转化生长因子β1

摘要： 背景:2型糖尿病并发症肾间质纤维化日益高发,然而有关2型糖尿病并发症肾间质纤维化及运动对其作用的影响机制尚待揭示。目的:探究不同方式运动对2型糖尿病小鼠肾间质纤维化的影响,及Klotho介导转化生长因子β1/Smad3途径在此过程中的调控机制。方法:44只4周龄C57BL/6雄性小鼠,1周适应性喂养后,随机分为正常对照组和2型糖尿病造模组。利用高脂膳食和一次注射链脲佐菌素法制备2型糖尿病小鼠模型,并随机分为模型对照组、高强度间歇训练组和下坡跑组,进行8周运动干预。结束后,检测肾功能生化指标;利用苏木精-伊红染色检测肾组织微细结构变化;Masson染色检测肾间质纤维化水平;实时定量PCR检测相关因子mRNA表达;Westernblotting检测相关因子蛋白表达;免疫组织化学染色检测肾中Ⅰ型胶原蛋白的蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组相比,模型对照组血肌酐、尿素氮和24 h尿蛋白水平均显著升高;肾盂扩张、肾实质变窄、肾小管数量减少;胶原面积百分比升高;肾组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平下调,转化生长因子β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA和蛋白表达水平上调,Smad3 mRNA和p-Smad3蛋白表达水平均显著上调;肾组织中Ⅰ型胶原蛋白的蛋白表达阳性区域显著增加;②与模型对照组相比,高强度间歇训练组Klotho、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达出现显著变化,转化生长因子β1和Ⅲ型胶原蛋白的蛋白表达上调;③与高强度间歇训练组相比,下坡跑组血肌酐、尿素氮和24 h尿蛋白水平下降;肾盂、肾小管、肾小球等结构病变被显著改善;胶原面积百分比显著降低;Klotho mRNA和蛋白表达上调,转化生长因子β1、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白mRNA和蛋白表达水平均下调,p-Smad3蛋白表达下调;Ⅰ型胶原蛋白的蛋白表达阳性区域显著减少;④提示2型糖尿病小鼠肾间质发生了纤维化;下坡跑通过上调Klotho并抑制转化生长因子β1/Smad3途径进而改善2型糖尿病小鼠肾间质纤维化,但高强度间歇性运动的作用效果不显著。

摘要： 背景:沙棘总黄酮可抑制肾脏、肝脏、心肌纤维化,但其对增生性瘢痕纤维化的相关疗效鲜有报道。目的:对兔耳增生性瘢痕组织块局部注射中草药沙棘总黄酮,观察其对增生性瘢痕组织块消退的影响并探讨其作用机制。方法:选择8只新西兰大白兔,每只耳沿腹侧中线两侧各建立3个直径8 mm圆形创面,共96个创面。21 d创面上皮化后,随机分为5组:0.5,1.0,2.0 g/L沙棘总黄酮组,2只/组;二甲基亚砜组(药物溶剂对照)和空白对照组,1只/组。于组织块基底部注射相应药物,每间隔3 d注射1次,连续干预4周。通过苏木精-伊红染色和Masson染色对比各组增生性瘢痕组织块病理组织变化;实时荧光定量PCR检测各组组织块中Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达;Western blot检测各组兔耳瘢痕组织块Ⅰ、Ⅲ型胶原、转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白、血管内皮生长因子的蛋白表达。结果与结论:①大体观察:不同质量浓度的沙棘总黄酮局部注射后瘢痕组织块明显软化、变平;②空白对照组大量炎性细胞浸润、血管生成、胶原纤维不规则排列;与空白对照组相比,各沙棘总黄酮组可见整齐的束状胶原纤维分布,新生血管较少,特别是2 g/L沙棘总黄酮组改善较为明显;不同质量浓度沙棘总黄酮组间瘢痕增生指数和胶原密度均低于空白对照组和二甲基亚砜组(P<0.05);③各沙棘总黄酮组和二甲基亚砜组瘢痕组织块的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平均显著低于空白对照组,其中2 g/L沙棘总黄酮组的抑制作用最明显(P<0.05);④与空白对照组相比,二甲基亚砜一定程度上可以降低组织块中Ⅲ型胶原、转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白、血管内皮生长因子蛋白表达水平;但不同质量浓度沙棘总黄酮组均可明显抑制兔耳增生性瘢痕组织块Ⅰ、Ⅲ型胶原、转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白、血管内皮生长因子蛋白的表达水平,且呈剂量依赖性(P<0.05);⑤提示沙棘总黄酮可抑制瘢痕增生,使瘢痕组织块软化、变平,颜色变淡,降低兔耳增生性瘢痕组织块转化生长因子β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达,抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,减少瘢痕组织内血管生成,从而达到治疗增生性瘢痕的作用。

