组织工程骨

摘要： 背景:前期研究证实多尺度羟基磷灰石/壳聚糖微管成骨优良,而血管再生在成骨过程中较为关键,探索多尺度微管结构在其成血管中的作用及相关机制意义重大.目的:探索多尺度羟基磷灰石/壳聚糖微管结构对兔骨缺损修复及成血管的影响.方法:构建多尺度羟基磷灰石/壳聚糖微管结构与羟基磷灰石/壳聚糖单体结构,将两种材料分别与骨髓间充质干细胞共培养,21 d后电镜下观察材料对细胞的吸附能力及细胞状态.在48只成年新西兰大白兔桡骨部位制作骨缺损模型,实验组(n=24)植入多尺度羟基磷灰石/壳聚糖微管结构材料,对照组(n=24)植入羟基磷灰石/壳聚糖单体结构材料,术后4,8,12周分别进行放射性核素骨显像、X射线片检查、组织形态学、CD31免疫组化染色及血管内皮生长因子蛋白检测.动物实验得到江西省人民医院伦理委员会批准.结果与结论:①电镜下可见,多尺度羟基磷灰石/壳聚糖微管结构材料孔隙相通,具有良好的空间结构,其表面吸附的骨髓间充质干细胞多于羟基磷灰石/壳聚糖单体结构材料.②放射性核素骨显像显示,实验组术后各时间点的血池成像均高于对照组(P < 0.05).③X射线片显示,实验组各时间点的骨痂形成多于对照组.④苏木精-伊红染色显示,实验组术后12 周时骨缺损植骨区域内可见大量的新生血管及成骨,对照组术后12周时仅见骨折断端少许再生血管及成骨细胞附着;CD31免疫组化染色显示,实验组各时间点的微血管密度高于对照组(P < 0.05).⑤Western Blot检测显示,实验组各时间点的血管内皮生长因子蛋白表达均高于对照组(P < 0.05).⑥结果表明,多尺度羟基磷灰石/壳聚糖微管结构材料较其单体结构具有更加良好的成骨与成血管能力.

摘要： 背景:由于羟基磷灰石与高分子材料的理化性质差异较大、界面相容性差且本身容易聚集,导致复合材料的力学和生物学性能较差,限制了其在组织工程骨中的应用.目的:综述近年来羟基磷灰石表面改性用于制备组织工程骨的方法,并对这些方法的反应机制、作用影响进行简述.方法:在万方、中国知网、维普、PubMed、PubMed Central Medine及谷歌学术等数据库中,以"温敏型凝胶,缓释,给药途径"为中文检索词,以"hydroxyapatite,surface modification,tissue engineered bone"为英文检索词,检索羟基磷灰石表面改性作为组织工程骨支架的研究进展方面的文章.结果 与结论:迄今已有多种材料表面改性方法,如表面活性剂、硅烷偶联剂及接枝聚合物等,已经取得一定进展,但是单一一种改性方法的效果仍有限,可考虑将两种或多种改性方法及改性剂结合使用,相互取长补短,取得更好的改性效果.表面改性不仅要改善羟基磷灰石的分散性,提高复合材料的力学性能,还要将具有生物活性、能够促进骨组织再生的生物活性因子、多肽等固定在羟基磷灰石表面,进而改善复合材料的生物学性能,实现对羟基磷灰石性能的调控,制备性能优良的组织工程骨.

摘要： 背景:临界骨缺损的修复一直是困扰临床外科医生的关键问题,骨组织工程研究提供了解决该问题的新思路.如何加快组织工程骨的血管化,进而促进种子细胞的成骨分化是骨组织工程研究中的关键问题.目的:探讨血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培养体系与部分脱蛋白生物骨构建组织工程骨修复骨缺损的能力.方法:体外构建3种组织工程骨:部分脱蛋白生物骨+血管内皮细胞、部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞、部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞(血管内皮细胞:脂肪干细胞比例为1:1),以单纯部分脱蛋白生物骨为对照组.取18周龄SD大鼠60只,随机分为5组,每组12只,分别将4种支架材料植入相应的SD大鼠下颌骨骨缺损处,空白对照组仅制造骨缺损,不做修复.术后2,4,8,12周处死动物行大体观察、X射线检查、苏木精-伊红染色和Masson染色组织学观察,并取Masson染色切片行骨胶原定量检测.结果 与结论:①大体观察示术后部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞组骨支架降解最快,修复骨缺损能力强于其他组,空白对照组骨缺损未被修复;②X射线片示术后8周时部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞组出现骨性联合,骨缝消失,至12周时骨密度明显增加,骨形态已经基本恢复正常;其他组至12周时材料大体形态依然存在,空白对照组骨缺损未被修复;③组织学观察可见部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞组与单纯部分脱蛋白生物骨组比较差异无显著性意义(P=0.607>0.05),部分脱蛋白生物骨+血管内皮细胞组与部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞组比较差异有显著性意义(P=0.011<0.05),其余各组两两比较差异均有非常显著性意义(P<0.01);④结果表明,联合培养细胞构建的组织工程骨修复骨缺损能力最强,血管内皮细胞的影响力大于脂肪干细胞.

