骨形态发生蛋白2

摘要： 背景:随着机械信号在骨骼中的作用研究逐渐增多,作为力学敏感因子的YAP/TAZ也逐渐受到大众关注。现有研究发现YAP/TAZ可能在骨形成的过程中作为一个重要介质参与其中,但具体机制尚不清楚。目的:对YAP/TAZ参与骨形成的最新研究进展进行综述。方法:第一作者以“Hippo pathway,YAP/TAZ,Bone,Osteogenesis”为英文检索词,以“Hippo信号通路、YAP/TAZ、骨骼、成骨”为中文检索词,检索PubMed数据库和中国知网2016年至2022年3月发表的相关文献,对筛选出的文献进行归纳分析。最终纳入56篇相关文献进行综述。结果与结论:①YAP/TAZ作为Hippo通路的核心因子,在其功能调控上具有特殊性,除了在分子水平上可以调控其活性,细胞微环境的改变,如细胞浓度、细胞形状和细胞外基质的刚度也可以促使其活性改变从而发挥不同功能作用。②YAP/TAZ参与成骨信号传导,并且调控也受细胞微环境影响。过表达或沉默细胞中的YAP/TAZ会促使或抑制成骨信号的传导,从而改变细胞分化结局。③YAP/TAZ参与骨组织细胞的成骨过程,并对不同类型的骨组织细胞有不同功能。但对于过表达或沉默YAP/TAZ方法不同,选择观察细胞种属类型差异较大,结果难以统一量化。④动物实验中证实YAP/TAZ对正常骨骼形态及颌面部形态的正常发育有着至关重要的作用,并且在不同成骨分化阶段有着不同的功能。然而对于实验动物敲除YAP/TAZ条件基因不统一、观察时机不一致导致实验成果难以相互比较。YAP/TAZ在骨形成中有着重要地位,但对于其作用机制还有待深入研究,期待后续有学者深入探索其作用机制,并利用其特性在骨性疾病中发挥作用。

摘要： 背景:氟中毒是一种常见的地方性疾病,其严重程度主要取决于氟化物暴露剂量和暴露持续时间。骨形态发生蛋白2在氟骨症发病过程中有重要作用。目的:探究兔股骨骨形态发生蛋白2表达与骨氟含量的关系,以及骨形成标志物骨钙素与Ⅰ型前胶原氨基端原肽在不同氟浓度下的变化。方法:将16只新西兰白兔随机分为对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组4只,分别饮用含0,100,200,400 mg/L氟化钠的自来水,饲养期间动物自由饮水、进食,实验周期6个月。观察氟斑牙发生发展情况,采用灰化蒸馏-氟试剂比色法测定兔股骨中氟含量,蛋白免疫印迹法检测股骨中骨形态发生蛋白2蛋白表达,采用酶联免疫吸附实验检测血清骨钙素和Ⅰ型前胶原氨基端原肽水平。结果与结论:①低氟组以轻度氟斑牙为主,表现为牙齿失去光泽,部分可见细纹;中氟组以中度氟斑牙为主,表现为牙齿表面凹凸不平、色泽不均,个别表现为重度氟斑牙,表现为牙齿缺损;高氟组以重度氟斑牙为主,表现为牙齿表面无光泽,牙齿发育畸形;②随着摄氟质量浓度的升高,兔股骨内骨氟含量增加,其中高氟组骨氟含量高于其他3组(P0.05);⑤兔股骨骨形态发生蛋白2表达与骨氟含量的相关性与氟暴露浓度有关,过高或过低的氟浓度均会影响骨形态发生蛋白2的表达。

