融合蛋白

摘要： 单链抗体融合蛋白是一种通过重组质粒将单链抗体与蛋白质融合构建的新型蛋白,具有保持抗原抗体结合的稳定性和外部蛋白质生物活性功能,主要通过大肠杆菌与酵母两个表达系统进行表达。单链抗体融合蛋白的抗肿瘤机制包括阻滞肿瘤细胞周期、靶向杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、增强机体免疫应答等,现已主要应用于靶向治疗、影像诊断、细胞内免疫和生物检测等方面。本文对近年来单链抗体融合蛋白抗肿瘤的研究进展作一综述。

摘要： 目的:建立ActRⅡB-Fc融合蛋白的生物学活性检测方法。方法:利用A204-CAGA12-LUC细胞系,通过荧光素酶检测系统进行ActRⅡB-Fc融合蛋白的生物学活性检测,根据四参数拟合分析计算样品相对效价,并对该方法的专属性、精密性和准确性进行验证。结果:ActRⅡB-Fc融合蛋白在该方法中存在量效关系,且符合4-参数方程:y=(A-D)/[1+(x/C)^(B)]+D。该方法具有良好的专属性;6批ActRⅡB-Fc融合蛋白样品经3次测定,相对效价平均值在(86.74±6.44)%~(108.81±15.07)%,RSD均小于15%;2批回收率样品经3次测定,回收率分别为(114.99±12.42)%和(81.19±7.35)%;8次独立测定重复性较好。结论:研究建立的ActRⅡB-Fc融合蛋白生物学活性检测方法专属性强,准确性高,精密度好,可作为ActRⅡB-Fc融合蛋白生物学活性的常规检测方法。

摘要： 融合基因是由2个或者2个以上不同的基因融合形成的一种基因产物,在基因组中普遍存在。部分基因融合的产生与多种癌症的发生发展密切相关,其在白血病、胃癌、肺癌和前列腺癌等癌症中通过调控激酶活性及表观遗传修饰等多种方式异常调节相关基因的表达,被广泛应用于癌症的诊断和预后分析,是癌症治疗的潜在靶点。现就染色体重排产生的融合基因与癌症发生发展的相关性及其具体致病机制的最新研究进展进行综述,为研究基因融合在恶性肿瘤中新的发生机制提供思路,为开展有效的临床治疗提供新的理论指导。

摘要： 【目的】反向遗传学技术构建EgM123基因重组狂犬病SRV_(9)病毒疫苗株,研究狂犬病病毒G基因、细粒棘球绦虫EgM123基因、eGFP基因重组质粒在真核细胞中的蛋白表达效果与蛋白免疫原性,为通过反向遗传学拯救eGFP标记EgM123基因重组狂犬病病毒,制备狂犬病-包虫病二联基因重组疫苗提供研究基础。【方法】将已构建的携带eGFP增强型绿色荧光蛋白的狂犬病病毒G基因重组细粒棘球绦虫EgM123基因重组质粒(3033 bp)利用脂质体转染方法转染BHK-21细胞,使其在BHK-21细胞中表达出融合蛋白,并通过荧光显微镜观察、SDS-PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳、Western blotting试验鉴定融合蛋白的荧光蛋白表达、融合蛋白分子量,鉴定其免疫原性。【结果】在转然后48 h可见绿色荧光蛋白的表达;通过SDS-PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳结果显示,重组质粒在BHK-21细胞中表达获得分子量约为120KDa的融合蛋白;Western blotting结果显示,将蛋白凝胶转移PVDF膜分别经狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体、EgM123多克隆抗体、GFP单克隆抗体分别孵育,均在120KDa处可见抗原抗体结合条带。【结论】eGFP标记的狂犬病病毒G基因重组细粒棘球绦虫EgM123基因重组质粒在真核细胞中成功表达出融合性蛋白,且具有免疫原性。

