弧菌

摘要： 从西沙永乐群岛7个岛礁海域的海水中分离出47株弧菌,将47株菌株进行16S rDNA、HSP60和gyrB扩增,序列在Genebank中进行比对,构建系统发育树。结果显示利用16S rDNA和HSP60序列比对均无法鉴定弧菌到种。gyrB 1和gyrB 2引物均只能扩增出6株菌株的目标序列,gyrB 3引物能扩增47株菌株的目标序列,且成功构建系统发育树,可鉴定弧菌到种。47株弧菌菌株分属于7个种,鸭公岛弧菌多样性最丰富,可分离到5种;石屿和羚羊礁筐仔沙洲弧菌多样性最低,均只分离到2种。本研究建立了可靠的海洋弧菌的分子鉴定方法,获得的菌株丰富了南海微生物菌种库,可为今后的研究与教学提供材料。

摘要： 研究基于弧菌属16S rRNA保守基因片段设计引物,利用恒温条件进行扩增,建立并优化了弧菌属环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,在LAMP检测方法最优条件下,验证LAMP方法的特异性、灵敏度和实际应用性。结果表明:最佳反应条件为反应温度61°C、Mg^(2+)、dNTPs和甜菜碱的浓度分别为4 mmol/L、1.8 mmol/L和0.4 mol/L;在最佳检测条件下,以4种弧菌(溶藻弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌)和8种其他菌株作为验证模板,发现该方法仅对弧菌有阳性扩增结果,证明该方法具有较高的特异性;同时,该方法对创伤弧菌DNA的最小检出量为940 fg/μL,其检测下限比常规PCR法降低了2个数量级。该研究成功建立了弧菌属细菌的快速检测方法,且方法具有良好的特异度和敏感度,为弧菌的快速检验提供了技术支撑。

摘要： 近年来,凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖生产中弧菌病的发病率越来越高,严重阻碍了我国海水养殖业的发展。文章介绍了凡纳滨对虾养殖过程中容易发生的几种弧菌病及其防治方法的相关研究,并对常见的哈维氏弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌和副溶血弧菌这4种弧菌的研究进展进行了综述,以期为海水养殖中弧菌病的防治和控制提供参考。

摘要： 群体感应是一种细菌细胞间的通讯过程,细菌通过测量细胞外自诱导剂浓度从而感知群体细胞密度变化。群体感应使细菌能够在两种基因表达模式下转换:在低细胞密度时有利于个体发展,而在高细胞密度时则有利于群体发展。目前主要有7种群体感应通路,分别以oligopeptides、AHL(Acylated Homoserine Lactones)、AI-2(Autoinducer-2)、CAI-1(Cholera Autoinducer-1)、PQS(Pseudomonas Quinolone Signal)、AI-3(Autoinducer-3)以及DSF(Diffusible Signal Factor)作为各群体感应通路的信号分子;其中oligopeptides存在于革兰氏阳性细菌中,其余6种信号分子存在于革兰氏阴性细菌中。弧菌是导致人类感染和水产品污染的主要病原菌,传统的抗生素治疗弧菌感染具有很强的选择压力,导致越来越多耐药弧菌出现。面对愈发严峻的弧菌耐药性问题,目前群体感应淬灭被认为是治疗弧菌感染的重要替代手段之一,因而有必要调查弧菌属细菌不同群体感应通路的分布情况,为针对弧菌的群体感应淬灭剂研发提供重要参考信息。通过比较基因组学分析,发现全基因组测序的46株弧菌存在AHL、AI-2以及CAI-1这3种信号分子通路,其中5株弧菌均含有上述3种信号分子通路,共有30株弧菌只含有AI-2和CAI-1两种信号分子通路;而46株弧菌都不存在PQS、AI-3以及DSF群体感应通路。此外,弧菌群体感应通路的分布与物种进化有关,含有同种群体感应信号分子通路的弧菌,其亲缘关系较近,说明该通路的基因进化自它们的共同祖先。本研究表明开发针对弧菌的群体感应淬灭剂应以AI-2和CAI-1两种信号分子介导的通路作为靶点。