摘要： 背景:骨软骨的缺损修复是目前骨科医生面对的一大挑战,当前的治疗手段达不到令人满意的效果,组织工程的发展为骨软骨缺损修复带来了新的希望。骨形态发生蛋白2是参与骨骼生长发育和修复的重要因子,具有良好的骨诱导作用,近些年研究发现骨形态发生蛋白2对软骨发育也有影响。目的:从骨形态发生蛋白2对骨和软骨2个方面的影响,探讨近年来骨形态发生蛋白2在骨软骨缺损修复中的研究进展。并通过总结骨形态发生蛋白2在各类骨缺损修复中的应用情况,为治疗骨软骨的缺损提供新的思路和策略。方法:在万方数据库和中国知网以“骨形态发生蛋白2,软骨细胞,软骨缺损,骨缺损,间充质干细胞,信号通路”为检索词;在PubMed数据库以“Bone morphogenetic protein 2,Chondrocytes,Cartilage injury,Bone injury,MSC,Signaling pathways”为检索词,检索2012-01-01/2022-07-01收录的有关骨软骨缺损修复中骨形态发生蛋白2的作用机制及在骨软骨组织工程中的应用研究。结果与结论:(1)骨形态发生蛋白2促进间充质干细胞软骨分化,并且能够维持软骨细胞表型来维持软骨的特性。(2)骨形态发生蛋白2通过调节软骨细胞的糖代谢来控制软骨发育。(3)骨形态发生蛋白2通过经典Smad 1/5/8信号通路对成骨起作用,但成软骨的机制尚不清楚。(4)骨形态发生蛋白2目前在组织工程中的研究和应用主要集中在骨缺损修复领域,关于软骨的缺损修复研究较少,如何阻止骨形态发生蛋白2促使软骨细胞向肥大软骨细胞的转化会是未来研究的重点。

摘要： 背景:Biodentine是一种具有生物相容性的新型硅酸钙口腔修复材料,它不仅可以增加牙髓细胞中生长因子的分泌,也可以诱导牙本质的矿化,但是其在骨修复方面的研究较少.目的:通过构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,研究Biodentine对于干扰骨形态发生蛋白2小鼠成骨前体细胞株的增殖及分化能力的影响.方法:将0.1,1,10,100 g/L的Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞24 h,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验筛选最佳的作用质量浓度10 g/L,用于以下实验.将Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞1,3,5,7d,以未干预组为对照,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察作用前后细胞的增殖及成骨分化.构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察干扰前后细胞的增殖及成骨分化.构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,Biodentine组加入10 g/L的Biodentine浸提液,设置单纯干扰组为对照,作用24,48 h后,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察细胞的增殖及成骨分化;作用24 h后,Real-time PCR、Western blot检测碱性磷酸酶mRNA与蛋白的表达.结果 与结论:①10 g/L的Biodentine浸提液在1,3,5,7d可促进小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;②干扰骨形态发生蛋白2可抑制小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;③Biodentine组作用24,48 h后的细胞增殖与成骨分化能力高于干扰组(P＜0.05),作用24 h后的碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达高于干扰组(P＜0.05);④结果表明,10g/L的Biodentine可以通过骨形态发生蛋白2增强成骨细胞的增殖及成骨分化.

摘要： 背景:绝经后骨质疏松症在中老年女性中属于高发疾病,严重影响其生活质量,发现并探索出一种有效的防治手段是非常必要的.中医可通过"肾主骨"理论选用补肾药治疗绝经后骨质疏松症,但其分子机制尚不清楚.目的:观察左归丸对骨形态发生蛋白2/Runx-2/Osterix信号通路的影响.方法:采用卵巢摘除的方法建立绝经后骨质疏松症小鼠模型,然后将造模成功的84只小鼠分为模型组、假手术组、雌二醇组、左归丸高、中、低(0.936,0.468,0.234 g/L)剂量组、阻断剂组,每组12只.左归丸高、中、低剂量组给予相应质量浓度的左归丸水煎液;假手术组、模型组给予等体积的生理盐水;雌二醇组给予雌二醇水溶液;阻断剂组给予ICI182780+左归丸高剂量水煎液,持续灌胃8周.采用免疫组化和Western Blot法检测左归丸干预后卵巢摘除骨质疏松症模型小鼠胫骨和股骨中骨形态发生蛋白信号通路的关键蛋白骨形态发生蛋白2、Runx-2和Osterix的表达;通过ICI182780阻断雌激素受体后,检测骨形态发生蛋白通路中蛋白表达的变化.结果 与结论:①免疫组化结果显示,与模型组小鼠相比,左归丸高、中剂量均可以明显提高模型组小鼠骨形态发生蛋白2的表达水平(P＜ 0.01,P＜0.05);左归丸高、中、低剂量组Runx-2的表达水平相比差异均有显著性意义(P＜0.01);②免疫印迹实验结果显示,与模型组小鼠相比,左归丸高、中剂量均可以明显提高模型组小鼠骨形态发生蛋白2的表达水平(P＜0.05);左归丸高、中、低剂量组Runx-2的表达水平均显著高于模型组(P＜ 0.01,P＜0.05,P＜0.05);左归丸高、中剂量组Osterix的表达水平均显著高于模型组(P＜0.01,P＜0.05);③ICI182780干预后,与左归丸高剂量组相比,阻断剂组小鼠胫骨骨形态发生蛋白2和Runx-2蛋白的表达水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);阻断剂组小鼠股骨中骨形态发生蛋白2、Runx-2和Osterix的表达水平均显著降低(P＜0.01);④提示左归丸可以通过雌激素受体激活骨形态发生蛋白2/Runx-2/Osterix信号通路进而参与骨代谢过程,实现骨保护的作用.

