复合碱性成纤维细胞生长因子聚乳酸/胶原支架修复兔尿道缺损

摘要

背景:碱性成纤维细胞生长因子作为有效的血管形成因子之一,不但可增加缺血组织的血液灌注量、加快组织微血管再生,还可提高肌肉组织的血管形成,增加肌肉的血流灌注量.目的:将碱性成纤维细胞生长因子复合于聚乳酸/胶原支架中,修复兔尿道缺损,提升组织工程支架诱导尿道再生的能力.方法:制备电纺聚乳酸/胶原尿道支架与负载碱性成纤维细胞生长因子的电纺聚乳酸/胶原支架,分别命名为对照支架与实验支架,检测实验支架的体外缓释性能.将第3代兔脂肪间充质干细胞接种于两种支架表面7 d,分别进行CCK-8实验、细胞黏附实验与细胞活死染色.取成年雄性新西兰大白兔24只,建立长约5 cm的尿道缺损模型,随机分2组治疗,每组12只,分别植入对照支架+脂肪间充质干细胞复合体与实验支架+脂肪间充质干细胞复合体,术后12,24周分别进行逆行尿道造影与尿道组织学观察.结果与结论:①体外缓释实验:在前6 d时,实验支架中的碱性成纤维细胞生长因子以平均2.5 ng/d的速率释放,在第7-14天时以平均1.52 ng/d的速率释放,此后以平均1.12 ng/d的速率释放,至第21天后释放速率逐步下降.②体外细胞实验显示,实验支架上的细胞增殖速率快于对照支架(P < 0.05);脂肪间充质干细胞可黏附于两种支架表面,生长状态良好并伸出伪足,其中实验支架上的细胞增殖迅速;实验支架上的细胞存活率高于对照支架(P < 0.05).③体内实验结果:术后24周尿道造影下可见,实验支架组未见尿道狭窄,对照支架组可见轻度的尿道狭窄.术后24周组织学观察显示,实验支架组尿道组织可见较厚且较完整的上皮层,可见大量肌纤维束与血管形成;对照支架组尿道组织上皮层形成较薄,也可见少量的肌纤维束与血管形成.④结果表明,采用负载碱性成纤维细胞生长因子的电纺聚乳酸/胶原支架修复兔尿道缺损可促进移植物局部血管形成,改善局部尿道微环境,促进尿道再生.