种子细胞

摘要： 出版重点:出版来自组织工程领域的种子细胞研究、生物材料研究、骨科植入物研究、组织构建研究的创新性成果的优秀文章;优先出版来自于组织工程研究项目接受国家级、省级各项基金资助课题的优秀文章;出版来自国内外组织工程研究优秀团队撰写的多中心、前瞻性、随机对照的临床试验注册方案的文章,以及这些方案产出结果的原著文章。

摘要： 出版重点:出版来自组织工程领域的种子细胞研究、生物材料研究、骨科植入物研究、组织构建研究的创新性成果的优秀文章;优先出版来自于组织工程研究项目接受国家级、省级各项基金资助课题的优秀文章;出版来自国内外组织工程研究优秀团队撰写的多中心、前瞻性、随机对照的临床试验注册方案的文章,以及这些方案产出结果的原著文章。

摘要： 出版重点:出版来自组织工程领域的种子细胞研究、生物材料研究、骨科植入物研究、组织构建研究的创新性成果的优秀文章;优先出版来自于组织工程研究项目接受国家级、省级各项基金资助课题的优秀文章;出版来自国内外组织工程研究优秀团队撰写的多中心、前瞻性、随机对照的临床试验注册方案的文章,以及这些方案产出结果的原著文章。

摘要： 出版重点:出版来自组织工程领域的种子细胞研究、生物材料研究、骨科植入物研究、组织构建研究的创新性成,果的优秀文章;优先出版来自于组织工程研究项目接受国家级、省级各项基金资助课题的优秀文章;出版来自国内外组织工程研究优秀团队撰写的多中心、前瞻性、随机对照的临床试验注册方案的文章,以及这些方案产出结果的原著文章。

摘要： 背景:细胞膜片技术在组织再生和修复方面具有广阔的应用前景,其在骨组织工程研究领域也具有重要的作用和应用价值.目的:综述细胞膜片技术在骨组织工程中的应用及存在的问题.方法:应用计算机检索CNKI数据库、PubMed数据库及Elsevier数据库中发表的细胞膜片在骨组织工程中应用的相关文献,中文检索词为"细胞膜片技术,细胞膜片,骨,骨缺损,骨修复,组织工程,骨组织工程",英文检索词为"Cell sheet technology,Cell sheet,Bone,Bone defect,Bone repair,Tissue engineering,Bone tissue engineering".选择2000年1月至2021年7月收录的细胞膜片技术在骨组织工程中应用的相关文章,包括综述、基础及临床研究.结果 与结论:细胞膜片技术是一种新型的获取种子细胞的技术,其既能获取想要的种子细胞,同时还能保留丰富的细胞外基质和细胞与细胞间的连接,因此,在组织再生和修复方面具有广阔的应用前景.目前制备细胞膜片的技术主要包括:温度反应系统、机械系统、磁反应系统、光反应系统、pH系统,各种技术在制备细胞膜片的应用方面都具有各自的优缺点.其中,温度反应系统和磁反应系统是目前应用较为广泛的.细胞膜片的种类较多,可根据不同细胞来源分为不同类型的细胞膜片;也可以根据膜片的层数分为单层细胞膜片、双层细胞膜片、多层细胞膜片等.在骨组织工程方面,细胞膜片技术可以单独应用于骨缺损的修复,同时还可以与其他各种支架材料复合从而增加其机械强度并用于骨缺损的修复.此外,在细胞膜片中加入生长因子或者小分子物质为细胞膜片的应用提供了新的思路.

