E2蛋白

摘要： 盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种由蚊媒传播的单股正链RNA病毒,属于披膜病毒科甲病毒属。该病毒自1955年在马来西亚分离至今,已遍布欧亚大陆和东南亚,1964年在中国南部的海南省首次发现GETV,迅速蔓延,近年来我国报道已有超过15个省份出现动物盖塔病毒疫情,造成一定的经济损失。该病毒宿主范围广,在猪、马、人、牛、袋鼠、狐狸、鸟类等多种动物血清中均检测到GETV抗体,表明GETV具有潜在的公共卫生风险。可导致马发热、体疹和腿水肿,以及母猪生殖障碍和胎儿死亡。受感染的动物可能在病毒的放大和传播中发挥关键作用。尽管如此,目前对该病毒的流行和致病性研究较少。

摘要： 为了筛选用于制备猪瘟E2基因工程亚单位疫苗的佐剂,用水佐剂、双相佐剂以及油包水佐剂分别制备了3种猪瘟E2基因工程亚单位疫苗,在猪上进行了免疫效果的评价。本试验选取4~5周龄猪瘟病毒病原、抗体阴性猪40头,随机分为8组,每组5头,其中3组用于3种不同佐剂制备的亚单位疫苗的单次免疫效果评价,3组用于疫苗的二次加强免疫效果评价,1组为商品化猪瘟活疫苗对照,1组为空白对照。免疫后进行临床观察、抗体水平监测和免疫效力评价,观察各组仔猪的不良反应情况。结果显示:3种不同类型佐剂制备的猪瘟E2基因工程亚单位疫苗接种猪后均无任何不良反应,均能诱导机体产生良好的中和抗体,油包水佐剂制备的疫苗与另外2种佐剂制备的疫苗相比,免疫空窗期短,免疫持续期长,中和抗体水平高,在临床使用上更具优势。本研究为商品化亚单位疫苗佐剂的选择提供了重要的数据支持。

摘要： 为了制备盖他病毒(Getah virus,GETV)结构蛋白Cap和E2的多克隆抗体,将Cap和E2克隆到原核表达载体pET-32a中,然后将构建的表达质粒pET-32a-Cap/E2转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导蛋白表达,非变性条件下用Ni-NTA琼脂糖树脂纯化重组pET-32a-Cap/E2蛋白。用纯化的重组蛋白多次接种新西兰大白兔,从而制备多克隆抗体,后续进行效价测定、Western blot与间接免疫荧光试验(IFA)验证抗体与病毒蛋白的反应。结果表明,Western blot与IFA显示制备的兔多克隆抗体能够与GETV抗原特异性结合;效价测定表明了制备的兔多克隆抗体Cap和E2效价均可达到1∶64000。研究制备的多克隆抗体特异性良好,为GETV检测制剂的研发提供了良好的生物材料,为GETV蛋白功能的研究奠定了基础。

摘要： 猪瘟病毒(CSFV)的E2蛋白是引起猪体产生针对猪瘟保护性抗体的主要抗原,构建可稳定表达CSFV E2蛋白的细胞系,可为E2蛋白功能研究及基因工程猪瘟疫苗的研制提供物质基础。本研究将CSFV E2基因克隆至慢病毒表达载体,构建重组慢病毒表达质粒pCDH-E2。将pCDH-E2重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,获得重组慢病毒。将该慢病毒感染BHK-21细胞,经嘌呤霉素抗性筛选结合有限稀释法筛选出可表达CSFV E2蛋白的BHK细胞系。Western blot分析结果显示,所构建的重组细胞系传至第10代仍能稳定表达CSFV E2蛋白。该细胞系的建立为研制猪瘟新型重组疫苗及其生产奠定基础。

摘要： 本试验克隆、表达了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的E2蛋白,以表达纯化后的E2蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件建立了间接ELISA检测法.确定该方法的阴阳判定临界值为0.33,抗原包被浓度为8μg/mL,一抗的最佳稀释度为1:100,10％PEG4000为最佳封闭液,酶标二抗最佳稀释度为1:6000.用建立的ELISA检测方法和IDEXX ELISA抗体检测试剂盒检测180份血清临床样品,总符合率为95％.该方法的建立为进一步研制BVDV ELISA检测试剂盒奠定了基础.