摘要： 目前市场上抑制弧菌的产品主要有抗生素类、消毒剂类、中草药类等。抗生素易导致耐药性和残留隐患,容易破坏水产动物免疫力和正常菌群微生态平衡;消毒剂往往无针对性,存在“通杀”风险;中草药制剂通常见效慢,效果差异较大。因此,开发安全、无抗、高效的新型抗弧菌产品具有重要的现实意义。

摘要： 开年以来,受极端恶劣天气影响,从广西到广东,从福建到江苏,弧菌、虹彩病毒等病害肆虐,整个华南华东养虾区几乎全部沦陷,多个地区早造虾颗粒无收,终端市场一片惨淡。在行业消沉之际,一款“弧菌克星”横空出世,它就是由诺立(上海)生物工程有限公司(以下简称诺立)花费三年时间潜心研发的“猎弧特工”系列噬菌体制剂产品。

摘要： 探讨了使用水产动物相匹配的益生菌制剂,以减少弧菌对水产养殖和育苗过程中所造成的经济损失,对弧菌进行直接或者间接预防、杀灭、控制的可能性。目前的研究和实验结果表明,使用芽孢杆菌、乳酸杆菌、光合细菌等菌种进行拌料和调水,均可通过控制水体优势菌群和所饲养水生生物肠道菌群,对弧菌性肠炎进行预防或初步治疗;也可以通过蛭弧菌,对全系统内弧菌的浓度进行控制,将其降低至环境内经济水生生物的最低感染阈值之下。

摘要： 为了探讨肠道微生物在水产动物脂类代谢中的作用,提高水产动物对配合饲料中植物油的利用能力,本研究收集摄食豆油或亚麻籽油配合饲料的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)幼鱼的肠道内容物,通过在培养基中添加尼罗红染液及混合脂肪酸底物的方法,从中筛选出一株能吸收亚油酸、亚麻酸的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus TO1);通过观察三丁酸甘油酯(tributyrin)固体培养基中的水解圈及在液体培养基中添加油脂和溴甲酚紫(bromocresol purple)指示剂方法,筛选到一株能高产脂肪酶、降解豆油和亚麻籽油的哈维氏弧菌(Vibrio harveyi TO1).这些结果表明,鱼类肠道微生物能够响应配合饲料中的脂肪源,当用植物油替代配合饲料中的鱼油时,肠道中吸收、降解、利用植物油的弧菌的丰度增加,进而参与鱼体内的脂类代谢.

摘要： 【目的】明确循环水养殖系统(Recirculating aquaculture system,RAS)的营养盐及微生物组成特征,为东星斑循环水养殖系统的合理利用提供理论依据和技术参考。【方法】检测东星斑循环水养殖系统进水、养殖池、养殖池出水、生物滤池、紫外消毒池的水质指标、水体中弧菌数量,利用高通量测序技术对水体中微生物群落进行分析。【结果】氨氮、硝酸盐氮和磷酸盐的浓度从养殖环节至消毒环节呈现先上升后下降的变化趋势,亚硝酸盐氮则相反。外源海水样品中的弧菌数量小于循环水养殖系统中各个环节样品中的弧菌数量,弧菌数量经过养殖池后明显上升,经过生物滤池处理之后明显下降。在门分类水平上,循环水养殖系统中不同环节主要的微生物门类是变形菌门Proteobacteria、拟杆菌门Bacteroidota、厚壁菌门Firmicutes。在属分类水平上,主要为假交替单胞菌属Pseudoalteromonas、发光杆菌属Photobacterium、弧菌属Vibrio、乳杆菌属Lactobacillus,Vibrio中主要为Vibrio ponticus,占Vibrio总量的66.17%。【结论】循环水养殖系统的水处理环节可以有效降低养殖池出水中氨氮、硝酸盐氮以及磷酸盐的浓度和弧菌数量,同时揭示了循环水系统不同环节微生物组成特征。