摘要： 目的:基于重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建转录因子EB(TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化。方法:根据SOE PCR技术原理设计突变引物,以pGEX-6p-1-TFEB质粒为模板,分别采用外侧引物F和R及突变引物F_(n)和R_(n)进行第1步PCR扩增,获得含突变位点的产物1和产物2。经第2步PCR退火延伸对产物1和产物2进行重叠拼接,以拼接后DNA片段为模板,采用外侧引物F和R进行第3步PCR扩增获得含突变位点的目的DNA;将其克隆至pGEX-6p-1载体,采用BamHⅠ和SalⅠ进行酶切鉴定,DNA测序验证突变结果。于大肠杆菌(E.coli)中分别采用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在不同条件下诱导TFEB及其突变体重组蛋白表达。Glutathione-Sepharose 4B琼脂糖凝珠分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳检测纯化产物蛋白浓度和相对分子质量。结果:第1步PCR扩增获得均含有突变位点的2条DNA片段,经第2步PCR退火延伸和第3步PCR扩增后获得大量含有突变位点的完整DNA片段。双酶切鉴定,连接的DNA片段与目的片段大小一致。DNA测序显示TFEB的114位丝氨酸(TCT)成功突变为丙氨酸(GCT)。在0.5 mmol·L^(-1)IPTG、16°C诱导过夜条件下获得TFEB及其突变体的可溶性蛋白表达。SDS-PAGE凝胶电泳,纯化后蛋白浓度较高,分子大小正确。结论:利用SOE PCR技术成功实现了TFEB丝氨酸114位点的定点突变,并且TFEB及其突变体基因在E.coli中成功表达。

摘要： 类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptide,ELP)是一种衍生于天然弹性蛋白,可人工合成的多肽聚合物。ELP具有特殊的温度响应性,它会随温度的变化表现出可逆相转变行为,并且当它与其他小分子或多肽偶联时,该温敏特性可以被充分保留。借助基因工程可以人工合成ELP与ELP融合蛋白,精确调控ELP的结构与功能,在其序列中添加反应性氨基酸或多肽。同时,ELP由天然氨基酸组成,其生物相容性好,易于生物降解,免疫原性低,无毒性作用。基于以上优势,ELP已被广泛应用于蛋白的表达纯化、体外诊断、药物递送和组织工程等生物医药领域。本文结合国内外研究报道,简要介绍了ELP的设计原理、理化特性和生物合成方法,并列举了一些ELP应用于药物递送系统中有代表性的工作,最后总结了该研究领域面临的挑战和问题。

摘要： 为提高抗呋喃唑酮代谢物衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量。采用液体培养基发酵培养能表达出目的蛋白的基因工程菌,对诱导表达得到的目标融合蛋白进行鉴定,探讨5种培养基、6种诱导时间和4种诱导剂-异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度对融合蛋白表达的影响,再通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化羧基琼脂糖凝胶柱和直接竞争酶联免疫分析法进行纯化并对其活性进行鉴定。结果表明,最适宜条件为SB培养基,诱导剂IPTG浓度为0.6 mmol/L,培养9 h,该条件下抗呋喃唑酮代谢物衍生物单链抗体-AP融合蛋白的表达效果较好,表达量从2.89%增加到5.75%,总体增加了约2.86百分点,通过NHS活化羧基琼脂糖凝胶柱纯化后融合蛋白的浓度为1.973 mg/mL,IC_(50)值为56.9231 ng/mL。本试验单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达量得到了很好的提高,并获得生物活性较好的融合蛋白,为后续呋喃唑酮代谢物免疫检测分析方法的建立奠定了一定基础。

摘要： 目的:探究过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)调控线粒体内膜中视神经萎缩症蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)改善阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的作用及其机制。方法:利用N 2 A细胞系脂质体法转染APPswe,构建AD体外模型,qRT-PCR评价mutAPP对PGC-1α和OPA1转录水平的影响;脂质体法共转APPswe和PGC-1α质粒,qRT-PCR评价PGC-1α对AD发生时OPA1转录水平的调控。利用APP/PS1鼠,通过脑区定点微注射及AAV介导的基因转导技术,诱导PGC-1α在APP/PS1小鼠侧顶叶联合皮层过表达,免疫荧光和透射电镜检测PGC-1α对AD发生时线粒体内膜形态的影响及对OPA1表达的调控作用。结果:AD的发生伴随着Aβ沉积增加,线粒体形态异常及PGC-1α和OPA1转录、蛋白表达水平的下调;PGC-1α通过促进OPA1的转录及表达,改善了AD所伴随的线粒体形态损伤及Aβ沉积。结论:PGC-1α通过正向调控OPA1,改善AD所伴随的线粒体内膜的损伤及病理改变,很可能成为AD治疗的潜在靶点。

