基因治疗

摘要： 背景:聚乙烯亚胺作为一种阳离子聚合物,目前在医学的诸多领域已得到广泛的研究,凭借自身丰富的胺基基团和阳离子电荷,使其具备易修饰性和静电吸附性,这些特性运用于骨组织工程中,具有潜在的优势与前景。目的:总结目前聚乙烯亚胺在骨组织工程的研究进展,并且对其用于骨组织工程中的应用前景作了讨论与展望。方法:检索2000年1月至2022年3月PubMed、Web of Science、中国知网及万方数据库中相关文献,英文检索词:“polyethyleneimine,bone tissue engineering,bone tissue regeneration,bone tissue repair,regenerative medicine,drug delivery”;中文检索词:“聚乙烯亚胺、骨组织工程、骨组织再生、骨组织修复、再生医学、药物递送”,最终纳入57篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)基于基因技术利用聚乙烯亚胺与成骨相关基因形成的复合物是一种高效的基因载体,能够诱导种子细胞表达成骨相关的细胞因子,促进成骨分化;通过与不同基团进行修饰,可以实现在不影响聚乙烯亚胺转染效率的同时尽可能的降低对间充质干细胞等种子细胞的毒性,但是对于DNA和聚乙烯亚胺链的长度、聚乙烯亚胺的电荷密度、结构和化学修饰以及氮/磷酸盐等关键参数未达成共识。(2)聚乙烯亚胺作为表面涂层或直接与支架材料形成复合物制备的骨缺修复支架,在支架的生物相容性、降解速率、孔隙大小和机械强度方面均有优化;同时聚乙烯亚胺及其衍生物应用于骨缺损修复支架可以赋予支架抗菌性和增强促血管生成的能力。(3)体内加载成骨诱导因子方面,聚乙烯亚胺搭载的成骨诱导因子基因在体外细胞实验中具有高效的转染能力,负载在支架上植入骨缺损动物模型体内则能提升支架的生物相容性,具有理想的骨缺损修复效果,并且未有严重的不良反应报道,但是对于基因的异位插入及促成骨蛋白的异位表达仍然是目前存在的问题。(4)为实现药物骨靶向递送,聚乙烯亚胺凭借自身丰富的可修饰基团,成为了靶头与药物载体之间连接的“桥梁”。(5)基于双膦酸盐类、刺激响应性系统及生物素亲和素系统的药物靶向递送方式向骨修复支架靶向持续递送促成骨的药物目前尚未见报道,但聚乙烯亚胺目前在药物递送领域的应用提供了实现该想法的可能,未来值得进一步探索。

摘要： 基因治疗是针对基因异常相关疾病的终极治疗技术,各种具有不同机制的核酸药物的出现为基因治疗带来了更多的可能性.但是,由于存在体内稳定性差、难以高效进入靶细胞等问题,核酸药物需要载体的帮助而进入目标细胞并到达特定的胞内位置,因此,开发安全高效的核酸递送系统是基因治疗的基石.与病毒载体相比,非病毒载体具有更高的安全性,但转染效率较低.随着纳米技术的发展,非病毒载体的效率得到了显著的提升,进入临床研究的数量逐渐增多.本文简要介绍基因治疗中的核酸药物及其递送载体,对非病毒核酸药物递送技术的瓶颈及进展做综合评述.

