软骨细胞

摘要： 背景:支架材料与生物因子在不同条件下复合培养对软骨细胞功能的影响,是组织工程材料研究的热点。目的:探讨动态环境下透明质酸与国产多孔钽复合对大鼠软骨细胞功能的影响。方法:分离培养SD大鼠膝关节软骨细胞,分5组培养:A组单纯细胞静态培养;B组接种于国产钽片上静态培养;C组接种于国产钽片上,加入含透明质酸的培养基,静态培养;D组接种于国产钽片上,置于动态转瓶中(双向交替正反转,旋转角度为40°,40 r/h)培养;E组接种于国产钽片上,加入含透明质酸的培养基,置于动态转瓶中(双向交替正反转,旋转角度为40°,40 r/h)培养,5组均连续培养7 d。扫描电镜下观察材料上的细胞形态,采用ELISA法检测细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、SOX9的分泌情况,Western Blot实验检测细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、SOX9蛋白的表达。结果与结论:①扫描电镜下可见,随着静态培养时间的延长,C组软骨细胞数量逐渐增多,并逐渐覆盖钽材料表面;②培养第5天,C组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原分泌量均高于A、B组(P<0.05),D组SOX9分泌量低于E组(P<0.05),B组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原分泌量低于D组(P<0.05),C组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原分泌量低于E组(P<0.05);③培养第5天,C组Ⅱ型胶原蛋白表达量高于B组(P<0.05),D组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量高于B组(P<0.05),E组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量高于C组(P<0.05);④结果表明,国产多孔钽与透明质酸复合后可促进软骨细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的分泌和蛋白表达,动态环境培养下蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的分泌及蛋白表达优于静态环境培养,SOX9的分泌及蛋白表达不受动、静态培养环境影响。

摘要： 背景:体外冲击波是一种新兴的治疗方法,被广泛应用于各个医疗领域,对骨关节炎的发生发展具有重要作用。目的:通过研究体外冲击波对大鼠骨关节炎软骨细胞增殖和自噬的影响,探讨体外冲击波在治疗骨性关节炎过程中的作用机制。方法:选取清洁级1周龄SD大鼠,获取四肢关节软骨进行原代软骨细胞的分离与培养。将第3代软骨细胞按随机数表法随机分为对照组(未加任何处理)、白细胞介素1β组(10μg/L白细胞介素1β刺激24 h)、体外冲击波组(1.5×10^(5)Pa体外冲击波干预500次)、白细胞介素1β+体外冲击波组(10μg/L白细胞介素1β刺激24 h后1.5×10^(5)Pa体外冲击波干预500次)。CCK-8法检测各组软骨细胞活力和增殖情况,实时荧光定量PCR法检测各组软骨细胞自噬基因Beclin 1、P62、Atg5和LC3 mRNA的表达。结果与结论:①与对照组相比,白细胞介素1β组软骨细胞活力和增殖能力下降(P<0.05);与白细胞介素1β组相比,白细胞介素1β+体外冲击波组软骨细胞活力和增殖能力有所提高(P<0.05);②与对照组相比,白细胞介素1β组自噬基因Beclin 1、Atg5和LC3的表达下降,P62的表达增加(P<0.05);与白细胞介素1β组相比,白细胞介素1β+体外冲击波组自噬基因Beclin 1、Atg5和LC3的表达显著增加,P62表达下降(P<0.05);③结果表明,体外冲击波可促进骨关节炎软骨细胞增殖,并提高骨关节炎软骨细胞的自噬水平,从而参与调节骨关节炎的进展。

