β干扰素

摘要： 目的 探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者干扰素调节因子(IRF)-3水平的变化及其与丙型肝炎病毒(HCV)RNA载量、肝脏损伤程度及干扰素抗病毒疗效的关系.方法 检测57例CHC患者抗病毒治疗前及26名体检健康者(正常对照组)血浆IRF-3、β-干扰素(IFN-β)水平,同时检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平及HCV RNA载量.根据ALT、CⅣ和HCV RNA载量分别分组;根据抗病毒疗效分为应答组和无应答组.采用Spearman秩相关分析评估各项目之间的相关性.结果 CHC组血浆IRF-3、IFN-β水平明显低于正常对照组(P0.05).结论 CHC患者血浆IRF-3水平与HCV RNA载量、肝细胞损伤程度及纤维化程度有关,对干扰素疗效的判断也有一定的价值.

摘要： 为研究犬瘟热病毒(CDV)H蛋白对β干扰素信号通路的影响,构建不同CDV毒株H蛋白真核表达质粒以及CDV H蛋白不同截短体真核表达质粒,分别与β-IFN-Luc基因报告质粒和内参质粒pRL-TK共转染细胞,用双荧光素酶报告基因试剂盒检测CDV H蛋白对仙台病毒(SeV)诱导β干扰素的影响以及RIG-I(N)、MAVS、TBK1和IKK-i等信号分子在H蛋白介导的β干扰素转录活性的作用,通过激光共聚焦试验和GST-pull down试验检测CDV H蛋白与RIG-I(N)的相互作用。结果,CDV2野毒株H蛋白能够特异地抑制SeV感染诱发的β干扰素转录活性,而且这种抑制作用与RIG-I(N)激活相关。激光共聚焦试验显示,CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)在细胞质中存在共定位现象;GST-pull down试验证明了CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)存在直接的相互作用;H蛋白截短表达试验证明其N端结构域(1-462 bp)是抑制β干扰素转录活性的关键结构域。本项目的成功开展为深入研究CDV H蛋白抗宿主天然免疫机制奠定了基础,对该病的预防和治疗具有重要意义。

摘要： 目的:研究干扰素在多发性硬化治疗中的应用效果及价值.方法:选取我科在2016年1月--2018年12月收治的88例多发性硬化患者,采用抽签法分为两组,参照组(n=44)予以常规治疗方案,实验组(n=44)在参照组基础上加用干扰素β-1b,对比二组患者的治疗总有效率及血清指标.结果:实验组患者的治疗总有效率为93.18％,明显高于参照组的68.18％,实验组患者的IFN-γ、IL-10、IL-6各指标均优于参照组,两组数据比较P<0.05.结论:为多性硬化患者采用β-干扰素治疗,可促进神经功能恢复、减轻机体炎性反应,是一种值得推广的治疗方案.

摘要： [目的]探究G蛋白在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制中的作用,以揭示携带双G基因的重组RABV的Hep-dG与亲代毒株rHep-Flury在神经母细胞瘤(NA)细胞中滴度差异的原因,为RABV致病机制的研究奠定基础.[方法]通过病毒吸附、入侵、荧光定量PCR、Western-blot以及中和抗体阻断等试验,检测G蛋白过表达对IFN-β 以及相关因子转录的影响.[结果]Hep-dG感染能显著上调NA细胞中IFN-βmRNA的表达,激活了下游因子STAT1的表达与磷酸化,在较低的感染复数(MOI=0.01)下,Hep-dG感染后24 h即可显著促进IFN-β 基因的表达,36 h达到最高水平(P<0.001).该病毒进入细胞后,产生了更多的病毒Leader RNA和RIG-I mRNA,且与IFN-βmRNA的表达高度一致.抗体阻断IFN-β 后,Hep-dG在NA细胞中的病毒滴度显著上升(P<0.01),约为阻断前的7.9倍,且与亲代毒株rHep-Flury无显著差异.与阴性对照比较,5μg的pH-G质粒转染能刺激IFN-β 的转录(P<0.05),表明真核表达RABV G蛋白能在一定程度上刺激IFN-β 的转录.[结论]本研究初步揭示了G蛋白激活先天性免疫应答的原因和作用.RABV G蛋白的过表达,通过促进病毒Leader RNA的转录,激活了RIG-I介导的IFN-β 通路,进而抑制了Hep-dG在NA细胞的繁殖.G蛋白的过表达也对干扰素通路起到一定的作用.