摘要： 背景:失神经骨骼肌萎缩尚缺乏较有效的治疗方法,预后差,microRNA在体内的表达谱不清楚。目的:采用高通量测序技术分析失神经支配骨骼肌萎缩大鼠microRNA表达谱及转化生长因子β1/Smad3信号通路的变化,探讨microRNA在骨骼肌萎缩中的作用及其机制。方法:12只SD大鼠随机分为2组,实验组采用坐骨神经截断的方法建立失神经肌萎缩模型,对照组仅暴露坐骨神经后缝合伤口。完整取下大鼠双侧腓肠肌计算肌湿质量比,苏木精-伊红染色观察肌萎缩和纤维化情况并测定肌纤维横截面积;应用Illumina HiSeq 2500测序技术筛查骨骼肌组织中的microRNA表达谱;结合火山图、层次聚类图、基因本体论、京都基因与基因组百科全书通路分析差异表达基因参与骨骼肌代谢的生物过程;采用实时荧光定量PCR验证候选基因在肌肉组织中的差异表达;Western blot检测转化生长因子β1、p-Smad3蛋白表达。结果与结论:①与对照组相比,实验组腓肠肌湿质量比和横截面积明显降低(P0.0),筛选出显著差异表达的microRNA共14个,其中2个表达上调,12个表达下调;③生物学功能和通路分析结果提示,miR-1247-3p、miR-132-5p、miR-21-3p、miR-363-3p、miR-451-5p等具有显著差异表达的microRNAs显著富集于细胞增殖、分化、凋亡等生物过程及转化生长因子β信号通路;④实时荧光定量PCR结果显示,miR-21-3p在实验组腓肠肌组织中呈显著低表达(P<0.001),与测序结果趋势一致;⑤Western blot结果显示,转化生长因子β1、p-Smad3蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.05);⑥提示microRNA在骨骼肌萎缩生理病理过程中扮演关键角色,miR-21-3p可能通过激活转化生长因子β1/Smad3信号通路的生物活性,进而在骨骼肌细胞代谢中发挥作用。

摘要： 背景:机械通气是目前重症呼吸疾病重要有效的治疗支持手段之一,但不适当的机械通气可使肺损伤加重,甚至纤维化形成.如何最大程度减少呼吸机相关肺损伤,发挥呼吸机的真正保护作用显得至关重要.肺是一个力学器官,机械通气使肺泡反复充气,对邻近的肺上皮细胞产生牵张作用,使其处于一个非正常的损伤修复过程.因此,过度机械牵张在促进肺纤维增殖发生中可能扮演重要角色.目前国内外关于机械牵张对肺上皮细胞纤维增殖的影响报道较少,其具体发生机制并不清楚.目的:观察不同机械牵张强度及牵张时间对人肺上皮BEAS-2B细胞中转化生长因子β1、波形蛋白及Ⅰ型胶原表达的影响.方法:体外培养人肺上皮细胞株BEAS-2B,取对数生长期的细胞分为静止对照组、10％牵张组、20％牵张组.采用FX-5000T细胞应力加载系统对人肺上皮BEAS-2B细胞以频率20次/min,正弦波形式分别牵张24,48,72 h,采用倒置显微镜观察细胞形态变化,RT-qPCR和免疫荧光方法检测转化生长因子β1、Ⅰ型胶原mRNA表达及波形蛋白表达变化.结果 与结论:①静止对照组BEAS-2B细胞呈卵圆形贴壁生长,20％牵张组牵张72 h后细胞形态由鹅卵圆形变为长梭样,细胞间隙增宽;②随着机械牵张强度的增加,BEAS-2B细胞中转化生长因子β1、Ⅰ型胶原mRNA表达及波形蛋白水平较静止对照组均增加,并呈时间依赖趋势(P<0.05);与静止对照组比较,10％牵张组转化生长因子β1、Ⅰ型胶原mRNA及波形蛋白变化不明显;③结果 表明,过度机械牵张可刺激人肺上皮BEAS-2B细胞中转化生长因子β1、波形蛋白及Ⅰ型胶原表达增加,过度机械牵张在促进肺纤维增殖发生中发挥重要作用.

