基因启动子

摘要： [目的]探讨组织蛋白酶D基因启动子序列单核苷酸多态性与急性心肌梗死的关系。[方法]采用病例-对照研究方法,对357例急性心肌梗死患者和347例对照人群的组织蛋白酶D基因启动子采用聚合酶链反应扩增目的基因片段并测序,结合目的基因测序后的序列及比对,GenBank上查找相对应的单核苷酸多态性位点后进行数据统计和分析。运用Hardy-Weinberg平衡检验后,应用χ^(2)检验和t检验进行相关分析。采用Logistic回归对多种危险因素以及2个单核苷酸多态性位点与急性心肌梗死易感性进行关联性分析。用Haploview4.2软件和SHEsis在线软件进行连锁不平衡及单倍型分析。TRANSFAC数据库用于预测可能受单核苷酸多态性影响的转录因子的结合位点。[结果] Logistic回归分析结果显示年龄增大、吸烟史、高血压病史、甘油三酯增高是急性心肌梗死的独立危险因素(P0.05)。[结论]组织蛋白酶D基因启动区两个单核苷酸多态性位点为完全连锁不平衡。该2个单核苷酸多态性位点及其单倍体型与急性心肌梗死发病无相关性,但提供了组织蛋白酶D基因启动区多态性的群体遗传学资料。

摘要： 目的 探讨党参、黄精和三七等中药提取物对超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)基因启动子活性的影响.方法 使用乙醇超声萃取和旋转蒸发的方法从党参、黄精和三七等中药中制备醇提物;然后从人胚肾293T(HEK-293T)细胞基因组DNA中扩增SOD基因启动子DNA片段并连接入启动子报告质粒pGL3-Basic中,通过荧光素酶活性检测成功构建pGL3-SOD启动子报告质粒;细胞活力测定(MTS法)确定了中药提取物的使用浓度后,将pGL3-SOD启动子报告质粒转染HEK-293T细胞,然后加入党参、黄精和三七等中药提取物,并通过检测荧光素酶活性来测定这些中药提取物对SOD基因启动子活性的影响.结果 PCR扩增出1500 bp SOD基因启动子片段,大小与文献和GenBank数据库报道一致,成功构建pGL3-SOD启动子报告质粒;与转染空载体pGL3-Basic相比,转染pGL3-SOD启动子报告质粒的HEK-293T细胞的荧光素酶活性增强了72倍;党参、黄精和三七中药提取物在50～400μg/mL时对HEK-293T细胞的活力影响不明显,400μg/mL的党参、黄精和三七提取物增强SOD基因启动子活性分别为1.79、1.72和1.57倍.结论 成功构建pGL3-SOD启动子报告质粒并具有启动荧光素酶活性;党参、黄精和三七增强SOD的活性可能是通过增强其基因的启动子活性水平来实现.

摘要： 目的:探索肾素基因启动子甲基化水平与精神分裂症可能的相关性及潜在的生物学作用.方法:利用外周血单个核细胞基因组,采用Massarray飞行时间质谱法,测定肾素基因启动子CpG位点的甲基化水平.采用剑桥神经心理自动化成套测试中的快速视觉信息处理(rapid visual information processing,RVP)和延迟匹配(delayed matching to sample,DMS)评估受试者注意力及视觉记忆.结果:发现两组间肾素基因启动子甲基化水平差异无统计学意义(P＞0.05).以性别、年龄、患病状态作协变量,CpG位点[chr1:204166158(hg38)]的甲基化比例与RVP总正确反应数(r=-0.68,P=2.42×10-7),RVPA'(r=-0.61,P=6.94×10-6),DMS总正确数(r=-0.55,P=1.02×10-4),DMS延迟正确数(r=-0.54,P=1.52×10-4)显著相关.结论:肾素基因可能通过启动子甲基化在精神分裂症病理中发挥一定的作用.