摘要： β干扰素(IFN-β)具有重要的抗病毒生物学功能,为了研究从江香猪源IFN-β生物活性,试验设计1对扩增切除信号肽序列的香猪源IFN-β编码区引物,以pUCm-T-IFN-β为模板进行PCR扩增,经菌液PCR筛选、测序鉴定后,获得重组质粒pColdⅠ-CJ-poIFN-β,将其转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE蛋白电泳,Western blot方法对重组表达蛋白进行分析.结果:切除信号肽序列的从江香猪源IFN-β序列编码区长为498 bp,表明该片段已正确插入原核表达质粒pColdⅠ中;SDS-PAGE蛋白电泳在预期位置未见蛋白条带,但Western blot检测显示带His标签的重组表达蛋白能被His单抗识别,显色后条带为18.26 ku,与预期大小相符.结果显示:试验成功构建了携带切除信号肽序列的香猪源IFN-β基因的原核表达质粒,但重组蛋白表达量极低,试验结果为进一步研究从江香猪源-β干扰素的生物活性奠定基础.

摘要： 目的 分析激素联合β-干扰素用于治疗多发性硬化的临床效果.方法 选择多发性硬化患者100例进行治疗分析,并且根据患者选择治疗方法 的差异将患者分为观察组和对照组,各50例,观察组患者采用激素联合β-干扰素进行治疗,对照组患者采用单纯的激素治疗,比较两组患者治疗的总有效率和治疗前后血清IL-6水平的变化情况.结果 观察组患者治疗的总有效率为94%,对照组患者治疗的总有效率为74%,观察组患者的治疗效果更好;从血清IL-6指标的变化上看,两组患者治疗之前指标参数相似,而治疗后观察组患者为(16.38±5.27)g/L,对照组治疗后为(35.27±5.19)g/L,观察组的恢复水平明显优于对照组患者,两项判定指标相比差异均具有统计学研究意义(P<0.05).结论 采用激素联合β-干扰素治疗多发性硬化有着很好的临床效果,可以促进患者神经功能的恢复,降低患者出现残障的风险,并且安全性很高,有着积极的临床治疗价值.

摘要： Objective To explore the effect of β-interferon on neurological function recovery after acute spinal cord injury in rats.Methods Forty adult SD rats were randomly divided into four groups:group A (spinal cord injury group),group B (methylprednisolone intervention group),group C (intervention with β-interferon);Group D (sham operation group).The acute spinal cord injury model of rats was established by impinging on the thoracic spinal cord segment 9-10 with modified Allen device.The rats were treated with BBB,modified Tarlov score and inclined plate test.Changes of neurological function were evaluated at 1st,3rd,7th,14th and 21th day postoperatively,and the neurological function of the spinal cord was evaluated at different time points after acute spinal cord injury in rats.Results BBB score,modified Tarlov score and ramp plate test scores were nearly 0 in acute spinal cord injury rats.The scores of B and C increased significantly with the time of treatment.There was no significant difference (P>0.05) between the B and C groups and the spinal cord injury control A group within 7 days (P> 0.05),but there was significant difference at 14th day(P0.05).Conclusion Interventional therapy with β-interferon after acute spinal cord injury in rats is beneficial to the recovery of neurological function.The mechanism of action need further study.%目的 初步探讨β-干扰素对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的影响.方法 SD成年大鼠40只随机分成A组(脊髓损伤组)、B组(甲基强的松龙干预组)、C组(β-干扰素干预组)、D组(假手术组)各10只,用改良的Allen装置撞击大鼠脊髓胸9~10节段建立脊髓损伤模型,术后各组予相应干预处理.采用BBB评分、改良Tarlov评分和斜板实验方法观察大鼠行为学改变情况,于术后第1、3、7、14和21天对大鼠急性脊髓损伤后不同时段的脊髓神经功能进行评分.结果 大鼠急性脊髓损伤后BBB评分、改良Tarlov评分和斜板实验分值均近0,随着时间进展评分逐渐升高,B、C组升高明显,干预治疗的B、C组与A组相比7 d内无显著变化(P>0.05),14 d时有显著变化(P0.05).结论 β-干扰素应用有利于大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复,其作用机制需要进一步研究.

