非病毒载体

摘要： 基因治疗是针对基因异常相关疾病的终极治疗技术,各种具有不同机制的核酸药物的出现为基因治疗带来了更多的可能性.但是,由于存在体内稳定性差、难以高效进入靶细胞等问题,核酸药物需要载体的帮助而进入目标细胞并到达特定的胞内位置,因此,开发安全高效的核酸递送系统是基因治疗的基石.与病毒载体相比,非病毒载体具有更高的安全性,但转染效率较低.随着纳米技术的发展,非病毒载体的效率得到了显著的提升,进入临床研究的数量逐渐增多.本文简要介绍基因治疗中的核酸药物及其递送载体,对非病毒核酸药物递送技术的瓶颈及进展做综合评述.

摘要： 基因治疗从基因水平上对疾病进行干预已备受关注,阳离子脂质体作为一种非病毒载体,因其制备简单,可降解性等特点,可作为基因治疗的有效载体。该文从结构、制备方法、作用机制及应用等方面阐述了阳离子脂质体在基因治疗中的研究进展。

摘要： 遗传性视网膜变性(IRD)发病机制复杂多样,常常导致不可逆盲,目前尚缺乏有效的治疗方法。近年来,针对IRD的基因治疗显示出广阔的应用前景,而如何将基因药物递送至靶细胞并安全、高效地表达成为目前研究发展的关键点。病毒载体系统转染效率较高,但具有潜在的免疫反应和生物安全等问题,其临床应用的局限性使非病毒载体系统的开发应运而生。DNA纳米复合体是新型非病毒载体的研究热点之一,这种聚合物/DNA复合物纳米粒子由多肽、脂质、多糖等物质压缩和包裹DNA而成,在IRD的应用上取得了较大的进展。此外,非病毒载体在成本、制备难易度、包装容量及安全性上均显示出其优势,为视网膜色素变性、Stargardt病、先天性视网膜劈裂、Leber先天性黑矇等IRD的基因治疗提供了新的研究思路。本文对近年来非病毒载体系统在转染效率、靶向性和安全性等方面的进展及其在IRD基因治疗中的应用进行综述。

摘要： 遗传性视网膜变性(IRD)发病机制复杂多样,常常导致不可逆盲,目前尚缺乏有效的治疗方法.近年来,针对IRD的基因治疗显示出广阔的应用前景,而如何将基因药物递送至靶细胞并安全、高效地表达成为目前研究发展的关键点.病毒载体系统转染效率较高,但具有潜在的免疫反应和生物安全等问题,其临床应用的局限性使非病毒载体系统的开发应运而生.DNA纳米复合体是新型非病毒载体的研究热点之一,这种聚合物/DNA复合物纳米粒子由多肽、脂质、多糖等物质压缩和包裹DNA而成,在IRD的应用上取得了较大的进展.此外,非病毒载体在成本、制备难易度、包装容量及安全性上均显示出其优势,为视网膜色素变性、Stargardt病、先天性视网膜劈裂、Leber先天性黑矇等IRD的基因治疗提供了新的研究思路.本文对近年来非病毒载体系统在转染效率、靶向性和安全性等方面的进展及其在IRD基因治疗中的应用进行综述.

摘要： 非病毒载体在基因治疗中的应用前景较广.非病毒载体经过化学结构修饰后,可将DNA、mRNA及siR?NA等外源核酸递送到受体靶细胞或者靶器官,提高载体的转染效率、细胞靶向性.非病毒载体根据物理和化学结构可分为脂质体、阳离子聚合物、金纳米粒、多肽及蛋白质、壳聚糖等.脂质体具有无免疫原型、可生物降解及降低药物不良反应等优点,经过结构修饰后载体转染效率较高.阳离子多聚物是目前基因治疗领域应用最多的聚合物之一,具有灵活易修饰的优点,可与核酸形成复合物,防止核酸酶的降解.金纳米粒是一种无机纳米材料,可稳定吸附蛋白质,基于金纳米粒的载体转染效率高、细胞毒性低.多肽及蛋白质可分为具有荧光免疫标记的非病毒载体、靶向的非病毒载体、核定位的非病毒载体等多种类型,载体转染效率及细胞靶向性均较高,且细胞毒性低,壳聚糖具有稳定性、生物降解性和生物相容性等优点,还可以通过结构修饰、改造,使其转染更加安全、高效.本文将总结常见的非病毒载体在心血管疾病基因治疗中的应用.