摘要： 背景:由于羟基磷灰石与高分子材料的理化性质差异较大、界面相容性差且本身容易聚集,导致复合材料的力学和生物学性能较差,限制了其在组织工程骨中的应用。目的:综述近年来羟基磷灰石表面改性用于制备组织工程骨的方法,并对这些方法的反应机制、作用影响进行简述。方法:在万方、中国知网、维普、PubMed、PubMed Central Medine及谷歌学术等数据库中,以"温敏型凝胶,缓释,给药途径"为中文检索词,以"hydroxyapatite,surface modification,tissue engineered bone"为英文检索词,检索羟基磷灰石表面改性作为组织工程骨支架的研究进展方面的文章。结果与结论:迄今已有多种材料表面改性方法,如表面活性剂、硅烷偶联剂及接枝聚合物等,已经取得一定进展,但是单一一种改性方法的效果仍有限,可考虑将两种或多种改性方法及改性剂结合使用,相互取长补短,取得更好的改性效果。表面改性不仅要改善羟基磷灰石的分散性,提高复合材料的力学性能,还要将具有生物活性、能够促进骨组织再生的生物活性因子、多肽等固定在羟基磷灰石表面,进而改善复合材料的生物学性能,实现对羟基磷灰石性能的调控,制备性能优良的组织工程骨。

摘要： 背景:临界骨缺损的修复一直是困扰临床外科医生的关键问题,骨组织工程研究提供了解决该问题的新思路。如何加快组织工程骨的血管化,进而促进种子细胞的成骨分化是骨组织工程研究中的关键问题。目的:探讨血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培养体系与部分脱蛋白生物骨构建组织工程骨修复骨缺损的能力。方法:体外构建3种组织工程骨:部分脱蛋白生物骨+血管内皮细胞、部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞、部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞(血管内皮细胞∶脂肪干细胞比例为1∶1),以单纯部分脱蛋白生物骨为对照组。取18周龄SD大鼠60只,随机分为5组,每组12只,分别将4种支架材料植入相应的SD大鼠下颌骨骨缺损处,空白对照组仅制造骨缺损,不做修复。术后2,4,8,12周处死动物行大体观察、X射线检查、苏木精-伊红染色和Masson染色组织学观察,并取Masson染色切片行骨胶原定量检测。结果与结论:①大体观察示术后部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞组骨支架降解最快,修复骨缺损能力强于其他组,空白对照组骨缺损未被修复;②X射线片示术后8周时部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞+血管内皮细胞组出现骨性联合,骨缝消失,至12周时骨密度明显增加,骨形态已经基本恢复正常;其他组至12周时材料大体形态依然存在,空白对照组骨缺损未被修复;③组织学观察可见部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞组与单纯部分脱蛋白生物骨组比较差异无显著性意义(P=0.607>0.05),部分脱蛋白生物骨+血管内皮细胞组与部分脱蛋白生物骨+脂肪干细胞组比较差异有显著性意义(P=0.011<0.05),其余各组两两比较差异均有非常显著性意义(P<0.01);④结果表明,联合培养细胞构建的组织工程骨修复骨缺损能力最强,血管内皮细胞的影响力大于脂肪干细胞。

摘要： 患者,男,13岁,主因“右侧尺骨干大段骨缺损、骨水泥填充术后5个月”入院。患者于2017年8月无明显诱因出现右前臂肿痛,到当地医院就诊,行前臂穿刺、脓液引流、给予抗生素等对症治疗,4个月后出现右前臂皮肤窦道形成,遂就诊于空军军医大学西京医院,门诊以“右尺骨骨髓炎”收住院治疗,入院后行“右尺骨干骨髓炎病灶探查清除、滴注引流、外固定架固定术”。

