自体外周血干细胞

摘要： 背景:目前国内已有较多采用利妥昔单抗联合自体外周血干细胞移植治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的临床报道,但其作用机制还不是很明确。目的:对比分析利妥昔单抗联合自体外周血干细胞移植与利妥昔单抗治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的效果与相关因子水平的变化。方法:选择96例弥漫大B细胞淋巴瘤患者为研究对象,其中男62例,女34例,年龄20-75岁。48例采用利妥昔单抗联合化疗方案(对照组),另48例采用利妥昔单抗联合化疗、自体外周血造血干细胞移植方案(试验组),对比两组临床疗效、不良反应发生情况,随访记录患者生存期,治疗前、化疗6个疗程后及移植后6个月,检测两组血清血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子及白细胞介素17水平。结果与结论:①试验组患者均采集到了足够的外周血造血干细胞,回输CD34+细胞数为(3.6±0.6)×106/kg,回输后中性粒细胞植入时间为(11.1±1.2)d,血小板植入时间为(12.3±2.4)d;②试验组治疗有效率明显高于对照组(81%,56%,P0.05);⑤治疗前与化疗6个疗程后,两组间3种细胞因子水平比较差异无显著性意义;与治疗前比较,两组化疗6个疗程后的白细胞介素17水平升高(P<0.05),血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平降低(P<0.05);与化疗6个疗程后比较,试验组移植后6个月的白细胞介素17水平升高(P<0.05)、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平降低(P<0.05),对照组3种细胞因子水平无显著变化(P<0.05);⑥结果表明,利妥昔单抗联合自体外周血干细胞移植可提高弥漫大B细胞淋巴瘤患者的生存期,其作用途径可能与调控白细胞介素17、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子水平有关。

摘要： 大剂量化疗联合自体外周血干细胞(PBSC)移植是淋巴瘤和多发性骨髓瘤(MM)的有效治疗手段。PBSC的常规动员方案包括粒细胞集落刺激因子(G-CSF)单用或联合化疗。部分患者使用常规动员方案无法采集到目标剂量的CD34+细胞,无法进行造血干细胞(HSC)移植治疗。因此,针对动员不佳患者以及降低具有危险因素患者动员失败的风险,根据个体情况有效调整动员策略十分必要。

摘要： 目的 探讨自体外周血干细胞移植对心肌梗死患者血清1-磷酸鞘氨醇(S1P)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 选取2016年2月至2018年11月于郑州市第七人民医院心内科确诊并住院治疗的心肌梗死患者76例为研究对象,采用随机数字表法将分为治疗组和对照组两组(每组各38例).对照组患者给予常规治疗,治疗组在此治疗基础上给予自体外周血干细胞移植治疗.观察治疗前后两组患者的血清S1P、TGF-β1表达水平变化、心功能各项指标及治疗后不良心血管事件的发生率.结果 治疗后两组患者的血清S1P、TGF-β1表达水平及左室舒张末期容积(LVEDV)、心室壁运动积分指数(WMSI)均显著低于治疗前(P0.05),治疗组心力衰竭(心衰)再住院的发生率显著少于对照组(P<0.05).结论 自体外周血干细胞移植可降低心肌梗死患者血清S1P、TGF-β1表达水平,改善心功能,降低不良心血管事件的发生.

摘要： 大剂量化疗联合自体外周血干细胞(PBSC)移植是淋巴瘤和多发性骨髓瘤(MM)的有效治疗手段。PB-SC的常规动员方案包括粒细胞集落刺激因子(G-CSF)单用或联合化疗。部分患者使用常规动员方案无法采集到目标剂量的CD34+细胞,无法进行造血干细胞(HSC)移植治疗。因此,针对动员不佳患者以及降低具有危险因素患者动员失败的风险,根据个体情况有效调整动员策略十分必要。普乐沙福是一种新型动员剂,联合G-CSF可显著提高CD34+细胞采集量,降低动员失败率的同时缩短采集天数,进而提高自体造血干细胞移植(ASCT)效率,改善患者长期预后。

