);与化疗6个疗程后比较,试验组移植后6个月的白细胞介素17水平升高(P<0.05)、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平降低(P<0.05),对照组3种细胞因子水平无显著变化(P<0.05);⑥结果表明,利妥昔单抗联合自体外周血干细胞移植可提高弥漫大B细胞淋巴瘤患者的生存期,其作用途径可能与调控白细胞介素17、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平有关。

摘要： 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及血小板反应蛋白-1(TSP-1)与鼻腔-鼻窦恶性肿瘤生成的临床关系.方法 以80例疑似鼻腔肿瘤患者为对象,术后病理证实鼻腔-鼻窦恶性肿瘤34例,鼻腔良性肿瘤27例,鼻息肉19例.采用免疫组化法检测bFGF、TSP-1表达,分析其与鼻腔-鼻窦恶性肿瘤的关系.结果 bFGF在鼻腔-鼻窦恶性肿瘤、鼻腔良性肿瘤、鼻息肉中的阳性表达率分别为82.35％(29/34)、59.26％(16/27)、21.05％(4/19).三组间bFGF阳性检出率比较,差异显著(P0.05).结论 bFGF对鼻腔-鼻窦恶性肿瘤具有促进作用,而TSP-1可抑制肿瘤的发生及发展.

摘要： 背景:碱性成纤维细胞生长因子作为有效的血管形成因子之一,不但可增加缺血组织的血液灌注量、加快组织微血管再生,还可提高肌肉组织的血管形成,增加肌肉的血流灌注量.目的:将碱性成纤维细胞生长因子复合于聚乳酸/胶原支架中,修复兔尿道缺损,提升组织工程支架诱导尿道再生的能力.方法:制备电纺聚乳酸/胶原尿道支架与负载碱性成纤维细胞生长因子的电纺聚乳酸/胶原支架,分别命名为对照支架与实验支架,检测实验支架的体外缓释性能.将第3代兔脂肪间充质干细胞接种于两种支架表面7 d,分别进行CCK-8实验、细胞黏附实验与细胞活死染色.取成年雄性新西兰大白兔24只,建立长约5 cm的尿道缺损模型,随机分2组治疗,每组12只,分别植入对照支架+脂肪间充质干细胞复合体与实验支架+脂肪间充质干细胞复合体,术后12,24周分别进行逆行尿道造影与尿道组织学观察.结果与结论:①体外缓释实验:在前6 d时,实验支架中的碱性成纤维细胞生长因子以平均2.5 ng/d的速率释放,在第7-14天时以平均1.52 ng/d的速率释放,此后以平均1.12 ng/d的速率释放,至第21天后释放速率逐步下降.②体外细胞实验显示,实验支架上的细胞增殖速率快于对照支架(P < 0.05);脂肪间充质干细胞可黏附于两种支架表面,生长状态良好并伸出伪足,其中实验支架上的细胞增殖迅速;实验支架上的细胞存活率高于对照支架(P < 0.05).③体内实验结果:术后24周尿道造影下可见,实验支架组未见尿道狭窄,对照支架组可见轻度的尿道狭窄.术后24周组织学观察显示,实验支架组尿道组织可见较厚且较完整的上皮层,可见大量肌纤维束与血管形成;对照支架组尿道组织上皮层形成较薄,也可见少量的肌纤维束与血管形成.④结果表明,采用负载碱性成纤维细胞生长因子的电纺聚乳酸/胶原支架修复兔尿道缺损可促进移植物局部血管形成,改善局部尿道微环境,促进尿道再生.

