狂犬病病毒

摘要： 狂犬病是由狂犬病病毒(RABV)引起的重要人兽共患病,全球每年有超过6万人因感染狂犬病而死亡,主要发生在亚洲和非洲地区。由于对狂犬病的致病机制尚未解析,目前缺少针对狂犬病的有效药物,因此一旦发病,死亡率接近100%。病原感染宿主细胞通常是一个能量需求的过程,深入研究RABV调控宿主能量代谢的机制不仅有助于拓展我们对RABV致病机制的理解,而且可以为狂犬病有效治疗制剂的研发奠定理论基础。

摘要： 近些年来,每年都会发生人因感染狂犬病而导致死亡的事件。在乡村地区,存在着相当数量的猫和犬,因猫、犬伤人而导致人感染狂犬病病毒的事件较多,也造成了乡村地区狂犬病的发病率和死亡率较高的状况。本文主要关于犬类病诊治难点以及防控措施的研究,以期为相关学者提供一定参考。

摘要： 狂犬病是人畜共患传染病,犬是狂犬病病毒的主要宿主,感染犬唾液中含有大量病毒,病毒可通过犬的咬、抓、舔传染给人类或其他动物。由于犬类免疫接种率低,我国人感染狂犬病的发病率及死亡率一直居高不下,仅次于印度。狂犬病可防不可治,一旦感染致死率高达100%。除狂犬病外,犬瘟热、细小病毒病、传染性肝炎、支气管炎、副流感、冠状病毒病等均是犬的常见多发病,这些疾病可通过多种途径传播。为保障人、犬健康,应按照免疫程序给犬接种疫苗。

摘要： 一、什么是狂犬病?狂犬病又名恐水症,是由狂犬病毒引起的一种侵犯神经系统为主的急性人兽共患传染病(在动物和人之间传播的疾病),宿主或易感动物主要包括犬科、猫科及翼手目动物(蝙蝠)。二、狂犬病传播途径是什么?狂犬病病毒主要通过暴露的皮肤或黏膜侵入人体,也就是说,得狂犬病要有两个必要条件,即皮肤或黏膜有损伤和接触的动物携带狂犬病病毒。三、动物狂犬病有什么症状?一是狂暴型,分三期,前驱期、兴奋期和麻痹期。前驱期表现精神沉郁、怕光喜暗,反应迟钝,不听主人呼唤,不愿接触人,食欲反常,喜咬吃异物,吞咽伸颈困难,唾液增多,后肢无力,瞳孔散大。

摘要： 狂犬病是由狂犬病毒(RABV)感染引起的一种古老的人兽共患病,但其至今仍对全球的公共卫生健康造成严重威胁。全球每年约有59000人死于狂犬病,该病主要发生于一些非洲和亚洲的发展中国家,中国是狂犬病高发国家之一。RABV是一种典型的嗜神经病毒,其在进入中枢神经系统(CNS)后开始大量复制,造成宿主的神经损伤,最终致其死亡。狂犬病的病死率几乎100%,目前无有效治疗方法,主要原因是RABV的致病机制尚未完全解析。

摘要： 目的了解浙江地区狂犬病分子流行病学现状,为浙江地区狂犬病防控提供相关数据。方法使用RT-PCR扩增浙江狂犬病病毒街毒株核苷酸并进行全基因组序列测定,与32株中国狂犬病病毒街毒株基因序列进行比对分析;使用Neuro-2a细胞进行病毒分离,测定不同代次全基因组序列并比较核苷酸突变情况。结果获得了全长为11782 bp的全基因组序列,经过比对分析后发现该毒株属于ChinaⅠ型,与全部参考基因Ⅰ型病毒核苷酸序列一致性为97.10%~99.31%;通过Neuro-2a细胞成功分离到狂犬病病毒,连续三代培养后病毒滴度最终达到5.71×10^(7)FFU/mL,子代之间序列一致性在99.9%以上,其中F3代较F1代核苷酸序列发生了7个位点突变,氨基酸未发生改变。结论新狂犬病病毒分离毒株(ZJSX-2021)属于ChinaⅠ型,与以往分离毒株属同一基因型,表明狂犬病病毒近年在浙江地区仍持续传播。细胞分离后病毒序列并无明显变化。