摘要： 背景:组织工程骨为大型骨缺损修复提供了新方向,但只有早期形成完善的毛细血管网才能保证移植物在体内的长期存活,因此早期组织工程骨的血管化是其临床应用的关键所在。目的:探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)复合羟基磷灰石-磷酸三钙(hydroxyapatite tertiary calcium phosphate,HA-TCP)支架对大鼠颅骨缺损修复早期血管生成的影响。方法:①将HA-TCP支架分4组处理:A组加入体积比1∶1的DMEM培养液与细胞外基质培养液;B组加入体积比1∶1的BMSCs悬液与HUVECs悬液;C组加入体积比1∶1的DMEM培养液与HUVECs悬液,D组加入体积比1∶1的BMSCs悬液与细胞外基质培养液,培养21 d后用于体内植入实验。②在成年SD大鼠颅骨制作直径1 cm骨缺损,分别植入A、B、C、D组材料,术后4,8,12周,分别进行颅骨Micro-CT及颅骨支架复合物大体、组织形态学、CD31/CD34免疫组化染色、CD31/CD34分子含量、血管内皮生长因子A蛋白检测。动物实验已获得西南医科大学动物伦理委员会批准。结果与结论:①Micro-CT检测:术后8周时,B组新生骨质量高于其他3组,C、D组高于A组;术后12周时,新生骨质量由高到低依次为:B组>C组>D组>A组;②大体观察:B组支架上骨质爬行面积高于其他3组,C、D组高于A组;相同时间点下血性渗液量由多到少依次为:B组>C组>D组>A组;③组织学观察:术后4周时,骨质新生量由高到低依次为:B组>C组>D组>A组,其余时间点骨质新生量由高到低依次为:B组>D组>C组>A组;④免疫组化染色:相同时间点下CD31/CD34微血管密度由高到低依次为:B组>C组>D组>A组,除C、D组无差异无外(P>0.05),其余组间比较差异有显著性意义(PC组>D组>A组,除C、D组无差异外(P>0.05),其余组间比较差异有显著性意义(P<0.05);⑥结果表明,BMSCs与HUVECs复合HA-TCP支架材料移植修复大鼠颅骨缺损具有较强的早期血管化能力。

摘要： 背景:目前临床上治疗骨缺损的标准方法为自体骨移植,但是自体骨来源受限且会造成新的创伤和缺损,因此开发符合人体工程学的组织工程骨成为骨缺损修复的趋势.目的:总结归纳了胶原/无机材料构建组织工程骨的特点及制造技术.方法:以“胶原;无机材料;组织工程骨;骨修复;支架几何结构”等为中文关键词,以“collagen;inorganic materials;tissue-engineered bone;bone repair;geometry of bone scaffold”等为英文关键词,检索2000年1月至2020年1月收录在PubMed、Web of Science 和2010至2020年中国知网数据库中关于胶原/无机材料复合支架应用研究的文献.结果 与结论:应用仿生原理,采用胶原复合无机材料模拟天然骨的成分、结构及特性来构建组织工程骨,是骨移植材料研究领域的重要方向.胶原为支架材料提供细胞外基质微环境,促进细胞在支架上的迁移、黏附及增殖,且加速支架在体内的降解,使复合支架具有良好的生物相容性和骨诱导性.选择合适的制造技术改变胶原/无机材料支架的几何结构,达到最佳的三维多孔纳米级结构,可促进细胞的黏附与增殖,增强胶原/无机材料支架的骨再生能力.同时对胶原/无机材料支架进行表面修饰和改性,将具有成骨或成血管潜能的干细胞、生物因子及聚合物复合到胶原/无机材料支架上,改善胶原/无机材料支架的机械性能差、结构稳定性不足、骨再生能力有限等缺点,为组织工程骨移植材料的选择提供良好的思路.