摘要： 背景:碱性成纤维细胞生长因子是维持人胚胎干细胞长期培养的重要生长因子,提供来源可靠、无动物源性以及低成本的碱性成纤维细胞生长因子产品对维持人胚胎干细胞生长以及规模化制备至关重要.目的:为了排除动物源性或者其他细菌类的潜在干扰,该研究评估植物源性碱性成纤维细胞生长因子对人胚胎干细胞生长与分化的影响.方法:以人胚胎干细胞系(H9)作为研究材料,采用免疫荧光染色、流式细胞仪检测、碱性磷酸酶染色、RT-PCR方法比较不同质量浓度植物源性碱性成纤维细胞生长因子维持干细胞特性的能力以及其向外、中、内三胚层分化和胰腺细胞分化的潜能.结果 与结论:植物源性碱性成纤维细胞生长因子(4μg/L和0.4μg/L)和常规碱性成纤维细胞生长因子(4μg/L)都能很好地维持人胚胎干细胞的生长和分化能力,提示植物源性碱性成纤维细胞生长因子可以作为有效支持人胚胎干细胞生长和分化的备选产品.

摘要： 背景:碱性成纤维细胞生长因子是维持人胚胎干细胞长期培养的重要生长因子,提供来源可靠、无动物源性以及低成本的碱性成纤维细胞生长因子产品对维持人胚胎干细胞生长以及规模化制备至关重要。目的:为了排除动物源性或者其他细菌类的潜在干扰,该研究评估植物源性碱性成纤维细胞生长因子对人胚胎干细胞生长与分化的影响。方法:以人胚胎干细胞系(H9)作为研究材料,采用免疫荧光染色、流式细胞仪检测、碱性磷酸酶染色、RT-PCR方法比较不同质量浓度植物源性碱性成纤维细胞生长因子维持干细胞特性的能力以及其向外、中、内三胚层分化和胰腺细胞分化的潜能。结果与结论:植物源性碱性成纤维细胞生长因子(4μg/L和0.4μg/L)和常规碱性成纤维细胞生长因子(4μg/L)都能很好地维持人胚胎干细胞的生长和分化能力,提示植物源性碱性成纤维细胞生长因子可以作为有效支持人胚胎干细胞生长和分化的备选产品。

摘要： 宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,其发病率居于妇科恶性肿瘤首位[1]。临床上治疗宫颈癌的方法有手术治疗、放疗和化疗。近年临床发现,同期放化疗可提高治疗效果,降低转移风险,但因个体差异放化疗敏感性及预后存在显著差异。随着临床实践积累及治疗技术发展,个性化综合治疗成为宫颈癌治疗趋势[2]。因此,确认与宫颈癌放化疗敏感性及预后相关的因子,根据患者相关因子水平预测其治疗效果及预后情况,对实施个性化治疗方案具有非常重要的意义[3]。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibro-blast growth factor,bFGF)具有强烈的血管生成作用,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有高度特异性,能够促进血管内皮细胞迁移、增殖及血管形成,bFGF和VEGF在促进血管形成方面具有协同作用[4]。

摘要： 目的探究胰岛素生长因子-1(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)在支气管哮喘(简称哮喘)患儿血清中含量及临床意义。方法选择2019年1月至2020年5月本院儿科收治的哮喘患儿120例(观察组)和同期健康体检同龄段儿童33名(对照组)为对象。观察组依据患儿病情分为间歇发作组、轻度持续组、中度持续组、重度持续组。测定比较各组血清IGF-1、bFGF、TGF-β1、EGF含量,Pearson法分析血清生长因子含量与最大呼气峰流速(PEFpre)、第1秒用力呼吸容积(FEV1pre)百分比间相关性;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清指标在儿童哮喘诊断中的效能。结果与对照组比,观察组各分组患儿血清IGF-1、bFGF、TGF-β1、EGF表达水平明显升高(P<0.01),且随着病情加重,血清生长因子含量明显增加(P<0.05)。Pearson法分析显示,患儿血清IGF-1、bFGF、TGF-β1、EGF表达水平与肺功能指标PEFpre、FEV1pre间均呈显著负相关(P<0.01);ROC曲线分析显示,血清IGF-1、bFGF、TGF-β1、EGF均在儿童哮喘临床诊断中具有存在一定价值(P<0.05),且4项指标联合检能明显提高儿童哮喘诊断灵敏度(81.7%),且特异度无下降(97.0%)。结论哮喘患儿体内IGF-1、bFGF、TGF-β1、EGF上调表达,且与患儿肺功能呈负相关,可作为哮喘诊断及病情判断的重要指标。