摘要： 背景:在大块工程化移植物内部迅速形成功能性血管系统,是其在宿主体内成功存活的基本前提。利用基因工程技术实现工程组织血管化具有治疗效果好、费用低、安全性高等优点,开展工程组织血管化基因治疗的相关研究对实现长期有效的组织修复有着重大意义。目的:综述目前组织工程血管化基因治疗的种子细胞、目的基因和基因载体的研究现状及存在的主要问题,以期进一步探讨基因治疗在组织工程血管化中的应用前景。方法:在PubMed、Web of Science、CNKI上进行了文献检索,并以“Tissue engineering;Vascularization;Gene therapy;Seed cells;Target genes;Vectors”作为英文检索词,以“组织工程;血管化;基因治疗;种子细胞;目的基因;载体”作为中文检索词,对最终纳入的61篇文献进行了归纳总结。结果与结论:间充质干细胞、血管内皮细胞及内皮祖细胞是组织工程血管化基因治疗中最具潜力的种子细胞,不仅具有良好的血管诱导性,而且有利于多种病毒和非病毒载体的导入及血管化目的基因的表达。血管内皮生长因子、血管生成素1、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2、缺氧诱导因子1α等血管化目的基因,主要通过双/多基因联合、成骨与成血管耦合及上游基因调控等方式在工程化移植物内部构建出高效、稳定的血管网络。由于不同的病毒和非病毒载体具有各自的优缺点,因此在应用时主要根据基因转染效率、生物安全性、成本等方面来选择合适的载体。目前,尽管基因治疗在组织工程血管化中的应用研究已取得很大进展,但是要真正应用于临床实践,还需要突破众多技术瓶颈,例如如何提高目的因子的释放靶向性和降低安全风险等,这也是未来组织工程血管化基因治疗的研究方向和热点。

摘要： 背景:在大块工程化移植物内部迅速形成功能性血管系统,是其在宿主体内成功存活的基本前提.利用基因工程技术实现工程组织血管化具有治疗效果好、费用低、安全性高等优点,开展工程组织血管化基因治疗的相关研究对实现长期有效的组织修复有着重大意义.目的:综述目前组织工程血管化基因治疗的种子细胞、目的基因和基因载体的研究现状及存在的主要问题,以期进一步探讨基因治疗在组织工程血管化中的应用前景.方法:在PubMed、Web of Science、CNKI上进行了文献检索,并以"Tissue engineering;Vascularization;Gene therapy;Seed cells;Target genes;Vectors"作为英文检索词,以"组织工程;血管化;基因治疗;种子细胞;目的 基因;载体"作为中文检索词,对最终纳入的61篇文献进行了归纳总结.结果 与结论:间充质干细胞、血管内皮细胞及内皮祖细胞是组织工程血管化基因治疗中最具潜力的种子细胞,不仅具有良好的血管诱导性,而且有利于多种病毒和非病毒载体的导入及血管化目的基因的表达.血管内皮生长因子、血管生成素1、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2、缺氧诱导因子1α等血管化目的基因,主要通过双/多基因联合、成骨与成血管耦合及上游基因调控等方式在工程化移植物内部构建出高效、稳定的血管网络.由于不同的病毒和非病毒载体具有各自的优缺点,因此在应用时主要根据基因转染效率、生物安全性、成本等方面来选择合适的载体.目前,尽管基因治疗在组织工程血管化中的应用研究已取得很大进展,但是要真正应用于临床实践,还需要突破众多技术瓶颈,例如如何提高目的因子的释放靶向性和降低安全风险等,这也是未来组织工程血管化基因治疗的研究方向和热点.

摘要： 关节软骨损伤在临床工作中很常见。一方面,由于缺乏血供和未分化细胞的原因,使得关节软骨的自我恢复能力非常低。另一方面,关节软骨的修复技术尚不成熟,很难将受损的软骨恢复到原有的状态及功能。因此,关节软骨损伤的修复和再生成为临床工作中的一大难题。但随着材料科学和细胞生物学的发展,组织工程技术的为软骨损伤的再生和修复提供了新思路。本文对组织工程技术在软骨损伤修复的研究进展进行简要综述。

摘要： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)最早起源于早期中胚层,能够自我更新并具有多向分化的潜能,能在成体骨髓、牙髓、脂肪组织、脐带等组织中分离[1]。与其他组织来源的MSCs相比,人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)是从人脐带的华通氏胶(WJ)、人脐带血、人脐带血管周围组织、羊膜中分离出来的间充质干细胞,取材简单,来源广泛,基本不受伦理学的限制,具有免疫原性低、免疫调节能力强、更易体外扩增等特点,同时还具有胚胎干细胞及成体干细胞的优点,逐渐成为组织工程和再生医学中最具发展前景的种子细胞[2]。