摘要： 背景:Biodentine是一种具有生物相容性的新型硅酸钙口腔修复材料,它不仅可以增加牙髓细胞中生长因子的分泌,也可以诱导牙本质的矿化,但是其在骨修复方面的研究较少。目的:通过构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,研究Biodentine对于干扰骨形态发生蛋白2小鼠成骨前体细胞株的增殖及分化能力的影响。方法:将0.1,1,10,100 g/L的Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞24 h,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验筛选最佳的作用质量浓度10 g/L,用于以下实验。将Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞1,3,5,7 d,以未干预组为对照,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察作用前后细胞的增殖及成骨分化。构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察干扰前后细胞的增殖及成骨分化。构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,Biodentine组加入10 g/L的Biodentine浸提液,设置单纯干扰组为对照,作用24,48 h后,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察细胞的增殖及成骨分化;作用24 h后,Real-time PCR、Western blot检测碱性磷酸酶mRNA与蛋白的表达。结果与结论:①10 g/L的Biodentine浸提液在1,3,5,7 d可促进小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;②干扰骨形态发生蛋白2可抑制小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;③Biodentine组作用24,48 h后的细胞增殖与成骨分化能力高于干扰组(P<0.05),作用24 h后的碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达高于干扰组(P<0.05);④结果表明,10 g/L的Biodentine可以通过骨形态发生蛋白2增强成骨细胞的增殖及成骨分化。

摘要： 背景:绝经后骨质疏松症在中老年女性中属于高发疾病,严重影响其生活质量,发现并探索出一种有效的防治手段是非常必要的。中医可通过“肾主骨”理论选用补肾药治疗绝经后骨质疏松症,但其分子机制尚不清楚。目的:观察左归丸对骨形态发生蛋白2/Runx-2/Osterix信号通路的影响。方法:采用卵巢摘除的方法建立绝经后骨质疏松症小鼠模型,然后将造模成功的84只小鼠分为模型组、假手术组、雌二醇组、左归丸高、中、低(0.936,0.468,0.234 g/L)剂量组、阻断剂组,每组12只。左归丸高、中、低剂量组给予相应质量浓度的左归丸水煎液;假手术组、模型组给予等体积的生理盐水;雌二醇组给予雌二醇水溶液;阻断剂组给予ICI182780+左归丸高剂量水煎液,持续灌胃8周。采用免疫组化和Western Blot法检测左归丸干预后卵巢摘除骨质疏松症模型小鼠胫骨和股骨中骨形态发生蛋白信号通路的关键蛋白骨形态发生蛋白2、Runx-2和Osterix的表达;通过ICI182780阻断雌激素受体后,检测骨形态发生蛋白通路中蛋白表达的变化。结果与结论:①免疫组化结果显示,与模型组小鼠相比,左归丸高、中剂量均可以明显提高模型组小鼠骨形态发生蛋白2的表达水平(P<0.01,P<0.05);左归丸高、中、低剂量组Runx-2的表达水平相比差异均有显著性意义(P<0.01);②免疫印迹实验结果显示,与模型组小鼠相比,左归丸高、中剂量均可以明显提高模型组小鼠骨形态发生蛋白2的表达水平(P<0.05);左归丸高、中、低剂量组Runx-2的表达水平均显著高于模型组(P<0.01,P<0.05,P<0.05);左归丸高、中剂量组Osterix的表达水平均显著高于模型组(P<0.01,P<0.05);③ICI182780干预后,与左归丸高剂量组相比,阻断剂组小鼠胫骨骨形态发生蛋白2和Runx-2蛋白的表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);阻断剂组小鼠股骨中骨形态发生蛋白2、Runx-2和Osterix的表达水平均显著降低(P<0.01);④提示左归丸可以通过雌激素受体激活骨形态发生蛋白2/Runx-2/Osterix信号通路进而参与骨代谢过程,实现骨保护的作用。