摘要： 目的研究瑞德西韦对不同狂犬病病毒的体外抑制作用。方法根据药物、病毒及细胞的不同作用方式,以法匹拉韦(T705)作为阳性对照药物,使用组织培养半数感染量(TCID 50)、直接免疫荧光法及实时荧光定量PCR等方法,分析瑞德西韦对不同狂犬病病毒的阻断吸附、抑制复制和直接杀伤作用。结果在阻断吸附和抑制复制的实验中,与相应浓度的T705阳性对照组相比,500μmol/L瑞德西韦处理BHK-21及N2a细胞后,CVS-11病毒滴度均降低(P<0.01)。分别与CVS-11及SC16街毒株感染组相比,500μmol/L瑞德西韦处理N2a细胞后病毒的滴度及mRNA拷贝数均降低(P<0.01)。在直接杀伤实验中,瑞德西韦无抑制病毒作用。结论瑞德西韦能够显著阻断狂犬病病毒的吸附并能够抑制其体外复制,但无直接杀伤狂犬病病毒的能力。

摘要： 为探究狂犬病毒P和M基因对其生物学特性的影响,本研究以弱毒疫苗株rRC-HL为骨架,利用反向遗传技术将广西街毒株GX01和GX074的P和M基因分别组合替换rRC-HL株相应的基因进行联合突变,拯救获得重组突变体,应用间接免疫荧光实验和RT-PCR对重组突变体鉴定,测定多步生长曲线将亲本弱毒株和重组突变体进行生长特性的比较。结果显示,重组突变体rRC-HL(01P-074M)、rRC-HL(074P-01M)与亲本弱毒株rRC-HL在BSR/T7-9细胞中生长趋势较为相似,但在24、48、96h的病毒滴度均低于亲本毒株;与亲本强毒株CX01、GX074及标准强毒株CVS-11比较,重组突变体病毒滴度明显增高,说明狂犬病毒P和M基因影响病毒的复制。

摘要： 为阐明2015年在内蒙古呼和浩特地区3株美洲驼源狂犬病病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,经基因扩增和测序获得3株美洲驼源RABV N基因序列,并进行遗传进化分析.结果显示3株RABV之间N基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为100％,且都与2011年呼和浩特奶牛源和犬源毒株、2013年内蒙古牛源毒株、2007年湖北犬源毒株、2016和2018年北京犬源毒株、2006年天津犬源毒株和2009年福建犬源毒株的亲缘性最高,同源率为100％.这些毒株位于同一个遗传进化群内,均属于CTN-1(Asian谱系).研究结果说明3株美洲驼源RABV的N基因与参考的内蒙古、湖北、北京、福建和天津毒株起源于共同的祖先.

摘要： 为阐明2015年在内蒙古呼和浩特地区3株美洲驼源狂犬病病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,经基因扩增和测序获得3株美洲驼源RABV N基因序列,并进行遗传进化分析。结果显示3株RABV之间N基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为100%,且都与2011年呼和浩特奶牛源和犬源毒株、2013年内蒙古牛源毒株、2007年湖北犬源毒株、2016和2018年北京犬源毒株、2006年天津犬源毒株和2009年福建犬源毒株的亲缘性最高,同源率为100%。这些毒株位于同一个遗传进化群内,均属于CTN-1(Asian谱系)。研究结果说明3株美洲驼源RABV的N基因与参考的内蒙古、湖北、北京、福建和天津毒株起源于共同的祖先。

摘要： 狂犬病病毒(Rahies virus,RABV)糖蛋白(Glycoprotein,GP)是唯一剌激机体产生针对狂犬病病毒中和抗体的抗原,是基因工程狂犬病疫苗研究的主要靶蛋白.本研究使用Gateway技术,设计特异性引物扩增狂犬病病毒弱毒株SRV9的糖蛋白基因,先后经过BP反应和LR反应、转化,获得经测序正确的pLv-SRG载体质粒,与pPACKH1-1-1-Gap、pPACKG1-Rev、pVSV-G2-1包装质粒共转染293T细胞,包装重组病毒并鉴定,滴度为3×108TU/mL.本实验获得表达狂犬病病毒弱毒株SRV9糖蛋白基因的重组慢病毒,为开展下一步的疫苗研究奠定基础.