摘要： 干细胞作为一种可以自我更新和多向分化的细胞,具有修复组织功能和再生器官的能力,被称为“种子细胞”。近年来,中山大学中山医学院教授项鹏及其团队深耕干细胞研究,建立了中山大学干细胞与再生医学创新平台,经过多年攻关,发现了适合不同组织损伤修复的间充质干细胞功能亚群,阐明了间充质干细胞参与损伤修复的机制,并提出了靶向病损组织的间充质干细胞精准治疗新策略,为推动间充质干细胞的临床转化提供了重要科学依据。其项目成果“间充质干细胞功能特性、治疗机理与临床转化的系列研究”获广东省自然科学奖一等奖。

摘要： 目的:研究人正常泌尿系上皮细胞系(SV-HUC-1)在传代20代之后的性质变化,探讨将其作为组织工程化尿道研究种子细胞的可行性.rn 方法:对于SV-HUC-1传代20代的细胞进行形态观察,应用RT-PCR法和间接免疫荧光法检测细胞标志蛋白表达.应用Cell TrackerTMBlue CMF2HC,进行活细胞示踪研究.rn 结果:对于第20代SV-HUC-1细胞,应用倒置相差显傲镜观察生长到其形态正常.应用RT-PCR法和间接免疫荧光法均检测到第20代SV-HUC-1细胞中Vimentin和CK-18的mRNA表达.应用研究活细胞示踪研究,在第20代SV-HUC-1细胞中加入活细胞示踪剂Cell TrackerTMBlue CMF2HC后,发现SV-HUC-1细胞生长良好.rn 结论:SV-HUC-1细胞能够正常生长传代20代,形态正常,能够表达泌尿系上皮细胞的标志蛋白,并能以活细胞的方式进行示踪和观察.SV-HUC-1细胞系是适合作为尿道组织工程实验用的种子细胞.

摘要： 目的：系统探讨血管基质片段(SVF)细胞作为理想的组织工程种子细胞的优势.rn 方法：0.125％Ⅰ型胶原酶分离消化脂肪组织,获得血管基质片段细胞,用DII染色进行观察.观察其Po代细胞成脂、成骨、成软骨分化情况.观察SVF和Dil标记SVF细胞与Ⅰ型胶原支架相容性.rn 结果：0.125％Ⅰ型胶原酶可快速大量获得血管基质片段细胞,其Po代细胞能成脂、成骨、成软骨分化,这种细胞可用Dil染色标记,与Ⅰ型胶原支架能相容性好,Dil标记前后粘附率分别为SVF组细胞粘附率为:(92.596±2.268)％和(92.488±2.262)％.两组独立样本T检验,t=0.096,P=0.964,差异不具有统计学意义.rn 结论：SVF细胞可用0.125％Ⅰ型胶原酶消化法,快速大量获得,经培养可成脂、成骨、成软骨分化.并可用Dil标记,与Ⅰ型胶原支架具有良好的生物相容性,是理想的组织工程种子细胞.

摘要： 随着牙齿形成机理研究的逐步深入及组织工程学的飞速发展,牙齿组织工程化已成为国内外所共同关注的课题,组织工程化牙齿被认为是好的生物学牙齿,它能够被重组到颌骨并且执行天然牙的正常功能包括受损后再生的能力.作为种子细胞来源的人牙髓细胞的研究也越来越受到重视.本实验通过组织块培养法培养人健康牙髓组织细胞,为本实验室开展牙髓组织工程研究提供种子细胞.结论:本实验采用组织块贴壁法成功分离培养和保存了人健康牙髓组织细胞。由于人牙髓组织位于空间有限的牙髓腔中，量少，细胞活性低且随着年龄增长而较早发生退形性变，实验取材的样本年龄较低。组织块培养法操作环节少，污染率低，对组织损伤小。但是，由于牙髓干细胞具有多向分化潜能:能分化成为包括成牙本质细胞、成骨细胞、软骨细胞等，因此目前牙齿组织工程中的种子细胞多采用牙髓干细胞。后续实验拟在对人牙髓组织细胞增殖活性和生物学特性进行深入研究的基础上，对牙髓细胞进行进一步分离提纯，得到牙髓干细胞，并且对牙髓干细胞进行相关生物学特性的鉴定，包括基质抗原-1等表面标志物的检测。为进一步进行牙齿组织工程研究做好种子细胞准备。