摘要： 背景:骨形态发生蛋白2可以促进成骨作用,骨细胞通过表达骨硬化蛋白基因分泌骨硬化蛋白进而抑制成骨细胞的成骨作用;有研究发现骨形态发生蛋白家族直接作用骨细胞时可促进骨硬化蛋白的分泌,这与骨形态发生蛋白的正向成骨作用相矛盾.目的:探究骨形态发生蛋白2对促进成骨细胞增殖能力及间接调控骨细胞表达骨硬化蛋白基因的机制.方法:体外分别以不同质量浓度(4,8,16,32,64,125,250,500,1000μg/L)的骨形态发生蛋白2干预小鼠成骨样细胞MC-3T3-E1细胞,CCK-8法检测促进MC-3T3-E1细胞增殖的最佳作用浓度,然后通过MC-3T3-E1细胞与小鼠骨样细胞MLO-Y4细胞共培养技术,探究骨形态发生蛋白2间接调控骨细胞骨硬化蛋白基因表达的影响,通过RT-PCR检测MC-3T3-E1细胞中可能发生变化的基因,筛选出MC-3T3-E1细胞的目的基因,验证目的基因对MLO-Y4细胞表达骨硬化蛋白的影响.结果 与结论:①骨形态发生蛋白2对成骨细胞具有显著的促增殖作用,相对于其他质量浓度,250μg/L具有最佳作用;②RT-PCR实验结果显示,骨形态发生蛋白2可间接调控骨细胞骨硬化蛋白基因的表达,促进骨硬化蛋白表达量的下调(P<0.01);③目的基因筛选结果显示,相对于其他基因,成骨细胞核因子κB受体活化因子配体表达量的下调与骨保护素表达量的上调(P<0.01);④目的基因验证结果证明,骨形态发生蛋白2可能是通过间接影响成骨细胞表达骨保护素与核因子κB受体活化因子配体的改变,进而影响MLO-Y4细胞中骨硬化蛋白的表达,从而实现正向促进成骨.

摘要： 背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向.目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性.方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞进行分组诱导,分别为对照组(普通IMDM培养基)、骨形态发生蛋白2组(200 ng/L)、5-氮胞苷组(10μmol/L)、5-氮胞苷+骨形态发生蛋白2组.诱导3 d后更换正常培养基继续培养4周,免疫细胞化学法检测cTnI的表达,免疫荧光化学法检测Desmin、cTnT的表达,Western blot检测cTnT和cTnI的表达;诱导3 d后更换正常培养基继续培养1,2,4周,采用RT-qPCR检测心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达.结果 与结论:①Western blot检测诱导组均表达cTnT、cTnI,联合诱导组cTnT、cTnI的表达高于单独诱导组(P<0.01);②免疫细胞化学法检测诱导组cTnI均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);免疫荧光细胞化学法检测诱导组Desmin、cTnT均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);③RT-qPCR检测诱导组均有GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);④结果表明,骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷和骨形态发生蛋白2联合诱导后可以提高心肌样细胞的分化效率.