摘要： 背景:羟基磷灰石/明胶复合材料具有良好的生物相容性及骨诱导性,可作为组织工程支架用于修复骨缺损.目的:观察3D打印羟基磷灰石/明胶支架复合骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞修复兔颅骨缺损的效果.方法:取9只雄性新西兰白兔,建立直径约0.8 cm的颅骨缺损模型,分3组处理:空白组不做处理,对照组植入3D打印羟基磷灰石/明胶支架,实验组植入3D打印羟基磷灰石/明胶支架与骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞复合物,每组3只.术后第8周,对各组白兔进行颅骨锥形束CT扫描与颅骨缺损部位组织学观察.动物实验获得济宁医学院伦理委员会批准.结果 与结论:①锥形束CT扫描:空白组可见明显的骨缺损,缺损区域与周围正常骨组织边缘有点状不透射影;对照组可见有部分新生骨形成,呈不连续状,与周围骨组织亦不连贯;实验组可见新生骨组织呈线性连续,厚度较薄,缺损区域与邻近骨组织边缘融合;②组织学观察:苏木精-伊红染色与Masson三色显示,空白组缺损区见纤维结缔组织生成及少量游离骨细胞;对照组可见少量成骨,材料边缘可见有骨基质沉积,取代材料形成骨小梁;实验组材料空间逐渐被新生骨代替,新生骨和骨小梁结构样组织充填于缺损区域;③结果表明,3D仿生打印羟基磷灰石/明胶支架复合骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞可有效促进骨组织的生长,加快骨缺损修复.

摘要： 背景:组织工程骨为大型骨缺损修复提供了新方向,但只有早期形成完善的毛细血管网才能保证移植物在体内的长期存活,因此早期组织工程骨的血管化是其临床应用的关键所在.目的:探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)复合羟基磷灰石-磷酸三钙(hydroxyapatite tertiary calcium phosphate,HA-TCP)支架对大鼠颅骨缺损修复早期血管生成的影响.方法:①将HA-TCP支架分4组处理:A组加入体积比1:1的DMEM培养液与细胞外基质培养液;B组加入体积比1:1的BMSCs悬液与HUVECs悬液;C组加入体积比1:1的DMEM培养液与HUVECs悬液,D组加入体积比1:1的BMSCs悬液与细胞外基质培养液,培养21 d后用于体内植入实验.②在成年SD大鼠颅骨制作直径1 cm骨缺损,分别植入A、B、C、D组材料,术后4,8,12周,分别进行颅骨Micro-CT及颅骨支架复合物大体、组织形态学、CD31/CD34免疫组化染色、CD31/CD34分子含量、血管内皮生长因子A蛋白检测.动物实验已获得西南医科大学动物伦理委员会批准.结果 与结论:①Micro-CT检测:术后8周时,B组新生骨质量高于其他3组,C、D组高于A组;术后12周时,新生骨质量由高到低依次为:B组>C组>D组>A组;②大体观察:B组支架上骨质爬行面积高于其他3组,C、D组高于A组;相同时间点下血性渗液量由多到少依次为:B组>C组>D组>A组;③组织学观察:术后4周时,骨质新生量由高到低依次为:B组>C组>D组>A组,其余时间点骨质新生量由高到低依次为:B组>D组>C组>A组;④免疫组化染色:相同时间点下CD31/CD34微血管密度由高到低依次为:B组>C组>D组>A组,除C、D组无差异无外(P>0.05),其余组间比较差异有显著性意义(PC组>D组>A组,除C、D组无差异外(P>0.05),其余组间比较差异有显著性意义(P<0.05);⑥结果表明,BMSCs与HUVECs复合HA-TCP支架材料移植修复大鼠颅骨缺损具有较强的早期血管化能力.

摘要： 当因各种疾患引起患者大块颌骨缺损时,重建骨组织并恢复面部外形及咀嚼功能,提高患者临床生存质量极为重要.对于超过6-8mm的骨缺损一般可以称为大块骨缺损,临床上结合缺损的部位、病因、程度,选择合适的治疗方案.现阶段的主要治疗方法有自体或异体骨移植、外来材料种植、及组织工程技术(再生医学)。相对于其它方法,组织工程骨具有能避免供区二次损伤,无免疫排斥反应及疾病传播等优点,为最终实现无损伤骨缺损修复开辟了一条新途径。骨组织工程的四个基本要素为种子细胞、支架材料、生长因子和生物力学微环境。传统组织工程骨缺损修复是将种子细胞接种到支架材料,经过一定时间的体外培养后,移植到体内继续构建。但组织工程骨也有自身的缺点：没有血供系统。营养物质的供给和代谢产物的排出主要通过有限的弥散和渗透,这阻碍了大块组织的构建。所以目前,组织工程骨仅限于修复体积小、厚度薄的骨缺损,也仅处在动物实验阶段。我们通过以下方面的研究,尝试解决大块组织工程骨构建中的一些难题。