摘要： 狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)糖蛋白(Glycoprotein,GP)是唯一刺激机体产生针对狂犬病病毒中和抗体的抗原,是基因工程狂犬病疫苗研究的主要靶蛋白.本研究使用Gateway技术,设计特异性引物扩增狂犬病病毒弱毒株SRV9的糖蛋白基因,先后经过BP反应和LR反应、转化,获得经测序正确的pLv-SRG载体质粒,与pPACKH1-1-1-Gag、pPACKH1-Rev、pVSV-G2-1包装质粒共转染293T细胞,包装重组病毒并鉴定,滴度为3×108TU/mL.本实验获得表达狂犬病病毒弱毒株SRV9糖蛋白基因的重组慢病毒,为开展下一步的疫苗研究奠定基础.

摘要： 在新城疫病毒LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统的基础上,构建表达狂犬病病毒ERA株糖蛋白的重组新城疫病毒rLa-ERA-GP,并探索rLa-ERA-GP对小鼠免疫原性.利用RT-PCR技术,从狂犬病病毒ERA疫苗株上得到狂犬病病毒的糖蛋白(GP)基因,将其克隆到载体pBRN-FL-Pmel上,构建了表达狂犬病病毒糖蛋白重组新城疫病毒全长cDNA克隆pBRN-FL-ERA-GP.利用磷酸钙转染法,在辅助质粒pBS-NP、pBS-P和pBS-L的共同作用下,拯救重组病毒rLa-ERA-GP.RT-PCR检测证实重组病毒rLa-ERA-GP基因组中含有GP基因;western blot和IFA检测结果均表明GP基因在新城疫载体中得到了正确、稳定的表达;大剂量接种BALB/c小鼠不会引起小鼠发病和生长阻滞,并能诱导出高水平ERA特异中和抗体反应;加强免疫后可有效抵御致死剂量RV街毒对BALB/c小鼠的攻击.重组病毒rLa-ERA-GP有望成为防制狂犬病更加安全、有效的,新型重组基因工程活载体疫苗.

摘要： 通过对新分离的猪源狂犬病病毒(GD-SH01)全基因进行序列分析,为了解析该毒株的来源及国内其它流行毒株的关系.将来自病猪的脑组织制备成乳液,颅内接种3天龄的乳鼠和6周龄的成鼠.结果显示,该毒株在乳鼠脑内传代5次后,病毒在乳鼠脑内的繁殖趋于稳定.F5代病毒还能致6周龄昆明系成鼠,表明该毒株为强毒.将病毒接种于BHK-21、NA、Vero细胞,发现该病毒在NA细胞的繁殖效率更高,第四天病毒滴度最高(1.0×104FFU/mL).

摘要： 本文实验选取了两株犬源和牛源狂犬病病毒街毒分别对比格犬进行了攻毒实验，以探索感染犬唾液排毒的特点和病毒在感染动物组织器官的分布情况。结果表明，狂犬病病毒感染犬的内脏器官及其他非神经组织可以带毒。

摘要： 对2株犬源狂犬病病毒街毒株全基因组测序,了解国内狂犬病病毒的流行和变异情况.采用乳鼠脑内接种方法分离2株天津地区狂犬病病毒街毒株,RT-PCR扩增病毒DNA覆盖全基因组12个相互重叠的基因片段,PCR产物平端克隆后进行全基因组核苷酸序列测定,然后对其分子变异和进化特点进行分析.多序列相似性比较和种系发生分析显示，两株病毒均属于基因1型,N基因与全基因进化树保持一致，与中国犬源狂犬病病毒BD06同源性最高(99. 6%)，进化关系近，并具有较为独特的中国地域特点。两天津株狂犬病毒可能是自然界中固有的狂犬病病毒街毒株。

摘要： 本文利用树突状细胞活化分子作为狂犬病病毒疫苗的遗传佐剂，试图影响先天性免疫反应，诱导出更高的特异性的中和抗体，包括从淋巴结中成熟的和迁移的树突状细胞聚集到炎症部位。结果表明，重组的RV分子表达树突状细胞活化分子能够加强免疫保护反应并且具有发展成为下一代RV疫苗的潜力。

摘要： 本研究自2003年至2008年在国内8个省份采集的动物脑组织标本中共获得了77个P基因和63个M基因序列。以这些序列信息为基础对我国RABV流行株P基因和M基因进行了遗传突变和分子进化分析。结果发现我国RABV流行街毒株与疫苗株及固定毒株相比其P基因和M基因均存在多个氨基酸位点的差异，这些位点对RABV的生物学特性影响需要进一步研究。