摘要： 旨在探究定向培藻在凡纳滨对虾养殖中应用效果.选取体长0.545cm的凡纳滨对虾84万尾,随机分为2组(每组3个重复,每个室内水泥池(30m2)14万尾),对照组水体不添加藻,试验组水体中添加海链藻(藻浓度维持2×104～5×104 cell·mL-1),试验周期25d.结果表明:定向培藻对凡纳滨对虾生长、存活及养殖水质影响显著(P<0.05),其中,对虾体长、体质量成活率和饵料系数均为海链藻组显著大于对照组(P<0.05);养殖水体的pH日差值和、NO3--N、NH4+-N、PO43--P和养殖水体中弧菌数量均为海链藻组显著小于对照组(P<0.05).由此可见,在凡纳滨对虾养殖过程中,养殖池中添加定向培海链藻有利于维持养殖池水体的水质稳定,减少水体的氮磷含量和抑制弧菌的生长,同时也有利于凡纳滨对虾的健康生长.

摘要： 采用塔菲尔极化曲线,电化学阻抗谱测试技术,研究了B10合金分别在海水中接种弧菌、硫酸盐还原菌以及二者混合菌种的条件下的腐蚀行为.结果表明,弧菌对B10合金腐蚀行为影响最小,SRB影响最大,混合菌种则居于二者之间.

摘要： 采用塔菲尔极化曲线,电化学阻抗谱测试技术,研究了B10合金分别在海水中接种弧菌、硫酸盐还原菌(SRB)以及二者混合菌种的条件下的腐蚀行为.结果表明,弧菌对B10合金腐蚀行为影响最小,SRB影响最大,混合菌种则居于二者之间.

摘要： 近年来弧菌在凡纳滨对虾养殖中带来了很大的危害,通过及时检测弧菌量的增减趋势,为我们预防虾病的发生提供了直观有效的数据支持.我们通过对水体中弧菌的长期监测,发现当弧菌达到500个/ml或菌落占培养皿表面积的1/5以上时,就应及时对水体和虾体进行处理,如不及时处理发生弧菌病的几率大大增加.实践表明用弧菌天敌加黄金多糖可有效控制弧菌病的发生.

摘要： 目的：了解温州地区食品中致病性弧菌污染程度和耐药性，为控制致病性弧菌相关的食源性疾病和临床合理使用抗生素提供科学依据。方法：药敏试验采用Kirby-Bauer纸片扩散法，结果判断按CLSI抗微生物药物敏感性试验执行标准。结果：8种117株致病性弧菌对大多抗菌药物敏感，耐药率最高的是氨苄西林，为89.7％，利福平次之，为45.3％；多重耐药性菌株33株，占总菌株数的28.2％；各类致病性弧菌对被检测的抗菌药物在耐药程度上存在一定差异，以嗜水、非01群霍乱弧菌及豚鼠3种致病性弧菌的耐药性较高。结论：温州地区各类食品中携带致病性弧菌情况较为普遍，药敏试验证实8种致病性弧菌对抗菌药物的耐药现象较为普遍，应引起相关部门的重视。可选择氨基糖甙类、头孢菌素类和氟喹诺酮类等抗菌药物治疗致病性弧菌引起的食源性疾病。