摘要： 目的：研究IFN-β在沙眼衣原体感染细胞中的表达及其对衣原体感染的影响。方法：采用ELISA双抗体夹心法检测衣原体感染细胞培养上清中IFN-β的表达，利用抗人IFN-β抗体中和IFN-β的作用，然后分别用Western blot和免疫荧光技术检测沙眼衣原体感染后衣原体主要外膜蛋白、STAT1蛋白、p-STAT1蛋白和衣原体二次感染滴度变化。结果：沙眼衣原体能诱导宿主细胞表达IFN-β、STAT1蛋白和p-STAT1蛋白，抑制IFN-β的作用能下调STAT1和p-STAT1蛋白表达，同时促进衣原体生长和提高衣原体的二次感染滴度。结论：沙眼衣原体感染能通过诱导宿主细胞分泌IFN-β并上调和活化STAT1蛋白而抑制衣原体生长。%Objective:To investigate the expression of IFN-βin Chlamydia trachomatis-infected cells and the effect of IFN-βon Chlamydia trachomatis infection.Methods:IFN-βwas examined in Chlamydia trachomatis-infected cells culture supernatant with ELISA double antibody sandwich method.Chlamydia trachomatis major outer membrane protein , STAT1 protein and p-STAT1 and infectious titers were detected by using Western blot and immunofluorescence assays, respectively, after the IFN-βwas neutralized by IFN-βantibody.Results:Chlamydia trachomatis infection could induce IFN-βand STAT1 protein and p-STAT1 expression.Inhibition the activity of IFN-βcould down-regulated the expression of STAT 1 and p-STAT1 protein,moreover,promotes Chlamydia trachomatis growth and secondary infectious titers.Conclusion: Chlamydia trachomatis growth were inhibited by IFN-βin a STAT1-dependent fashion in infected cells.

摘要： 为了解鸡干扰素刺激基因(ISG)在鸡传染性支气管炎病毒(IBV)感染雏鸡气管黏膜中的表达情况,采用实时荧光定量PCR检测IBV M41株感染SPF鸡后不同时相气管黏膜中β干扰素(IFN-β)和干扰素刺激基因mRNA转录水平和IBV病毒载量变化.结果显示,鸡气管黏膜中IFN-β和干扰素刺激基因Mx、PKR、OAS、Viperin、IFITM3和IFIT5 mRNA转录水平在感染后(DPI)第1~14天显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,且均在5 DPI达到峰值;鸡气管黏膜中IBV病毒载量在1 DPI急剧升高,在5 DPI达到峰值,14DPI病毒载量急剧下降.结果表明,IFN-β、干扰素刺激基因Mx、PKR、OAS、Viperin、IFITM3和IF-IT5 mRNA转录水平与IBV病毒载量变化趋势一致,提示IFN-β、干扰素刺激基因Mx、PKR、OAS、Vi-perin、IFITM3和IFIT5在抵御IBV入侵、抑制IBV复制、增殖以及病毒清除中发挥重要作用.试验结果丰富了宿主抗IBV感染的固有免疫应答机制,为IBV感染的预防和控制提供了理论依据.

摘要： 本实验从中国梅山猪白细胞基因组中克隆出IFN-β基因,通过原核表达系统进行表达,用细胞病变抑制法进行活性检测,表明表达产物具有生物学活性,该研究为今后进一步研究β干扰素在抗病毒方面的功能提供了条件.