摘要： 细菌和古细菌中发现的成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)系统是通过CRISPR RNA引导核酸内切酶特异性断裂靶基因,借助同源重组和非同源末端连接修复基因组DNA,引入碱基序列的插入、缺失或替换,实现定向基因编辑的一个工具.它的出现为多个学科领域的基础研究带来极大的便利,也为临床治疗基因疾病提供了一种方式.两个主要功能组分只有进入细胞核才能发挥作用,由于细胞内和细胞外的多重障碍,高效递送CRISPR/Cas到靶组织或靶细胞仍是一个巨大的挑战,递送效率低限制了该技术的临床转化.多种递送方式中,非病毒载体与病毒载体、物理递送相比,具有独特的优点,许多学者投入了大量时间和精力设计性质优良的非病毒递送系统,包括阳离子脂质体、类脂纳米粒、阳离子聚合物、囊泡、金纳米粒、多肽和蛋白等.本文对CRISPR/Cas9的作用机制,基于质粒、mRNA和RNP的基因编辑实现方式、这些方式面临的困难和非病毒载体的研究进展进行了总结.

摘要： 近年来,阳离子聚合物、阳离子脂质体等非病毒载体在基因递送中的应用越来越受到人们的关注.然而,血清的存在会降低它们的转染效率,从而阻碍它们在临床中的使用.因此,非常有必要开发能抵抗血清干扰的非病毒基因载体.本工作合成了一种新型的锌离子配位的脂质,其与1,2-二油酰-S N-甘油-3-磷酰乙醇胺脂质(DOPE)共自组装形成阳离子脂质体(Zn-DTAc脂质体).实验结果表明,Zn-DTAc脂质体可以有效地压缩质粒形成纳米复合物.即使在50％胎牛血清存在的情况下,该复合物也能进行有效的细胞内化和内涵体逃逸,并实现高效的基因转染.

摘要： 针对CRISPR/Cas9系统在DNA、RNA和蛋白3种水平的递送形式,本文着重介绍了CRISPR/Cas9系统的病毒载体和非病毒载体的研究现状和CRISPR/Cas9系统递送的新策略,及其在生物医学领域和基因相关疾病治疗的应用进展。通过对CRISPR/Cas9系统递送和基因治疗策略进行总结与阐述,为创新药物的发现和基因治疗的开发提供新思路。

摘要： 近年来,基于核酸分子的探针与药物在针对中枢系统的诊疗应用中展现出强大的潜力.但是,复杂的中枢神经系统以及生理屏障使得核酸分子的递送成为一大难题.因此,开发更加高效而安全的中枢神经递送载体仍是一项迫切需求.本文综述了目前针对中枢神经系统的多种核酸递送方式,包括利用病毒载体、非病毒载体以及无载体递送等方法.这些方法在一定程度上提高了核酸药物递送的效率以及在机体内的稳定性,获得了较好的诊断与治疗效果.本文讨论了这些递送方式的优势和局限性,并对新型核酸递送载体的发展进行了展望.

摘要： 基因治疗是一种新兴的治疗方式,也是攻克肿瘤最具挑战的研究领域.然而,基因治疗的实现仍然面临着缺乏安全有效转运载体的问题.常用的载体主要包括病毒载体和非病毒载体.病毒载体的转染效率高,但近年来因存在安全性问题,其临床使用受到了制约.非病毒载体具有免疫原性低、安全性高、易于制备且基因容量大等优势,目前越来越受到研究学者的关注.尤其近年来发展了一系列多功能非病毒载体,将多种功能整合于同一个非病毒载体中,使之能同时实现靶向、成像、示踪、光热疗、载药或可控释药等,从而达到了更加有效的治疗肿瘤的目的.现就近年来国内外对于影像导向、光热驱动、联合药物3种多功能病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用作一综述,阐述其优点及临床应用前景,了解其发展方向.

摘要： 基因治疗是一种新兴的治疗方式,其广泛运用于癌症治疗的研究中.而用于递送核酸的载体在这期间扮演着重要的角色.如今对于多功能非病毒载体的研究已成为热门,其不仅具有非病毒载体安全性高、生物相容性好的优点,同时能在不同时点执行不同任务,从而达到更加有效的抑癌作用.本文主要回顾了影像导向、光热驱动、联合药物三种多功能递送系统在肿瘤基因治疗中的应用,并阐述了其优点及应用于临床的瓶颈,从而了解其发展方向.