摘要： 研究背景:弧菌感染引起坏死性筋膜炎及脓毒症是临床少见的危重急症，病死率达50～100%。早期诊断及外科手术治疗能改善患者预后.但该病的早期识别、急诊手术指征的把握以及手术方式的选择仍是目前困扰急诊医师的主要问题。rn 方法:回顾性分析2000年7月至2009年6月在我院急诊救治的弧菌坏死性筋膜炎病例，总结其外科教治方案，旨在为弧菌性坏死性筋膜炎的外科治疗提供临床证据。rn 结果：共19例弧菌坏死性筋膜炎纳入研究，其中创伤弧菌16例，溶藻弧菌2例，解藻朊酸弧菌1例。所有患者均为男性沿海居民，平均年龄52.2(36～75)岁。68.4%的患者有慢性肝病病史，78.9%的患者有嗜酒史。52.6%的患者有发热，89.5%的患者并发脓毒性休克，31.6%患者进展为多脏器功能不全。快速进展的局部肿痛、皮肤浅农静脉淤血显现等是弧菌坏死性筋膜炎局部损害的早期表现,而皮肤瘀斑、水疱或血疱、坏死、皮下捻发音等是局部损害的晚期征象。17例患者行急诊切开减张引流术,术中可见皮下血管栓塞、皮下组织坏死、肌肉及全层皮肤坏死等征象,探查或病理证实均为坏死性筋膜炎。术后择期清创术植皮修复创面，2例患者行械肢术闭合创面。患者平均住院时间21.3(1～82)天，其中8例死亡，病死率42.1%。rn 结论：快速进展的局部损害和急剧恶化的病情是弧菌坏死性筋膜炎最突出的临床表现，掌握局部皮肤、组织损害的早期征象是早期诊断、及早外科干预的关键。急诊切开减张引流术联合择期清创植皮术能改善患者预后，同时也尽可能的保全了患者肢体的完整性。

摘要： 采用平板计数和16SrDNA序列分析方法,研究了7-11月份三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)养殖水体中的弧菌数量和群落演替。从养殖塘水体中共分离得到90株弧菌,分属于12个种,其中V.natriegens和V.harveyi为优势种,均占总菌株数的四分之一以上。养殖塘水体中弧菌的群落组成随时间而发生非常显著的演替,除了V.harveyi在3个月份中出现,V.neptunius、V.coralliilyticus、V.parahaemolyticus等3个种在2个月份中出现,其余8个种均只出现在单个月份中。7月份弧菌数量最多,占异养细菌总数的95.8%,在总共6种弧菌中,V.natriegens具有明显优势,占该月份弧菌总数的76.1%,但养殖三疣梭子蟹没有任何发病迹象;V.harveyi出现在8、9、10三个月份中,而这三个月也是三疣梭子蟹发病的时期,且在严重发病的8月份的发病蟹体液中也发现有大量的V.harveyi。这些结果似乎表明,V.natriegens的大量出现不仅与病害无关,还可能具有重要的生态功能,而V.harveyi的优势出现可能与病害发生相关。

摘要： 采用平板计数和16SrDNA序列分析方法，研究了7-11月份三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)养殖水体中的弧菌数量和群落演替。从养殖塘水体中共分离得到90株弧菌，分属于12个种，其中V.natriegens和V.harveyi为优势种，均占总菌株数的四分之一以上。养殖塘水体中弧菌的群落组成随时间而发生非常显著的演替，除了V.harveyi在3个月份中出现，V.neptunius，V.coralliilyticus、V.parahaemolyticus等3个种在2个月份中出现，其余8个种均只出现在单个月份中。7月份弧菌数量最多，占异养细菌总数的95.8％，在总共6种弧菌中，V.natriegens具有明显优势，占该月份弧菌总数的76.1％，但养殖三疣梭子蟹没有任何发病迹象：V.harveyi出现在8、9、10三个月份中，而这三个月也是三疣梭子蟹发病的时期，且在严重发病的8月份的发病蟹体液中也发现有大量的V.harveyi。这些结果似乎表明，V.natriegens的大量出现不仅与病害无关，还可能具有重要的生态功能，而V.harveyi的优势出现可能与病害发生相关。

摘要： 本研究采用柔性Linker(GGGGS)和重叠延伸PCR方法将三个毒素基因，即副溶血弧菌的耐热型直接溶血素基因tdh、创伤弧菌的溶细胞毒素基因vvhA和拟态弧菌的热不稳定型溶血素基因vmhA的成熟蛋白基因片段进行串联，得到三联融合毒素基因tdh-vvhA-vmhA(命名为F7)。一致性比对分析与预计融合的基因序列一致性为99.6％.FT的开放阅读框架全长3225 bp，编码1074个氨基酸残基，预测分子量为120.4kDa。将，7亚克隆至表达载体pET-22b(+)中，转化至E.coli BL21(DE3)中进行表达，经SDS-PAEG分析，融合蛋白分子量与预测的相符.终浓度为1mmol/L的IPTG，37°C诱导4 h，融合毒素蛋白表达量最高，经薄层扫描分析，此时融合毒素蛋白占全菌体蛋白的11.49％.三联融合毒素基因的成功克隆与表达，为进一步建立多种食物中毒性弧菌广谱、快速、特异的同步免疫学检测方法奠定基础.