摘要： 目的 目前关于PCDHA13启动子甲基化在乳腺癌中的作用机制尚未阐明,文中探讨PCDHA13基因启动子甲基化在乳腺癌发生发展中的作用.方法 应用MassARRAY质谱甲基化测序检测人乳腺癌组织PCDHA13基因启动子甲基化状态,用培养基配置100μmol/L的5-氮杂胞苷储存液,取融合度60％的ZR-75-1细胞分别加入终浓度为5μmol/L(低浓度组)和10μmol/L(高浓度组)的5-氮杂胞苷储存液,对照组仅加入未经处理的培养基,重亚硫酸盐测序法和甲基化特异性PCR法检测人乳腺癌细胞中PCDHA13基因启动子甲基化状态,并结合半定量RT-PCR的方法分析PCDHA13基因甲基化状态与其mRNA表达的关系.Western blot、MTT以及DAPI染色检测5-Aza处理对乳腺癌ZR-75-1细胞增殖和凋亡的影响.结果 乳腺癌组织中PCDHA13基因启动子在第1,4-6,9,10,11个CpG位点甲基化程度明显高于正常乳腺组织[(0.2639±0.1575)vs(0.1612±0.1706)、(0.2509±0.1377)vs(0.1688±0.0992)、(0.4204±0.2087)vs(0.2621±0.1731)、(0.3761±0.1407)vs(0.2824±0.1486)、(0.3922±0.1294)vs(0.3072±0.1496)],差异有统计学意义(P0.05).对照组ZR-75-1细胞PCHDA13基因mRNA表达缺失,经5-Aza处理后,ZR-75-1细胞PCDHA13基因mRNA重新恢复表达,高浓度组PCDHA13基因mRNA表达明显高于低浓度组(P>0.05).对照组ZR-75-1细胞PCHDA13蛋白表达缺失,经5-Aza处理后,ZR-75-1细胞PCDHA13蛋白重新恢复表达,而且高浓度组PCDHA13蛋白表达水平明显高于低浓度组(P>0.05).经5-Aza处理后24、48和72 h后,低浓度组细胞生长抑制率均较高浓度组降低(P<0.05).未经药物处理的ZR-75-1细胞核形态基本正常,未出现细胞凋亡.经5-Aza处理后,部分ZR-75-1细胞出现核固缩、染色质凝集、着色较重的现象.结论 乳腺癌中PCDHA13启动子高甲基化状态与其mRNA低表达或缺失有关,ZR-75-1细胞PCDHA13表达可被5-Aza逆转,PCHAD13基因重新表达后不仅抑制细胞增殖,而且促进细胞凋亡.PCDHA13基因异常甲基化有望成为乳腺癌潜在的肿瘤生物标志物.

摘要： 目的 探讨PRDM16(PR domain containing 16)基因启动子区甲基化水平与食管癌的关联.方法 运用MethyTarget方法检测40例食管癌患者的癌组织与癌旁组织中的PRDM16基因启动子区甲基化水平,构建食管癌诊断模型.结果 共有25个位点甲基化水平差异有统计学意义(校正P值=0.000 5),癌组织的甲基化水平均高于癌旁组织,两者间甲基化差值在0.13～0.26.多因素logistics回归独立筛选出两个位点,分别为prdm16_1f_14、prdm16_2f_6 (P＜0.01).决策曲线显示prdm16 _1f_14、prdm16_2f_6联合诊断收益率高于单独诊断;ROC曲线显示prdm16_1f_14、prdm16_2f_6单独诊断曲线下面积(AUC)分别为0.837、0.803,联合诊断AUC为0.880.结论 联合prdm16_1f_14、prdm16_2f_6位点对食管癌诊断有一定的应用价值.

摘要： 肾细胞癌是发达国家十大常见恶性肿瘤之一,在泌尿系恶性肿瘤中发生率仅次于膀胱癌.肿瘤基因治疗是一种新型的肿瘤治疗方法,溶瘤腺病毒是肿瘤基因治疗中的热点,带有特异性启动子的溶瘤腺病毒能提高溶瘤腺病毒的溶瘤作用和增加抗肿瘤的靶向性.本文对溶瘤腺病毒构建中肾细胞癌特异性启动子进行综述.