摘要： 目的 通过比较卵巢子宫内膜异位囊肿(巧克力囊肿)患者异位囊壁、子宫在位内膜和其他卵巢良性肿瘤患者子宫内膜的组织学特点及分子生物学特征,探究TGF-β1、Smads在子宫内膜异位症(EMs)患者的表达和意义.方法 募集行腹腔镜或宫腹腔镜联合术的巧克力囊肿患者,取其卵巢异位症囊壁组织作为卵巢异位症囊壁组,留取其子宫内膜组织作为子宫在位内膜组;同期行宫腹腔镜联合术的其它卵巢良性肿瘤患者,取其子宫内膜组织作为子宫内膜对照组.采用Masson染色、免疫组织化学法分别检测三种组织中纤维化形成和TGF-β1、Smads的表达情况.结果(1)Masson染色显示,卵巢异位症囊壁组可见大量的纤维化沉积,子宫在位内膜组、子宫内膜对照组均未见明显纤维化蓝染.(2)卵巢异位症囊壁组TGF-β1、p-Smad2/3表达水平分别为(0.039±0.024)和(0.035±0.014)均高于子宫内膜对照组(0.018±0.012和0.023±0.004),差异有统计学意义(P<0.05);子宫在位内膜组p-Smad2/3表达水平(0.034±0.011)高于子宫内膜对照组(0.023±0.004)(P<0.05);卵巢异位症囊壁组Smad7的表达水平(0.006±0.003)低于子宫在位内膜组(0.019±0.011)和子宫内膜对照组(0.041±0.023),差异有统计学意义(P<0.01);子宫在位内膜组Smad7的表达含量较子宫内膜对照组低(P<0.01).结论 TGF-β1、p-Smad2/3在子宫内膜异位症中存在高表达,可能通过促进纤维母细胞增生、胶原蛋白的沉积导致异位病灶纤维化的形成,而Smad7作为抑制因子,在EMs中表达降低,对Smads介导的TGF-β1致纤维化的抑制作用减弱,也促使了子宫内膜异位症纤维化的进展.

摘要： 目的 观察胃癌患者组织中上皮间质转化(EMT)相关蛋白、转化生长因子(TGF)-β1 mRNA表达与淋巴结转移的相关性.方法 将该院2016年1月至2020年11月收治的51例胃癌合并淋巴结转移患者纳入淋巴结转移组,另将该院同期收治的51例胃癌未合并淋巴结转移患者纳入无淋巴结转移组,收集患者资料,并进行回顾性分析.采用回归分析检验患者肿瘤分化程度,TNM分期,脉管内癌栓,EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、β-链蛋白(β-catenin)],TGF-β1 mRNA相对表达水平与淋巴结转移的关系,并分析患者胃癌组织中EMT相关蛋白、TGF-β1 mRNA相对表达水平对淋巴结转移的预测效能.结果 初步比较两组的基线资料后,经回归分析检验结果 显示,胃癌患者肿瘤分化情况、病理分期、脉管内癌栓情况、胃癌组织内E-cadherin表达、Vimentin、β-catenin及TGF-β1 mRNA相对表达水平均与患者淋巴结转移有关,肿瘤低分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有脉管内癌栓,胃癌组织中E-cadherin相对表达水平降低,Vimentin、β-cate-nin及TGF-β1 mRNA相对表达水平升高均可能是胃癌患者淋巴结转移的风险因子(P0.800,均有一定预测效能.结论 胃癌患者组织中EMT相关蛋白、TGF-β1 mRNA相对表达水平与淋巴结转移密切相关,癌组织中E-cadherin相对表达水平降低,Vimentin、β-catenin及TGF-β1 mR-NA相对表达水平升高可增加淋巴结转移风险,并可用于预测淋巴结转移.

摘要： 背景:湿润烧伤膏能够抑制炎症反应,降低氧化应激水平,加速创面愈合速度,广泛用于治疗烧伤创面、皮肤放射性损伤、糖尿病足病,并取得了显著效果,但对其机制的研究仍处于空白阶段.目的:基于转化生长因子β1/Smad家族成员3信号通路探讨湿润烧伤膏对烧伤模型大鼠创面愈合及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响.方法:将80只SPF级SD雄性大鼠随机分为假烫伤组、模型组、湿润烧伤膏组、转化生长因子β1组,后3组采用圆形烫伤仪(直径为2.5 cm)构建大鼠模型,伤后湿润烧伤膏组创面涂抹湿润烧伤膏,转化生长因子β1组注射转化生长因子β1,假烫伤组、模型组创面涂抹生理盐水.第21天麻醉处死,观察各组大鼠伤后创面愈合情况;采用苏木精-伊红染色观察大鼠创面组织病理学表现;免疫组化染色检测创面组织表皮生长因子受体、α-平滑肌肌动蛋白表达水平;ELISA法检测大鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的表达水平;黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法检测创面组织氧化应激指标超氧化物歧化酶、丙二醛水平;Western-blot检测创面组织转化生长因子β1、磷酸化Smad家族成员3蛋白表达水平.结果 与结论:①与假烫伤组相比,模型组大鼠创面愈合率、表皮生长因子受体、α-平滑肌肌动蛋白、超氧化物歧化酶、转化生长因子β1、Smad家族成员3水平显著降低(P0.05);④提示湿润烧伤膏可通过激活转化生长因子β1/Smad家族成员3信号通路,降低烧伤模型大鼠氧化应激水平和炎症程度,增加α-平滑肌肌动蛋白表达水平,从而促进创面愈合.