摘要： BACKGROUND: Although clinical methods for autologous peripheral blood stem cell separation and identification arerelatively more, there is no unified standard. Moreover, little is reported on immune effects on lung adenocarcinomaduring autologous peripheral blood stem cell transplantation.OBJECTIVE: To study the effect of autologous peripheral blood stem cell transplantation on immunological function oflung adenocarcinoma rats by exploring the separation and identification methods of autologous peripheral blood stemcells.METHODS: The mononuclear cells were isolated from the peripheral blood of Wistar rats by density gradientcentrifugation method and then identified. Eighteen Wistar rats were randomly divided into routine treatment group andcell transplantation group, with nine rats in each group. Animal models of lung adenocarcinoma were established in therats, and underwent no treatment in the routine treatment group but injection of autologous peripheral blood stem cellsuspension (0.2 mL, 2.5×106/L) via the tail vein in the cell transplantation group. Immune indicators were detected in twogroups after treatment. Three rats from each group were anesthetized and scarified at 4, 10, 14 days after treatment,respectively. Afterwards, we detected the effects of autologous peripheral blood stem cell transplantation onimmunological function of lung adenocarcinoma rats.RESULTS AND CONCLUSION: Newly isolated mononuclear cells from rat peripheral blood showed a round or ovalshape and were relatively small in size. After 5 days of culture, autologous peripheral blood stem cells grew rapidly, andthe round cells began to spread to both ends and became spindle-shaped, thereby forming small colonies. Autologousperipheral blood stem cells induced in vitro experienced three stages successively: cell arrest, logarithmic and plateauphases. Flow cytometry showed that sorted cells were identified as autologous peripheral blood stem cells by expressingCD90, CD133 and Flk-1. After 4, 10 and 14 days culture, the expression of CD133 increased first and then descended,and Flk-1 showed an increasing trend. Compared with the routine treatment group, the expression of tumor necrosisfactor-α induced protein 6 in the cell transplantation group was significantly higher (P < 0.05), while the expression ofnuclear factor κB was significantly lower (P < 0.05). In conclusion, the isolation and identification methods of autologousperipheral blood stem cells are simple and can be used to secrete a large number of nutritional factors in the treatment oflung adenocarcinoma, which can enhance body immunity in the treatment.%背景:目前临床上自体外周血干细胞分离鉴定方法相对较多,尚缺乏统一的标准.同时自体外周血干细胞在肺腺癌移植治疗过程中对免疫的影响也缺乏报道.目的:探讨自体外周血干细胞的分离、鉴定方法,观察自体外周血干细胞移植对肺腺癌大鼠免疫功能的影响.方法:采用密度梯度离心法从Wistar大鼠外周血分离单个核细胞并进行鉴定.将18只Wistar大鼠随机分为常规处理组和细胞移植组,每组9只,建立肺腺癌模型,常规处理组不给予任何方法治疗,细胞移植组经尾静脉注入0.2 mL含有2.5×106 L-1的自体外周血干细胞悬液,大鼠治疗后检测其免疫指标.2组大鼠分别于治疗4,10,14 d后麻醉处死(n=3),观察自体外周血干细胞移植治疗对肺腺癌免疫行为的影响.结果与结论:①从大鼠外周血新分离的单个核细胞呈现圆形或者椭圆形,且体积相对较小;自体外周血干细胞培养5d后细胞生长迅速,圆形细胞开始向两端伸展,并呈现梭形,从而能够形成较小的细胞集落;自体外周血干细胞体外诱导培养后先后经历了生长滞缓期、对数增殖期以及生长平台期;②流式细胞仪分选纯化的细胞,干细胞因子受体CD90、CD133及Flk-1均有表达,提示分离培养获得的细胞为自体外周血干细胞;③自体外周血干细胞培养4,10,14 d后检测其表面抗原表达结果显示,CD90,CD133呈现先升高后下降趋势;Flk-1呈现上升趋势;④在移植治疗后第4,10,14天,细胞移植组免疫指标肿瘤坏死因子诱导蛋白6显著高于常规处理组(P<0.05),而核因子κB显著低于常规处理组(P<0.05);⑤结果提示,自体外周血干细胞分离、鉴定方法比较简单,并且应用于治疗肺腺癌能够分泌大量营养因子,治疗过程中能够增强机体免疫.