摘要： 目的：基于间充质干细胞(MSC)的组织工程策略是治疗大节段骨缺损最有希望的手段之一.然而,移植的外源性MSC促进成骨修复的具体作用机制不清,极大地限制了组织工程骨(TEB)的进一步发展和应用.本研究的目的在于探索在骨缺损修复早期炎症阶段外源性MSC的间接作用方式及相关机制. 方法：将GFP小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSC)接种于部分脱钙骨基质(pDBM)支架构建TEB.利用本课题组前期制备的小鼠双侧大节段股骨缺损模型,以GFP+转基因小鼠为受体,左右侧股骨缺损分别移植以TEB或pDBM支架.术后,在指定的时间点通过免疫荧光观察宿主CD14+单核/巨噬细胞(Mc/Mp)及CD34+内皮祖细胞(EPCs)的募集情况;通过RT-PCR及拮抗实验鉴定介导宿主细胞迁移的主要趋化因子及相关受体;通过组织学染色评价各组成骨修复能力及供体/宿主细胞对成骨修复的贡献. 结果：外源性MSC的移植显著促进成骨修复,然而在TEB介导的成骨效应中,外源性MSC的直接贡献比例低于10％.在骨缺损修复早期炎症阶段,移植的外源性MSC显著促进宿主Mc/Mp及EPCs的募集,募集高峰分别出现在术后第7天及第10天.宿主Mc/Mp的募集主要归因于单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其主要作用受体CCR2的表达升高.然而,宿主EPCs的募集与既往研究鉴定的主要作用因子SDF-1关系不大. 结论：TEB介导的骨缺损修复主要归因于MSC的间接作用,即其募集的宿主细胞的贡献.在早期炎症阶段,外源性MSC通过释放趋化因子募集宿主Mc/Mp及EPCs至缺损处,对抗局部的缺氧缺血微环境,显著促进成骨修复效果.对此开展更深入的研究将有助于揭示移植MSC的间接作用机制,为TEB的进一步研究和发展提供理论基础.

摘要： 目的：通过术后随访评价对比,分析个体化组织工程骨修复骨纤维异常增殖症术后骨缺损的临床疗效. 方法：回顾性分析2004年-2008年10例个体化组织工程骨病例(组织工程骨组)和10例同种异体骨病例(异体骨组)移植修复重建骨纤维异常增殖症刮除术后骨缺损的临床资料.比较两种方法的愈合时间、骨性愈合评分、并发症发生率及植骨失败率,评价组织工程骨治疗骨纤维异常增殖症的临床疗效. 结果：组织工程骨组10例平均随访63.6±19.6月,患者1例术后2年出现病理骨折再次手术,其余9例患者术后骨缺损获得良好修复,愈合时间3.3+1.6月,骨性愈合评分2.6±0.5分.异体骨组10例平均随访55.1±15.4月,1例术后2年出现复发,3例出现骨移植区疼痛、局部肿胀等并发症,骨缺损均获得良好修复,愈合时间6.0±2.4月,骨性愈合评分2.4±0.8分.两组之间在并发症发生率以及愈合评分方面的差异无统计学意义(P＞0.05);在愈合时间方面的差异有统计学意义(P＜0.05). 结论：运用个体化组织工程骨在治疗骨纤维异常增殖症能获得与不劣于同种异体骨疗效且具有较高的生物安全性,组织工程骨在修复骨缺损愈合时间上优于同种异体骨.

摘要： 目的:检测组织工程骨中牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)残余量,并探讨减少其残留量的方法.rn 方法:体外分离培养人骨髓基质干细胞,接种完全脱钙骨支架材料并体外成骨诱导2周,构建组织工程骨.组织工程骨先经1:100 (v:v)生理盐水浸洗3次,然后加入磷酸盐缓冲液,37°C振荡浸提24h,获取浸提液.采用酶联免疫法检测其中BSA的残余量.以单纯支架材料作为对照组,比较二者单位重量材料中残余BSA含量.rn 结果:随洗涤次数增多，组织工程骨样品洗涤液中BSA含量明显降低。单位重量组织工程骨与单纯支架材料的BSA残余量分别为0.2808±0.1713 ng/mg和0.2104±0.1117ng/mg，两者相比无显著性差异。rn 结论:酶联免疫法适用于组织工程骨中BSA残余量的检测。因为支架材料较细胞更为容易吸附BSA，现有条件下构建的组织工程骨BSA残余量仍然较高，需要继续探索降低BSA残余量的新方法。