摘要： 背景:骨关节炎的重要病理变化是关节软骨的退变,转化生长因子β1和Ras同源基因家族成员A分别在维持关节软骨稳态和骨关节炎的发生发展中起重要作用.目的:探讨转化生长因子β1、Ras同源基因家族成员A在软骨细胞分化过程中对细胞形态、骨架及相关因子表达的影响,以及转化生长因子β1与Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9之间的相互调控关系.方法:外源性添加转化生长因子β1不同质量浓度、不同时间刺激ATDC5细胞,检测Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9的蛋白表达情况;转化生长因子β1、LY-364947(一种有效的ATP竞争性转化生长因子β受体Ⅰ抑制剂)、溶血磷脂酸(Ras同源基因家族成员A激动剂)不同组合处理ATDC5细胞72 h,检测Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9、转化生长因子β的蛋白表达情况,并观察细胞形态、细胞骨架的变化情况.结果 与结论:①随着转化生长因子β1作用质量浓度和时间的增加,Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9蛋白表达水平显著升高(P＜0.001);②相比空白对照组,溶血磷脂酸能够显著提高Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9蛋白表达水平(P＜0.001),但溶血磷脂酸对转化生长因子β的蛋白表达水平没有影响(P＞0.05),转化生长因子β1+溶血磷脂酸处理细胞使Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9和转化生长因子β的蛋白表达水平都显著升高(P＜ 0.001),LY-364947使Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9的蛋白表达水平降低(P＜ 0.001),并且显著减弱了溶血磷脂酸对Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9的激活作用(P＜0.001);⑧相比未经处理的空白对照组,转化生长因子β1、溶血磷脂酸、转化生长因子β1+溶血磷脂酸处理ATDC5细胞后,细胞形态伸长、胞内肌动蛋白丝排列更加有序,聚集在细胞边缘的肌动蛋白丝增多,LY-364947使细胞形态变为多边形,肌动蛋白丝排列紊乱,细胞边缘的肌动蛋白丝减少;LY-364947+溶血磷脂酸对细胞形态和骨架的改变情况与LY-364947处理组有类似的结果;④提示在ATDC5细胞中,转化生长因子β1对Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9的蛋白表达水平有浓度剂量和时间叠加作用,转化生长因子β1可能是Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9的上游因子,转化生长因子β1通过调控Ras同源基因家族成员A、性别决定区Y框蛋白9的表达调节细胞骨架的功能,进而参与调节骨关节炎的发生发展过程.

摘要： 背景:骨髓间充质干细胞在组织工程、细胞治疗、基因治疗等方面具有强大的应用前景,有效提升骨髓间充质干细胞移植存活率与治疗效果成为研究热点.目的:探讨芍药苷对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、迁移能力以及对脂多糖干预下骨髓间充质干细胞中转化生长因子β1、ERK1/2表达的影响.方法:CCK-8实验检测不同浓度芍药苷对骨髓间充质干细胞的增殖作用,划痕实验检测10μmol/L芍药苷对骨髓间充质干细胞迁移能力的影响,实时荧光定量PCR检测10μmol/L芍药苷干预后骨髓间充质干细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Ki67 mRNA表达量.将骨髓间充质干细胞分为对照组、脂多糖组(1 mg/L)、脂多糖+芍药苷组(1 mg/L脂多糖+80μmol/L芍药苷),干预72 h后荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检测细胞中转化生长因子β1、ERK1/2(MAPK3/1)基因与蛋白表达水平,免疫荧光法对骨髓间充质干细胞中转化生长因子β1蛋白进行定位与半定量分析.结果 与结论:①一定浓度(6.25-12.5μmol/L)芍药苷能促进骨髓间充质干细胞增殖;②与对照组比较,10μmol/L芍药苷组空白划痕面积缩小,差异有显著性意义(P<0.05);③与对照组比较,10μmol/L芍药苷组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Ki67 mRNA相对表达量上调,差异有显著性意义(P<0.01);④脂多糖刺激后骨髓间充质干细胞中转化生长因子β1、MAPK1、MAPK3 mRNA表达量与转化生长因子β1、p-ERK1/2蛋白表达量上调,差异有显著性意义(P<0.01),芍药苷与脂多糖联合干预后,上述基因与蛋白表达量降低,差异有显著性意义(P<0.01);⑤实验结果表明,芍药苷能促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖、迁移以及损伤修复相关基因Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Ki67表达,下调脂多糖干预的骨髓间充质干细胞中转化生长因子β1、ERK1/2(MAPK3/1)基因与蛋白表达.