摘要： 2006年7～10月,采用异养菌总数TSB平板计数法(HPC)、弧菌TCBS平板计数法(VPC)在三处刺参养殖场刺参腐皮综合征发生早期,对发病池塘的水质和池塘水体、底泥中异养菌总数和孤菌总数的数量与分布以及刺参肠道中的异养菌总数和弧菌总数进行了研究.水质监测内容包括:温度(T)、盐度(S)、pH值、溶解氧(DO)、化学需氧量(COD)、氨氮(NH4+-N)和亚硝酸氮(NO;-N).结果表明:整个养殖池塘水体出现了不同程度的恶化,水体中异养菌总数与弧菌总数平均分别为3.3×104cfu/mL、2.0×104cfu/mL,水层差异不大;池塘表层底泥中异养菌总数和弧菌总数平均分别为5.9×106cfu/g、1.4×106cfu/g;刺参肠道中异养菌总数和弧菌总数平均分别为5.8×106cfu/g、1.9×106cfu/g;表层底泥与刺参肠道中细菌数量相当,且均较池塘水体高出2个数量级.刺参腐皮综合征的发生与养殖池塘的水质恶化以及池塘水体和底泥中致病性弧菌数量密切相关.

摘要： 从南海海绵体上分离获得一株具有选择性抗肿瘤活性的细菌B2817,多相分类鉴定发现B2817与Vibrio rubber.Vibrio gazogenes亲缘关系最近,16S rDNA同源性分别为98.6％与95.8％,系统发育分析结果表明B2817与Vibrio rubber亲缘关系最近,在发育树上处于同一分支.但在形态、生理生化特征等方面存在较大差异,B2817与两菌的DNA杂交率分别为40.1％、37.6％,由此鉴定B2817为弧菌属的一个新种,命名为海绵弧菌Vibrio spongia sp.nov..

摘要： 一种食品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和拟态弧菌的PCR检测方法，其特征在于：其检测步骤为：待检测的样品经二次增菌后，采用水煮法提取弧菌基因组DNA，然后经PCR反应后，再经电泳、染色、漂洗，最后用凝胶成像仪观察结果并拍照，最后经过谱图分析即可得出检测结果。本发明的优点在于：可同时检测食品中的霍乱弧菌、副溶血弧菌和拟态弧菌，可以在不影响检出率的条件下加快检测速度，减少工作量和检测成本。

摘要： 本发明涉及一种以具备特异性杀灭副溶血弧菌的能力并具有用序列号1标示的基因组为特征的从自然界分离的肌尾噬菌体科噬菌体Vib‑PAP‑5(保藏号KCTC 13029BP)及利用以其为有效成分包含的组合物防止副溶血弧菌感染及治疗副溶血弧菌感染的方法。

摘要： 一种食品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和拟态弧菌的PCR检测方法，其特征在于：其检测步骤为：待检测的样品经二次增菌后，采用水煮法提取弧菌基因组DNA，然后经PCR反应后，再经电泳、染色、漂洗，最后用凝胶成像仪观察结果并拍照，最后经过谱图分析即可得出检测结果。本发明的优点在于：可同时检测食品中的霍乱弧菌、副溶血弧菌和拟态弧菌，可以在不影响检出率的条件下加快检测速度，减少工作量和检测成本。