摘要： 目的:构建肿瘤归巢肽(THPs)-近红外荧光蛋白(NIRFP)miRFP670-LyP1融合蛋白的原核表达载体,纯化融合蛋白,研究融合蛋白的近红外荧光特性。方法:采用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和NotⅠ对pmiRFP670-N1质粒和pET-28a质粒进行双酶切,构建pET-miRFP670原核表达载体,通过点突变引入LyP-1的DNA序列,构建重组表达载体pET-miRFP670-LyP1;将测序正确的重组表达载体转化至大肠杆菌BL21细胞中,SDS-PAGE电泳法检测不同温度(16°C和37°C)、不同异丙基硫代半乳糖苷浓度(0.1、0.5和1.0 mmol·L^(-1))诱导下融合蛋白原核表达量;采用Ni-NTA树脂亲和纯化融合蛋白,检测miRFP670-LyP1蛋白原核表达量;采用荧光显微镜观察乳腺癌4T1细胞中miRFP670-LyP1融合蛋白的细胞内吞形态表现。结果:检测到长度约为5343和973 bp的DNA条带,与pET-28a载体及miRFP670基因片段大小相符。DNA测序,LyP1序列成功插入至pETmiRFP670表达载体中。在16°C时miRFP670-LyP1融合蛋白的可溶性蛋白表达量较37°C时更高。采用Ni-NTA树脂纯化得到了高纯度的miRFP670-LyP1融合蛋白。荧光成像,miRFP670-LyP1融合蛋白可被乳腺癌4T1细胞高效内吞。结论:成功构建了pET-miRFP670-LyP1原核表达载体,融合蛋白在低温(16°C)较常温(37°C)诱导的可溶性蛋白表达量更高,亲和层析得到了高纯度的融合蛋白,融合蛋白被乳腺癌4T1细胞高效内吞并显示出近红外荧光。

摘要： 纳米抗体是一类在生物医药中具有重要应用前景的蛋白药物,然而由于其分子过小极易被清除.为了获得更好的体内代谢,我们通过CD47纳米抗体融合表达白蛋白结合域(ABD),从而提高其体内半衰期.使用分子克隆技术合成构建带有CD47-ABD基因的原核表达载体pET22b-3D3-2-ABD,转入BL21(DE3)中进行表达及Ni+亲和层析柱纯化,并使用酶联免疫吸附剂(ELISA)法测定其生物学活性.给小鼠尾静脉注射融合蛋白后在不同时间点采血,用双抗体夹心ELISA测定融合蛋白的血浆浓度,并计算药代动力学参数.获得了pET22b-3D3-2-ABD重组质粒,并在BL21(DE3)表达了CD47-ABD融合蛋白.通过Ni+亲和柱纯化,获得了较高纯度和浓度的CD47-ABD融合蛋白;改造后的CD47-ABD融合蛋白仍保留抗原结合活性,与CD47抗原及人血清白蛋白(HSA)的结合活性均具有剂量依赖性.CD47-ABD融合蛋白的半衰期从改造前的35.82 min延长至了501.52 min.本研究证明了融合ABD能够显著延长CD47纳米抗体体内半衰期而不影响其抗原结合,为解决纳米抗体自身半衰期短的缺点提供了理论和技术参考.

摘要： 作为重组DNA技术的产物,融合蛋白已经被开发为一类具有多功能的新生物分子.通过基因融合两个或多个蛋白结构域,可使融合蛋白取得各组成部分的衍生功能.两个功能蛋白分子之间的接头序列(连接肽）,为一段适当的氨基酸序列,用于连接蛋白的不同结构域,并且能维护结构域间的相互作用,保留蛋白的生物活性.针对天然连接肽的研究,有助于促进实用连接肽的合理设计和研究.

摘要： 选取靶向胃癌组织中高表达EGFR分子单域抗体及肿瘤穿透肽iRGD,构建融合蛋白：构建融合蛋白anti-EGFR-iRGD,在2D细胞、3D肿瘤多细胞球状体及体内水平评价其靶向性、高穿透性及其体内外抗肿瘤作用;拓展融合蛋白anti-EGFR-iRGD的应用,在2D细胞、MCS水平及荷瘤裸鼠水平研究融合蛋白anti-EGFR-iRGD对紫杉醇抗肿瘤效果的影响,并研究其协同机制.