摘要： 背景:机械敏感通道蛋白Piezo1是机械应力刺激的重要靶蛋白,能将物理的机械力转化成生物电信号,从而调控骨形成与骨吸收,在抗骨质疏松中发挥着重要作用。目的:总结机械应力刺激在抗骨质疏松中的作用机制、Piezo1分子生物学研究进程及Piezo1在骨质疏松中的研究进展。方法:使用计算机在中国知网、万方、维普、PubMed及Web of Science数据库进行文献检索,中文检索词为“骨质疏松、Piezo1、机械应力、骨”,英文检索词为“osteoporosis,Piezo1,mechanical,osteoblast,osteoclast,chondrocyte,bone”,根据纳排标准对文献进行筛选,最终纳入65篇文献进行综述。结果与结论:①机械敏感通道蛋白Piezo1的蛋白结构在冷冻电镜技术突破中不断得到新的解析,目前研究表明Piezo1蛋白基于三叶螺旋桨状三维构造主体,在静默和应激状态下可表现出不同的结构变化;②Piezo1介导的机械应力刺激能通过调控成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、肠道细胞的功能影响骨形成,同时调控破骨细胞的功能影响骨吸收,进而在抗骨质疏松中发挥重要作用;③Piezo1介导的机械应力刺激主要通过Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞功能影响骨形成;而其对破骨细胞功能的调节,因机械力的类型、大小、作用时间的不同而对骨吸收有双向调节作用,需进一步量化的研究;④未来基于Piezo1在骨质疏松中的临床研究、骨质疏松动物模型研究、破骨细胞的相关机制及新型复合材料研究仍需更多的关注。

摘要： 背景:靶向铁过载基因调节铁死亡或许是一种较快且有效延缓骨关节炎退变的方法,但目前对骨关节炎铁死亡相关分子机制及基因靶点尚不清楚。目的:通过生物信息学分析铁死亡在骨关节炎中的关键基因和途径,结合体外实验验证骨关节炎中铁死亡标记基因,探讨铁死亡在骨关节炎中的潜在作用。方法:以“Osteoarthritis”为检索词,通过GEO数据库检索2010-01-01/2021-01-01的公开数据,筛选得到基因微阵列数据集GSE55235,对GSE55235数据集进行数据矫正后分析获得差异表达基因;利用FerrDb数据库检索得到铁死亡相关基因与GSE55235数据集差异表达基因作交集,对交集基因作基因本体(Gene Ontology,GO)与京都基因和基因组数据库富集分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)并绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络,获得骨关节炎铁死亡HUB基因,筛选出铁死亡标记基因;将正常人软骨细胞设为对照组、人软骨细胞骨关节炎模型设为实验组,采用实时荧光定量PCR对两组铁死亡标记基因的mRNA表达进行验证。结果与结论:①共获得36个骨关节炎铁死亡基因,GO富集分析表明其主要参与氧化应激反应、皮质类固醇反应、类固醇激素反应、对糖皮质激素的反应和活性氧的代谢等过程;②针对产生超氧化物的NAD(P)H氧化酶及氧化还原酶活性、血红素结合、四吡咯结合中发挥作用;③KEGG富集分析表明骨关节炎铁死亡基因主要参与NOD样受体、白细胞介素17、缺氧诱导因子1、肿瘤坏死因子及叉头盒O类(FoxO)等信号通路;④构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,进一步分析获得血管内皮生长因子A、白细胞介素6、JUN、PTGS2和DUSP1等5个骨关节炎铁死亡HUB基因,筛选出血管内皮生长因子A、白细胞介素6、PTGS2和DUSP1等4个铁死亡标记基因,体外实验证实其在对照组(正常人软骨细胞)与实验组(细胞骨关节炎模型)中有显著差异(P<0.05);⑤上述数据显示,铁死亡可能通过氧化应激、氧化还原及诱导炎症等作用于骨关节炎,机制上可能与缺氧诱导因子1等信号通路刺激NAD(P)H有关;血管内皮生长因子A、白细胞介素6、PTGS2和DUSP1可作为骨关节炎铁死亡的生物标志物。