摘要： 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体对卵巢癌裸鼠移植瘤癌细胞转移和移植瘤组织血管新生的影响。方法60只BALB/c裸鼠通过腹腔注射卵巢癌细胞建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型。1周后,60只卵巢癌移植瘤模型小鼠按照随机数字表法均分为3组,即模型组、溶剂组和bFGF抗体组。模型组不进行治疗,溶剂组腹腔注射bFGF抗体溶剂治疗,bFGF抗体组腹腔注射bFGF抗体治疗,共治疗7周。每组取10只小鼠让其自然死亡,记录并比较生存时间。实验第8周,每组安乐死10只小鼠。比较各组小鼠体重,卵巢癌移植瘤体积和重量,卵巢癌细胞转移结节数、转移器官数和转移病灶总数,以及卵巢癌移植瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)表达水平、微血管数目以及凋亡细胞率。结果bFGF抗体组小鼠各时间点体重和最终生存时间均显著高于模型组和溶剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。bFGF抗体组小鼠腹水体积、卵巢移植瘤体积和重量、癌细胞转移结节数、转移器官数和转移病灶总数均显著低于模型组和溶剂组,差异均有统计学意义(P<0.05);bFGF抗体组小鼠卵巢癌抑瘤率高于溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05)。bFGF抗体组小鼠移植瘤组织VEGF阳性细胞率和MVD数均显著低于模型组和溶剂组,而卵巢癌细胞凋亡率显著高于模型组和溶剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。bFGF抗体组卵巢癌细胞转移结节数、转移器官数和转移灶总数均显著低于模型组和溶剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论bFGF对卵巢癌移植瘤具有抑制作用,可显著抑制卵巢癌细胞体内转移和卵巢癌移植瘤组织新血管的生成。

摘要： 目的观察给予新生SD(Sprague Dawley)大鼠高胆红素血症模型给予碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)干预后受损伤脑组织Bcl-2、Bax表达的变化。方法选取120只7 d龄新生SD大鼠,随机按窝系、体质量分为3组:正常空白对照组(CG组)、高胆红素血症组(EG1组)和bFGF干预组(EG2组),每组40只大鼠。将胆红素溶液注入SD大鼠腹腔建立高胆红素血症模型,模型建立后EG2组EG1组腹腔注射bFGF溶液干预,CG组腹腔注射等体积生理盐水,分别于不同时间(6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)分批处死大鼠,剖取海马组织采用苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化法观察Bcl-2、Bax表达,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Tunnel)测量细胞凋亡情况。结果SD大鼠神经异常行为表现证实造模成功。EG2组大鼠脑损伤及神经行为异常程度均较EG1组减轻。EG1组、EG2组海马区神经细胞凋亡率增加,EG2组较轻;Bcl-2及Bax表达较CG组均增多,EG2组Bcl-2表达增加,EG1组Bax增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论bFGF可减轻胆红素源性脑损伤,发挥一定的神经细胞保护作用。

摘要： 创面愈合是复杂的细胞学和生物化学的过程,包括了炎症反应、血管再生、细胞分裂增殖与移行及细胞外基质的重建过程,任何影响这些过程的因素都会促进或延缓创面的愈合.成纤维细胞生长因子是一类具广泛生物学活性的肽类物质,按其等电点(PI)的不同,可分为碱性成纤维细胞生长因子和酸性成纤维细胞生长因子.碱性成纤维细胞生长因子对源于中胚层和神经外胚层的细胞具有有效的促有丝分裂活性,对其它外胚层细胞及内胚层衍生物也有促进有丝分裂的活性.国内近来关于碱性成纤维细胞生长因子对创面愈合的治疗作用的报道，大多局限于临床应用观察，鲜有较为系统的实验指标统计一和病理研究。本实验结合动物实验及临床应用，通过一系列检测指标进行检测。从组织形态、细胞的增殖周期，细胞外基质合成变化等方面研究碱性成纤维细胞生长因子对创面愈合主要方面影响，以便更客观准确地对其治疗作用进行评价，为其更有效地应用于临床提供理论及实验依据。