摘要： 为了筛选与鉴定牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2蛋白与MDBK细胞的互作蛋白,以牛病毒性腹泻病毒BA株为模板,通过PCR扩增E2基因,构建重组质粒pFast-E2。将其转化至DH10Bac感受态细胞,再转染sf9昆虫细胞,获得P3代重组杆状病毒,在sf9细胞中表达E2蛋白,应用Western-blot进行鉴定,通过pull-down结合质谱技术筛选与鉴定BVDV E2蛋白与MDBK细胞互作的候选蛋白。结果表明,PCR克隆获得的E2基因片段大小约为1047 bp;在sf9昆虫细胞中能成功表达出分子质量约为43.6 ku的E2蛋白;筛选出8种候选互作蛋白,主要包括α-辅肌动蛋白(α-actinin)、延伸因子1-α(elongation factor 1-α)、波形蛋白(vimentin)和α葡萄糖苷酶Ⅱ(GANAB);通过GO分析可知,3种蛋白(P68103、E1B9F6、E1B7J1)具有GTP酶活性和结合GTP的功能,3种蛋白(A4ZZF8、Q3B7N2、P48616)具有结合双链RNA的功能,2种蛋白(Q3B7N2、A5D7D1)具有结合肌动蛋白丝的功能,2种蛋白(A4ZZF8、Q3B7N2)具有结合离子通道的功能和配体依赖性核受体转录共激活因子活性,2种蛋白(A5D7D1、A6QNJ8)具有结合m RNA的多聚腺苷酸尾部功能,1种蛋白(P48616)是细胞骨架的结构成分,且具有蛋白绑定功能。本研究为探索BVDV感染的分子机制以及治疗靶点筛选等研究提供了参考。

摘要： 为评价霍乱弧菌菌影(VCG)对猪瘟活疫苗及猪瘟病毒E2蛋白抗原区(BC和AD区)亚单位疫苗免疫增强效果的作用,本实验首先利用含有裂解质粒的霍乱弧菌制备VCG,通过对细菌裂解前后进行平板计数及透射电镜检测VCG裂解效果,结果显示所制备的VCG裂解率高,且基本形成一个完整的细菌空壳.在确定最佳猪瘟活疫苗使用量后探究VCG对猪瘟活疫苗(CFS ST)免疫效果的影响,实验分别用VCG+CFS ST和CFS ST免疫家兔一次,设置对照组,并在免疫第42 d后攻毒.本研究还探究了VCG作为佐剂对猪瘟E2蛋白主要抗原区蛋白亚单位疫苗免疫效果的影响,实验分别用完全弗氏佐剂(CFA)和VCG联合E2蛋白主要抗原区蛋白,通过间隔两周的方式分4次免疫家兔,设置对照组,并在免疫第56d后攻毒.通过阻断ELISA方法每周检测家兔血清的抗体阻断率,免疫后以500 RID50的猪瘟病毒弱毒株通过耳缘静脉注射方式对家兔攻毒.结果 显示,50 RID50的猪瘟活疫苗组家兔血清抗体阻断率显著降低(p＜0.001);VCG+CFS ST组家兔猪瘟抗体阻断率在免疫14d后大部分时间点显著高于CFS ST组(p＜0.05),并且攻毒后仅对照组出现定型热反应;CFA(E2)组和VCG(E2)组的家兔猪瘟抗体阻断率均显著达到较高水平(p＜0.001),并且攻毒后仅对照组出现定型热反应.以上结果表明VCG可作为免疫佐剂增强猪瘟活疫苗的免疫效果;VCG联合猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区亚单位疫苗在家兔中也具有较好的免疫效果.本研究为研发廉价高效的疫苗佐剂提供重要的实验依据.

摘要： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是危害中国养猪业最重要的传染病之一.自20世纪50年代末推广使用猪瘟兔化弱毒(HCLV)疫苗以来,有效控制了CSF在中国的暴发流行,但猪瘟仍在国内不间断流行.开展中国分子流行病学研究,实时跟踪CSFV的变异特征及抗原性变异程度,监测新的CSFV流行毒株的情况和疫苗对流行毒株的有效性,对中国猪瘟防控具有十分重要的意义.