摘要： 由于病毒载体的高毒副作用,制备高转染效率、毒副作用较小的非病毒载成为基因治疗研究新方向.文献报道,常见的非病毒载体主要有电穿孔技术、光穿孔技术、阳离子脂质体穿孔技术、声穿孔技术以及磁性纳米载体技术,然而高能量的电穿孔技术、光穿孔技术会使细胞膜发生永久性破坏,导致细胞死亡;阳离子脂质体因不易被机体快速清除,在体内形成炎症反应;基于磁性纳米颗粒穿孔技术中细胞内残留的磁性纳米颗粒都会降低基因的转染效率.而声穿孔技术相对其他膜穿孔技术具有很大的应用潜景.目前关于声穿孔技术引起的声孔效应产生机制主要基于空化效应，即瞬态空化和稳态空化效应，然而稳态空化增强细胞膜的通透性具有可逆性和可控性，近年来受到越来越多的关注。由于空化效应的随机性，在单细胞水平很难实现较均一性的声孔效应。本实验研制了一种微流控装置，通过振荡微泡阵列对单细胞的膜透性进行平行调制，实现在单细胞水平上高通量、均一性的声穿孔技术。

摘要： 目的：比较研究腺病毒、慢病毒和Lipofectamine 2000三种方法转染U937细胞的效果差异,以寻找一种简便、高效转染U937细胞的方法.方法：分别采用Lipofectamine2000介导质粒载体(pGPHI/GFP/Neo),腺病毒(Adv-GFP-NC)、慢病毒(LV-GFP-NC)三种方法转染U937细胞,于脂质体转染48 h后、腺病毒和慢病毒转染96 h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,并收集细胞上流式细胞仪检测GFP阳性细胞的比例.台盼蓝染色法计数不同转染方法对细胞活力的影响.结果：Lipofectamine2000介导质粒载体转染组、腺病毒转染组GFP阳性细胞极少,流式细胞仪检测GFP阳性细胞均＜4％;慢病毒转染组GFP阳性细胞满视野,MOI=100时,GFP阳性细胞约占90％.台盼蓝染色法显示腺病毒、慢病毒组活细胞率明显高于脂质体组,差异具有统计学意义(p＜0.01).结论：慢病毒,而不是Lipofectamine2000和腺病毒能有效地将外源基因导入U937细胞内表达,是转染U937细胞的理想载体.

摘要： 本工作首先设计了一种功能性两嵌段共聚物PEGMA-bMAH，该共聚物是通过大分子引发剂聚(聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯)(P(PEGMA))引发L-甲基丙烯酰组氨酸甲酯(MAH)单体采用可逆加成-断裂链转移(RAFT)聚合的方法制备而成。然后研究了该复合物对DNA的压缩能力以及稳定性，并通过体外转染实验和MTT测试研究了复合物的转染效率和毒性。实验结果表明，非共价的共混组装的方法为改性PEI并增强其转染效率提供了一种新的方法。

摘要： RNA干扰（RNA interference, RNAi）是近年发展起来的一种新技术。RNAi 是指通过外源性或内源性的双链RNA在体内诱导靶基因mRNA产生特异性降解，进而引起不同水平的基因沉默。RNAi已经用于肿瘤、病毒感染、乙型肝炎等多种疾病的治疗。小干扰RNA（siRNA）是RNAi的效应分子,可在体内诱导RNAi 效应。但是裸siRNA在体内容易被核酶（RNase）降解，且半衰期短，转染效率低。因此，siRNA需要借助递送载体进入细胞发挥治疗作用。病毒载体在基因治疗中有潜在的免疫原性、致突变等副作用。所以，非病毒载体成为当前的研究热点。本文对现行siRNA非病毒递送载体的研究现状进行了综述。