摘要： 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对过氧化氢(H2O2)诱导的骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)凋亡的保护作用,并探讨其机制. 方法：用bFGF干预H2O2处理的BMSCs,MTT法检测bFGF处理的BMSCs活性,LDH试剂盒检测细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,TUNEL法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清液中IL-6和TNF-α的表达及细胞中Bcl-2/Bax比值. 结果：bFGF能显著改善细胞活性(P＜0.05),降低LDH漏出量及凋亡率(P＜0.05),减少细胞上清液中IL-6和TNF-α的表达(P＜0.05),上调细胞的Bcl-2/Bax比值(P＜0.05). 结论：bFGF可能通过减少细胞IL-6和TNF-α的表达以及上调Bcl-2/Bax比值,从而增强BMSCs的抗H2O2损伤能力.

摘要： 目的：放射性皮炎是肿瘤患者治疗中常见的一种反应之一,严重影响到肿瘤患者治疗进程.本研究探讨Urgo水凝胶治疗Wistar大鼠Ⅱ度放射性皮炎愈合过程中创面愈合率及其机制,为临床治疗放射性皮炎提供新方法. 方法：建立Wistar大鼠Ⅱ度放射性皮炎模型,随机分成3组,实验组给予Ugro水凝胶0.2mm涂层,比亚芬组(传统组)给予比亚芬0.2mm涂层,生理盐水组(对照组)给予0.9％生理盐水喷雾创面处理.通过HE染色、免疫组化及图像分析,测定各组Wistar大鼠放疗后7、14、21和28d创面肉芽组织、创面面积及创面中碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达. 结果：X射线放射后大鼠出现脱毛或皮肤溃疡现象,实验组创面面积在第21天为(0.900±0.07)cm2,低对照组(2.317±0.28)cm2和传统组(1.550±0.08)cm2,差异有统计学意义,F=20.4,P＜0.05;实验组创面面积在第28天为(1.061±0.054)cm2,明显低于对照组(2.520±0.14)cm2和传统组(1.453±0.08)cm2,差异有统计学意义,F=68.84,P＜0.05.实验组第28天bFGF阳性表达量为55.00±1.00,高于传统组43.60±1.81,差异有统计学意义,t=5.52,P=0.0006.实验组第28天TGF-β1阳性表达量为51.00±3.69,高于传统组36.40±4.41,差异有统计学意义,t=2.54,P=0.035. 结论：Ugro水凝胶能加快Wistar大鼠Ⅱ度放射性皮炎创面的愈合,减轻创面的炎症反应,促进弹力纤维和胶原的修复,其机制与表皮生长因子的表达有关.

摘要： 目的：探讨子宫内膜异位组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达及临床意义.rn 方法：采用免疫组织化学法检测子宫内膜异位组织标本中的bFGF蛋白表达情况,分析bFGF的表达与子宫内膜异位组织及在位内膜组织的关系.rn 结果：bFGF在异位内膜组织的阳性表达率88.6％,明显高于在位内膜组织的阳性表达率69.4％,差异有统计学意义(P＜0.05),bFGF在正常子宫内膜组织中阳性表达率为31.6％,明显低于在位内膜组织(P＜0.05).bFGF在异位内膜组织及在位内膜组织中的增生期及其分泌期中的表达无统计学意义(P＞0.05),但正常内膜组织中增生期及分泌期的表达有明显的差异(P＜0.05).rn 结论：bFGF在子宫内膜异位症的发生发展过程中起了重要作用,与异位内膜的生长、侵润转移及预后密切相关.

摘要： 利用组织工程技术制备聚乙酸羟基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolic acid)(PLGA))纤维支架基因缓释系统,通过材料缓慢降解释放目的基因(骨形态发生蛋白2(Bonemorphogenetic protein2,BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growthfactor,FGF-2)并转染种子细胞,促进牙周组织修复.