摘要： 目的：分别测定6代次CTN-1V、aG株及3代次PV2061株病毒糖蛋白基因序列,并研究3株病毒致病力稳定性。方法：RT-PCR方法扩增各代次病毒糖蛋白基因组序列,分别将产物克隆入pGEM-T载体中,测定并拼接序列,应用DNAStar和Mega4.0软件包中的相应软件对基因组序列进行分析,并与近期国内分离且具有地域代表性的狂犬病病毒街毒株进行基因同源性分析；分别测定5代次CTN-1V株、6代次aG株及4代次PV2061株病毒病毒滴度(FFU/ml)和细胞荧光滴度(FFU/ml),采用1g(FFU/LD50)指标来对病毒的致病力进行评价。结果：株病毒各代次糖蛋白基因序列测定结果表明,3株病毒糖蛋白均传代稳定；3株病毒致病力指标均在0.00-0.60之间；糖蛋白生物信息学分析表明,3株病毒均与我国近期分离的街毒株均具有较高同源性,其中CTN-1V株病毒与我国大部分地区街毒株高度同源。结论：CTN-1V、aG及PV2061株病毒糖蛋白传代稳定,且与国内近期分离的街毒株高度同源,3株病毒各代次糖蛋白基因组序列的测定及致病力研究,为完善毒株的质量控制提供数据支持。

摘要： 本文对每个病毒的基因序列进行了分析，发现不同毒株，尤其是分离自亚洲的毒株的核蛋白和糖蛋白基因存在更多的多样性.推导的氨基酸序列比核昔酸序列的同源性更高。所有狂犬病毒毒株的N蛋白，G蛋白和L蛋白的同源性都很高，超过93%。对其氨基酸水平进行检测发现，G蛋白和P蛋白的同源性分别大于87%和84%。在对G蛋白进行分析时我们发现，每个主要遗传谱系的糖蛋白都有其独特的特点。这些研究进一步证明了中国和亚洲的狂犬病毒的多样性。

摘要： 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法，包括如下过程：一、制备目的基因：设计引物，扩增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因与N基因；二、构建腺病毒穿梭载体：将抗原蛋白G基因与N基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体特异性启动子和终止子之间，构建成含有融合基因(G+N)的腺病毒穿梭载体(pAdTrack-CMV/G+N)；三、获得腺病毒质粒：将获得的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体(pAdTrack-CMV/G+N)与腺病毒骨架载体(pAdEasy-1)通过同源重组得到重组腺病毒质粒；四、用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒，将重组腺病毒制成狂犬病活载体疫苗。本发明较之现有狂犬病疫苗更为安全和有效，制作周期较短。

摘要： 本发明属于动物病毒学及基因工程学技术领域，涉及缺失伪狂犬病病毒闽A株的部分毒力基因的伪狂犬病病毒，并用所述病毒制备成疫苗的方法。利用DNA重组技术人工去除PRV(Pseudorabies Virus，PRV)中影响毒力的几个病毒复制非必须基因TK、gE、gI、11K、28k的全部或部分蛋白编码区，降低PRV的毒力，获得减毒基因工程缺失弱毒疫苗株SA215，并用SA215病毒制备疫苗，免疫动物能有效地预防和控制伪狂犬病的发生和流行。

摘要： 本发明涉及兽用生物制品技术领域，具体涉及猪伪狂犬病病毒活疫苗组合物用于治疗猪伪狂犬病的用途。本发明通过施用加大剂量的猪伪狂犬病病毒活疫苗接种感染猪伪狂犬病病毒的猪只，意外发现发现猪伪狂犬病病毒活疫苗具有治疗作用，能有效减轻猪的各种临床症状的严重性及降低死亡率，同时，也提供了一种治疗猪伪狂犬病病毒感染的相关疾病的技术手段，具有积极的意义。

摘要： 本发明涉及一种狂犬病病毒ERA减毒疫苗突变株及其制备方法和狂犬病活疫苗。其中，狂犬病病毒ERA减毒疫苗突变株表达编码突变糖蛋白，并且所述突变糖蛋白具有下列突变：信号肽第2位的氨基酸缺失；信号肽的第3位的氨基酸缺失；第333位氨基酸由精氨酸突变为谷氨酸；缺失psi假基因区；所述糖蛋白的G基因插入M基因之前。由此上述狂犬病病毒ERA减毒疫苗突变株更安全、有效、成本低。