摘要： 背景:在骨关节炎的发生、发展过程中,软骨病变是其中的关键环节,探究软骨细胞功能、开发具有软骨细胞保护作用及促软骨细胞分泌Ⅱ型胶原等的药物,是当前探索骨关节炎临床治愈的重要手段。目的:研究黄芪甲苷对白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎性损伤的保护作用,探讨Hippo-YAP通路是否参与到该作用中及其潜在的作用机制。方法:分离培养SD大鼠乳鼠胫骨与股骨软骨细胞。取对数生长期软骨细胞,分5组:空白组常规培养,模型组加入白细胞介素1β诱导软骨细胞炎性损伤,黄芪甲苷组加入白细胞介素1β+黄芪甲苷,NC-si RNA组转染NC-si RNA+白细胞介素1β+黄芪甲苷,YAP1-si RNA转染组转染YAP1-si RNA+白细胞介素1β+黄芪甲苷。各组细胞培养48 h后,进行相关检测。结果与结论:(1)模型组细胞活力低于空白组(P <0.05),黄芪甲苷组、NC-si RNA组、YAP1-si RNA转染组细胞活力高于模型组(P <0.05),YAP1-si RNA转染组细胞活力高于NC-si RNA组(P<0.05);(2)模型组细胞相凋亡率高于空白组(P<0.05),黄芪甲苷组、NC-si RNA组、YAP1-si RNA转染组细胞相凋亡率低于模型组(P <0.05),YAP1-si RNA转染组细胞相凋亡率低于NC-si RNA组(P <0.05);(3)RT-q PCR检测显示,模型组金属基质蛋白酶1、组织金属蛋白酶抑制物1 m RNA表达高于空白组(P <0.05),YAP1、TEAD1 m RNA表达低于空白组(P <0.05);黄芪甲苷组YAP1 m RNA表达高于模型组(P <0.05);YAP1-si RNA组金属基质蛋白酶1、组织金属蛋白酶抑制物1 m RNA表达高于NC-si RNA组(P <0.05),YAP1、TEAD1m RNA表达低于NC-si RNA组(P<0.05);(4)Western Blot检测显示,模型组金属基质蛋白酶1、组织金属蛋白酶抑制物1、YAP1蛋白表达高于空白组(P <0.05),Ⅱ型胶原、TEAD1、p-YAP1蛋白表达低于空白组(P <0.05);YAP1-si RNA组金属基质蛋白酶1、织金属蛋白酶抑制物1蛋白表达高于NC-si RNA组(P <0.05),Ⅱ型胶原、TEAD1、p-YAP1蛋白表达低于NC-si RNA组(P <0.05);(5)结果表明,黄芪甲苷对白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎性损伤存在保护作用,该作用可能与Hippo-YAP通路有关。

摘要： 背景:基质分泌不均匀、力学强度不足是影响组织工程构建物在体内形成效果的重要因素,力学刺激是促进细胞外基质分泌的有效手段。目的:探索3D生物打印复合支架在力学加压环境下的生物学表现。方法:采用3D生物打印技术制备软骨细胞-甲基丙烯酰胺基明胶复合支架,活死染色观察细胞存活情况。将复合支架置于力学加压生物反应器中进行加压培养,以6孔板中不加压培养的复合支架为对照,活死染色观察细胞存活情况,组织学染色观察复合支架体外软骨形成情况,qRT-PCR检测成软骨相关基因mRNA的相对表达量。将加压与不加压复合支架分别植入裸鼠皮下,5周后取材,组织学观察软骨形成情况。结果与结论:①复合支架外观呈现清晰的网格状结构,体外培养1,4,7 d时,支架形态稳定、结构清晰,细胞存活率均在90%以上;②培养2周后,加压组复合支架中的细胞存活率低于不加压组(P<0.05);苏木精-伊红染色显示两组复合支架均有明显的软骨陷窝结构,细胞在材料中分布较均匀,加压组复合支架的材料间空隙内有更多新生软骨组织形成;番红O染色显示两组均可见红色软骨基质形成,加压组细胞周基质染色更深;Ⅰ型胶原免疫组织化学染色显示,加压组着色更为明显;加压组弹性蛋白、Ⅱ型胶原的mRNA表达高于不加压组(P<0.05);③植入裸鼠皮下5周后,苏木精-伊红染色显示加压组软骨组织形成更为均一,软骨细胞大小均匀,陷窝结构明显;④结果表明,虽然体外加压刺激会引发3D生物打印软骨细胞-甲基丙烯酰胺基明胶复合支架中的细胞死亡,但同时会促进存活细胞向支架空隙间长入,提高其软骨基质相关基因的表达,促进成软骨能力。