摘要： 目的 探讨大肠癌组织RAS相关区域家族(RASSF2A)基因启动子甲基化状态及其临床意义.方法 选择大肠癌患者111例,均手术切除肿瘤组织,术中留取肿瘤组织(避免在肿瘤中心处的坏死区采集)及癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm).采用结合重亚硫酸盐限制性内切酶法及PCR技术检测RASSF2A基因启动子甲基化发生率,分析大肠癌组织RASSF2A基因启动子甲基化发生率与患者临床病理参数的关系.结果 大肠癌组织RASSF2A基因启动子甲基化发生率为83.78%(93/111),癌旁正常组织为7.21%(8/111),两者比较χ2=131.245、P0.05).结论 大肠癌组织RASSF2A基因启动子甲基化发生率升高,可能与肿瘤的发生相关.

摘要： 目的：观察慢性肾脏病( CKD)患者Klotho基因启动子羟甲基化水平变化，并探讨其与CKD临床病理参数的关系。方法1~3期CKD患者58例，肾脏穿刺取肾脏组织( CKD组)；肾结核患者31例，取手术切除的正常肾脏组织(对照组)。将各组抽提的全基因组DNA分为两份，一份以15 mmol/L高钌酸钾、0.05 mol/L氢氧化钠氧化后，进行亚硫酸盐转化；另一份直接进行亚硫酸盐转化。用特异引物进行PCR扩增，焦磷酸测序，检测羟甲基化并计算其在甲基化中所占比例。分析Klotho基因启动子羟甲基化水平与CKD临床病理参数的关系。结果对照组肾脏组织Klotho基因启动子羟甲基化修饰；CKD组肾脏组织Klotho基因启动子甲基化水平高于对照组，羟甲基化水平低于对照组(P均<0.05)。 CKD患者Klotho基因启动子羟甲基化水平与eGFR呈正相关关系，与肾小管间质纤维化面积及肌酐水平呈负相关。结论 CKD患者肾脏组织中Klotho基因启动子羟甲基化水平降低，并与CKD临床病理参数有关。 Klotho基因启动子羟甲基化水平下降可能参与了CKD的发生发展。

摘要： 目的 研究南方汉族人群谷胱甘肽过氧化物酶(GPX-3)基因启动子区-991C/T基因多态性的分布及其与脑梗死的关系.方法 检测佛山市南海区第二人民医院神经内科自2011年11月至2015年6月收治的南方地区汉族脑梗死患者112例(病例组)和同期南方地区汉族健康体检者112例(对照组)的GPX-3基因启动子区-991C/T基因多态性,比较两组的一般资料、卒中危险因素及-991C/T基因多态性的分布特点,分析影响脑梗死发生的危险因素.结果 与对照组比较,病例组高血压病史、血脂、尿酸、血同型半胱氨酸、血糖水平有明显差异(P<0.01),-991C/T TT基因型频率及T等位基因频率均较高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 中国南方地区汉族人群GPX-3基因启动子区-991C/T位点存在多态性,TT基因型或为脑梗死的易感基因型.

摘要： 目的：检测胶质瘤Dapk1基因启动子甲基化并研究其临床价值. 方法：采用甲基特异性PCR法检测胶质瘤患者(GLI组)和颅脑良性疾病患者(CON组)术后切除脑组织Dapk1基因启动子甲基化,对比GLI组胶质瘤患者不同临床病理中Dapk1基因启动子甲基化的差异,比较GLI组胶质瘤患者中Dapk1基因启动子甲基化与未甲基化患者预后的差异. 结果：GLI组胶质瘤患者术后切除肿瘤组织Dapk1基因启动子甲基化率显著高于CON组颅脑良性疾病患者(P＜0.05).GLI组胶质瘤患者术后切除肿瘤组织Dapk1基因启动子甲基化率在性别、年龄、肿瘤部位、颅内高压和病理类型方面均无统计学差异(均P＞0.05),在肿瘤最大径和WHO分级方面的差异均有统计学意义(均P＜0.05),肿瘤最大径≥5cm和WHOⅢ+Ⅳ级患者Dapk1基因启动子甲基化率显著高于肿瘤最大径＜5cm和WHOⅠ+Ⅱ级级患者(均P＜0.05).Dapk1基因启动子甲基化患者R0切除率、3年生存率及总生存时间均显著低于未甲基化患者(均P＜0.05). 结论：Dapk1基因启动子在胶质瘤患者中呈高甲基化状态,可能在胶质瘤病情及预后评估中具有重要价值.