摘要： 背景：目前临床上自体外周血干细胞分离鉴定方法相对较多,尚缺乏统一的标准。同时自体外周血干细胞在肺腺癌移植治疗过程中对免疫的影响也缺乏报道。目的：探讨自体外周血干细胞的分离、鉴定方法,观察自体外周血干细胞移植对肺腺癌大鼠免疫功能的影响。方法：采用密度梯度离心法从Wistar大鼠外周血分离单个核细胞并进行鉴定。将18只Wistar大鼠随机分为常规处理组和细胞移植组,每组9只,建立肺腺癌模型,常规处理组不给予任何方法治疗,细胞移植组经尾静脉注入0.2 mL含有2.5×106 L~（-1）的自体外周血干细胞悬液,大鼠治疗后检测其免疫指标。2组大鼠分别于治疗4,10,14 d后麻醉处死（n=3）,观察自体外周血干细胞移植治疗对肺腺癌免疫行为的影响。结果与结论：（1）从大鼠外周血新分离的单个核细胞呈现圆形或者椭圆形,且体积相对较小;自体外周血干细胞培养5 d后细胞生长迅速,圆形细胞开始向两端伸展,并呈现梭形,从而能够形成较小的细胞集落;自体外周血干细胞体外诱导培养后先后经历了生长滞缓期、对数增殖期以及生长平台期;（2）流式细胞仪分选纯化的细胞,干细胞因子受体CD90、CD133及Flk-1均有表达,提示分离培养获得的细胞为自体外周血干细胞;（3）自体外周血干细胞培养4,10,14 d后检测其表面抗原表达结果显示,CD90,CD133呈现先升高后下降趋势;Flk-1呈现上升趋势;（4）在移植治疗后第4,10,14天,细胞移植组免疫指标肿瘤坏死因子诱导蛋白6显著高于常规处理组（P〈0.05）,而核因子κB显著低于常规处理组（P〈0.05）;（5）结果提示,自体外周血干细胞分离、鉴定方法比较简单,并且应用于治疗肺腺癌能够分泌大量营养因子,治疗过程中能够增强机体免疫。

摘要： 目的 :探索分析针对糖尿病下肢血管病变患者实施自体外周血干细胞移植结合介入治疗的临床作用和效果.方法 :将我院收治的100例2型糖尿病下肢血管病变患者作为观察对象并实施分组治疗,对照组实施介入治疗,观察组均实施自体外周血干细胞移植结合介入治疗,将临床效果进行对比.结果 :两组治疗后踝肱指数均明显增加,经皮氧分压也明显增加,跛行距离显著性增加,且观察组优于对照组(P<0.05).实施治疗后6个月内,两组患者的患肢痛感以及冷感均有不同程度改善,观察组总有效率明显超过对照组(P<0.05).所有溃疡患者经相应治疗后均逐渐愈合,坏疽术后一期均愈合.结论 :针对糖尿病下肢血管病变患者实施介入治疗结合自体外周血干细胞移植,有助于加速其患肢侧支循环的建立,可以有效减轻患肢缺血症状,效果显著,值得推广应用.