摘要： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种烈性传染病。E2为CSFV主要结构蛋白，在介导CSFV感染宿主细胞方面发挥重要作用。rn 为研究E2蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用，本研究以E2为诱饵蛋白，利用酵母双杂交系统从本实验室构建的猪外周血单个核细胞(PBMC) cDNA酵母表达文库中筛选得到与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白MEK2，并用GST pulldown、双分子荧光互补和激光共聚焦等方法验证了E2与MEK2的相互作用。进一步研究证实，CSFV感染PK-15细胞后，可活化ERK通路并促进MEK2的表达，而用MEK1/2特异性抑制剂U0126抑制该通路，则可显著降低CSFV的增殖，表明CSFV通过调节该通路以促进其增殖。与以往研究不同的是，用MEK1特异性抑制剂PD98059处理PK-15细胞则对CSFV增殖无明显影响。分别于感染后不同时间用U0126处理CSFV感染的PK-15细胞，结果显示，阻断ERK通路不影响CSFV的吸附和进入细胞。采用β干扰素(IFN-β)双荧光素酶报告系统检测MEK2对IFN-β表达的影响，结果表明，MEK2以剂量依赖性的方式抑制IFN-β的表达，但其具体机制有待深入研究。rn 总之，本研究发现CSFV E2与MEK2存在相互作用并可激活MEK/ERK通路，阻断MEK/ERK通路显著抑制CSFV的复制，其机制可能是通过MEK2抑制IFN-β表达。

摘要： 利用重叠PCR技术在体外拼接IFN β和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA.重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到高拷贝转化子.PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达的融合蛋白IFNβ-HSA表明该蛋白分子量约为90kDa且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU/ml.

摘要： 利用重叠PCR技术在体外拼接IFN β和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA.重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到高拷贝转化子.PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达的融合蛋白IFNβ-HSA表明该蛋白分子量约为90kDa且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU/mL.

摘要： 目的:研究发酵培养阶段生长速度对重组人干扰素β(INF-β)工程菌稳定性、菌体密度和干扰素表达的影响.方法:采用日本LE.Marubishi MSJ-50L发酵罐,在发酵过程中于诱导后通过控制不同的补料速度和葡萄糖浓度,检测低和高生长速度发酵结束后,菌体密度、稳定性和重组人干扰素β的表达量.结果:经37°C培养至对数期诱导后,维持低生长速度即比生长速率低于0.2h,发酵结束后平均密度OD值为7.52,表达量达20.7％,质粒稳定率好,达到91％,粗制干扰素收获2.37克;在高生长速度即比生长速率高于0.3h,发酵结束后平均密度OD值达20.57,但表达量降为4.13％,质粒稳定降为27％,粗制干扰素收获仅为0.59克.结论:诱导后生长速度对工程菌稳定性和产物表达有明显影响,确立了发酵培养时维持工程菌质粒稳定性和IFN-β高表达的最适生长速度.

摘要： 本文研究β-干扰素治疗多发性硬化在我国大陆地区应用的局限性及不足.收集医院自2011年1月至2014年12月开始应用β-干扰素的81例多发性硬化患者人口学资料及临床资料,进行电话或门诊随访,将收集的资料进行统计分析,结合现有文献,除对于β-干扰素在我国大陆地区治疗多发性硬化进行安全性及有效性的分析外,初步分析其无法被多发性硬化患者长期应用的局限性和不足.发现我国大陆地区β-干扰素治疗多发性硬化的患者依从性差的原因主要为副反应而耐受性较差，其次为效果欠佳及经济原因，需进一步研究长效药物，并调整药物价格或实行医疗保险等而改善现况。

摘要： 本文研究β-干扰素治疗多发性硬化在我国大陆地区应用的局限性及不足.收集医院自2011年1月至2014年12月开始应用β-干扰素的81例多发性硬化患者人口学资料及临床资料,进行电话或门诊随访,将收集的资料进行统计分析,结合现有文献,除对于β-干扰素在我国大陆地区治疗多发性硬化进行安全性及有效性的分析外,初步分析其无法被多发性硬化患者长期应用的局限性和不足.发现我国大陆地区β-干扰素治疗多发性硬化的患者依从性差的原因主要为副反应而耐受性较差，其次为效果欠佳及经济原因，需进一步研究长效药物，并调整药物价格或实行医疗保险等而改善现况。