摘要： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是危害中国养猪业最重要的传染病之一.自20世纪50年代末推广使用猪瘟兔化弱毒(HCLV)疫苗以来,有效控制了CSF在中国的暴发流行,但猪瘟仍在国内不间断流行.开展中国分子流行病学研究,实时跟踪CSFV的变异特征及抗原性变异程度,监测新的CSFV流行毒株的情况和疫苗对流行毒株的有效性,对中国猪瘟防控具有十分重要的意义.

摘要： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是危害中国养猪业最重要的传染病之一.自20世纪50年代末推广使用猪瘟兔化弱毒(HCLV)疫苗以来,有效控制了CSF在中国的暴发流行,但猪瘟仍在国内不间断流行.开展中国分子流行病学研究,实时跟踪CSFV的变异特征及抗原性变异程度,监测新的CSFV流行毒株的情况和疫苗对流行毒株的有效性,对中国猪瘟防控具有十分重要的意义.

摘要： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是危害中国养猪业最重要的传染病之一.自20世纪50年代末推广使用猪瘟兔化弱毒(HCLV)疫苗以来,有效控制了CSF在中国的暴发流行,但猪瘟仍在国内不间断流行.开展中国分子流行病学研究,实时跟踪CSFV的变异特征及抗原性变异程度,监测新的CSFV流行毒株的情况和疫苗对流行毒株的有效性,对中国猪瘟防控具有十分重要的意义.

摘要： 用4～5周龄仔猪20头,对猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源)、猪瘟兔化弱毒疫苗(ST传代细胞源)进行效力对比试验.试验分四组,每组5头,分别免疫上述疫苗,第四组对照组;一免后21日进行二免,二免后14日,所有猪只耳后肌肉注射石门系标准强毒株1ml/头(含106最小致死量),攻毒测温,观察临床症状.结果显示:对照组在攻毒第6～10日后死亡,免疫组除少数试验猪体温稍有升高,均无异常临床反应;组织病理学检测结果表明,三个免疫组脑、肾脏、脾脏、颌下淋巴结中均未见病理损伤,而对照组均有显著的实质性损伤;从病理学角度证明用石门系标准强毒株攻毒后,免疫猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源和传代细胞源)相比对试验猪的保护效力是相当的.

摘要： 用4～5周龄仔猪20头,对猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源)、猪瘟兔化弱毒疫苗(ST传代细胞源)进行效力对比试验.试验分四组,每组5头,分别免疫上述疫苗,第四组对照组;一免后21日进行二免,二免后14日,所有猪只耳后肌肉注射石门系标准强毒株1ml/头(含106最小致死量),攻毒测温,观察临床症状.结果显示:对照组在攻毒第6～10日后死亡,免疫组除少数试验猪体温稍有升高,均无异常临床反应;组织病理学检测结果表明,三个免疫组脑、肾脏、脾脏、颌下淋巴结中均未见病理损伤,而对照组均有显著的实质性损伤;从病理学角度证明用石门系标准强毒株攻毒后,免疫猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源和传代细胞源)相比对试验猪的保护效力是相当的.

摘要： 用4～5周龄仔猪20头,对猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源)、猪瘟兔化弱毒疫苗(ST传代细胞源)进行效力对比试验.试验分四组,每组5头,分别免疫上述疫苗,第四组对照组;一免后21日进行二免,二免后14日,所有猪只耳后肌肉注射石门系标准强毒株1ml/头(含106最小致死量),攻毒测温,观察临床症状.结果显示:对照组在攻毒第6～10日后死亡,免疫组除少数试验猪体温稍有升高,均无异常临床反应;组织病理学检测结果表明,三个免疫组脑、肾脏、脾脏、颌下淋巴结中均未见病理损伤,而对照组均有显著的实质性损伤;从病理学角度证明用石门系标准强毒株攻毒后,免疫猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源和传代细胞源)相比对试验猪的保护效力是相当的.