摘要： 鸡传染性支气管炎是由传染性支气管炎病毒引起的一种严重危害世界养禽业的重大传染病.目前疫苗免疫是IB防控的主要手段.S1蛋白是IBV主要的免疫原性蛋白,虽然采用昆虫细胞表达IBV的S1蛋白可以诱导鸡体产生保护性免疫应答,但是攻毒保护效果很差(＜50％).本研究利用昆虫杆状病毒表达系统分别表达了IBV的S1蛋白(rS1)、S1与H3N2流感病毒跨膜胞内区(H3TM和CT)融合蛋白(rS1-H3(TM))以及S1与H3N2流感病毒HA2融合蛋白(rS1-HA2).免疫实验结果显示,与rS1蛋白及灭活疫苗相比,rS1-H3(TM)蛋白和rS1-HA2蛋白可以更好的诱导鸡体产生体液免疫和细胞免疫,IBV M41毒株攻毒保护试验结果显示,rS1蛋白及灭活疫苗免疫组对SPF鸡分别能达到47％,60％的保护率,而rS1-HA2蛋白及rS1-H3(TM)蛋白分别可达87％和73％的保护水平.研究结果表明,H-3N2流感病毒的HA2或跨膜胞内区(H3TMD)能提高S1蛋白的免疫原性和保护效果,可以作为疫苗开发的新策略.

摘要： 干扰素a1b对许多疾病都有很好的治疗效果,一直是医学领域研究的重要对象.目前a1b已经成功运用于抗病毒、肿瘤治疗等方面.为了充分发挥干扰素a1b的作用,人们利用基因工程的方法对干扰素a1b基因序列、表达系统等方面进行改进,取得多项进展.目前针对a1b化修饰,糖基化修饰,融合蛋白,生物可降解微球缓释体系,脂质体给药系统等方面,干扰素a1b能发挥其生物学效用,临床治疗进展取得一定的突破.但是干扰素a1b在临床应用仍然受某些因素制约,需要进一步研究解决.

摘要： 目的：人促红素(EPO)是由肾脏分泌的一种活性糖蛋白,作用于骨髓中红系造血祖细胞,促进其增殖、分化,从而促进红细胞生成,临床上多用来治疗贫血症.本研究介绍了两种长效EPO融合蛋白(EPO-CTP融合蛋白和EPO-HSA融合蛋白)重复皮下注射给予SD大鼠,对妊娠雌鼠、胚胎及胎仔发育的影响,并了解该药物对大鼠的致畸胎作用,为临床安全性用药提供参考. 方法：两个试验均选用SD雌性大鼠120只，分为对照组、低、中和高剂量组，剂量分别为EPO-CTP融合蛋白20μg/kg,100μg/kg,5OOμg/kg和EPO-HSA融合蛋白20μg/kg, 60μg/kg, 200μg/kg。皮下注射给药，EPO-CTP融合蛋白于孕鼠GD6,GD9. GD12和GD15给药，EPO-HSA融合蛋白于孕鼠GD6和GD13给药，在GD20对孕鼠实施安乐死。试验中对于孕鼠进行临床观察，体重和食量检查，并对孕鼠生殖能力、胚胎-胎仔发育、及胎仔外观、骨骼、内脏进行检查，对孕鼠大体观察异常组织进行组织病理学检查。 结果：孕鼠一般毒性:两种融合蛋白各剂量组孕鼠临床观察、体重和食量均未见给药相关的异常改变。大体解剖观察中，EPO-CTP融合蛋白5OOμg/kg和EPO-HSA融合蛋白200μg/kg剂量组各有2只动物脾脏体积增大，镜检表现为髓外造血。孕鼠生殖能力及胚胎发育指标:与对照组相比，两种融合蛋白各剂量组窝平均黄体数、窝平均着床数、窝平均活胎数、活胎率、总吸收胎率、早期吸收胎率、晚期吸收胎率、着床后丢失率、死胎率以及胎盘异常率均未见毒理学意义的改变。孕鼠未见流产及早产情况的发生。胎仔发育指标:与对照组相比，EPO-CTP融合蛋白各剂量组、EPO-HSA融合蛋白200μg/kg剂量组大部分胎仔发育指标可见统计学意义的改变，包括雌、雄胎仔体重降低，身长和/或尾长减少，或胎仔胎盘重增加。胎仔性别比未见统计学意义的改变。致畸性:骨骼检查中，EPO-CTP融合蛋白各剂量组、EPO-HSA融合蛋白 200μg/kg剂量组胎仔骨骼包括胸骨、骸尾骨、中手骨和/或中足骨等数目减少，胸骨骨化率降低，部分骨骼骨化不全率升高;EPO-HSA融合蛋白20μg/kg和60μg/kg剂量组胎仔骨骼也发生相应改变，发生数目较少、程度较轻，与高剂量组呈剂量相关性。内脏检查中，EPO-CTP融合蛋白5OOμg/kg剂量组胎仔胸腺颈部残留率增加。外观检查中，两种融合蛋白胎仔外观畸形率未见统计学意义的改变。 结论：胎仔骨骼数目和骨化程度是判断胎仔骨骼发育迟缓的重要指标，骨骼数目减少和骨化不全增多均提示骨骼发育迟缓;同时胸腺残留也是判断胎仔内脏发育迟缓的指标之一，胸腺残留率升高提示内脏发育不良。以上胎仔发育指标和骨骼及内脏的改变考虑是由于供试品的药理学作用的放大引起孕鼠的凝血系统功能指标发生改变，从而导致孕鼠血流动力学改变，引起胎盘输送营养物质缓慢，继而导致胎仔营养下降，造成宫内发育迟缓和骨骼及内脏发育不良。在本试验条件下，EPO-CTP融合蛋白500μg/kg, EPO-HSA融合蛋白200μg/kg剂量下，孕鼠脾脏可见与药理作用相关的髓外造血;两种EPO融合蛋白各剂量下均未见胚胎毒性，但可出现由于供试品药理作用放大导致的胎仔宫内发育迟缓、骨骼和/或内脏发育不良。