摘要： 本文研究β-干扰素治疗多发性硬化在我国大陆地区应用的局限性及不足.收集医院自2011年1月至2014年12月开始应用β-干扰素的81例多发性硬化患者人口学资料及临床资料,进行电话或门诊随访,将收集的资料进行统计分析,结合现有文献,除对于β-干扰素在我国大陆地区治疗多发性硬化进行安全性及有效性的分析外,初步分析其无法被多发性硬化患者长期应用的局限性和不足.发现我国大陆地区β-干扰素治疗多发性硬化的患者依从性差的原因主要为副反应而耐受性较差，其次为效果欠佳及经济原因，需进一步研究长效药物，并调整药物价格或实行医疗保险等而改善现况。

摘要： 提取经植物血凝素诱导培养的我国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA，应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上，测序结果表明，扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列，与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100％。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上，并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达。表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在，表达量约占细菌总蛋白的40％。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化，并利用VSV—MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛β-干扰素抗病毒活性分别约3.16×105U/mL，7.5×104U/mL。结果表明重组奶牛β-干扰素特异性好，而且抗病毒活性比较稳定。本研究为研制和开发重组奶牛β-干扰素类生物制品研发奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种由犬白细胞介素2、犬干扰素γ和犬干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由犬白细胞介素2、犬干扰素γ和犬干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组犬长效干扰素。所述重组犬长效干扰素可显著提高犬干扰素的半衰期，较普通犬干扰素的半衰期提高15倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高犬自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由猪白细胞介素2、猪干扰素γ和猪干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由猪白细胞介素2、猪干扰素γ和猪干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组猪长效干扰素。所述重组猪长效干扰素可显著提高猪干扰素的半衰期，较普通猪干扰素的半衰期提高19倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高猪自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由羊白细胞介素2、羊干扰素γ和羊干扰素τ组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由羊白细胞介素2、羊干扰素γ和羊干扰素τ经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组羊长效干扰素。所述重组羊长效干扰素可显著提高羊干扰素的半衰期，较普通羊干扰素的半衰期提高15倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高羊自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由鸡白细胞介素2、鸡干扰素γ和鸡干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由鸡白细胞介素2、鸡干扰素γ和鸡干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组鸡长效干扰素。所述重组鸡长效干扰素可显著提高鸡干扰素的半衰期，较普通鸡干扰素的半衰期提高18倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高鸡自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由牛白细胞介素2、牛干扰素γ和牛干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由牛白细胞介素2、牛干扰素γ和牛干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组牛长效干扰素。所述重组牛长效干扰素可显著提高牛干扰素的半衰期，较普通牛干扰素的半衰期提高16倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高牛自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由羊白细胞介素2、羊干扰素γ和羊干扰素τ组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由羊白细胞介素2、羊干扰素γ和羊干扰素τ经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组羊长效干扰素。所述重组羊长效干扰素可显著提高羊干扰素的半衰期，较普通羊干扰素的半衰期提高15倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高羊自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由鸡白细胞介素2、鸡干扰素γ和鸡干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由鸡白细胞介素2、鸡干扰素γ和鸡干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组鸡长效干扰素。所述重组鸡长效干扰素可显著提高鸡干扰素的半衰期，较普通鸡干扰素的半衰期提高18倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高鸡自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由牛白细胞介素2、牛干扰素γ和牛干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由牛白细胞介素2、牛干扰素γ和牛干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组牛长效干扰素。所述重组牛长效干扰素可显著提高牛干扰素的半衰期，较普通牛干扰素的半衰期提高16倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高牛自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由猪白细胞介素2、猪干扰素γ和猪干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由猪白细胞介素2、猪干扰素γ和猪干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组猪长效干扰素。所述重组猪长效干扰素可显著提高猪干扰素的半衰期，较普通猪干扰素的半衰期提高19倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高猪自身的免疫应答。

摘要： 本发明公开了一种由犬白细胞介素2、犬干扰素γ和犬干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法，所述融合蛋白由犬白细胞介素2、犬干扰素γ和犬干扰素α经柔性linker连接而形成，融合蛋白与冻干保护剂混配后经冷冻干燥即可得到重组犬长效干扰素。所述重组犬长效干扰素可显著提高犬干扰素的半衰期，较普通犬干扰素的半衰期提高15倍以上，并具有广谱抗病毒作用并能提高犬自身的免疫应答。