摘要： 目的:使用快速成型(RP)技术制造的β-TCP支架联合兔成骨细胞进行体外灌注接种和培养以构建理想化的组织工程骨,探究其体内修复骨缺损的能力.rn 方法:以RP技术制备的可控微结构β-TCP支架为载体进行兔成骨细胞的灌注接种和灌注培养(PSPC),以静态接种和静态培养(SSSC)以及静态接种和灌注培养(SSPC)方法为对照,对比三种方法的细胞增殖和分布情况.将组织工程骨植入兔桡骨节段性骨缺损,加以缺损旷置、自体骨和单纯β-TCP支架为对照,通过影像学和组织学检查比较骨缺损的修复效果.rn 结果:FSPC组的葡萄糖日耗量、细胞活力和碱磷酶活性显著高于SSPC和SSSC组(P＜0.05)且PSPC组的细胞数量高于SSPC和SSSC组(P＜0.05)且细胞分布更均匀。植入兔桡骨缺损12周后自体骨组6例全部愈合(6/6), PSPC组有4例愈合(4/6)SSPC组有2例愈合(2/6)，其余各组缺损均未愈合。PSPC组的新骨生成量和生成速度显著高于SSPC组、SSSC组和单纯β-TCP组(P＜0.05)。新生骨主要分布在支架的近尺骨端，部分未降解的材料仍可见。rn 结论:RP技术制造的β-TCP支架联合灌注接种和培养系统使构建理想化的组织工程骨成为可能，然而尽管其修复节段性骨缺损的效果优于SSSC法和SSPC法，但仍低于自体骨。为了克服其植入后营养供应障碍，RP支架的降解性和体内血管化问题有待研究。

摘要： 目的:通过长时间的临床随访观察个体化组织工程骨用以修复患者长骨缺损的疗效与安全性.rn 方法:通过对2004年1月-2008年12月,采用自体骨髓进行分离、培养,获取间充质干细胞1.8-2×106个/ml与经过预处理的自制DBM支架复合构建个体化的组织工程骨,经体外培养5d后,植入修复30例骨缺损.男18例,女12例;年龄6～45岁,中位年龄25.5岁.其中鼓囊性病变20例,新鲜骨折3例,陈旧性骨折不愈合4例,慢性化脓性骨髓炎1例,骨肿瘤2例.每例患者植入自体干细胞构建的个体化组织工程骨5-45g,平均12g,通过临床随访其放射学及血液学结果评价其疗效与安全性.rn 结果:30例患者术后切口均Ⅰ期愈合，术后获随访4-8年，除1例慢性骨髓炎复发以及3例陈旧性骨折出现骨不连，其余植骨均在3~5月达骨性愈合，随访资料显示成骨速度及效果均与自体骨类似，且术后肝肾功、血沉等指标均无明显异常，X线片检查:骨缺损基本愈合，骨皮质连续，重塑良好。患肢功能能满足日常生活及工作需要。最长随访达8年未发现病灶复发。rn 结论:由患者自体间充质干细胞构建的组织工程骨临床应用中期效果良好，具有良好的生物安全性和成骨效能。

摘要： 目的:大段骨缺损后构建的组织工程骨中间的营养供应是影响其修复效果的重要因素之一,其根源是缺乏有效的血液供应,如何在早期即可具有良好的血管形成是研究者追随的目标.通过VEGF缓释和周期性压应力来协同处理血管内皮细胞并观察其变化,为探讨新的织工程骨血管化策略提供实验依据.rn 方法:将多聚赖氨酸包被的VEGF藻酸盐缓释微球与血管内皮细胞共培养,通过模拟山羊步态的周期性压应力刺激仪来作用于VEGF藻酸盐缓释微球,观察缓释的VEGF和血管化策略对内皮细胞的效应.rn 结果:通过累计释放曲线观察到周期性的压应力可以促进VEGF的释放，缓释的VEGF可以促进血管内皮细胞的增殖，缓释的VEGF和周期性压应力可以促进内皮细胞分泌MMP-2,MMP-9,Flk-1，这些均与早期的血管化密切相关。rn 结论:缓释的VEGF和周期性压应力可以促进内皮细胞的增殖和加速其分泌早期血管形成相关的金属蛋白质酶和受体，可能具有加速组织工程骨血管化的效应。