摘要： AML1-ETO是急性髓性白血病患者中常见的癌蛋白,为染色体易位所致AML1基因与ETO基因融合的产物,能够抑制细胞分化并促进其恶性增殖.利用反义核酸、siRNA或冬凌草甲素特异地靶向AML1-ETO可以造成其mRNA下调或蛋白降解,促使白血病细胞分化或凋亡而不影响正常血细胞的功能,因此,AML1-ETO是理想的白血病靶向治疗靶标.

摘要： 目的：通过原核表达及纯化获得甘蔗1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)的大、小亚基融合蛋白,为获得符合抗体制备条件的高纯度融合蛋白提供技术支持. 方法：以甘蔗品种桂糖11号(GT11)+1叶为材料,根据NCBI公布的甘蔗Rubisco大、小亚基基因(rbcL和rbcS)的编码域序列(CDS)设计特异性引物,PCR扩增rbcL和rbcS基因的CDS,然后连接至原核表达载体pET-30A(+),构建重组质粒后转入原核细胞(大肠杆菌Rosetta)中诱导表达,用镍亲和层析柱对融合蛋白进行纯化,并比较分析桂糖11号与其他甘蔗品种在rbcL和rbcS基因的CDS及编码蛋白序列方面的差异. 结果：rbcL和rbcS基因的CDS长度分别为1431和510bp,其中桂糖11号rbcL基因的CDS与Saccharumhybrid cuLtivar SP80-3280(GenBank登录号AE009947)、Saccharum hybrid cultivar Q155(GenBank登录号KU214867)的一致,桂糖11号rbcS基因的CDS与Saccharum hybrid cultivar GT28(GenBank登录号JN591757)的存在7个碱基差异,但仅有2个氨基酸发生错义突变.RbcL和RbcS融合蛋白以包涵体形式存在原核细胞中,用镍离子亲和层析纯化及超滤浓缩后其浓度均在1.0mg/mL以上. 结论：从桂糖11号成功克隆Rubisco大亚基和小亚基基因的CDS,大亚基基因的CDS比小亚基的保守性更高,且均可在原核细胞中高度表达,经纯化浓缩获得的高纯度融合蛋白可用于制备Rubisco单克隆抗体.