摘要： 背景:关节软骨碎块后能增强其修复能力,其中具体机制尚不明确.目的:成年关节软骨碎块化后转化生长因子β1的表达与软骨细胞迁移关系的研究.方法:收集30只12-15周龄的SPF级成年SD雄性大鼠后肢膝关节(共60膝),采用划格法获取碎块关节软骨颗粒(约1 mm×1 mm×1 mm)和块状软骨(直径约5 mm,厚度约2 mm),复合明胶海绵碎屑及纤维蛋白胶制作体外培养模型.实验分3组,即碎块组、整块组、抑制剂组.碎块组和整块组均采用普通细胞培养液进行培养,抑制剂组采用添加外源性转化生长因子β1抑制剂Decori和普通细胞培养液培养.Transwell实验检测细胞迁移;鬼笔环肽染色观察细胞微丝骨架F-actin的变化;实时荧光定量PCR和Western blotting检测转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达;使用分子对接技术探索转化生长因子β1和F-actin之间的关系.结果 与结论:①Transwell实验结果表明,与整块组相比,碎块组细胞通过matrigel基质胶的数量明显增多(P＜0.05);与碎块组相比,抑制剂组细胞通过matrigel基质胶的数量明显减少(P＜0.05);②鬼笔环肽染色结果表明,与整块组相比,碎块组的F-actin环状结构明显减少,逐渐呈现细丝状结构,细胞中应力纤维明显减少,细胞间隙明显减小,软骨损伤逐渐恢复;与碎块组相比,抑制剂组F-actin环状结构明显增多,细胞间隙明显增大;③与整块组相比,碎块组转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达水平明显上升(P＜0.05);与碎块组相比,抑制剂组转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达水平明显下降(P＜0.05);④分子对接模拟中转化生长因子β1与F-actin结合形成稳定的复合体,主要以氢键作用力为主;⑤提示转化生长因子β1在成年关节软骨碎块化后存在过表达的现象,并且过表达的转化生长因子β1能够促进软骨细胞迁移,促进软骨损伤的修复.

摘要： 目前认为成纤维细胞合成胶原蛋白增多是许多纤维化疾病的主要特点。在其发病机制中促纤维化和抗纤维化因子在调节胶原蛋白合成上起着关键的作用。TGF-β1途径被认为是病理性纤维化的核心途径。本实验中，通过扩增Cthrcl过表达的质粒转染正常人成纤维细胞，提高了正常细胞中Cthrcl含量，构建出pCMV6-XL4-Cthrcl组;通过化学合成小干扰RNA,瞬时转染成纤维细胞，降低正常细胞中Cthrcl含量，分别构建出Cthrcl基因升高及降低模型。相应的，通过加入细胞级TGF-β1刺激因子，提高正常细胞中TGF-β1因子含量，通过TGF-β1抑制剂抑制正常细胞中TGF-β1的表达，降低TGF-β1的含量，分别构建出TGF-β1基因升高及降低模型。在此基础上通过轻脯氨酸消化法检测胶原蛋白的合成与表达，研究发现TGF-β1因子能诱导轻脯氨酸合成和表达明显增高，而重组的过表达Cthrcl能抑制TGF-β1诱导的上述效应。初步提示Cthrcl可能作为抗纤维化潜在的治疗方法。

摘要： 目前认为成纤维细胞合成胶原蛋白增多是许多纤维化疾病的主要特点。在其发病机制中促纤维化和抗纤维化因子在调节胶原蛋白合成上起着关键的作用。TGF-β1途径被认为是病理性纤维化的核心途径。本实验中，通过扩增Cthrcl过表达的质粒转染正常人成纤维细胞，提高了正常细胞中Cthrcl含量，构建出pCMV6-XL4-Cthrcl组;通过化学合成小干扰RNA,瞬时转染成纤维细胞，降低正常细胞中Cthrcl含量，分别构建出Cthrcl基因升高及降低模型。相应的，通过加入细胞级TGF-β1刺激因子，提高正常细胞中TGF-β1因子含量，通过TGF-β1抑制剂抑制正常细胞中TGF-β1的表达，降低TGF-β1的含量，分别构建出TGF-β1基因升高及降低模型。在此基础上通过轻脯氨酸消化法检测胶原蛋白的合成与表达，研究发现TGF-β1因子能诱导轻脯氨酸合成和表达明显增高，而重组的过表达Cthrcl能抑制TGF-β1诱导的上述效应。初步提示Cthrcl可能作为抗纤维化潜在的治疗方法。