摘要： 背景:在大块工程化移植物内部迅速形成功能性血管系统,是其在宿主体内成功存活的基本前提。利用基因工程技术实现工程组织血管化具有治疗效果好、费用低、安全性高等优点,开展工程组织血管化基因治疗的相关研究对实现长期有效的组织修复有着重大意义。目的:综述目前组织工程血管化基因治疗的种子细胞、目的基因和基因载体的研究现状及存在的主要问题,以期进一步探讨基因治疗在组织工程血管化中的应用前景。方法:在PubMed、Web of Science、CNKI上进行了文献检索,并以“Tissue engineering;Vascularization;Gene therapy;Seed cells;Target genes;Vectors”作为英文检索词,以“组织工程;血管化;基因治疗;种子细胞;目的基因;载体”作为中文检索词,对最终纳入的61篇文献进行了归纳总结。结果与结论:间充质干细胞、血管内皮细胞及内皮祖细胞是组织工程血管化基因治疗中最具潜力的种子细胞,不仅具有良好的血管诱导性,而且有利于多种病毒和非病毒载体的导入及血管化目的基因的表达。血管内皮生长因子、血管生成素1、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2、缺氧诱导因子1α等血管化目的基因,主要通过双/多基因联合、成骨与成血管耦合及上游基因调控等方式在工程化移植物内部构建出高效、稳定的血管网络。由于不同的病毒和非病毒载体具有各自的优缺点,因此在应用时主要根据基因转染效率、生物安全性、成本等方面来选择合适的载体。目前,尽管基因治疗在组织工程血管化中的应用研究已取得很大进展,但是要真正应用于临床实践,还需要突破众多技术瓶颈,例如如何提高目的因子的释放靶向性和降低安全风险等,这也是未来组织工程血管化基因治疗的研究方向和热点。

摘要： 背景:在大块工程化移植物内部迅速形成功能性血管系统,是其在宿主体内成功存活的基本前提.利用基因工程技术实现工程组织血管化具有治疗效果好、费用低、安全性高等优点,开展工程组织血管化基因治疗的相关研究对实现长期有效的组织修复有着重大意义.目的:综述目前组织工程血管化基因治疗的种子细胞、目的基因和基因载体的研究现状及存在的主要问题,以期进一步探讨基因治疗在组织工程血管化中的应用前景.方法:在PubMed、Web of Science、CNKI上进行了文献检索,并以"Tissue engineering;Vascularization;Gene therapy;Seed cells;Target genes;Vectors"作为英文检索词,以"组织工程;血管化;基因治疗;种子细胞;目的 基因;载体"作为中文检索词,对最终纳入的61篇文献进行了归纳总结.结果 与结论:间充质干细胞、血管内皮细胞及内皮祖细胞是组织工程血管化基因治疗中最具潜力的种子细胞,不仅具有良好的血管诱导性,而且有利于多种病毒和非病毒载体的导入及血管化目的基因的表达.血管内皮生长因子、血管生成素1、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2、缺氧诱导因子1α等血管化目的基因,主要通过双/多基因联合、成骨与成血管耦合及上游基因调控等方式在工程化移植物内部构建出高效、稳定的血管网络.由于不同的病毒和非病毒载体具有各自的优缺点,因此在应用时主要根据基因转染效率、生物安全性、成本等方面来选择合适的载体.目前,尽管基因治疗在组织工程血管化中的应用研究已取得很大进展,但是要真正应用于临床实践,还需要突破众多技术瓶颈,例如如何提高目的因子的释放靶向性和降低安全风险等,这也是未来组织工程血管化基因治疗的研究方向和热点.

摘要： 目的:研究重组Tet-on COLIA1基因腺病毒骨组织靶向表达对大鼠骨质疏松骨折愈合生物力学的影响。方法:40只健康雌性大鼠按照随机数字表法分为手术组(n=36)和假手术组(n=4)。手术组大鼠切除双侧卵巢,建立骨质疏松动物模型。假手术组大鼠仅切开皮肤,不切除双侧卵巢。手术组36只大鼠切除双侧卵巢3个月后,随机选取4只并处死,同时处死假手术组4只大鼠。收集其胫骨标本,采用双能X线测量假手术组和手术组大鼠的骨密度,以证实大鼠骨质疏松模型建立成功。随后,将剩余的32只手术组大鼠,采用薄电锯片从胫骨中段横行切断骨干,克氏针固定骨折断端,以构建大鼠骨质疏松骨折模型。同时按照随机数字表法分为4组:A组,重组Tet-on COLIA1基因腺病毒+强力霉素组;B组,重组Tet-on COLIA1基因腺病毒;C组,Tet-on空白腺病毒+强力霉素组;D组,空白对照组。分别于注射腺病毒6、8周后在电子万能材料试验机上进行胫骨三点弯曲试验。根据载荷-变形曲线计算骨折标本的生物力学参数,包括最大负荷、弹性模量、屈服点最大应力,同时采用micro-CT检测骨折愈合情况。结果:术后3个月手术组大鼠胫骨骨密度低于假手术组大鼠,且差异有统计学意义(P=0.005),表明大鼠骨质疏松模型制备成功。胫骨三点弯曲试验发现A组大鼠的最大负荷、弹性模量、屈服点最大应力,在腺病毒转染6、8周后,均高于B、C、D三组大鼠,且差异均有统计学意义(P<0.05)。Micro-CT显示,在转染6、8周后,A组大鼠骨折断端更加模糊,骨皮质较连续,骨折断端愈合更好。结论:经重组Tet-on COLIA1基因腺病毒转染的骨质疏松骨折大鼠,在强力霉素的作用下,能增加大鼠的最大载荷、弹性模量、屈服点最大应力,改善骨折愈合的能力,缩短骨折愈合的时间。