摘要： 目的:组织工程骨体内植入后的早期血运尚未建立,材料上复合的骨髓基质干细胞营养供给不足,成骨分化功能受限.针对该问题,尝试在组织工程骨体内植入部位局部长期灌注淫羊藿苷培养基,在营养供给的同时促进成骨分化,探索在体内环境下早期构建组织工程骨的方法.rn 方法:36只兔子随机分成A、B、C3组,制造1.5cm桡骨骨缺损,A组为BMSC复合β-TCP材料,并在植入处局部灌注浓度为10-6mol/L的淫羊藿苷培养基;B组为BMSC复合β-TCP材料,无局部灌注;C组为单纯β-TCP材料组,无BMSC复合及局部灌注.术后4周、8周、12周对骨缺损修复效果进行大体观察、影像学、骨密度、组织形态学评估,比较各组骨修复效果.rn 结果:大体观察、影像学观察、骨密度检测、组织形态学结果均显示，各时间点A组组织工程骨植入的成骨效果明显好于其他两组，其中第4周时差异最明显;而B组的成骨效果又明显好于C组。以上所有差异都具有显著性，P＜0.05。rn 结论:局部灌注淫羊藿普培养基能够提高组织工程骨的体内植入效果，并在植入的早期效果更明显。

摘要： 探讨骨形成蛋白9(Bone morphogenetic protein9,BMP9)基因修饰的大鼠牙囊干细胞(rat dental follicle stem cells,rDFCs)联合珊瑚羟基磷灰石生物玻璃陶瓷(Coralline hydroxyapatite,CHA)修复大鼠急性牙槽骨缺损的体内实验研究.

摘要： 探讨骨形成蛋白9(Bone morphogenetic protein9,BMP9)基因修饰的大鼠牙囊干细胞(rat dental follicle stem cells,rDFCs)联合珊瑚羟基磷灰石生物玻璃陶瓷(Coralline hydroxyapatite,CHA)修复大鼠急性牙槽骨缺损的体内实验研究.

摘要： 本发明公开了提供了一种用于治疗感染性大段骨缺损组织工程骨支架及其制备方法和应用，其中制备方法，包括：1)将脱钙骨基质支架浸泡于氯化钙溶液中；2)将含有IFN‑γ的海藻酸钠溶液与适量万古霉素溶液混合均匀，得到黏稠溶液；3)将黏稠溶液缓慢滴注至步骤1)所述脱钙骨基质的孔隙中，静置，形成复合支架；4)以去离子水将所述复合支架洗净后，于‑70°C冻存后再低压冻干，直至重量不再变化；5)将步骤4)得到的材料浸入含纤维蛋白原的KH2PO4溶液中缓慢搅动后，再浸入凝血酶溶液中缓慢搅动一段时间，取出并于室温风干，即得组织工程骨支架。本发明还公开了其制备的组织工程骨支架及其应用。本发明提供的组织工程骨支架可序贯释放炎症因子，促进血管生成并预防感染。

摘要： 本发明提供了一种组织工程骨修复用纤维和骨修复支架及其制备方法。本发明所述的组织工程骨修复用纤维具有内外双层结构，内层为纤维整体提供了合适的力学强度，外层能够有效维持细胞的活性和功能性，将所述组织工程骨修复用纤维应用于制备组织工程骨修复支架，所制备得的组织工程骨修复支架能很好地保持细胞活性，具有优异的快速成骨和成血管的功能，且具有良好力学性能。

摘要： 本发明公开了一种骨缺损再生修复组织工程骨及其构建方法与应用，组织工程骨由三层骨髓间充质干细胞聚合体与两层骨基质颗粒构成的复合层状结构体；复合层状结构体是由骨髓间充质干细胞聚合体‑骨基质颗粒‑骨髓间充质干细胞聚合体‑骨基质颗粒‑骨髓间充质干细胞聚合体组成的复合体；骨髓间充质干细胞聚合体包括骨髓间充质干细胞以及由骨髓间充质干细胞分泌的并分布在骨髓间充质干细胞周围的胞外基质。采用本发明构建方法形成的组织工程骨同时复合活细胞及活性因子，修复重建过程快速，新生骨与周边自体骨结合完整、厚度一致，适用于骨缺损再生修复，实现了骨的生理再生并提高了骨缺损的修复治疗效果。