摘要： 目前认为成纤维细胞合成胶原蛋白增多是许多纤维化疾病的主要特点。在其发病机制中促纤维化和抗纤维化因子在调节胶原蛋白合成上起着关键的作用。TGF-β1途径被认为是病理性纤维化的核心途径。本实验中，通过扩增Cthrcl过表达的质粒转染正常人成纤维细胞，提高了正常细胞中Cthrcl含量，构建出pCMV6-XL4-Cthrcl组;通过化学合成小干扰RNA,瞬时转染成纤维细胞，降低正常细胞中Cthrcl含量，分别构建出Cthrcl基因升高及降低模型。相应的，通过加入细胞级TGF-β1刺激因子，提高正常细胞中TGF-β1因子含量，通过TGF-β1抑制剂抑制正常细胞中TGF-β1的表达，降低TGF-β1的含量，分别构建出TGF-β1基因升高及降低模型。在此基础上通过轻脯氨酸消化法检测胶原蛋白的合成与表达，研究发现TGF-β1因子能诱导轻脯氨酸合成和表达明显增高，而重组的过表达Cthrcl能抑制TGF-β1诱导的上述效应。初步提示Cthrcl可能作为抗纤维化潜在的治疗方法。

摘要： 目前认为成纤维细胞合成胶原蛋白增多是许多纤维化疾病的主要特点。在其发病机制中促纤维化和抗纤维化因子在调节胶原蛋白合成上起着关键的作用。TGF-β1途径被认为是病理性纤维化的核心途径。本实验中，通过扩增Cthrcl过表达的质粒转染正常人成纤维细胞，提高了正常细胞中Cthrcl含量，构建出pCMV6-XL4-Cthrcl组;通过化学合成小干扰RNA,瞬时转染成纤维细胞，降低正常细胞中Cthrcl含量，分别构建出Cthrcl基因升高及降低模型。相应的，通过加入细胞级TGF-β1刺激因子，提高正常细胞中TGF-β1因子含量，通过TGF-β1抑制剂抑制正常细胞中TGF-β1的表达，降低TGF-β1的含量，分别构建出TGF-β1基因升高及降低模型。在此基础上通过轻脯氨酸消化法检测胶原蛋白的合成与表达，研究发现TGF-β1因子能诱导轻脯氨酸合成和表达明显增高，而重组的过表达Cthrcl能抑制TGF-β1诱导的上述效应。初步提示Cthrcl可能作为抗纤维化潜在的治疗方法。

摘要： 目前认为成纤维细胞合成胶原蛋白增多是许多纤维化疾病的主要特点。在其发病机制中促纤维化和抗纤维化因子在调节胶原蛋白合成上起着关键的作用。TGF-β1途径被认为是病理性纤维化的核心途径。本实验中，通过扩增Cthrcl过表达的质粒转染正常人成纤维细胞，提高了正常细胞中Cthrcl含量，构建出pCMV6-XL4-Cthrcl组;通过化学合成小干扰RNA,瞬时转染成纤维细胞，降低正常细胞中Cthrcl含量，分别构建出Cthrcl基因升高及降低模型。相应的，通过加入细胞级TGF-β1刺激因子，提高正常细胞中TGF-β1因子含量，通过TGF-β1抑制剂抑制正常细胞中TGF-β1的表达，降低TGF-β1的含量，分别构建出TGF-β1基因升高及降低模型。在此基础上通过轻脯氨酸消化法检测胶原蛋白的合成与表达，研究发现TGF-β1因子能诱导轻脯氨酸合成和表达明显增高，而重组的过表达Cthrcl能抑制TGF-β1诱导的上述效应。初步提示Cthrcl可能作为抗纤维化潜在的治疗方法。

摘要： 目的：观察消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病大鼠血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响. 方法：将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,消瘀泄浊饮组,洛汀新组各10只.采用环孢素灌胃及低盐饮食建模,4周后检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐、24小时尿蛋白,并计算肌酐清除率(creatinine clearance,Ccr),用HE染色法观察大鼠的肾脏组织病理学改变.免疫组化法观察肾脏组织Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)表达情况;ELISA法检测血清及肾组织肾素水平;qPCR检测肾脏组织AngⅡ、TGF-β1mRNA表达情况. 结果：相比于模型组,洛汀新组及消瘀泄浊饮组大鼠Scr、Bun、Ccr及24小时尿蛋白明显改善,血清肾素水平下降,肾组织AngⅡ、TGF-β1mRNA及肾素、ColⅣ表达下调,肾脏病理纤维化程度明显降低,消瘀泄浊饮组大鼠死亡率低于洛汀新组和环孢素组. 结论：消瘀泄浊饮可通过下调AngⅡ表达、抑制TGF-β/Smad信号通路,延缓慢性环孢素肾病进展.