摘要： 2022年3月26日至27日,由常州市人民政府、农工党中央科技工作委员会和农工党中央生物技术与药学工作委员会共同主办的2022西太湖细胞和基因治疗前沿技术发展大会学术交流活动以线上方式成功举办。农工党中央常务副主席何维出席会议并致辞。中国医学科学院北京协和医院党委书记吴沛新主持开幕式。中国科学院院士王福生、中国科学院院士阎锡蕴和中国工程院院士田志刚作了主旨发言。

摘要： 目前,干性年龄相关性黄斑变性尚无有效的治疗方法,但近年的临床试验显示出巨大的治疗前景,包括饮食疗法、抗体疗法、基因治疗、细胞治疗和激光治疗等。本文就干性年龄相关性黄斑变性的病理特征、发病机制和治疗方法等进行述评,以期为干性年龄相关性黄斑变性的预防和治疗提供新思路。

摘要： 脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一种常染色体隐性遗传的神经肌肉疾病,主要特征为进行性肌无力和肌肉萎缩。该病是导致患儿在婴幼儿期死亡的首要遗传病。SMA治疗的研究领域近年来发展迅速,部分相关治疗药物已经成功获批上市。该文以SMA近年的治疗研究进展作一综述。

摘要： 朊病毒是一种由体内正常朊蛋白转化形成的传染性蛋白质,朊病毒病是由朊病毒引发的致命性神经退行性疾病。目前临床虽然尚无治疗朊病毒病的方法,但是大量的研究者已从多个角度进行研究,并取得了一定进展。对近期有关传统化学药物、基因治疗方法、免疫学治疗方法和同源朊蛋白的朊病毒病治疗方法进行了综述,并重点分析了新型靶向细胞内信号通路药物以及有潜在利用价值的线粒体相关朊病毒胞内作用信号通路,旨在为朊病毒新的研究方向提供理论依据,从而促进朊病毒病治疗方法应用于临床。

摘要： 主办单位:羽嘉会议协办单位:《医学信息》杂志社、肽度TIME0OO、中科蓝智,领慧人力资源2022国际医药生物技术大会(简称ICMB2022)将于2022年7月26-28日在古都西安召开。会议以“加强创新合作,发展健康产业”为主题,围绕基因工程、遗传工程、细胞工程、酶工程、免疫治疗、基因治疗、干细胞治疗、蛋白质工程、生物信息学。

摘要： 由于30多年来对F9和F8基因特征的深入了解,使得重组因子产品的开发和转基因技术治疗血友病成为可能.血友病基因治疗的进展曾在3次美国血液学会全体科学大会上予以公布,即1988年首次治愈大型动物的血友病模型,2011年首次在血友病患者中取得持续性载体来源的因子Ⅸ活性,以及2016年我们的试验结果报道载体来源的因子Ⅸ活性保持在轻度降低或正常水平.这一有临床意义的进展、加上众多正在进行的重组腺相关病毒(rAAV)介导的血友病转基因临床试验表明,以改变血友病治疗模式为目标的基因治疗有可能很快成为统实.尽管最近在研发几种治疗血友病的新药,但基因治疗因一次治疗就可能改善、甚至治愈疾病而具有独特价值.