摘要： 目的：检测结直肠癌组织中NGFR基因启动子区的甲基化状态及其表达水平,探讨其临床意义. 方法：收集江西省人民医院2015年9月至2016年3月手术切除的91例结直肠癌组织及其相应的癌旁组织标本作为研究对象,通过MSP及RT-PCR法检测NGFR启动子区的甲基化状态及mRNA表达水平,分析结直肠癌组织中NGFR启动子区甲基化水平与临床资料的相关性. 结果：与癌旁组织相比结直肠癌组织中NGFR的表达水平降低且伴随启动子区高甲基化.甲基化水平与TNM分期、分化程度及肿瘤浸润深度相关(P＜0.05),随着肿瘤分化程度的降低、TNM分期的提高及浸润深度的增加而具有更明显的甲基化水平. 结论：结直肠癌组织中NGFR启动子区高甲基化可能是其表达水平降低一个重要原因.

摘要： 基于课题组前期产奶性状全基因组关联分析(GWAS)结果,本研究将PDE9A基因作为产奶性状候选关键基因,进一步通过SNaPshot分型技术,分析了PDE9A基因启动子区在8个公牛家系的506头中国荷斯坦牛女儿群体中的多态性及其对5个产奶性状的遗传效应.采用混合动物模型进行最小二乘法拟合线性模型分析,关联分析结果表明:c.-1376G＞A和c.-724A＞G均与产奶量(P＜0.0001;P＜0.0001),乳脂量(P=0.0009;P=0.0016)和乳蛋白量(P＜0.0001;P＜0.0001)显著相关.单倍型分析结果与单个SNP分析结果一致.RT-PCR结果表明PDE9A基因在乳腺组织中特异性高表达.以上结果显示PDE9A为影响产奶性状的关键基因,可进一步开展功能验证.

摘要： 目的：探讨由外周血白细胞DNA中FHIT、RASSF1A和p16基因启动子甲基化水平以及DNA相对端粒长度4项生物标志建立的支持向量机模型在肺癌诊断中的意义.rn 方法：通过实时甲基化特异性PCR(Real-time methylationspecific PCR)法,测定200例正常对照和200例肺癌患者外周血白细胞DNA中p16、RASSF1A和FHIT基因启动子甲基化水平,实时荧光定量PCR方法测定外周血DNA相对端粒长度,基于上述4种生物标志构建肺癌诊断支持向量机模型.rn 结果：肺癌组和对照组中FHIT、RASSF1A和p16基因启动子甲基化水平分别为3.33(1.86～6.40)和2.85(1.39～5.44)(P=0.002),27.62(9.09～52.86)和17.17(3.86～50.87)(P=0.038),0.59(0.16～4.50)和0.36(0.06～4.00)(P=0.008),端粒相对长度分别为0.93±0.32和1.16±0.57(P＜0.001),这4项生物标志在两组间差异有统计学意义.基于4项生物标志建立的判别分析和支持向量机模型对预测集的的ROC曲线下面积(AUC)及95％CI分别为0.670(0.569～0.761)和0.810(0.719～0.882).rn 结论：成功构建基于p16、RASSF1A、FHIT基因启动子甲基化和端粒损伤4种生物标志的肺癌诊断支持向量机模型.