摘要： 目的:观察三七总皂苷(PNS)结合细胞穿透肽Tat(47-57)对骨折的愈合作用,并探讨其可能机制。方法:研究选取成年雄性SD大鼠建立骨折实验动物模型,实验动物随机分为四组:空白对照组、外用三七总皂苷组(PNS外用组)、外用三七总皂苷和细胞穿透肽联合组(Tat-PNS外用组)、口服三七总皂苷组(PNS口服组)。给药14d后,检测骨折病灶局部的抗氧化SOD酶活性,同时取骨折病灶局部进行病理切片分析,对比和分析各给药组对实验大鼠骨折愈合过程的影响程度。结果:与空白对照组对比,PNS外用组对大鼠骨折愈合无明显的疗效,可能与PNS无法有效透皮吸收,并在病灶局部富集有效浓度有关。Tat-PNS外用组能够明显增加病灶局部的SOD酶活性(P<0.05),而且病理切片显示骨折处恢复状况良好,其促进骨折病灶处愈合的效果与PNS口服组效果基本一致。结论:三七总皂苷与细胞穿透肽Tat(47-57)联合经皮给药能够明显促进骨折愈合,其作用机制可能与提高骨折病灶局部的抗氧化力,增强骨形态发生蛋白BMP-2的表达有关。

摘要： 血管钙化在血液透析患者中很常见,且患者在透析过程中使用碳酸氢盐透析液,使机体处于碱性环境中.本实验通过调整培养基pH值,探讨BMP-2在碱性环境中对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用.研究发现：碱性环境能够促进高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化，其机制可能是通过上调BMP-2进而促进了血管平滑肌细胞表型转化实现的。

摘要： 血管钙化在血液透析患者中很常见,且患者在透析过程中使用碳酸氢盐透析液,使机体处于碱性环境中.本实验通过调整培养基pH值,探讨BMP-2在碱性环境中对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用.研究发现：碱性环境能够促进高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化，其机制可能是通过上调BMP-2进而促进了血管平滑肌细胞表型转化实现的。

摘要： 血管钙化在血液透析患者中很常见,且患者在透析过程中使用碳酸氢盐透析液,使机体处于碱性环境中.本实验通过调整培养基pH值,探讨BMP-2在碱性环境中对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用.研究发现：碱性环境能够促进高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化，其机制可能是通过上调BMP-2进而促进了血管平滑肌细胞表型转化实现的。

摘要： 血管钙化在血液透析患者中很常见,且患者在透析过程中使用碳酸氢盐透析液,使机体处于碱性环境中.本实验通过调整培养基pH值,探讨BMP-2在碱性环境中对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用.研究发现：碱性环境能够促进高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化，其机制可能是通过上调BMP-2进而促进了血管平滑肌细胞表型转化实现的。

摘要： 血管钙化在血液透析患者中很常见,且患者在透析过程中使用碳酸氢盐透析液,使机体处于碱性环境中.本实验通过调整培养基pH值,探讨BMP-2在碱性环境中对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用.研究发现：碱性环境能够促进高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化，其机制可能是通过上调BMP-2进而促进了血管平滑肌细胞表型转化实现的。

摘要： 本文探讨骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)信号通路在不同pH值环境影响高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用.选取5～8周龄健康雄性SD大鼠,体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定.将VSMCs用随机抽样法分为正常对照组(pH7.4)、pH7.4+高磷组、pH7.1+高磷组及pH7.7+高磷组.采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BMP-2、Smad1及Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达.结果表明，胞外酸性环境(pH7.1)抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，胞外碱性环境(pH7.7促进高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，其机制可能是通过BMP-2信号通路介导了VSMCs的表型转化.

摘要： 本文探讨骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)信号通路在不同pH值环境影响高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用.选取5～8周龄健康雄性SD大鼠,体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定.将VSMCs用随机抽样法分为正常对照组(pH7.4)、pH7.4+高磷组、pH7.1+高磷组及pH7.7+高磷组.采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BMP-2、Smad1及Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达.结果表明，胞外酸性环境(pH7.1)抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，胞外碱性环境(pH7.7促进高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，其机制可能是通过BMP-2信号通路介导了VSMCs的表型转化.

摘要： 本文探讨骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)信号通路在不同pH值环境影响高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用.选取5～8周龄健康雄性SD大鼠,体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定.将VSMCs用随机抽样法分为正常对照组(pH7.4)、pH7.4+高磷组、pH7.1+高磷组及pH7.7+高磷组.采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BMP-2、Smad1及Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达.结果表明，胞外酸性环境(pH7.1)抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，胞外碱性环境(pH7.7促进高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，其机制可能是通过BMP-2信号通路介导了VSMCs的表型转化.