摘要： 目的：制备一种新型的载siRNA-Cy5靶向纳米微泡复合物,并研究其在动物体内对肿瘤分子影像成像与治疗能力. 方法：联合薄膜水化法与机械震荡法,以磷脂复合物为原料,制备载NET-1siRNA靶向纳米微泡复合物.以SMMC-7721与BALB/c裸鼠建立肝癌荷瘤鼠模型.采用低频超声辐照介导靶向纳米微泡复合物的基因转染.荷瘤鼠随机分为5组,每组裸鼠注射药物后低频超声辐照5分钟,所有裸鼠在60天的随访期内,每周治疗2次.以小动物活体荧光成像仪分析靶向纳米微泡复合物的分子影像能力,免疫组化染色检测其基因治疗效果. 结果：载NET-1siRNA靶向纳米微泡复合物的平均粒径小于500nm。使用纳米微泡复合物治疗组的裸鼠，肿瘤生长速度明显减慢，并且生存期最长。与其他实验相比，使用纳米微泡复合物治疗组的移植瘤内荧光信号最强，NET-1蛋白抑制率最高。 结论：载NET-1siRNA靶向纳米微泡复合物是一种经济的、高效的、安全的基因载体与分子影像探针，它也许会提高肝细胞的早期诊断率与治疗效果。

摘要： 目的：本研究探索制备载NET-1siRNA以及GPC3脂质纳米微泡,并采用声触诊组织成像和定量(VTIQ)技术评价该微泡对人肝癌荷瘤鼠的体内治疗效果. 方法：采用薄膜水化联合机械振荡法制备载NET-1siRNA以及GPC3脂质纳米微泡.将人肝癌细胞系(SMMC-7721)与BD基质胶混合液注射于Balb/c雌性裸鼠背部皮下,建立24只荷瘤鼠模型.当肿瘤大小达到5mm时,将荷瘤鼠随机分为空白对照组,阴性对照组,Lipo2000组以及微泡组.第1,5,9,13天各组分别注射生理盐水，载阴性对照基因脂质纳米微泡，Lipo2000+NET-1siRNA，载NET-1siRNA脂质纳米微泡。第0,7,14,21天采用西门子S3000的VTIQ技术测量各组荷瘤鼠肿瘤弹性值，在肿瘤组织选取7个感兴趣区，测定平均和最大剪切波速度(SWSmean,SWSmax)，同时记录肿瘤生长曲线和荷瘤鼠生存时间。第60天或者肿瘤达到2cm时，将荷瘤鼠处死，取肿瘤组织以及肝肾标本，进行免疫组化检测NET-1蛋白表达情况以及肝肾毒性检测。 结果:肿瘤生长曲线显示，微泡组和Lipo2000组肿瘤明显小于空白和阴性对照组。各组裸鼠中位生存期分别为28，35，56，60天。免疫组化显示，微泡组NET-1蛋白水平相对于空白和阴性对照组有明显下降（P<0.05）。微泡组SWSmean与肿瘤大小呈正相关(r=0.9806,P=0.0194)，与其他组均有显著差异(P<0.05)。治疗后，肿瘤组织剪切波速度SWSmean，SWSmax较对照组明显变小。另外，肝肾标本HE染色显示治疗后无明显损伤。 结论:本研究制备的载NET-1siRNA脂质纳米微泡具有粒径小、低毒、高效转染等优点，不仅为今后肝癌的基因治疗提供了有效载体，而且为进一步研究肿瘤组织软硬度变化探索了一种新的弹性成像技术。VTIQ能够无创、准确地测量肿瘤组织弹性变化，并与肿瘤的发展阶段有关。

摘要： 尽管目前移植技术取得了显著进展,添加了可供选择的造血干细胞来源,但是许多遗传性骨髓衰竭综合征患者仍然不能接受移植.此外,有效的测序组合可以识别表现不明显的患者,已经显著改善了的诊断.雄激素是先天性角化不良和范科尼贫血中针对骨髓衰竭的主要非移植治疗,反应率达80％.达那唑和康复龙更常用,但男性化和肝脏毒性是其主要的不良事件.Diamond-Blackfan贫血通常是采用糖皮质激素治疗,毒性有限,但大多数患者最终会耐药.生长因子在遗传性病例中仍有一定的作用,特别粒细胞集(蕾)刺激因子在先天性中性粒细胞减少患者中.新的治疗方法已经获批,TPO受体激动剂、亮氨酸、槲皮黄酮和和新的基因治疗方法在未来可能会使遗传性病例获益.