摘要： 背景：研究表明外周血干细胞具有高度分化潜能，可分化成血管内皮细胞，促进血管再生，改善侧支循环，从而达到治疗肢体缺血的目的。　　目的：观察糖尿病下肢血管病变患者腔内治疗结合自体外周血干细胞移植的临床效果。　　方法：收集2011年3月至2014年12月住院治疗的糖尿病下肢血管病变患者50例，其中25例采取腔内治疗和自体外周血干细胞移植(联合组)，另外25例只采取腔内治疗(对照组)。所有患者于治疗后1，6，12个月随访，记录患肢疼痛、冷感等主观评分，测定踝肱指数、经皮氧分压、跛行距离等客观指标。结果与结论：①两组患者治疗后踝肱指数均明显增加，尤其是治疗后1个月时增加显著，治疗后6，12个月有所下降，但与治疗前比较差异均有显著性意义(P 0.05)；②两组患者治疗后经皮氧分压、跛行距离也明显增加，治疗后1，6，12个月与治疗前比较差异均有显著性意义(P 0.05). At 1, 6, and 12 months after surgery, both of transcutaneous oxygen partial pressure and claudication distance in the two groups were significantly increased compared with those before treatment (P<0.05). Furthermore, compared with the control group, these two indicators in the combination group were significantly increased (P<0.05). Within 12-month follow-up, affected limb pain and cold sensation were improved in the two groups, especial y in the combination group. Inevitably, three cases had hypocalcemia during the col ection of peripheral blood stem cel s, and two cases developed fever and 3 cases appeared to have local exudation after surgery. All these symptoms were released by symptomatic treatments, respectively. In conclusion, percutaneous transluminal angioplasty combined with autologous peripheral blood stem cel transplantation for diabetic lower extremity vascular lesions can promote the establishment of affected limb col ateral circulation, to decrease the risk of limb ischemia, which achieves significant outcomes than percutaneous transluminal angioplasty used alone.

摘要： 背景：研究表明外周血干细胞具有高度分化潜能,可分化成血管内皮细胞,促进血管再生,改善侧支循环,从而达到治疗肢体缺血的目的。目的：观察糖尿病下肢血管病变患者腔内治疗结合自体外周血干细胞移植的临床效果。方法：收集2011年3月至2014年12月住院治疗的糖尿病下肢血管病变患者50例,其中25例采取腔内治疗和自体外周血干细胞移植（联合组）,另外25例只采取腔内治疗（对照组）。所有患者于治疗后1,6,12个月随访,记录患肢疼痛、冷感等主观评分,测定踝肱指数、经皮氧分压、跛行距离等客观指标。结果与结论：（1）两组患者治疗后踝肱指数均明显增加,尤其是治疗后1个月时增加显著,治疗后6,12个月有所下降,但与治疗前比较差异均有显著性意义（P〈0.05）。治疗后1,6,12个月时两组比较差异无显著性意义（P〉0.05）;（2）两组患者治疗后经皮氧分压、跛行距离也明显增加,治疗后1,6,12个月与治疗前比较差异均有显著性意义（P〈0.05）,治疗后1,6,12个月时联合组经皮氧分压、跛行距离高于对照组,差异有显著性意义（P〈0.05）;（3）治疗后12个月内患肢痛感和冷感均有不同程度改善,联合组改善更明显;（4）外周血干细胞采集过程中出现低钙血症3例,移植后出现发热2例,局部渗血3例,对症治疗后好转;（5）结果表明,糖尿病下肢血管病变患者行腔内治疗结合自体外周血干细胞移植加速患肢侧支循环的建立,从而减轻患肢缺血症状,因此能取得比单独采取腔内治疗更好的临床效果。

摘要： 目的:为了探索自体外周血干细胞移植在恶性血液病中的临床意义.方法:比较白血病病人APBSCT与联合化疗的治疗费用.结果:自体外周血干细胞移植(APBSCT)是近几年发展起来的治疗恶性血液病新技术,已逐渐成为白血病根治性治疗手段之一.单纯化疗能延长病人生存期,但总体费用昂贵,生存期低于APBSCT.APBSCT虽然单次费用较高,然而,耗费与疗效分析优于联合化疗.APBSCT之所以能根治恶性肿瘤,在于某些肿瘤的疗效与药物剂量正相关.APBSCT预处理的目的就是提供高浓度的抗癌药物杀灭肿瘤中对常规化疗部分敏感的细胞株,以及尽量避免耐药株的产生,消灭体内残存的白血病细胞,以避免复发,而回输的造血干细胞在一定程度上减轻了其骨髓毒性作用.