摘要： 本文探讨骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)信号通路在不同pH值环境影响高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用.选取5～8周龄健康雄性SD大鼠,体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定.将VSMCs用随机抽样法分为正常对照组(pH7.4)、pH7.4+高磷组、pH7.1+高磷组及pH7.7+高磷组.采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BMP-2、Smad1及Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达.结果表明，胞外酸性环境(pH7.1)抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，胞外碱性环境(pH7.7促进高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，其机制可能是通过BMP-2信号通路介导了VSMCs的表型转化.

摘要： 本文探讨骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)信号通路在不同pH值环境影响高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用.选取5～8周龄健康雄性SD大鼠,体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定.将VSMCs用随机抽样法分为正常对照组(pH7.4)、pH7.4+高磷组、pH7.1+高磷组及pH7.7+高磷组.采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BMP-2、Smad1及Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达.结果表明，胞外酸性环境(pH7.1)抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，胞外碱性环境(pH7.7促进高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，其机制可能是通过BMP-2信号通路介导了VSMCs的表型转化.

摘要： 本发明涉及纤维蛋白胶复合人重组骨形态发生蛋白2微球的制备方法和用途，通过制备出粒径适宜的缓释微球，然后构建rhBMP-2/PLGA微球/纤维蛋白胶复合材料，可以在局部注射应用，既可减少手术的创伤，又可通过不断补充局部骨形态发生蛋白来加速骨折及骨不连的愈合过程，是具有很好降解性和成骨活性的骨修复材料。

摘要： 本发明涉及优化的基于大肠杆菌表达系统的重组人骨形态发生蛋白-2的DNA序列及重组人骨形态发生蛋白-2的制备。具体地，本发明提供了优化的、适合大肠杆菌表达系统的重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的DNA序列，高效生产rhBMP-2的方法，以及有关的工程菌的构建、rhBMP-2的表达和纯化的工艺。与表达未经优化的原hBMP-2基因相比，本发明的优化的hBMP-2基因在大肠杆菌工程菌中的rhBMP-2表达量提高了50％。此外，本发明还提供了复性效率更高、分离纯化得率更高的长链型rhBMP-2的制备方法。

摘要： 描述了一种在细胞中诱导一种或多种骨形态发生蛋白(BMPs)和/或转化生长因子-β(TGF-βs)蛋白表达的方法。该方法包括用包含操作性连接于一启动子的编码LIM矿化蛋白的核苷酸序列的分离核酸转染细胞。所述一种或多种骨形态发生蛋白可以是BMP-2、BMP-4、BMP-6、BMP-7或它们的组合。所述转化生长因子-β蛋白可以是转化生长因子-β1蛋白(TGF-β1)。转染可通过直接注射病毒或裸DNA，或通过非病毒载体如质粒，离体或在体内完成。该方法可用来在骨细胞中诱导骨形成，或在能够产生蛋白聚糖和/或胶原蛋白的细胞中，刺激蛋白聚糖和/或胶原蛋白的生成。

摘要： 本发明涉及一种重组人骨形态发生蛋白异源二聚体蛋白及高效表达和复性方法，方法包括以下步骤：利用融合PCR技术通过编码(GlyGlyGlyGlySer)3的DNA片段将BMP7和BMP2基因连接，将融合基因插入pHis-NusA质粒中，构建重组质粒，重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中，37°C培养，0.5mM IPTG诱导表达，结果表明此方法高效表达BMP7/BMP2异源二聚体蛋白，表达蛋白以包涵体形式存在，经过简便的包涵体纯化和复性即能得到大量复性蛋白，本方法获得BMP活性蛋白操作简单，极大地降低了制备成本，适合大规模发酵生产，为BMP在临床上治疗骨损伤的广泛应用提供了可能。