摘要： 目的：观察消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病大鼠血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响. 方法：将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,消瘀泄浊饮组,洛汀新组各10只.采用环孢素灌胃及低盐饮食建模,4周后检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐、24小时尿蛋白,并计算肌酐清除率(creatinine clearance,Ccr),用HE染色法观察大鼠的肾脏组织病理学改变.免疫组化法观察肾脏组织Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)表达情况;ELISA法检测血清及肾组织肾素水平;qPCR检测肾脏组织AngⅡ、TGF-β1mRNA表达情况. 结果：相比于模型组,洛汀新组及消瘀泄浊饮组大鼠Scr、Bun、Ccr及24小时尿蛋白明显改善,血清肾素水平下降,肾组织AngⅡ、TGF-β1mRNA及肾素、ColⅣ表达下调,肾脏病理纤维化程度明显降低,消瘀泄浊饮组大鼠死亡率低于洛汀新组和环孢素组. 结论：消瘀泄浊饮可通过下调AngⅡ表达、抑制TGF-β/Smad信号通路,延缓慢性环孢素肾病进展.

摘要： 目的：观察消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病大鼠血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响. 方法：将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,消瘀泄浊饮组,洛汀新组各10只.采用环孢素灌胃及低盐饮食建模,4周后检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐、24小时尿蛋白,并计算肌酐清除率(creatinine clearance,Ccr),用HE染色法观察大鼠的肾脏组织病理学改变.免疫组化法观察肾脏组织Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)表达情况;ELISA法检测血清及肾组织肾素水平;qPCR检测肾脏组织AngⅡ、TGF-β1mRNA表达情况. 结果：相比于模型组,洛汀新组及消瘀泄浊饮组大鼠Scr、Bun、Ccr及24小时尿蛋白明显改善,血清肾素水平下降,肾组织AngⅡ、TGF-β1mRNA及肾素、ColⅣ表达下调,肾脏病理纤维化程度明显降低,消瘀泄浊饮组大鼠死亡率低于洛汀新组和环孢素组. 结论：消瘀泄浊饮可通过下调AngⅡ表达、抑制TGF-β/Smad信号通路,延缓慢性环孢素肾病进展.

摘要： 目的：观察消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病大鼠血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响. 方法：将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,消瘀泄浊饮组,洛汀新组各10只.采用环孢素灌胃及低盐饮食建模,4周后检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐、24小时尿蛋白,并计算肌酐清除率(creatinine clearance,Ccr),用HE染色法观察大鼠的肾脏组织病理学改变.免疫组化法观察肾脏组织Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)表达情况;ELISA法检测血清及肾组织肾素水平;qPCR检测肾脏组织AngⅡ、TGF-β1mRNA表达情况. 结果：相比于模型组,洛汀新组及消瘀泄浊饮组大鼠Scr、Bun、Ccr及24小时尿蛋白明显改善,血清肾素水平下降,肾组织AngⅡ、TGF-β1mRNA及肾素、ColⅣ表达下调,肾脏病理纤维化程度明显降低,消瘀泄浊饮组大鼠死亡率低于洛汀新组和环孢素组. 结论：消瘀泄浊饮可通过下调AngⅡ表达、抑制TGF-β/Smad信号通路,延缓慢性环孢素肾病进展.

摘要： 目的：观察消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病大鼠血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响. 方法：将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,消瘀泄浊饮组,洛汀新组各10只.采用环孢素灌胃及低盐饮食建模,4周后检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐、24小时尿蛋白,并计算肌酐清除率(creatinine clearance,Ccr),用HE染色法观察大鼠的肾脏组织病理学改变.免疫组化法观察肾脏组织Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)表达情况;ELISA法检测血清及肾组织肾素水平;qPCR检测肾脏组织AngⅡ、TGF-β1mRNA表达情况. 结果：相比于模型组,洛汀新组及消瘀泄浊饮组大鼠Scr、Bun、Ccr及24小时尿蛋白明显改善,血清肾素水平下降,肾组织AngⅡ、TGF-β1mRNA及肾素、ColⅣ表达下调,肾脏病理纤维化程度明显降低,消瘀泄浊饮组大鼠死亡率低于洛汀新组和环孢素组. 结论：消瘀泄浊饮可通过下调AngⅡ表达、抑制TGF-β/Smad信号通路,延缓慢性环孢素肾病进展.

摘要： 本发明涉及TGF-β家族中的一种蛋白、编码它的DNA以及包含这种蛋白的药物组合物。

摘要： 本发明公开了一种抗人转化生长因子β1的纳米抗体B3及其制备方法和应用，属于生物制药领域。提供的制备方法采用噬菌体展示技术和生物淘筛技术筛选出与抗原具有较高结合力的抗人转化生长因子β1的纳米抗体。该纳米抗体能够特异性地和天然TGF‑β1蛋白的三种形式：LAP前体、TGF‑β1单体及二聚体进行结合，并且具有特异性强和亲和力高的特点，能够有效中和肿瘤微环境中自分泌或旁分泌TGF‑β1，为肿瘤的免疫治疗、促进伤口愈合以及促进组织修复和胚胎发育等方面提供一种基因工具。