摘要： 随着基因治疗研究的不断深入，人们认识到选择合适的载体，使目的基因靶向、可控并有效表达，是基因治疗成功的关键。应用于基因治疗的载体主要有病毒载体和非病毒载体两种，由于病毒载体的免疫原性高、毒性大、目的基因容量小、靶向特异性差、制备较复杂及费用较高等缺点，人们愈来愈重视非病毒载体的研究。在诸多非病毒载体中，以聚乙烯亚胺(PEI)最受瞩目，其转染是基于其极大的缓冲能力，能够消耗大量溶酶体中的质子，促进其破裂，使DNA避免降解而顺利进入细胞浆。但PEI的毒性较大，而且PEI/DNA复合物的溶解度差，体内稳定性不佳，导致转染效率降低，因此在一定程度上限制了其使用。性较大，而且PEI/DNA复合物的溶解度差，体内稳定性不佳，导致转染效率降低，因此在一定程度上限制了其使用。鉴于上述问题，本课题拟采用糖基对PEI进行修饰。本研究转染的细胞为呼吸道上皮细胞，其表面存在能与半乳糖(GAL)特异性结合的凝集素，故采用具有双功能基团的N - hydroxysuccinimide一PEG - Maleimide (NHS - PEG - MAL)，将具有靶向呼吸道上皮细胞上凝集素的半乳糖和转基因载体相连接，所形成的聚合物与DNA结合后能通过受体介导的途径进人细胞，高效表达目的蛋白。另外，上述载体系统中引人了PEG的亲水链，有望提高PEI/DNA复合物的溶解度，防止复合物在超滤浓缩后相互聚集;PEG的电荷屏蔽作用能掩蔽PEI表面过多的正电荷，降低其细胞毒性;PEG链的“隐形功能”能减少复合物与体液中蛋白的相互作用，延长体内循环时间，提高体内的表达水平。

摘要： 目的:采用低分子量聚乙烯亚胺(PEI)修饰壳聚糖硬脂酸(CSOSA)聚合物，考察PEI-CSOSA共聚物作为基因载体在体内外介导基因药物的能力和安全性。方法: 碳二亚胺法合成壳聚糖硬脂酸嫁接物；高碘酸法合成PEI修饰壳聚糖硬脂酸共聚物；以荧光质粒DNA(pEGFP-C1)和虫荧光素酶质粒作为报告基因，研究共聚物胶团-DNA给药系统的基因转染。以质粒DNA(PEDF)作为治疗基因，研究共聚物胶团-DNA纳米粒给药系统抗肿瘤体内治疗效果。结果:CSOSA经PEI修饰后，离子缓冲能力显著增强，其与DNA形成复合物的粒经在100-200nm；体外转染实验表明：在血清存在下，共聚物胶团-DNA复合纳米粒可体现出与Lipofectamine TM2000相当的基因转染效率。体内动物实验结果表明，共聚物载治疗基因可有效地抑制肿瘤生长，且安全性高。结论: PEI-CSOSA 共聚物可实现肿瘤的安全高效的治疗。

摘要： 目的:采用低分子量聚乙烯亚胺(PEI)修饰壳聚糖硬脂酸(CSOSA)聚合物，考察PEI-CSOSA共聚物作为基因载体在体内外介导基因药物的能力和安全性。方法: 碳二亚胺法合成壳聚糖硬脂酸嫁接物；高碘酸法合成PEI修饰壳聚糖硬脂酸共聚物；以荧光质粒DNA(pEGFP-C1)和虫荧光素酶质粒作为报告基因，研究共聚物胶团-DNA给药系统的基因转染。以质粒DNA(PEDF)作为治疗基因，研究共聚物胶团-DNA纳米粒给药系统抗肿瘤体内治疗效果。结果:CSOSA经PEI修饰后，离子缓冲能力显著增强，其与DNA形成复合物的粒经在100-200nm；体外转染实验表明：在血清存在下，共聚物胶团-DNA复合纳米粒可体现出与Lipofectamine TM2000相当的基因转染效率。体内动物实验结果表明，共聚物载治疗基因可有效地抑制肿瘤生长，且安全性高。结论: PEI-CSOSA 共聚物可实现肿瘤的安全高效的治疗。