摘要： 目的:通用化组织工程骨是一种应用于同种异体,可标准化制备并储存,临床治疗上即需即取的再生医学产品.而制备这种组织工程骨,选取一种体外成骨能力强,免疫原性低,来源广泛的种子细胞是首要关键.为此尝试在山羊动物模型上,对比胎龄期骨髓间充质干细胞(Fetal BMSC),成年期骨髓间充质干细胞(Adult BMSC),以及脐带干细胞(Umbilical MSC)体外细胞增殖能力及成骨能力差异并建立相应种子细胞库,为后续研究做准备.rn 方法:人工授精法获取孕期90天的孕山羊，剖宫产手术取出胎羊。注射器四肢骨抽取骨髓，并全骨髓贴壁法体外培养;将脐带剪碎，利用胶原酶消化贴壁法获取脐带干细胞;另选择年龄1岁-2岁成年山羊，骼前上棘穿刺抽取骨髓，贴壁培养。通过观察三种细胞的集落形态，生长曲线，克隆形成率，三向诱导来比较体外增殖能力及成骨差异。rn 结果:胎龄期的骨髓间充质干细胞呈成纤维细胞样生长，生长速度，克隆形成率均高于成年期骨髓间充质干细胞和脐带干细胞，同时三向诱导也证实其有较强的成骨分化能力。rn 结论:胎羊来源的骨髓间充质干细胞是一种增殖能力强，具有高分化潜力，与骨组织工程材料复合紧密，同时适合冻存建库的良好的种子细胞来源。

摘要： 丝素因其良好的生物相容性、可降解性、优良的力学性能和产量丰富等特点,已经成为骨组织工程材料的重要来源之一.选用合理的材料构建技术,可制备丝素多孔支架、丝素水凝胶等多种形式的生物材料,为种子细胞的生存提供一种类似于体内时的形态,从而促进缺损骨组织的修复和功能的重建.

摘要： 当因各种疾患引起患者大块颌骨缺损时,重建骨组织并恢复面部外形及咀嚼功能,提高患者临床生存质量极为重要.对于超过6-8mm的骨缺损一般可以称为大块骨缺损,临床上结合缺损的部位、病因、程度,选择合适的治疗方案.现阶段的主要治疗方法有自体或异体骨移植、外来材料种植、及组织工程技术(再生医学)。相对于其它方法,组织工程骨具有能避免供区二次损伤,无免疫排斥反应及疾病传播等优点,为最终实现无损伤骨缺损修复开辟了一条新途径。骨组织工程的四个基本要素为种子细胞、支架材料、生长因子和生物力学微环境。传统组织工程骨缺损修复是将种子细胞接种到支架材料,经过一定时间的体外培养后,移植到体内继续构建。但组织工程骨也有自身的缺点：没有血供系统。营养物质的供给和代谢产物的排出主要通过有限的弥散和渗透,这阻碍了大块组织的构建。所以目前,组织工程骨仅限于修复体积小、厚度薄的骨缺损,也仅处在动物实验阶段。我们通过以下方面的研究,尝试解决大块组织工程骨构建中的一些难题。

摘要： 将脂肪干细胞(ADSC,A)负载入可注射性软骨细胞砖-富血小板血浆(Chondrocyte Bricks-Platelet Rich Plasma,CB-PRP)复合体中,探究其作为种子细胞实现颌面部微创软骨修复的可行性.

摘要： 在消除个体差异的基础上,比较同一供体来源的三种牙源性干细胞(人牙周膜干细胞,人牙髓干细胞及人牙龈干细胞)在增殖、多向分化、衰老、长期体外培养条件下的干性维持能力等多种生物学性能的差异,为组织工程中种子细胞的选择提供理论依据.