摘要： 用4～5周龄仔猪20头,对猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源)、猪瘟兔化弱毒疫苗(ST传代细胞源)进行效力对比试验.试验分四组,每组5头,分别免疫上述疫苗,第四组对照组;一免后21日进行二免,二免后14日,所有猪只耳后肌肉注射石门系标准强毒株1ml/头(含106最小致死量),攻毒测温,观察临床症状.结果显示:对照组在攻毒第6～10日后死亡,免疫组除少数试验猪体温稍有升高,均无异常临床反应;组织病理学检测结果表明,三个免疫组脑、肾脏、脾脏、颌下淋巴结中均未见病理损伤,而对照组均有显著的实质性损伤;从病理学角度证明用石门系标准强毒株攻毒后,免疫猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源和传代细胞源)相比对试验猪的保护效力是相当的.

摘要： 用4～5周龄仔猪20头,对猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源)、猪瘟兔化弱毒疫苗(ST传代细胞源)进行效力对比试验.试验分四组,每组5头,分别免疫上述疫苗,第四组对照组;一免后21日进行二免,二免后14日,所有猪只耳后肌肉注射石门系标准强毒株1ml/头(含106最小致死量),攻毒测温,观察临床症状.结果显示:对照组在攻毒第6～10日后死亡,免疫组除少数试验猪体温稍有升高,均无异常临床反应;组织病理学检测结果表明,三个免疫组脑、肾脏、脾脏、颌下淋巴结中均未见病理损伤,而对照组均有显著的实质性损伤;从病理学角度证明用石门系标准强毒株攻毒后,免疫猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(脾淋源和传代细胞源)相比对试验猪的保护效力是相当的.

摘要： 本研究基于高致病性(HP)PRRSV细胞致弱株HuN4-F112的反向遗传操作平台,将CSFV的囊膜糖蛋白E2基因插入PRRSV基因组ORF1b和ORF2之间,并在外源基因后插入了转录调控序列6,使外源基因作为一个独立的亚基因组进行表达.从而获得了能够稳定表达CSFV E2蛋白的重组PRRSV:rPRRSV-E2.rPRRSV-E2具有与亲本病毒相似的病毒学特性,能够在体内与体外都稳定的表达猪瘟病毒E2蛋白.本研究中,就该弱毒活疫苗候选株rPRRSV-E2对HP-PRRSV和CSFV的免疫保护效力进行评价.

摘要： 本发明公开了一种含丝素蛋白改性聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯复合材料，包括如下质量份的组分：100份聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯、1‑20份改性丝素蛋白粉，2‑10份聚乙烯醇，通过高速共混后挤出造粒；所述改性丝素蛋白粉通过如下方法制备：将丝素蛋白粉与无水乙醇混合，超声分散得丝素蛋白粉悬浮液；将偶联剂溶于无水乙醇中配成偶联剂溶液；将丝素蛋白粉悬浮液和偶联剂溶液混合，回流，冷却后离心分离、烘干得到所述改性丝素蛋白粉。本发明通过采用改性丝素蛋白粉对聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯进行复合改性，并引入聚乙烯醇弥补蛋白质材料力学性能差的缺陷，大大改善聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯机械性能的作用，并降低生产成本。

摘要： 本发明公开了一种纳米氧化物及大豆分离蛋白改性聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯复合材料，包含如下重量份的组分：聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯100份、大豆分离蛋白1‑20份、纳米氧化物5‑10份、润滑剂0.2‑1份、热稳定剂0.1‑1份。本发明通过引入大豆分离蛋白及纳米氧化物能够起到改善聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯机械性能的作用，并且可以防止塑料的过快老化，延长以该复合材料为基材的农用薄膜制品的使用寿命，满足聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯的改性需求。

摘要： 本发明公开了治疗或抑制选自由以下组成的组的疾病的方法：α‑突触核蛋白病、tau蛋白病、ALS、外伤性脑损伤、和缺血再灌注相关损伤，所述方法包含向有此需要的受试者施用治疗有效量的下式化合物：或其氢醌形式；或其溶剂化物或水合物。