摘要： 本发明公开了抗人转化生长因子β1的纳米抗体及其制备方法和应用，属于生物制药领域。提供的制备方法采用噬菌体展示技术和生物淘筛技术获得与抗原具有较高结合力的抗人转化生长因子β1的纳米抗体。该纳米抗体能够特异性地和天然TGF‑β1蛋白的三种形式：LAP前体、TGF‑β1单体及二聚体进行结合，并且具有特异性强和亲和力高的特点，能够有效中和肿瘤微环境中自分泌或旁分泌TGF‑β1，为肿瘤的免疫治疗、治疗伤口愈合，促进组织修复和胚胎发育等方面提供一种基因工具。

摘要： 本发明公开了一种转化生长因子β1II型受体抗原肽及抗转化生长因子β1II型受体的纳米抗体。本发明利用转化生长因子β1(TGFβ1)与受体结合的3D模型，从II型受体TβRⅡ筛选到了15个氨基酸组成的、靶向受体与配体相互作用界面区的抗原肽。利用筛选到的抗原肽成功筛选到2种人源化纳米抗体(TβRⅡ Nb17和TβRⅡ Nb21)。其均可以特异性结合于成纤维细胞，并有效阻断TGFβ1的生长刺激效应，抑制I、III型胶原蛋白的形成，在预防和治疗组织纤维化和瘢痕形成方面具有重要应用价值。

摘要： 本发明涉及TGF-β家族中的一种蛋白、编码它的DNA以及包含这种蛋白的药物组合物。

摘要： 本发明公开了一种转化生长因子β1活性多肽及其应用，属于转化生长因子β1活性多肽技术领域。所述转化生长因子β1活性多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示。本发明还公开了上述转化生长因子β1活性多肽在制备治疗创面愈合的药物中的应用。本发明应用噬菌体随机十二肽库筛选TGF‑β1关键序列，进行体外TGF‑β1活性多肽的合成，短期内可以大量合成，大大降低了生产成本。

摘要： 本发明公开了一种治疗轻度烫伤的转化生长因子‑α喷雾剂，包括水凝胶和全氟化碳溶液，水凝胶内包含转化生长因子‑α，全氟化碳溶液的溶质为氧气，全氟化碳溶液分散在水凝胶内。本发明还公开了治疗轻度烫伤的转化生长因子‑α喷雾剂的制备方法。本发明能够发挥转化生长因子‑α和氧气的协同增效作用，提升对轻度烫伤的治疗效果。

摘要： 本发明提供了一种用于检测细胞中转化生长因子‑β的ELISA检测方法，所述检测方法中，包括有待测样本的预处理，所述预处理是将待测细胞的细胞悬液进行至少一次离心后得到沉淀，并采用稀释液重悬得到沉淀重悬液，沉淀重悬液反复冻融至少3次后再加热预活化，冷却后得到预活化沉淀重悬液，再按比例加入一定量HCl，静置活化。本发明的的特点及优点是：本发明提供了一种用于检测细胞中转化生长因子‑β的ELISA检测方法，直接取人间充质干细胞活化后检测转化生长因子‑β即可得到稳定的结果，无需对其进行培养3天或更久；该方法比传统的培养法检测效率更高，样本制备时间短，结果更稳定，节省人力物力和时间成本，检测方法简单可靠。

摘要： 本发明提供一种由外泌体负载的针对转化生长因子βⅡ型受体的核酸适配子的纳米制剂及其制备方法。该核酸适配子纳米制剂为由外泌体和核酸适配子组成的双层膜结构的中空半球形微粒，为外泌体负载核酸适配子；所述核酸适配子纳米制剂的粒径为30～150nm；所述核酸适配子为Seq58。本发明还提供所述核酸适配子纳米制剂的制备方法。本发明针对转化生长因子βⅡ型受体的核酸适配子纳米制剂能竞争性地抑制TGF‑β与其受体TβRⅡ结合，并具有良好的生物安全性、免疫原性及长循环半衰期，可应用于抑制青光眼外滤过术后成纤维细胞增殖及转分化，以及其他纤维化相关疾病的体外研究中。

摘要： 本发明涉及细胞因子检测领域，尤其涉及一种转化生长因子β的体外检测试剂盒及其应用。本发明将TGF‑β信号通路的下游响应元件(CAGA)12和荧光报告基因EGFP构建到pGL3‑basic载体中得到了pGL3(CAGA)12‑EGFP报告基因质粒，然后将所述报告基因质粒稳定转染至Expi293F细胞后筛选获得了(CAGA)12‑EGFP单克隆报告基因细胞系。进一步的，以该单克隆报告基因细胞系为基础，本发明中同时建立了标准化的检测参数指标和检测流程，为活性TGF‑β含量的体外检测及其相关的疾病和药物研究提供了一种高灵敏度、高特异性、低成本同时操作更加简便、信号更加稳定的新型检测方法。