摘要： 种子细胞来源不足、支架材料体内炎症反应、体外再生软骨力学强度不足、形态难以精确控制等难题一直是限制软骨再生技术研究与应用的瓶颈问题,也是人耳形态软骨一直未能从裸鼠背上转化为临床应用的核心问题.课题组经过十几年的研究,成功地建立了:1)软骨再生种子细胞(包括干细胞与软骨细胞)大规模扩增技术;2)体外软骨再生核心技术,包括再生软骨形态(耳、鼻、气管、半月板等)的精确控制技术;3)大动物各类软骨缺损(耳、气管、关节、半月板等)修复技术;4)软骨再生技术的安全性评价.在上述基础上,我们成功开展了组织工程耳、鼻、关节等多种软骨再生技术的临床应用,目前已获得了较好的临床效果,这些研究为软骨再生技术的进一步临床推广应用奠定了基础.

摘要： 目的:探讨去分化脂肪(dedifferentiated fat,DFAT)细胞向心肌细胞分化的可能性,旨在为治疗心肌梗死、心脏生物起搏器的构建提供新的种子细胞.rn 方法:用天花板培养法分离获得大鼠DFAT细胞并鉴定;5-AZA、EBIO、与新生鼠窦房细胞共培养等方法对DFAT细胞进行诱导,观察形态变化,用RT-PCR和免疫细胞化学检测心肌和起搏细胞标记物,并将其与静息心室肌细胞共培养观察其带动心肌细胞跳动的情况.rn 结果:获得的DFAT细胞与间充质干细胞类似，可以表达CD29, CD44和CD90，但不表达CD31和CD34，可以向脂肪细胞和骨细胞方向分化。在培养中未发现自发性搏动的细胞。5-AZA、EBIO、与新生鼠窦房细胞共培养诱导后，细胞变大，并呈长梭形，表达心脏早期标志基因GATA-4和Nkx2.5、心肌相关标志基因HCN、Cx和Tn等;免疫细胞化学显示诱导后细胞可以表达起搏细胞相关标志物HCN,Cx和Tn;5-AZA诱导的细胞与静息心室肌细胞共培养后未发现自主搏动的细胞，而与窦房结共培养的DFAT细胞可以带动静息心室肌搏动。rn 结论:5-AZA、EBIO与窦房结细胞共培养都可以将DFAT细胞诱导分化为具有一定心肌细胞、起搏细胞表型的细胞，而与窦房结细胞共培养的DFAT细胞还可以带动静息心室肌搏动，更接近起搏细胞。

摘要： 本发明属于植物分子生物学和农业生物技术领域，具体涉及核核酸分子、载体和细胞及其应用以及通过无性胚和无胚种子高效筛选植物无融合生殖克隆种子，核酸分子包含表达盒E1，表达盒E1携带有产生MiMe突变体的元件及沉默BABY BOOM‑like基因的元件。筛选方法包括：将含有表达盒E1、E2和E3的核酸分子，或者含有该核酸分子重组载体导入植物；将所得转基因植物自交，获得带有筛选标记的无性胚种子和不带有筛选标记的无胚种子；通过筛选标记对无性胚种子和无胚种子进行分选，获得作为克隆种子的无性胚种子。本发明能够使转基因植物自交时获得无性胚种子和无胚种子，有利于无性胚种子的分选，从而可高比率的获得克隆种子。

摘要： 提供了一种利用中药调控细胞周期清除受损干细胞种子的方法，通过中药调控细胞周期相关蛋白的表达，使组织破碎过程中受损的不符合要求的干细胞种子凋亡，提高了干细胞种子质量。