摘要： 背景:作为在软骨中发现的唯一一种细胞,软骨细胞在骨性关节炎中的作用受到了广泛的关注。越来越多的研究发现长链非编码RNA能够通过影响软骨细胞的各种基本细胞特征从而参与骨性关节炎的发病机制。目的:综述长链非编码RNA在骨性关节炎软骨细胞中的研究进展,为骨性关节炎寻找更多的诊断和治疗靶标。方法:通过中国知网及PubMed数据库,以“骨性关节炎,长链非编码RNA,软骨细胞,自噬”为中文关键词;以“osteoarthritis;non-coding RNAs;long non-coding RNAs;chondrocytes;chondrocytes proliferation;chondrocytes autophagy;chondrocytes inflammation;chondrocytes extracellular matrix”为英文关键词,搜索2007-2022年在骨性关节炎中与长链非编码RNA有关的文献,排除重复研究、可信度低及无参考意义文献,共纳入62篇文献进行分析、归纳、总结。结果与结论:①长链非编码RNA能够通过调节软骨细胞增殖、自噬、炎症反应和细胞外基质合成等机制进而影响骨性关节炎的发展;②长链非编码RNA有可能成为骨性关节炎诊断或治疗的潜在生物标志物。

摘要： 目的 探索不同高强度电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)照射对大鼠髁突软骨的生物学效应。方法 SD大鼠随机分为对照组(Sham组)、辐照组(EMP1组:场强500 kV/m、10 Hz;EMP2组:场强270 kV/m、10 Hz),于辐照后1 h、3 h、12 h、24 h、3 d处死取材。通过HE、番红O固绿、Ⅱ型胶原免疫组化和TUNEL染色评估软骨退变程度,通过免疫组化染色及Western blot检测髁突软骨中基质降解因子:基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-5,ADAMTS-5)和凋亡关键因子:活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase,cleaved-Caspase3)的表达。结果 HE染色结果显示,与Sham组相比,EMP1组和EMP2组在辐照后出现了髁突软骨纤维层少量剥脱,EMP1组12、24 h(P<0.01)和EMP2组12、24 h(P<0.05)时软骨中番红O固绿染色阳性面积百分比显著下降,EMP1组3、12 h时Ⅱ型胶原染色阳性面积百分比显著下降(P<0.05,P<0.001),EMP1组1、3、12、24 h和EMP2组1、3、12 h时软骨中TUNEL阳性的凋亡细胞显著增多(P<0.05)。此外,EMP1组、EMP2组不同时间点(3 d组除外)髁突软骨中的MMP-13、ADAMTS-5、cleaved-Caspase3阳性细胞率以及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论 一定程度的高强度EMP能够对髁突软骨造成早期的一过性损伤效应,该效应具有一定的剂量和时间依赖性。

摘要： 和全文进行筛选,最终纳入相关68篇文献。结果与结论:①长链非编码RNA作为一种具有多种生物学功能的关键调控分子,通过多种机制调控不同的信号通路从而调控髓间充质干细胞、成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞的增殖、分化和凋亡等生理病理过程,抑制或促进骨质疏松症、骨关节炎的进程;②常见的长链非编码RNA调节的信号通路有WNT、TGF-β/BMPs、NOTCH及PI3K/AKT信号通路,信号通路之间往往存在串扰,共同参与对骨细胞代谢的调控;编码RNA和非编码RNA之间通过竞争miRNA结合位点来相互调节。

摘要： 背景:骨髓间充质干细胞是软骨组织工程中热门的种子细胞之一,随着医学研究的不断进步,诸多实验表明某些中药有效成分对骨髓间充质干细胞诱导成软骨细胞具有促进作用。目的:对不同类型的复方中药与单味中药有效成分促进骨髓间充质干细胞诱导分化为软骨细胞的作用、中药调控的机制与存在的问题等方面进行综述,以期为中药有效成分促进骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞提供研究思路。方法:第一作者通过检索中国知网、万方、PubMed、Scopus和Web of Science数据库的相关文献,以“复方中药,单味中药,骨髓间充质干细胞,软骨细胞,组织工程”为中文检索词,以“compound Chinese medicine,single Chinese medicine,bone marrow mesenchymal stem cells,chondrocytes,tissue engineering”为英文检索词进行检索,最终选取符合标准的60篇文献进行综述。结果与结论:①某些复方中药与单味中药的有效成分对骨髓间充质干细胞诱导成软骨细胞具有促进作用,是中药应用于软骨组织工程研究的重要部分;②利用中药有效成分诱导骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞,逐步应用于软骨组织工程进行软骨修复,已经成为祖国医学不断发展壮大的热门趋势,其中透骨消痛颗粒与人参皂苷、黄芪甲苷、川芎嗪均有较好的作用效果,可以展开更多的实验项目进行研究。