摘要： 作为一种药食两用植物,苦荞(Fagopyrum tataricum)富含以芦丁为代表的黄酮类生物活性成分,黄酮醇合酶(Flavonol Synthase)是其合成途径的关键酶,其酶催特性及其表达调控对芦丁的合成至关重要.本研究采用同源克隆技术获得FtFLS1、FtFLS2和FtFLS3苦荞黄酮醇合酶同源基因的cDNA和DNA序列,实现其在大肠杆菌中的可溶性表达;采用薄层层析技术(TLC)鉴定了3个重组酶的酶催活性,采用双倒数曲线法测定了它们对3种二氢黄酮醇的特征物理常数Km值;采用荧光定量PCR技术分析了黄酮醇合酶同源基因的组织表达特征;采用融合引物巢式PCR技术(FPN1-PCR)克隆了苦荞黄酮醇合酶同源基因启动子PFtFLS1、PFtFLS2和PFtFLS3,并通过瞬时转化技术验证其基本转录激活活性,采用稳定转化技术分析其组织特异性.

摘要： 目的：本研究旨在筛选猪Abcb1基因的核心启动子区,利用定点突变及siRNA检测Spl转录因子结合位点在猪Abcbl基因转录调控中的作用. 方法：本文首次通过5'-RACE确定了猪Abcb1基因的转录起始位点(TSS),利用猪基因组DNA获得了1905bp的5'非翻译区,并预测了转录因子结合位点和CpG岛,发现猪Abcb1基因的5'非翻译区存在AP1、CEBPα、CEBPβ和Spl等转录因子结合位点,并存在2个CpG岛. 结果：通过构建一系列启动子截短片段质粒,证实猪Abcb1基因启动子的-195～+25bp为核心启动子区,可决定该基因的基础转录水平.在核心启动子区存在多个Spl转录因子结合位点,定点突变-61/-51bp和-43/-31bp位点后均能显著降低启动子的活性,证实Sp1转录因子的主要结合位点存在于该区域.siRNA干扰细胞内的Spl转录因子可降低猪Abcb1基因的启动子活性,并能影响P-gpmRNA及蛋白表达水平.最后通过CHIP证实,细胞内的Spl转录因子可与猪Abcb1基因的启动子结合. 结论：本研究结果表明猪Abcb1基因启动子的-195～+25bp为核心启动子区,Sp1转录因子可以与猪Abcbl基因的核心启动子区的Sp1转录因子结合位点直接结合,从而正向调控猪Abcbl基因的转录,该研究结果为深入研究猪P-gp的转录调控提供了理论基础.

摘要： 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)基因启动子区域的(GT)n双核苷酸重复序列多态性与天津地区原发性高血压(EH)的关系及与血浆炎症因子、胆红素水平的关联性.方法：选择102例EH患者(EH组)及134例正常对照组作为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增染色体DNA中含HO-1基因相应的DNA片段,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术分析基因型.自动生化分析仪分析血浆胆红素水平.酶联免疫吸附(ELISA)法分析血清白细胞介素(IL)-10及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平可能与EH人群的易感性有关.HO-1长等住基因携带者患高血压的危险性增大.

摘要： 本实验采用甲基化特异性PCR检测上皮性卵巢癌组织及其相对应的血清标本中RASSF2A基因启动子甲基化状态，RT PCR检测RASSF2A mRNA在卵巢癌组织中的表达情况，分析RASSF2A启动子异常甲基化与其转录表达的相关性，甲基化状态在两种组织标本中的相关性，以及RASSF2A启动子甲基化与卵巢癌患者临床病理特征(年龄、病理类型、临床分期、组织分级、淋巴转移)的关系。并使用去甲基化试剂5-aza-dC作用于卵巢癌细胞系SKOV3，分析去甲基化作用前后RASSF2A表达水平、甲基化状态的改变，以及对细胞生物学活性的影响，探讨RASSF2A启动子区甲基化在卵巢癌发生发展中的作用及机制，血清RASSF2A启动子区甲基化状态在卵巢癌早期诊断中的价值，初步探索并寻找治疗卵巢癌的新靶点。