摘要： HSC是人类发现最早的一种干细胞，也是目前研究最多的一种干细胞，已广泛应用于白血病的治疗、肿瘤病患者化疗后造血功能重建、遗传病以及肿瘤的基因治疗。目前，临床上采用脐带血移植治疗的疾病已经达到80余种，治疗的患者(包括儿童、成人)全世界已超过6000例，特别是近几年，人们将造血干细胞与基因治疗技术结合，为实体肿瘤的治疗开辟了新的道路。但由于目前理论和技术尚不够成熟，许多问题还需进一步完善和解决。如肿瘤是一个多基因，多因素导致的疾病，单一环节的干预，效果往往不够理想;基因修饰的造血干细胞介导的肿瘤治疗刚刚起步，实验结果并不尽如人意等，但医学科研是一个循序渐进的过程，有理由相信，随着相关研究的不断深入，在确保安全的基础上，加快实验研究成果向临床的过渡，基因修饰的造血干细胞介导的肿瘤治疗走向临床指日可待。

摘要： PVOD/PCH是临床表现、血流动力学特征与PH相似的罕见病，病理特点分别为肺毛细血管后小静脉纤维化、狭窄、甚至闭塞和弥漫性肺毛细血管血管瘤形成。随着研究的不断深入，除了HPAH和PVOD/PCH等PH的易感基因外，还发现了其他类型PH相关的易感基因，为PH早期诊断、表型分层及治疗提供依据。现根据PH的5大分类，将其相关易感基因的研究进展及临床应用归纳。

摘要： PVOD/PCH是临床表现、血流动力学特征与PH相似的罕见病，病理特点分别为肺毛细血管后小静脉纤维化、狭窄、甚至闭塞和弥漫性肺毛细血管血管瘤形成。随着研究的不断深入，除了HPAH和PVOD/PCH等PH的易感基因外，还发现了其他类型PH相关的易感基因，为PH早期诊断、表型分层及治疗提供依据。现根据PH的5大分类，将其相关易感基因的研究进展及临床应用归纳。

摘要： PVOD/PCH是临床表现、血流动力学特征与PH相似的罕见病，病理特点分别为肺毛细血管后小静脉纤维化、狭窄、甚至闭塞和弥漫性肺毛细血管血管瘤形成。随着研究的不断深入，除了HPAH和PVOD/PCH等PH的易感基因外，还发现了其他类型PH相关的易感基因，为PH早期诊断、表型分层及治疗提供依据。现根据PH的5大分类，将其相关易感基因的研究进展及临床应用归纳。

摘要： PVOD/PCH是临床表现、血流动力学特征与PH相似的罕见病，病理特点分别为肺毛细血管后小静脉纤维化、狭窄、甚至闭塞和弥漫性肺毛细血管血管瘤形成。随着研究的不断深入，除了HPAH和PVOD/PCH等PH的易感基因外，还发现了其他类型PH相关的易感基因，为PH早期诊断、表型分层及治疗提供依据。现根据PH的5大分类，将其相关易感基因的研究进展及临床应用归纳。

摘要： PVOD/PCH是临床表现、血流动力学特征与PH相似的罕见病，病理特点分别为肺毛细血管后小静脉纤维化、狭窄、甚至闭塞和弥漫性肺毛细血管血管瘤形成。随着研究的不断深入，除了HPAH和PVOD/PCH等PH的易感基因外，还发现了其他类型PH相关的易感基因，为PH早期诊断、表型分层及治疗提供依据。现根据PH的5大分类，将其相关易感基因的研究进展及临床应用归纳。

摘要： 本发明公开了一种基因治疗用载体，其能够在进行基因治疗时以更高敏感度监控目的蛋白质的血液中浓度，并且标记肽不具有生理作用而在多种动物中无免疫原性。基因治疗用载体具有如下结构：在哺乳动物细胞用表达载体中整合了编码由胰高血糖素的C末端侧19-29个氨基酸肽区域和有待在体内生产的目的蛋白质区域的融合蛋白质的核酸。