摘要： 本发明涉及一种血液病自体外周血造血干细胞采集结果预测方法，首先收集血液病患者自体外周造血干细胞采集前的基本信息、患病信息、血液指标等信息，采集后CD34+和单个核细胞(MNC)计数；分析外周血造血干细胞采集前的各项指标与采集结果的相关性；选取具有相关性的指标作为模型输入参数，采集后CD34+和MNC计数作为模型输出参数，对最小二乘支持向量机(LSSVM)模型进行训练以建立预测模型；选取测试样本，将相关参数输入训练后的LSSVM模型，模型输出结果为患者外周造血干细胞采集预测结果，即CD34+和MNC计数。根据模型预测误差设置安全系数，以此提高血液病自体外周血造血干细胞采集的成功率。

摘要： 本发明提供一种自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖方法，包括：取人脂肪间充质干细胞经过原代分离培养和传代培养后，进行无血清化，获得多代培养的无血清培养液和多代培养的传代干细胞；合并多代培养的传代干细胞，离心收集得到干细胞上清液；并且，合并所述多代培养的无血清培养液，得到合并培养液；将所述合并培养液和所述细胞上清液混合，再与无血清培养液混合，作为外周血干细胞培养基进行培养，以进行自体脂肪干细胞共培养促进外周血造血干细胞增殖。本发明通过自身的脂肪干细胞代替异基因外周血造血干细胞，作为自身造血干细胞的稳定的来源，方法简单，费用低，大大提高了造血干细胞总数，从而满足了临床的需求。

摘要： 本发明涉及细胞培养基的技术领域，一种利于自体骨髓间充质干细胞在体外培养扩增的细胞培养基，本发明是在细胞培养基的配制中用加入自体的PL血小板裂解液，用加入PL血小板裂解液的细胞培养基培养自体的骨髓间充质干细胞，可以保证细胞在体外培养时细胞的增殖能力，同时也保证了骨髓间充质干细胞在体外培养扩增时不受外源性的污染，也免于异体细胞治疗疾病时的免疫排斥，有利于在临床上用自体细胞治疗自身疾病的应用。

摘要： 本发明公开了一种自体外周血培养免疫细胞的培养方法，属于细胞培养技术领域，以解决冷冻保存过程中由于技术员的操作、环境以及冻存液性能的影响，使冻存细胞易受污染而影响其活性表达。本发明中，在现有的培养方式基础上改进了冻存步骤，加入了冻存稳定剂，主要成分有脯氨酸、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、乙二醇、甘油、柠檬酸钠、依克多因和Al ys‑Basa l基础细胞培养液，由于不含动物血清、二甲基亚砜及动物源成分的无血清细胞冻存液，没有引入外源性的动物源蛋白，降低了动物源污染的可能性，降低感染真菌和细菌的概率，甘油具有冷冻保护作用，可降低低温冻存对细胞的损害，提高保存效果。

摘要： 本发明公开了一种自体外周血淋巴细胞的培养方法，具体包括以下步骤：(1)从外周血中分离外周血单个核细胞加入适量无血清细胞培养液中，并加入浓度为1000‑2000U/ml的干扰素‑γ，置于培养箱静置培养3天；(2)将步骤(1)中培养的单个核细胞转移至含细胞表面分子3单克隆抗体与细胞表面分子16单克隆抗体的培养瓶中，并加入浓度为1000‑2000U/ml的干扰素‑2，静置培养3天；(3)往步骤(2)中补加500‑1000mL的细胞培养液，加入1000‑2000U/ml的干扰素‑2，静置培养3天；(4)往步骤(3)中继续补加500‑1000mL的细胞培养液，置于培养箱静置培养3天，重复此步骤2‑3次，制得自体外周淋巴细胞。本发明可以培养高扩增率以及高活性的CIK细胞，进而很好的应用至抗肿瘤过继细胞免疫治疗中。