摘要： 一种利用可诱导表达狂犬病病毒蛋白的稳定细胞系生产狂犬病病毒假病毒系统的方法，包括：表达狂犬病病毒GP蛋白重组质粒的构建；重组质粒通过慢病毒三质粒或四质粒系统转染进HEK293T细胞内进行慢病毒包装得到慢病毒Lenti‑TRE‑RABV；将携带Tet‑ON基因的慢病毒感染宿主细胞筛选后得到表达Tet‑ON基因的细胞系；Lenti‑TRE‑RABV转染表达Tet‑ON基因的细胞系筛选后得到可诱导表达狂犬病病毒GP蛋白的细胞系；狂犬病病毒假病毒的包装生产。本发明生产的狂犬病病毒假病毒与天然狂犬病病毒结构相似，具有病毒批间差异小、稳定性好、病毒滴度高、具备规模化生产能力等特点，可应用于狂犬病病毒中和抗体检测、评价，疫苗研发及药物筛选等领域。

摘要： 本发明提供了一种依曲韦林在抗狂犬病病毒中的应用和抗狂犬病病毒药物的筛选方法，涉及抗狂犬病病毒药物技术领域。本发明发现依曲韦林具有抗狂犬病病毒活性，确定了依曲韦林在抗狂犬病病毒中的作用。同时本发明提供了抗狂犬病病毒药物的筛选方法，通过使用荧光标记的狂犬病病毒感染细胞，使用候选药物处理感染病毒的细胞，再观察细胞的荧光强度，能够通过荧光显微镜以连续和非损害方式来分析和定量病毒的复制。

摘要： 本发明提供了一种提高狂犬病病毒耐热稳定性和免疫效果的融合基因、重组狂犬病病毒及其应用，属于病毒技术领域。以狂犬病病毒SAD B19株为骨架，在基因组N与P基因之间插入矿化基因W6和G基因形成的融合基因，构建得到重组全长质粒pBNSP‑RV‑GW6和pBNSP‑RV‑W6G，并利用狂犬病的反向遗传操作系统拯救出含矿化基因和双G基因的重组狂犬病病毒。所述重组狂犬病病毒在细胞上稳定增殖，具有耐热稳定特性，免疫小鼠可以诱导产生较高的狂犬病病毒特异性抗体，能抵抗致死剂量狂犬病毒的攻击，同时具有耐热稳定和高效免疫效果，可以直接作为疫苗应用，具有较高的应用前景。

摘要： 本文描述了重组狂犬病病毒，所述重组狂犬病病毒编码狂犬病病毒糖蛋白和至少一种来自另一种狂犬病病毒属病毒例如莫克拉病毒、拉各斯蝙蝠病毒和/或西高加索蝙蝠病毒的异源糖蛋白。在具体的实施方案中，所述重组狂犬病病毒包括两种或三种异源的狂犬病病毒属病毒糖蛋白。所公开的重组狂犬病病毒可以用作广谱狂犬病病毒属病毒疫苗以提供抗引起狂犬病的狂犬病病毒属病毒的保护。

摘要： 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法，包括如下过程：一、制备目的基因：设计引物，扩增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因与N基因；二、构建腺病毒穿梭载体：将抗原蛋白G基因与N基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体特异性启动子和终止子之间，构建成含有融合基因(G+N)的腺病毒穿梭载体(pAdTrack－CMV/G+N)；三、获得腺病毒质粒：将获得的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体(pAdTrack－CMV/G+N)与腺病毒骨架载体(pAdEasy－1)通过同源重组得到重组腺病毒质粒；四、用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒，将重组腺病毒制成狂犬病活载体疫苗。本发明较之现有狂犬病疫苗更为安全和有效，制作周期较短。

摘要： 本发明属于动物病毒学及基因工程学技术领域，涉及缺失伪狂犬病病毒闽A株的部分毒力基因的伪狂犬病病毒，并用所述病毒制备成疫苗的方法。利用DNA重组技术人工去除PRV(Pseudorabies Virus，PRV)中影响毒力的几个病毒复制非必须基因TK、gE、gI、11K、28k的全部或部分蛋白编码区，降低PRV的毒力，获得减毒基因工程缺失弱毒疫苗株SA215，并用SA215病毒制备疫苗，免疫动物能有效地预防和控制伪狂犬病的发生和流行。