摘要： 本发明提供的制备重组人骨形态发生蛋白－7成熟肽二聚体的方法包括以下步骤：1)编码rhBMP－7成熟肽的核甘酸序列SEQ ID NO.1，它具有SEQ ID NO.2蛋白质序列；2)构建含BMP－7基因的表达载体；3)将步骤2)中的表达载体转入宿主细胞，形成能产生人BMP－7蛋白质的转化细胞，并对其进行检测；4)培养步骤3)中的转化子细胞；5)用物理方法或化学试剂裂解细胞，抽提重组蛋白质，将单链BMP－7复性、分离、纯化得到有生物活性的二聚体。用本发明方法制备重组人骨形态发生蛋白－7成熟肽二聚体，可大大降低成本，提高产量，操作简便。

摘要： 本发明涉及排斥性引导分子(RGM)蛋白质家族成员的骨形态发生蛋白(BMP)-结合结构域及从它们衍生的多肽片段和融合蛋白的鉴定和用途。本发明结构域，即肽片段和融合蛋白，适用作个体主动或被动免疫的药物，或作为用于疾病或医学病症的诊断和治疗药物，所述疾病或医学病症的起因或进展涉及RGM家族成员和与这一分子相关的细胞受体，例如再生蛋白和/或特别是BMP。本发明进一步涉及抗本发明结合结构域以及抗自其衍生的多肽的单克隆抗体和多克隆抗体，以及产生本发明多肽、蛋白质和抗体的方法。

摘要： 本发明涉及一种负载人重组骨形态发生蛋白rhBMP‑2的壳聚糖/丝素蛋白海绵，由包括人重组骨形态发生蛋白rhBMP‑2、丝素蛋白、壳聚糖、交联剂、以及其他辅料制备得到，其中丝素蛋白和壳聚糖的重量百分比为2：1。本发明一种负载人重组骨形态发生蛋白rhBMP‑2的壳聚糖/丝素蛋白海绵，将壳聚糖和丝素蛋白复合成海绵，并在复合海绵的过程中将rhBMP‑2加入，使得rhBMP‑2在成型后的海绵内均匀分布。利用京尼平和丝素蛋白进行初步交联，再加入改性壳聚糖和辣根氧化物酶，增加获得的海绵的机械应力，以及壳聚糖/丝素蛋白海绵作为rhBMP‑2载体，实现降解和释药时间的巨大进步，同时采用的壳聚糖是烯丙基三甲基氯化铵改性壳聚糖，降低了过敏性。

摘要： 本发明公开了一种优化的重组人骨形态发生蛋白质-2的DNA序列及其编码蛋白质，其重组蛋白质rhBMP-2SEDIDNO．1为人的BMP-2成熟肽的C端110个氨基酸加上MGAKQ五肽，其中BMP-2成熟肽的第五个氨基酸H突变为Q；构建的重组rhBMP-2蛋白序列，通过对密码子的优化，得到优化的DNA序列SEDIDNO．2和SEDIDNO．3。BMP-2成熟肽在加五肽或二肽的重组后，蛋白的表达量可提高至30%以上，而且后续纯化和复性过程中更容易，能够得到更高的复性效率，因而其产量会明显增高，有更高的生物活性，更加适合工业化生产。

摘要： 本发明涉及纤维蛋白胶复合人重组骨形态发生蛋白2微球的制备方法和用途，通过制备出粒径适宜的缓释微球，然后构建rhBMP-2/PLGA微球/纤维蛋白胶复合材料，可以在局部注射应用，既可减少手术的创伤，又可通过不断补充局部骨形态发生蛋白来加速骨折及骨不连的愈合过程，是具有很好降解性和成骨活性的骨修复材料。

摘要： 本发明涉及优化的基于大肠杆菌表达系统的重组人骨形态发生蛋白-2的DNA序列及重组人骨形态发生蛋白-2的制备。具体地，本发明提供了优化的、适合大肠杆菌表达系统的重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的DNA序列，高效生产rhBMP-2的方法，以及有关的工程菌的构建、rhBMP-2的表达和纯化的工艺。与表达未经优化的原hBMP-2基因相比，本发明的优化的hBMP-2基因在大肠杆菌工程菌中的rhBMP-2表达量提高了50％。此外，本发明还提供了复性效率更高、分离纯化得率更高的长链型rhBMP-2的制备方法。