摘要： 目的:采用低分子量聚乙烯亚胺(PEI)修饰壳聚糖硬脂酸(CSOSA)聚合物，考察PEI-CSOSA共聚物作为基因载体在体内外介导基因药物的能力和安全性。方法: 碳二亚胺法合成壳聚糖硬脂酸嫁接物；高碘酸法合成PEI修饰壳聚糖硬脂酸共聚物；以荧光质粒DNA(pEGFP-C1)和虫荧光素酶质粒作为报告基因，研究共聚物胶团-DNA给药系统的基因转染。以质粒DNA(PEDF)作为治疗基因，研究共聚物胶团-DNA纳米粒给药系统抗肿瘤体内治疗效果。结果:CSOSA经PEI修饰后，离子缓冲能力显著增强，其与DNA形成复合物的粒经在100-200nm；体外转染实验表明：在血清存在下，共聚物胶团-DNA复合纳米粒可体现出与Lipofectamine TM2000相当的基因转染效率。体内动物实验结果表明，共聚物载治疗基因可有效地抑制肿瘤生长，且安全性高。结论: PEI-CSOSA 共聚物可实现肿瘤的安全高效的治疗。

摘要： 目的:采用低分子量聚乙烯亚胺(PEI)修饰壳聚糖硬脂酸(CSOSA)聚合物，考察PEI-CSOSA共聚物作为基因载体在体内外介导基因药物的能力和安全性。方法: 碳二亚胺法合成壳聚糖硬脂酸嫁接物；高碘酸法合成PEI修饰壳聚糖硬脂酸共聚物；以荧光质粒DNA(pEGFP-C1)和虫荧光素酶质粒作为报告基因，研究共聚物胶团-DNA给药系统的基因转染。以质粒DNA(PEDF)作为治疗基因，研究共聚物胶团-DNA纳米粒给药系统抗肿瘤体内治疗效果。结果:CSOSA经PEI修饰后，离子缓冲能力显著增强，其与DNA形成复合物的粒经在100-200nm；体外转染实验表明：在血清存在下，共聚物胶团-DNA复合纳米粒可体现出与Lipofectamine TM2000相当的基因转染效率。体内动物实验结果表明，共聚物载治疗基因可有效地抑制肿瘤生长，且安全性高。结论: PEI-CSOSA 共聚物可实现肿瘤的安全高效的治疗。

摘要： 本发明属于生物领域，尤其涉及慢病毒载体的制备方法及得到的慢病毒载体和应用。本发明公开了一种慢病毒载体的制备方法，包括：以基于LTR1.27‑GEW质粒为骨架，在5’端添加R和U5区，得到慢病毒载体Obio‑01。本发明制备得到的新型的第四代慢病毒载体在保障安全性的前提下，还能够具有高产量的病毒滴度，可应用于基因治疗等领域。

摘要： mVSV病毒载体，即野生Indiana株VSV的M蛋白氨基酸位点发生多个修饰突变后得到的减毒mVSV，同时优选的异源抗原基因优先整合到mVSV包装核心质粒pmVSV‑Core的双克隆位点区域；一种mVSV病毒载体疫苗,包括在mVSV载体包膜G和L基因之间中融合或嵌合目的病毒的异源性抗原基因，抗原基因包含编码所述目的病毒包膜嵌合的抗原基因、嵌合的组合体抗原基因或融合的抗原基因；mVSV病毒载体嵌合或融合了COVID‑19病毒病原体的刺突蛋白S的优势抗原，所述优势抗原优选自刺突蛋白S的受体结合结构域即RBD，形成一种基于mVSV介导的新冠肺炎疫苗，该疫苗对新冠肺炎病毒感染者有较好的预防或治疗作用。

摘要： 本发明提供一种病毒载体，所述病毒载体能够使细胞免疫和体液免疫两方激活，能够用于对通常难以使用疫苗疗法的由病原微生物引起的传染病、恶性肿瘤有效的初免-加强疫苗的制造。所述病毒载体为包含下述（a）和（b）的初免-加强疫苗用病毒载体，（a）可表达地携带编码具有免疫原性的多肽的基因的痘苗病毒载体，（b）可表达地携带编码具有所述免疫原性的多肽的基因的仙台病毒载体。

摘要： 本发明涉及用于治疗溶原性病毒的组合物，该组合物包括编码分离的核酸的慢病毒载体，该分离的核酸编码两种或更多种基因编辑器，所述基因编辑器选自靶向病毒DNA的基因编辑器、靶向病毒RNA的基因编辑器、及其组合；治疗裂解性病毒的组合物，该组合物包括编码分离的核酸的慢病毒载体，所述分离的核酸编码至少一种靶向病毒DNA的基因编辑器以及靶向病毒RNA的成分；用于治疗溶原性病毒和裂解性病毒的组合物，该组合物包括编码分离的核酸的慢病毒载体，该分离的核酸编码靶向病毒RNA的两种或更多种基因编辑器；用于治疗裂解性病毒的组合物；以及通过向具有病毒的个体施用上述组合物并灭活该病毒来治疗溶原性病毒或裂解性病毒的方法。