摘要： 免疫球结合蛋白(Ig-binding proteins,IGBP)是一类表达于细菌表面的能与宿主免疫球蛋白特定部位结合的蛋白,能调节宿主对细菌的免疫反应,是细菌重要致病因子之一.其中研究最多的是SPA和SPG，这两种IGBP分子的胞外部分均含由若干重复的序列高度同源的Ig结合结构域。本研究对这两种免疫球蛋白结合结构域进行串联重组，获得具有更加全面的哺乳动物免疫球蛋白结合活性的重组IGBP分子，并评估其用于多物种共患传染性疾病抗体检测的潜能。本研究利用现代基因合成技术，结合选取的SPA和SPG的单结构域优点而合成的融合蛋白[AG]n，扩大了其应用范围，并成功地应用于检测多种动物FMDV感染的ELISA方法。通过对临床免疫状态不同的5个牛场829份血清和41份猪血清，16份羊血清进行检测。发现各场口蹄疫非结构蛋白阳性率差异较大，从0到41.75%。

摘要： 目的:构建前列腺干细胞抗原(PSCA)单链抗体与碱性磷酸酶(AP)的融合表达载体,并进行原核表达和鉴定.rn 方法:根据大肠杆菌的密码子偏爱性进行碱基优化,合成抗PSCA的单链抗体基因PaFv基因,用Sfi Ⅰ和Not Ⅰ限制性核酸内切酶分别酶切、连接至含有AP编码序列的pDAP2/S载体上,转化大肠杆菌XL1-Blue中诱导表达,Western blot检测融合蛋白的表达情况,并测定融合蛋白活性.rn 结果:PCR鉴定和序列测定显示抗PSCA单链抗体基因成功构建到pDAP2/S载体中,分析结果表明单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白在重组大肠杆菌中表达形式为包涵体,具有融合蛋白的活性.rn 结论:成功构建并表达了抗PSCA单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白,为进一步发展以PSCA为靶点的前列腺癌快速免疫诊断方法奠定了基础.

摘要： 试验旨在对迟钝爱德华菌EIB202 PuAH基因利进行克隆表达,并对其部分特性进行分析.根据GenBank中发表的迟钝爱德华菌PuAH基因序列(GenBank登录号:CP001135,CDS编号:ETAE-0818)设计引物,克隆并通过表达载体pET32a重组表达该基因所编码的蛋白,纯化表达产物并制备兔抗血清,采用ELISA、Western blotting、溶血试验、菌体凝集试验分析所得融合蛋白的特性.结果显示:所得融合蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达,蛋白分子质量约为42 ku;具有免疫原性和抗原性,对鳗鲡红细胞不具溶血性,但融合蛋白抗血清对EIB202膜蛋白提取物的溶血性有一定的抑制作用,且可以凝集EIB202菌体.

摘要： 本发明涉及融合蛋白质或融合肽，所述融合蛋白质或融合肽的体内半衰期通过维持体内持续释放而增加，本发明还涉及使用所述融合蛋白质或融合肽增加体内半衰期的方法。与固有的生理活性蛋白质或生理活性肽相比，根据本发明的融合蛋白质或融合肽通过将生理活性蛋白质或生理活性肽与α-1抗胰蛋白酶突变体或含有一个或一个以上突变氨基酸的α-1抗胰蛋白酶突变体结合以维持所述生理活性蛋白质或生理活性肽在体内持续释放并且显著地增加所述生理活性蛋白质或生理活性肽的血液半衰期(T

摘要： 本申请涉及生物技术领域，本申请提供一种OprJ‑N‑M融合基因及其融合蛋白、融合蛋白制备方法以及用途，该OprJ‑N‑M融合基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。通过动物实验验证，由该OprJ‑N‑M融合基因表达的OprJNM融合蛋白可以有效的刺激机体产生高水平的体液及细胞免疫应答和良好的抗绿脓杆菌的感染的免疫保护作用。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种辅助蛋白，为氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的蛋白，或为与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白具有85％以上同源性的蛋白，还公开了包含该辅助蛋白的重组融合蛋白、重组表达载体以及该重组融合蛋白的制备方法。本发明的优点在于，该辅助蛋白可用于生产多种氨基酸个数为20‑80个和/或等电点范围为3‑9的小分子多肽；该重组融合蛋白表达于细胞内，破壁后在4°C‑100°C均可稳定存在于上清液中，具有较佳的热稳定性，可在60°C‑100°C通过热破壁法即可获得大量重组融合蛋白，简化重组融合蛋白的提取流程，降低成本，再在合适条件下通过酶切割或化学切割使辅助蛋白与目的多肽断裂，即可获得稳定而有活性的目的多肽。