摘要： 本发明提供了一种直接在蛭弧菌的使用场地制备新鲜蛭弧菌的方法及蛭弧菌培养基，属于发酵领域。这种养殖户制备新鲜蛭弧菌的方法包括：在养殖户需要使用蛭弧菌的0.5～15天前，将含有宿主菌的蛭弧菌培养基与水混合，得到蛭弧菌培养液；再将蛭弧菌培养液与蛭弧菌菌种混合，得到蛭弧菌发酵液；以及将蛭弧菌发酵液于18～36°C、与空气接触下静置培养12～72h。该制备方法，扩大了蛭弧菌的培养环境，使得蛭弧菌的培养简单、易实施，可以满足蛭弧菌的现用现培养，从而避免现有的蛭弧菌水剂产品在储存或运输过程中的高衰亡率，同时又能降低蛭弧菌纯冻干粉的使用成本。

摘要： 本发明提供一种可快速特异检测溶藻弧菌(VA)、副溶血性弧菌(VP)及创伤弧菌(VV)的多重降落PCR检测及方法。它包括：10×PCR缓冲液，MgCl

摘要： 本发明公开一种可同时检测副溶血弧菌、创伤弧菌和溶藻弧菌的多重PCR检测方法，首先制备被检测物的DNA模板并置于反应管中；将三种弧菌引物放入a步骤的反应管中进行多重PCR反应，引物浓度依次为1~20pmol/μl、1~20pmol/μl、1~30pmol/μl；副溶血弧菌的引物序列为：5’-GCAGCTGATCAAAACGTTGAGT-3’、5’-ATTATCGATCGTGCCACTCAC-3’，创伤弧菌的引物序列为：5’-TTCCAACTTCAAACCGAACTATGAC-3’、5’-ATTCCAGTCGATGCGAATACCGAATACGTTG-3’、溶藻弧菌的引物序列为：5’-CGAGTACAGTCACTTGAAAGCC-3’、5’-CACAACAGAACTCGCGTTACC-3’。

摘要： 本发明属于环境科学水体病原菌检测领域，通过基因片段的体外酶促扩增，快速检测水样中的霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌，评价并预警海洋环境这三种致病菌的含量及污染情况。霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是三种常见的革兰氏阴性弧菌，在海洋环境中广泛分布，能感染人类，通过粪口途径在人群中传播。PCR技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时省力等优点。三重PCR在单一PCR基础上，向同一反应体系中加入三对引物，同时扩增出三段DNA片段，这样更加节省了时间和成本。建立三重PCR方法用于快速检测样品中的病原微生物具有重要的实际意义和应用价值，因而越来越受到人们的关注。

摘要： 一种食品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和拟态弧菌的PCR检测方法，其特征在于：其检测步骤为：待检测的样品经二次增菌后，采用水煮法提取弧菌基因组DNA，然后经PCR反应后，再经电泳、染色、漂洗，最后用凝胶成像仪观察结果并拍照，最后经过谱图分析即可得出检测结果。本发明的优点在于：可同时检测食品中的霍乱弧菌、副溶血弧菌和拟态弧菌，可以在不影响检出率的条件下加快检测速度，减少工作量和检测成本。

摘要： 本发明提供了构建生产香叶醇的重组需钠弧菌的方法以及通过该方法构建的重组需钠弧菌及其应用。本发明的重组需钠弧菌能够通过常规的需钠弧菌和LBv2培养基即可进行发酵培养，培养过程中通过IPTG诱导，获得高产量的香叶醇表达，约9.97mg/L，比使用大肠杆菌作为底盘细胞产生的香叶醇产量(1.22mg/L)明显提高，具有较强的香叶醇工业化潜力。

摘要： 本发明提供一株副溶血弧菌裂解性噬菌体GVP‑P20及其在中华绒螯蟹中副溶血弧菌的防治应用，所述副溶血弧菌裂解性噬菌体的保藏编号为CCTCC NO：M 20211479，分类命名为Vibrio parahaemolyticus phage GVP‑P20，本发明中的副溶血弧菌裂解性噬菌体GVP‑P20具有宿主范围广、特异性强、安全高效的特点，副溶血弧菌裂解性噬菌体GVP‑P20对中华绒螯蟹中副溶血弧菌引起的疾病具有良好的预防或治疗的作用。