摘要： 提供了一种能够调控细胞周期相关蛋白清除受损干细胞种子的中药组合物，通过增强细胞周期检查点对干细胞种子增殖的调控，清除受损干细胞种子，提高干细胞种子质量。

摘要： 本发明公开了肝源性表达NG2的干细胞群(NG2+HSC)作为种子细胞在体外3‑D培养重建人工肝脏中的应用及方法，具体是将NG2+HSC注入全肝去细胞天然生物支架中，然后加入能使NG2+HSC重建为人工肝脏的培养基，模拟体内肝组织器官发育生成的微环境体外三维(3‑D)培养重建肝脏器官，本发明的培养方法简单，成本低，培养时间短，21天即能形成完成的肝脏器官样轮廓，并且培养获得的人工肝脏器官具有正常肝组织类似的肝小叶结构，同时肝脏功能性蛋白也随着培养时间的延长而增加，并且对硬化肝脏和急性肝衰竭具有修复和功能恢复作用，能作为肝移植供体使用，对临床治疗终末期肝病具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种破骨细胞前体和间充质干细胞作为种子细胞的基质依赖型组织工程骨及其构建方法，将间充质干细胞和破骨细胞前体按10:1比例，种植于多孔骨支架材料上构建组织工程复合体，再在体外加入成骨诱导培养液继续培养12～14天，在‑70～80°C冷冻48～72小时，冻干24小时～30小时，获得基质依赖型组织工程骨。体内研究结果显示，能够促进新骨形成，成功修复骨缺损。

摘要： 本发明公开了基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，将间充质干细胞和内皮祖细胞按1:1比例，种植于多孔骨支架材料上构建组织工程复合体，再在体外加入成骨诱导培养液继续培养13～15天，在‑70～80°C冷冻48～72小时，冻干24小时～30小时，冷冻保存1～3个月，获得基质依赖型组织工程骨。体外研究结果显示，用本发明方法构建的基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞的基质依赖型组织工程骨，体外能够显著促进内皮祖细胞迁移、划痕修复和管腔形成，以及促进间充质干细胞的成骨分化；体内实验显示其能够显著促进新骨形成，成功修复骨缺损。

摘要： 本发明公开了一种血液中DC细胞及CIK种子细胞的冻存方法及制备的细胞与用途，将外周血或者脐带血中的单个核细胞通过适当的处理后，冻存在自体血清中，配合细胞冻存保护剂使细胞的存活率达到80％。复苏后的细胞能够满足同时制备DC‑细胞和CIK细胞，并最终制备成能够满足临床应用需求的DC‑CIK细胞制剂。这样就能够实现单次采血进行多次DC‑CIK临床治疗的需求，从而为免疫细胞治疗的规模化发展提了支持。

摘要： 本发明公开了一种基因修饰的干细胞及用作组织工程与再生医学种子细胞的用途。本发明发现，高表达HMGN2的人脐带间充质干细胞具有更强的增殖活性和迁移活性，且多向分化试验证明该高表达HMGN2的人脐带间充质干细胞依然具有良好的多项分化能力，因此，该基因修饰的人脐带间充质干细胞可以更好地满足组织工程需求。

摘要： 本申请公开一种角质形成细胞培养并构建以自体KC为种子细胞的双层组织工程表皮的方法，(1)在无血清培养基中添加Rock抑制剂Y‑27632，接种自体皮肤来源的原代角质形成细胞，进行扩增及传代培养；分离得种子细胞；(2)将所得种子细胞经无血清培养基重悬后接种至双层三维胶原海绵支架材料中，构建双层组织工程表皮。所述双层三维胶原海绵支架材料的上层为医用硅橡胶半透膜、下层为三维多孔胶原海绵支架，所述种子细胞接种至三维多孔胶原海绵支架层。本申请解决组织工程表皮构建中自体种子细胞的快速扩增培养受限问题以及支架材料的降解、组织相容性等问题。

摘要： 本发明公开了一种CD29+人脐带源间充质干细胞及其在制备治疗骨损伤的骨组织工程种子细胞中的用途。所述CD29+人脐带源间充质干细胞，表达如下四种间充质干细胞细胞膜分子：人白细胞分化抗原CD73、人白细胞分化抗原CD90、人白细胞分化抗原CD105和人白细胞分化抗原CD29。本发明的CD29+人脐带源间充质干细胞可在大鼠体内转化成成骨细胞参与骨折愈合，且CD29+人脐带源间充质干细胞免疫源性低，可作为组织工程骨的细胞来源，再配合传统的手术治疗方案，能够达到很好的治疗效果，具有广阔的应用前景。