摘要： 本发明涉及融合蛋白质或融合肽，所述融合蛋白质或融合肽的体内半衰期通过维持体内持续释放而增加，本发明还涉及使用所述融合蛋白质或融合肽增加体内半衰期的方法。与固有的生理活性蛋白质或生理活性肽相比，根据本发明的融合蛋白质或融合肽通过将生理活性蛋白质或生理活性肽与α-1抗胰蛋白酶突变体或含有一个或一个以上突变氨基酸的α-1抗胰蛋白酶突变体结合以维持所述生理活性蛋白质或生理活性肽在体内持续释放并且显著地增加所述生理活性蛋白质或生理活性肽的血液半衰期(T

摘要： 本申请涉及生物技术领域，本申请提供一种OprJ‑N‑M融合基因及其融合蛋白、融合蛋白制备方法以及用途，该OprJ‑N‑M融合基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。通过动物实验验证，由该OprJ‑N‑M融合基因表达的OprJNM融合蛋白可以有效的刺激机体产生高水平的体液及细胞免疫应答和良好的抗绿脓杆菌的感染的免疫保护作用。

摘要： 本发明涉及一种药物组合物，其含有作为有效成分的融合蛋白，其中融合有组织穿透肽和抗血管内皮细胞生长因子(抗VEGF)剂，用于治疗癌症或血管生成相关疾病。更具体地，本发明涉及融合蛋白用于治疗癌症或血管生成相关疾病的用途，其中，所述融合蛋白改善了抗血管内皮细胞生长因子剂的组织穿透性并且发挥癌症靶向作用，从而产生优异的血管生成抑制作用并表现出对癌症的治疗效果，其中所述癌症表现出对抗VEGF剂的耐药性或无反应性。

摘要： 本发明涉及异源纤维素酶融合构建物，其编码具有纤维素分解活性的融合蛋白，所述融合蛋白包括衍生自真菌外切纤维二糖水解酶的第一催化结构域和衍生自纤维素酶的第二催化结构域。本发明也涉及含有异源纤维素酶融合构建物的载体和真菌宿主细胞，以及产生所述纤维素酶融合蛋白的方法和酶促纤维素酶组合物。

摘要： 本发明提供适于溶解纤维蛋白凝块的融合蛋白及包含该融合蛋白的药物组合物。根据本发明，提供与不溶性纤维蛋白结合的抗体或其抗原结合性片段与以三环结构域的纤溶酶的氨基酸序列不易被纤溶酶切割的方式改造后的尿激酶原突变体的融合蛋白及包含该融合蛋白的药物组合物。

摘要： 提供用于测定变性HDL的量及质的不含脂质的长期保存性良好的标准品的融合蛋白，以及使用该融合蛋白的精确地、重现性·可靠性良好地测定高密度脂蛋白的方法。融合蛋白中，在与凝集素样氧化LDL受体：LOX‑1结合的LOX‑1结合蛋白序列上，直接或隔着间隔子连接有载脂蛋白A1：ApoA I的全蛋白序列或部分片段蛋白序列。标本试样中的变性高密度脂蛋白的测定方法为基于变性高密度脂蛋白针对LOX‑1和抗ApoA I抗体的结合的变性高密度脂蛋白的测定方法，其中，将该融合蛋白作为变性高密度脂蛋白的标准品使用，并且通过光学检测和/或放射剂量检测，通过与前述标准品的比较求出标本试样中的变性高密度脂蛋白。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种辅助蛋白，为氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的蛋白，或为与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白具有85％以上同源性的蛋白，还公开了包含该辅助蛋白的重组融合蛋白、重组表达载体以及该重组融合蛋白的制备方法。本发明的优点在于，该辅助蛋白可用于生产多种氨基酸个数为20‑80个和/或等电点范围为3‑9的小分子多肽；该重组融合蛋白表达于细胞内，破壁后在4°C‑100°C均可稳定存在于上清液中，具有较佳的热稳定性，可在60°C‑100°C通过热破壁法即可获得大量重组融合蛋白，简化重组融合蛋白的提取流程，降低成本，再在合适条件下通过酶切割或化学切割使辅助蛋白与目的多肽断裂，即可获得稳定而有活性的目的多肽。