摘要： 本发明提供了一种燃料电池，其能够防止固定在电极上的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和/或其衍生物被洗脱，且能够防止由于洗脱导致的性能劣化；以及该燃料电池的制造方法。一种生物燃料电池，其具有这样的结构，其中正极和负极经其间的质子导体彼此面对，该生物燃料电池经配置以使得酶用于从燃料提取电子，其中所述负极是由包括在表面上具有尺寸为2nm以上100nm以下的孔的碳和/或无机化合物且在碳和/或无机化合物上固定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和/或其衍生物的电极构成。碳粒子、碳片或碳纤维用作碳。生物碳、科琴黑、活性炭等用作碳粒子。根据需要，酶反应所需的酶也可经芘衍生物等固定在碳上。

摘要： 本发明公开了一种人工单锌指蛋白，其特征在于用下列氨基酸序列之一取代天然单锌指蛋白的α螺旋肽链上第－1位至+6位的氨基酸：SEQ ID NO.：14、SEQ ID NO.：17、SEQ ID NO.：21、SEQ ID NO.：23或SEQ ID NO.：24。本发明也具体地公开了11种人工单锌指蛋白、15种人工二锌指蛋白和54种人工多锌指蛋白，它们可以与天然和/或人工锌指蛋白连接成基因特异性的人工多锌指蛋白，用于识别特异性目的基因，调控相关基因。

摘要： 本发明提供了在致病真菌肉桂疫霉感染栗期间差异表达的分离和纯化的核苷酸序列。所述分离的基因可以插入表达盒并且在可以用于通过选定的转化方法转化宿主细胞的表达载体中克隆。可以通过体外培养技术从转化的植物细胞再生转基因植物。本发明中公开的核苷酸序列编码描述为对植物对致病真菌的抗性具有有效作用的蛋白。当以有义方向使用时，它们可以延缓或甚至防止植物感染，给栗、软橡树或其它木本树木物种的生产者提供益处。

摘要： 本发明公开了一种含丝素蛋白改性聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯复合材料，包括如下质量份的组分：100份聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯、1‑20份改性丝素蛋白粉，2‑10份聚乙烯醇，通过高速共混后挤出造粒；所述改性丝素蛋白粉通过如下方法制备：将丝素蛋白粉与无水乙醇混合，超声分散得丝素蛋白粉悬浮液；将偶联剂溶于无水乙醇中配成偶联剂溶液；将丝素蛋白粉悬浮液和偶联剂溶液混合，回流，冷却后离心分离、烘干得到所述改性丝素蛋白粉。本发明通过采用改性丝素蛋白粉对聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯进行复合改性，并引入聚乙烯醇弥补蛋白质材料力学性能差的缺陷，大大改善聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯机械性能的作用，并降低生产成本。

摘要： 公开了一种异源二聚体Fc融合蛋白和包含该异源二聚体Fc融合蛋白的药物组合物。该异源二聚体Fc融合蛋白包含免疫球蛋白重链恒定区(Fc)对的第一Fc区和第二Fc区，并且其中IL‑21与该第一Fc区和/或该第二Fc区的N末端或C末端中的至少一项结合，其中该第一Fc区和该第二Fc区的CH3结构域发生突变，从而促进异源二聚体的形成。当使用根据本发明的异源二聚体Fc融合蛋白时，可显著增加包括在异源二聚体Fc融合蛋白内的IL‑21的体内半衰期。

摘要： 本发明公开了一种纳米氧化物及大豆分离蛋白改性聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯复合材料，包含如下重量份的组分：聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯100份、大豆分离蛋白1‑20份、纳米氧化物5‑10份、润滑剂0.2‑1份、热稳定剂0.1‑1份。本发明通过引入大豆分离蛋白及纳米氧化物能够起到改善聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯机械性能的作用，并且可以防止塑料的过快老化，延长以该复合材料为基材的农用薄膜制品的使用寿命，满足聚己二酸/对苯二甲酸丁二酯的改性需求。

摘要： 本发明公开了一种MIC蛋白及ULBP蛋白二价纳米抗体及其应用。发明人筛选得到了性能优异的抗MIC蛋白和抗ULBP蛋白的纳米抗体。通过将二者偶联得到的二价纳米抗体，偶联至固相载体上得到的免疫吸附剂，可以通过血液净化的方式同时清除肿瘤患者血清中游离的可溶性MICA、MICB和ULBP分子，提高清除率，减少免疫逃逸作用，增强NK细胞的靶向杀伤作用。