摘要： 创面愈合是机体在遭受创伤后的一种组织修复功能.生长因子参与组织修复进程,并在其中起重要作用,其具有促进角质细胞分化和上皮的再生作用,临床上应用于烧伤治疗已有诸多报道.1997年6月～2000年1月随机选择176例住院和门诊烧伤患者,分别应用b-FGF(Basic Fibroblast Growth Factor,碱性成纤维细胞生长因子)配合碘伏和单用碘伏治疗并作对照观察,进行比较分析.

摘要： 目的：观察人重组碱性成纤维细胞生长因子(rf-bFGF)对微创泌尿外科手术切口的影响及临床疗效.方法：将2015年2月至2015年10月146例接受泌尿外科微创手术患者随机分为实验组和对照组,对照组采用常规切口治疗,实验组在常规切口治疗基础上加用rf-bFGF.观察两组切口红肿、感染例数及切口愈合时间,计算甲级愈合率.结果：实验组在术后第3天切口炎症情况、切口愈合时间及甲级愈合率方面均优于对照组(P＜0.05),两组在术后7天感染率方面无统计学差异(P＞0.05).结论：应用人重组碱性成纤维细胞生长因子能明显促进泌尿外科微创手术切口创面愈合,治疗效果好,有推广应用价值.

摘要： 利用GC修饰PLGA微球制备出载bFGF/CHA的PLGA-GC微球，该微球具有时序释放功能、良好的抑菌性能和生物相容性，有望作为药物时序释放系统用于组织再生修复。

摘要： 利用GC修饰PLGA微球制备出载bFGF/CHA的PLGA-GC微球，该微球具有时序释放功能、良好的抑菌性能和生物相容性，有望作为药物时序释放系统用于组织再生修复。

摘要： 利用GC修饰PLGA微球制备出载bFGF/CHA的PLGA-GC微球，该微球具有时序释放功能、良好的抑菌性能和生物相容性，有望作为药物时序释放系统用于组织再生修复。

摘要： 本发明公开了环（Ala-Thr-Leu-Gly-Gly-Gly-Ser-Pro-Leu-Leu-Gln）肽，其可用于抑制由bFGF诱导的细胞增殖和血管增生以及用于治疗结肠癌等方面。本发明还公开了包含该环肽的药物组合物和制备方法等。

摘要： 本发明公开了环(Ala-Thr-Leu-Gly-Gly-Gly-Ser-Pro-Leu-Leu-Gln)肽，其可用于抑制由bFGF诱导的细胞增殖和血管增生以及用于治疗结肠癌等方面。本发明还公开了包含该环肽的药物组合物和制备方法等。

摘要： 本发明涉及一种生物工程系统，特别是大肠杆菌宿主。所述宿主整合有DNA构建体组合用来生产至少第一多肽。第一多肽可以是真碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。DNA构建体中有插入片段，该插入片段包括，例如，按顺序，表达盒、内含肽和编码第一多肽的DNA。所述DNA构建体被配置为影响宿主胞内分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在宿主的细胞质中和/或外排到培养宿主的细胞培养基中。

摘要： 本发明涉及一种生物工程系统，特别是大肠杆菌宿主。所述宿主整合有DNA构建体组合用来生产至少第一多肽。第一多肽可以是真碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。DNA构建体中有插入片段，该插入片段包括，例如，按顺序，表达盒、内含肽和编码第一多肽的DNA。所述DNA构建体被配置为影响宿主胞内分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在宿主的细胞质中和/或外排到培养宿主的细胞培养基中。

摘要： 本发明公开了一种提高间充质干细胞培养液中碱性成纤维细胞生长因子含量的方法，该方法在细胞扩增至融合度70%‑80%时，使用注射用生理盐水更换培养液，12小时后，收集细胞上清待用，将细胞使用胰蛋白酶进行消化，收集细胞；将收集的细胞与细胞上清混合，进行低速离心，离心转速为500转‑8000转/分钟，离心结束后收集上清，并进行过滤，去除细胞碎屑残留。本发明的提高间充质干细胞培养液中碱性成纤维细胞生长因子含量的方法通过将细胞与培养上清共同低速离心，从而使得干细胞培养上清液中碱性成纤维细胞生长因子的含量明显提高；该方法无需使用高速离心机，且细胞不用裂解，能够减少成本，减少繁琐步骤。