摘要： 本发明提供一种构建重组腺病毒载体的方法，用C亚型人腺病毒基因组的E4基因序列改造AdC6的E4基因序列以提高重组腺病毒产量。以本发明的方法可构建得到非复制型腺病毒载体，可用作疫苗载体，实验证明可在其E1/E3/E4/Fiber/Hexon等区域插入外源基因，用于疫苗开发或基因治疗。以本发明的方法还可构建得到条件复制型腺病毒载体，即溶瘤病毒载体，并可在其△E3或E1或E4等区域插入了各种促进溶瘤的外源基因以增强溶瘤作用：实验证明所得重组溶瘤病毒可在多种肿瘤细胞中复制，并裂解肿瘤细胞；动物实验中重组溶瘤病毒都可有效抑制肿瘤进展，甚至清除肿瘤，表明其具有治疗肿瘤的潜力，可进一步向临床推进。

摘要： 本发明属于生物领域，尤其涉及慢病毒载体的制备方法及得到的慢病毒载体和应用。本发明公开了一种慢病毒载体的制备方法，包括：以基于LTR1.27‑GEW质粒为骨架，在5’端添加R和U5区，得到慢病毒载体Obio‑01。本发明制备得到的新型的第四代慢病毒载体在保障安全性的前提下，还能够具有高产量的病毒滴度，可应用于基因治疗等领域。

摘要： 本发明提供一种用于慢病毒载体制备的低温混匀装置和慢病毒载体的纯化方法。该装置包括磁力耦合搅拌电机、系统控制单元和水夹套控温单元；系统控制单元分别与磁力耦合搅拌电机、水夹套控温单元信号连接，用于控制磁力耦合搅拌电机和水夹套控温单元；水夹套控温单元包括水夹套箱体；水夹套箱体的底部设置有磁力耦合搅拌电机，顶部设置有开口，侧壁包括内壁、外壁以及位于内壁和外壁之间的冷却剂通道。本发明的装置可保证核酸酶在2‑8°C环境下进行消化步骤，并以一定的剪切力搅拌混匀病毒上清液，使核酸酶与病毒上清液充分混合，完全内切外源性核酸，减少人力成本，缩短核酸酶消化时间，有利于慢病毒载体的标准化生产。

摘要： 本文描述了用于产生重组腺相关病毒(rAAV)载体的核酸、AAV转移盒和质粒。所公开的核酸、盒和质粒包含表达一种或多种转基因的序列，所述一种或多种转基因在一种或多种疾病或病症的改善、治疗和/或预防中具有治疗功效。

摘要： mVSV病毒载体，即野生Indiana株VSV的M蛋白氨基酸位点发生多个修饰突变后得到的减毒mVSV，同时优选的异源抗原基因优先整合到mVSV包装核心质粒pmVSV‑Core的双克隆位点区域；一种mVSV病毒载体疫苗,包括在mVSV载体包膜G和L基因之间中融合或嵌合目的病毒的异源性抗原基因，抗原基因包含编码所述目的病毒包膜嵌合的抗原基因、嵌合的组合体抗原基因或融合的抗原基因；mVSV病毒载体嵌合或融合了SARS‑CoV‑2病原体的刺突蛋白S的优势抗原，所述优势抗原优选自刺突蛋白S的受体结合结构域即RBD，形成一种基于mVSV介导的新冠肺炎疫苗，该疫苗对新冠肺炎病毒感染者有较好的预防或治疗作用。

摘要： 本发明提供了一种CYBB慢病毒载体、慢病毒载体转染的干细胞及其制备方法和应用，所述慢病毒载体包括hEF1α启动子和CYBB串联共表达。本发明的慢病毒载体携带CYBB基因，在hEF1α启动子的启动下，实现了携带的CYBB基因在已分化或未分化的干细胞中的安全高效表达，同时，干细胞作为潜在的传送载体，提高了CYBB基因在转基因细胞中的表达量。