摘要： 目的：分析雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)基因启动子区甲基化与儿童氟斑牙的关系.rn 方法：采用整群抽样的方法抽取河南省某县氟病区2所小学8-12岁儿童174人,Dean’s分度法对儿童氟斑牙进行分度,并依据病情分为正常组,轻度组和中重度组.采用火焰原子分光光度计法测定血清钙含量;氟离子选择电极法测定尿氟含量;Real-time PCR法检测雌激素受体α基因启动子区甲基化水平.rn 结果：中重度组男性儿童ERα基因启动子区甲基化率(19.43％±16.31％)明显高于正常组儿童(8.89％±8.30％),差异有统计学意义(P＜0.05);3组女性儿童ERα基因启动子区甲基化水平差异无统计学意义(P＞0.05).ERα基因启动子区甲基化水平与血清钙水平呈负相关(r=-0.172,P=0.024).rn 结论：ERα基因启动子区甲基化水平可能与儿童氟斑牙患病程度有关,且存在性别差异;ERα基因启动子区甲基化水平与血清钙水平呈负相关.

摘要： 本实验通过检测各组子宫内膜组织(包括正常子宫内膜、单纯增生内膜、复杂增生内膜、不典型增生内膜和内膜癌)中VEGF-C的甲基化状态，分析VEGF-C启动子异常甲基化与子宫内膜癌发生发展的相关性，并首次联合检测VEGF,COX-2,GLUT 1和HIF-1α蛋白表达与子宫内膜癌侵袭、转移的关系。因DNA甲基化主要是使基因抑癌功能丧失或减弱，使用5-aza-dC诱导子宫内膜癌细胞系去甲基化，检测VEGF-C mRNA表达水平的改变、甲基化状态的变化以及对生物学行为的影响，以进一步探讨VEGF-C启动子甲基化在子宫内膜癌侵袭、转移中的作用。

摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种蓝光调节启动子、蓝光调节启动子的融合基因、蓝光介导调节质粒及构建方法和应用。本发明提供了一种蓝光调节启动子PC120‑CYC。本发明利用基于此合成的融合基因和蓝光介导调节质粒验证了蓝光诱导调节方式在解脂耶氏酵母的基因表达与调控过程中的可行性。本发明提供的蓝光介导调节质粒非常简洁紧凑，还能够在解脂耶氏酵母单细胞水平上被蓝光诱导。蓝光介导调节质粒的应用中，无毒无害、响应快速、操作简便、可逆性好，能够有效推动解脂耶氏酵母在食品、医药、农产品加工等领域的广泛应用。

摘要： 本发明涉及一种逆境诱导型启动子序列，包含SEQ ID NO:1的1388bp的DNA核苷酸序列，属于植物基因工程技术领域。本发明还提供了一种逆境诱导型启动子植物表达载体及使植物在低温、干旱和盐诱导下表达目标基因的方法，可将目标基因替换GUS基因插入到含有本发明启动子的植物表达载体中，将该重组载体导入目标植物；SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3为PCR引物，分别包含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点，所述引物适用于扩增含SEQ ID NO:1的DNA序列；本发明可用于启动冷、干旱和盐胁迫下外源基因的高效表达，适用于植物遗传育种改良研究。

摘要： 本发明公开了一种基于转录组测序构建棒状杆菌组成型表达载体启动子的方法，本发明还公开了基于转录组测序构建的棒状杆菌组成型表达载体启动子、含有该启动子的表达载体以及该表达载体转化宿主细胞谷氨酸棒状杆菌获得的重组菌株。用本发明获得的启动子构建的表达载体，对数期目的基因蛋白表达量低，但稳定期目的蛋白表达量相对于对数期大幅度提高，且对宿主菌生长影响低，质粒传代稳定性高，适合于对数期不需要表达，而稳定期需要高度表达的目的基因的载体构建，尤其适合于氨基酸发酵用工程菌株的构建。

摘要： 本发明公开了一种基于转录组测序构建棒状杆菌组成型表达载体启动子的方法，本发明还公开了基于转录组测序构建的棒状杆菌组成型表达载体启动子、含有该启动子的表达载体以及该表达载体转化宿主细胞谷氨酸棒状杆菌获得的重组菌株。用本发明获得的启动子构建的表达载体，对数期目的基因蛋白表达量低，但稳定期目的蛋白表达量相对于对数期大幅度提高，且对宿主菌生长影响低，质粒传代稳定性高，适合于对数期不需要表达，而稳定期需要高度表达的目的基因的载体构建，尤其适合于氨基酸发酵用工程菌株的构建。

摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种蓝光调节启动子、蓝光调节启动子的融合基因、蓝光介导调节质粒及构建方法和应用。本发明提供了一种蓝光调节启动子PC120‑CYC。本发明利用基于此合成的融合基因和蓝光介导调节质粒验证了蓝光诱导调节方式在解脂耶氏酵母的基因表达与调控过程中的可行性。本发明提供的蓝光介导调节质粒非常简洁紧凑，还能够在解脂耶氏酵母单细胞水平上被蓝光诱导。蓝光介导调节质粒的应用中，无毒无害、响应快速、操作简便、可逆性好，能够有效推动解脂耶氏酵母在食品、医药、农产品加工等领域的广泛应用。

摘要： 本发明的目的在于，为了治疗起因于PLP1基因异常的PMD，提供可以少突胶质细胞特异性地抑制PLP1基因的表达的载体、及用于其的启动子和miRNA、以及包含该载体的药物组合物。本发明的少突胶质细胞特异性启动子包含与序列号1记载的碱基序列具有至少90％的序列同一性的核酸。本发明的PLP1基因特异性miRNA具有由规定的反义序列和有义序列构成的一对碱基序列。

摘要： 本发明公开了一种热休克蛋白基因启动子和四环素基因启动子控制的多基因表达和沉默系统，同一质粒系统中热休克基因启动子HSPP与四环素基因启动子TETp互不影响，各自独立控制其下游的目的基因或shRNA的表达，既可人为控制单独一个基因或shRNA的表达，也可人为控制两个基因或shRNA共同表达。本发明为多基因特异性协调控制提供了条件，解决了目前采用多质粒共转染方法实现基因共表达所带来的表达效率低的问题，并且采取慢病毒搭载系统可以在难转染的细胞中实现选择性基因或shRNA的高效表达，满足了各种实验的需要，同时提供多基因靶点控制平台，为基因治疗提供更多的可能性。

摘要： 本发明公开了一种热休克蛋白基因启动子和四环素基因启动子控制的多基因表达和沉默系统，同一质粒系统中热休克基因启动子HSPP与四环素基因启动子TETp互不影响，各自独立控制其下游的目的基因或shRNA的表达，既可人为控制单独一个基因或shRNA的表达，也可人为控制两个基因或shRNA共同表达。本发明为多基因特异性协调控制提供了条件，解决了目前采用多质粒共转染方法实现基因共表达所带来的表达效率低的问题，并且采取慢病毒搭载系统可以在难转染的细胞中实现选择性基因或shRNA的高效表达，满足了各种实验的需要，同时提供多基因靶点控制平台，为基因治疗提供更多的可能性。

摘要： 本发明公开了SSA4基因启动子及利用该启动子驱动外源基因转录的毕赤酵母表达载体。所述SSA4基因启动子的序列如SEQ ID NO:1所示。利用SSA4基因启动子驱动外源基因转录的毕赤酵母表达载体包括胞内表达和胞外分泌型表达两种。本发明获得的SSA4基因启动子以及所构建的表达载体可以有效的提高外源蛋白在毕赤酵母中的表达，同时可以满足更多启动子的选择。

摘要： 本发明提供了一种在植物花中驱使基因表达的组织特异性启动子JcTM6基因启动子及其应用，属于转基因植物和植物基因编辑技术领域。在植物花中表达的组织特异性启动子JcTM6基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了一种含所述JcTM6基因启动子的重组载体。基于JcTM6基因启动子的活性强且具有在花中特异性表达的特点，本发明提供了组织特异性启动子JcTM6基因启动子、重组载体或所述引物在构建转基因植物或植物花、果实和种子性状改良中的应用。同时JcTM6基因启动子可作为花特异性启动子驱使功能基因表达，用于改良小桐子繁殖器官性状，实现种子产量的提高。