摘要： 本实用新型属于干细胞移植相关技术领域，尤其为一种自体外周血造血干细胞移植用灭菌装置，包括外壳、滑槽、放水口和第二卡槽，所述外壳下方设置有第一卡块，且第一卡块外侧设置有第一卡槽，同时第一卡槽下方设置有底座，所述滑槽均设置在外壳内壁两侧，且滑槽内部设置有滑块，所述滑块一侧设置有内胆。该自体外周血造血干细胞移植用灭菌装置，通过活动块、活动钩、密封圈、机盖、固定架和电动升降套杆的设置，可以对该装置起到一个便于固定密封的效果，活动块、活动钩和密封圈的设置，可以更加便于对还装置进行密封，防止装置在使用时机盖与内胆之间产生缝隙，导致装置内部的气体或液体漏出，影响装置的使用效果。

摘要： 一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，包含有以下步骤：第一步，制备脐血细胞因子，制备脐血干细胞；第二步，激发自体外周血干细胞；第三步，将脐血细胞因子输注血液，使脐血细胞因子与自体外周血干细胞相联合进行治疗；第四步，定期随访治疗者的各项指标变化。本发明中，自体干细胞没有免疫排斥，可以长期存活，但细胞的活性不足；用输入细胞因子的方法改善自体干细胞的生存环境，二者联合使用体现了优势互补，且在延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松过程中无副作用，采用输入脐血细胞因子和自体外周血干细胞修复受损的组织以恢复脏器功能达到延缓卵巢衰老和治疗骨质疏松的目的。

摘要： 本发明公开了一种用于整形充填的自体外周血干细胞和自体脂肪组合物，其由体积为5～20ml的自体脂肪和细胞量为6×107～9×107个且体积为2～20mL的自体外周血干细胞组成。将自体脂肪和自体外周血干细胞充分混合均匀后即能够用于整形充填。本发明的组合物能够用于整形充填的部位包括额头、泪沟、苹果肌、面颊、太阳穴、印堂、鼻子、下巴、眉弓、唇、耳垂、卧蚕和上眼窝。本发明是一种来源方便、活性强、安全简便的用于整形充填的组合物，属于最新干细胞，能够很好的被应用于整容充填或整形外科手术中。自体外周血干细胞具有费用低、效益好、采集干细胞安全简便、受肿瘤细胞浸润或污染的机会较少和具有潜在的抗残留病优势等优点。

摘要： 本发明公开一种用于治疗Ⅰ型糖尿病的自体外周血干细胞的提取方法，包括如下步骤：步骤A1、收集外周静脉血，于超净工作台中与PBS平衡溶液混匀，得到血浆；步骤A2、离心后上清液分为3层，吸出中间白膜层，加至装有PBS平衡液的离心管中，加入PBMC培养基，混匀后加入到24孔板中，每个孔1mL；步骤A3、每天用counterstar细胞计数板为单个核细胞计数，用PBMC培养基重悬细胞，其中每孔0.5ml加入到24孔板中；步骤A4、重悬结束后，去除PBMC培养基，利用生理盐水连续漂洗3遍；诱导培养在37°C、5％CO2的培养箱中进行，时间为48‑96h，即得到用于治疗Ⅰ型糖尿病的自体外周血干细胞。

摘要： 本发明提供了用于治疗退行性关节炎的自体外周血干细胞的培养方法，包括以下步骤：步骤一：脂肪组织的处理；步骤二：脂肪间充质干细胞的分离；步骤三：脂肪间充质干细胞的培养；步骤四：脂肪间充质干细胞的提取物的获得；步骤五：自体外周血干细胞的培养。且采用自体脂肪间充质干细胞的提取和培养，进行多代脂肪间充质干细胞培养混合形成的培养基进行自体外周血干细胞的培养，解决外周血造血干细胞来源有限及数目少问题；且在本发明中优化了整个自体脂肪间充质干细胞的提取方法，使获得干细胞纯度更高，利用Ⅰ型胶原酶、Ⅳ型胶原酶，提高了消化速度，同时本发明中利用了血清培养液，避免了潜在的病毒或支原体污染。