摘要： 本发明涉及一种基因治疗载体，该基因治疗载体用于治疗或预防由RPE65基因突变引起的2型Leber先天性黑蒙症(Leber’s congenital amaurosis,LCA2)。本发明的基因治疗载体包含人类视网膜色素上皮细胞主要蛋白65(hRPE65)、启动子及增加基因表达的血管紧张素II型受体内含子1。本发明还涉及包含上述基因治疗载体的药物及组合物。

摘要： 本发明涉及一种基因治疗载体，包含显性抑制型(dominant negative)人类sterile apha and TIR motif‑containing 1(dnSARM1)、启动子、增加基因表达的β‑globin内含子、human growth hormone poly(A)tail序列等。本发明还涉及包含上述基因治疗载体的药物及组合。其优点表现在：本发明的基因治疗载体可用于治疗或预防由青光眼引起的视网膜神经节细胞病变。

摘要： 本发明涉及一种基因载体及其用于治疗视网膜神经节细胞变性的基因治疗药物，所述基因载体包含显性抑制型(dominant negative)人类Fas‑associatedprotein with death domain(FADD‑DN)、增强子/启动子、增加基因表达的β‑globin内含子、human growth hormone poly(A)tail序列等。本发明还涉及上述基因载体或包含上述基因载体的组合物在制备治疗视网膜神经节细胞变性的药物中的应用。其优点表现在：本发明的基因治疗载体可用于治疗或预防由青光眼等引起的视网膜神经节细胞病变。

摘要： 本发明公开了一种基因治疗用载体，其能够在进行基因治疗时以更高敏感度监控目的蛋白质的血液中浓度，并且标记肽不具有生理作用而在多种动物中无免疫原性。基因治疗用载体具有如下结构：在哺乳动物细胞用表达载体中整合了编码由胰高血糖素的C末端侧19－29个氨基酸肽区域和有待在体内生产的目的蛋白质区域的融合蛋白质的核酸。

摘要： 本发明涉及一种基因治疗载体，包含显性抑制型(dominant negative)人类sterile apha and TIR motif‑containing 1(dnSARM1)、启动子、增加基因表达的β‑globin内含子、human growth hormone poly(A)tail序列等。本发明还涉及包含上述基因治疗载体的药物及组合。其优点表现在：本发明的基因治疗载体可用于治疗或预防由青光眼引起的视网膜神经节细胞病变。

摘要： 本发明涉及一种表达p65的基因载体及其用于治疗视网膜神经节细胞变性的基因治疗药物，所述的基因载体包含激活型的(constitutively active)人类p65(p65(CA))、启动子/增强子、增加基因表达的β‑globin内含子、human growth hormone poly(A)tail序列等。本发明还涉及上述基因载体或包含上述基因载体的组合物在制备治疗视网膜神经节细胞变性的药物中的应用。其优点表现在：本发明的基因治疗载体可用于治疗或预防由青光眼等引起的视网膜神经节细胞病变。

摘要： 本发明涉及一种基因载体及其用于治疗视网膜神经节细胞变性的基因治疗药物，所述基因载体包含显性抑制型(dominant negative)人类Fas‑associatedprotein with death domain(FADD‑DN)、增强子/启动子、增加基因表达的β‑globin内含子、human growth hormone poly(A)tail序列等。本发明还涉及上述基因载体或包含上述基因载体的组合物在制备治疗视网膜神经节细胞变性的药物中的应用。其优点表现在：本发明的基因治疗载体可用于治疗或预防由青光眼等引起的视网膜神经节细胞病变。

摘要： 本发明涉及一种基因治疗载体，该基因治疗载体用于治疗或预防由RPE65基因突变引起的2型Leber先天性黑蒙症(Leber’s congenital amaurosis,LCA2)。本发明的基因治疗载体包含人类视网膜色素上皮细胞主要蛋白65(hRPE65)、启动子及增加基因表达的血管紧张素II型受体内含子1。本发明还涉及包含上述基因治疗载体的药物及组合物。

摘要： 本发明描述含有被CD4+自然杀伤T(NKT)细胞识别的表位以增加活性的新型肽，所述新型肽用于感染性疾病、自体免疫性疾病、针对给予同种异体因子的免疫反应、变应性疾病、肿瘤治疗、预防移植排斥以及预防针对基因治疗或基因疫苗接种所用病毒蛋白的免疫。