摘要： 本发明提供一种氧调控性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因序列SEQ ID No.1，以及该基因序列修饰细胞的方法，该方法包括：步骤1、提供基因序列SEQ ID No.1；步骤2、将步骤1中得到的基因序列SEQ ID No.1构建为重组腺相关病毒载体；步骤3、将所构建的重组腺相关病毒载体融合到干细胞中，得到氧调控性碱性成纤维细胞生长因子修饰控性bFGF基因表达载体，实现特定条件下的可调控性表达，在常氧和低氧环境下不同表达，可避免传统基因治疗载体长期过量表达bFGF所产生的组织过度增生等诸多副作用及致瘤的风险。

摘要： 本发明公开了一种表达碱性成纤维细胞生长因子的胎儿肝脏基质细胞株。该胎儿肝脏基质细胞株是携带有碱性成纤维细胞生长因子基因的重组胎儿肝脏基质细胞株。实验证明，本发明的重组胎儿肝脏基质细胞可高效产生分泌型的碱性成纤维细胞生长因子，以该细胞作饲养层细胞体外培养人胚胎干细胞，能在无外源碱性成纤维细胞生长因子的条件下维持人胚胎干细胞增殖并保持其干性。本发明的重组胎儿肝脏基质细胞及其构建方法将为构建低成本(减少了外源碱性成纤维细胞生长因子的引入)，安全高效(可替代动物源性细胞作饲养层细胞)的人胚胎干细胞的体外培养体系及造血细胞发育分化方面的研究提供适宜的微环境，应用前景广阔。

摘要： 本发明涉及一种碱性成纤维细胞生长因子微球及其制备方法。本发明提供了一种制备微球的方法，包括以下步骤：提供有机相，所述有机相包含溶解于有机溶剂中的聚己内酯和任选的有机相表面活性剂；提供外水相，所述外水相包含溶解于水中的外水相表面活性剂；提供内水相，所述内水相包含溶解于水中的碱性成纤维细胞生长因子和任选的内水相表面活性剂；由内水相和有机相得到油包水初乳；由油包水初乳和外水相得到水包油包水复乳；使复乳中的有机溶剂挥发，得到微球；以及收集微球。本发明还提供了一种微球，包括外壳和内核，所述外壳包含聚己内酯，所述内核包含碱性成纤维细胞生长因子。

摘要： 本发明公开了一种碱性成纤维细胞生长因子制备方法，包括以下步骤：融合质粒构建；工程菌构建；将上述工程菌培养于培养基，当大肠杆菌的OD值达到2值，温度调为32°C诱导16小时，收集菌体，破碎，离心取上清；将上清37°C下水浴加热，37°C离心，取沉淀部分；向沉淀部分加入预冷的PBS后负40度冷冻2小时，超声溶解，低温离心取溶解部分；溶解部分加入带自备的His‑Tag的EK酶，冰水中酶切12小时；酶切完成后，蛋白质溶液过Ni‑NTA层析柱，ELP‑IDP标签以及带His‑Tag的EK酶将结合至层析柱上，收集流穿部分。bFGF在促进细胞生长增殖方面应用。本发明所制备bFGF的可溶性得到显著提升；同时大幅度简化纯化步骤，具有良好的经济价值。

摘要： 本发明提供一种从人胎盘中大规模制备碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的方法，包括以下步骤：步骤(1).清洗；步骤(2).匀浆；步骤(3).酸抽提；步骤(4).离心；步骤(5).澄清、过滤；步骤(6).浓缩更换缓冲；步骤(7).经过阳离子交换层析、肝素亲和层析制得人胎盘碱性成纤维细胞生长因子。本发明1kg人胎盘可纯化得到高纯度的人碱性成纤维细胞生长因子约100μg(Bradford法)，工艺经多次试验验证，重复性好、稳定性好；提高了收率，降低了成本；且采用低速离心利于工业化生产制备，有效避免了经典的硫酸铵分级沉淀法在工业化制备上不易操作和硫酸铵对环境污染大的缺点，在工业上大规模制备具有很好的应用前景。