摘要： 本发明公开了一种基于软骨内成骨体系的组织工程骨，是将间充质干细胞种植于多孔骨支架材料上构建组织工程复合体，再在体外对其进行成软骨分化诱导培养2周，继而进行成肥大化软骨分化诱导培养2周获得。体内研究结果显示，用本发明方法构建的基于软骨内成骨体系的组织工程骨能够在体内异位成骨，并成功修复骨缺损，避免了大块组织工程骨如何均匀血管化和保证足够营养供给的难题，在组织工程骨构建及骨缺损修复中有着良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种可局部调节成破骨活性的组织工程骨支架及制备方法，通过将组织工程骨材料浸润在双磷酸盐溶液中，使双磷酸盐复合在组织工程骨材料上。本发明制备的组织工程骨支架适用于负重区骨缺损修复,能够更好的维持植入骨力学性能稳定，能够抑制宿主对植入骨材料的吸收降解作用，能够更长久的给予力学支撑；并且能够局部缓慢释放出双磷酸盐，局部抑制破骨细胞导致的骨吸收作用和促进成骨细胞的骨生成作用，能够局部调节成破骨活性，促进植入骨材料与宿主骨的整合，有利于骨修复的爬行替代过程，对骨修复具有巨大的优势。

摘要： 本发明提供一种骨缺损修复材料及镁预处理脱细胞组织工程骨支架，该骨缺损修复材料包括载体以及负载于所述载体上的成骨促进剂，载体采用股骨，成骨促进剂主要由镁离子、以及镁离子与镁棒植入共同刺激后生成的生长因子及BMSCs形成。应用骨缺损修复材料制成的镁预处理脱细胞组织工程骨支架，能解决现有骨组织工程支架制作程序复杂、造价昂贵、治疗效果不确切及周期过长、骨缺损修复效果欠佳的问题，其具有制作程序简单、造价低、促进成骨作用较好等优点。

摘要： 本发明公开了提供了一种用于治疗感染性大段骨缺损组织工程骨支架及其制备方法和应用，其中制备方法，包括：1)将脱钙骨基质支架浸泡于氯化钙溶液中；2)将含有IFN‑γ的海藻酸钠溶液与适量万古霉素溶液混合均匀，得到黏稠溶液；3)将黏稠溶液缓慢滴注至步骤1)所述脱钙骨基质的孔隙中，静置，形成复合支架；4)以去离子水将所述复合支架洗净后，于‑70°C冻存后再低压冻干，直至重量不再变化；5)将步骤4)得到的材料浸入含纤维蛋白原的KH2PO4溶液中缓慢搅动后，再浸入凝血酶溶液中缓慢搅动一段时间，取出并于室温风干，即得组织工程骨支架。本发明还公开了其制备的组织工程骨支架及其应用。本发明提供的组织工程骨支架可序贯释放炎症因子，促进血管生成并预防感染。

摘要： 本发明提供了一种组织工程骨修复用纤维和骨修复支架及其制备方法。本发明所述的组织工程骨修复用纤维具有内外双层结构，内层为纤维整体提供了合适的力学强度，外层能够有效维持细胞的活性和功能性，将所述组织工程骨修复用纤维应用于制备组织工程骨修复支架，所制备得的组织工程骨修复支架能很好地保持细胞活性，具有优异的快速成骨和成血管的功能，且具有良好力学性能。

摘要： 本发明公开了一种骨缺损再生修复组织工程骨及其构建方法与应用，组织工程骨由三层骨髓间充质干细胞聚合体与两层骨基质颗粒构成的复合层状结构体；复合层状结构体是由骨髓间充质干细胞聚合体-骨基质颗粒-骨髓间充质干细胞聚合体-骨基质颗粒-骨髓间充质干细胞聚合体组成的复合体；骨髓间充质干细胞聚合体包括骨髓间充质干细胞以及由骨髓间充质干细胞分泌的并分布在骨髓间充质干细胞周围的胞外基质。采用本发明构建方法形成的组织工程骨同时复合活细胞及活性因子，修复重建过程快速，新生骨与周边自体骨结合完整、厚度一致，适用于骨缺损再生修复，实现了骨的生理再生并提高了骨缺损的修复治疗效果。

摘要： 本发明公开了一种可局部调节成破骨活性的组织工程骨支架及制备方法，通过将组织工程骨材料浸润在双磷酸盐溶液中，使双磷酸盐复合在组织工程骨材料上。本发明制备的组织工程骨支架适用于负重区骨缺损修复,能够更好的维持植入骨力学性能稳定，能够抑制宿主对植入骨材料的吸收降解作用，能够更长久的给予力学支撑；并且能够局部缓慢释放出双磷酸盐，局部抑制破骨细胞导致的骨吸收作用和促进成骨细胞的骨生成作用，能够局部调节成破骨活性，促进植入骨材料与宿主骨的整合，有利于骨修复的爬行替代过程，对骨修复具有巨大的优势。