摘要： 目的:研究骨髓、脂肪和脐带(UC-MSC)来源的MSCs及其外泌体对犬的软骨细胞增殖能力的影响,阐明MSC修复关节损伤的机制. 方法:本实验通过设立空白对照组、完全培养基对照组、生理盐水对照组、MSCs组及外泌体(exosomes,EXO)组,采用transwell共培养法研究骨髓、脂肪和脐带来源MSCs对关节软骨细胞(articular chondrocyte,AC)的影响. 结果:三种不同来源的MSCs均能显著增强AC的细胞活性(P＜0.01),其中脐带源MSC(UC-MSCs)的作用最强;通过研究UC-MSCs来源的EXO和不含外泌体的条件培养基(conditioned medium,CM)对AC增殖的影响,结果发现UC-MSCs不含外泌体的CM和UC-MSC-EXO均能促进AC增殖(P＜0.01),但不含外泌体的CM效果更好.以上结果提示,不同来源的UC-MSCs均可通过促进软骨细胞的增殖而修复关节损伤,其机制是主要通过分泌外泌体和其它成分来促进软骨细胞增殖.

摘要： 干细胞治疗已经逐渐成为了组织工程当中热门的研究.其中已经有研究表明,干细胞在不同材料硬度的情况下能够向不同的细胞类型分化,比如MSC在40Kpa是能向成骨细胞分化,而在10Kpa是想软骨细胞分化.本研究旨在探讨材料的物理化学因素在促进软骨细胞分化时具体的作用机理，在两种因素同时存在的是如何进行协同作用，并且为今后在材料设计方面提供更为重要的信息。

摘要： 各种病因所致关节软骨细胞破坏、损伤临床多见,由于关节软骨细胞是增殖能力极弱的终末分化细胞,靠细胞自身增殖修复关节软骨面十分困难.国内外学者对软骨细胞组织工程进行了大量的实验研究,例如自体软骨细胞体外增殖,诱导干细胞向软骨细胞方向分化,体外培养软骨细胞修复关节软骨损伤,自体软骨移植修复关节软骨缺损等,取得了很好的实验效果,但是也面临一些实际问题,如自体软骨细胞获取数量有限,体外软骨细胞去分化现象、老化、致瘤性;诱导干细胞向软骨细胞方向分化时,需大量使用生长因子,成本高,有可能引起机体不良反应体外培养的软骨细胞难以形成成熟软骨细胞等.BMSCs和软骨细胞共培养的研究，显示了较突出的优势，避免生长因子的使用，软骨细胞量消耗少，培养的软骨细胞分化成熟，增殖能力强，生物活性较强等，组织工程在临床应用中可供选择的优良种子细胞。随着三维培养技术和生物支架材料在共培养中的运用和发展，模拟的体内的微环境，为种子细胞的增殖提供了足够的生长空间，更好的营养，增殖细胞更趋成熟。

摘要： 目的：探究巴戟天-牛膝醇提物(M-AAE)对体外培养的SD大鼠软骨细胞G1/s周期蛋白与mRNA含量表达的影响,为其防治骨关节炎的临床应用提供依据. 方法：①用乙醇加热回流法获得其醇提物成分;采用机械-酶消化法分离SD大鼠膝关节处的关节软骨,建立体外培养细胞模型并进行鉴定;②MTT法检测M-AAE对软骨细胞增殖特性的影响,使用倒置相差显微镜镜下观察软骨细胞状态;③PCR、Western Blot法分别检测体外培养大鼠软骨细胞经M-AAE的0,75,150,300μg·mL-1DMEM溶液干预48h后的mRNA、蛋白含量的表达. 结果：①软骨细胞经Ⅱ型胶原法染色后,阳性对照组胞浆区域浸染为棕黄色;②经MTT检测M-AAE对软骨细胞增殖具有一定的时效-量效关系,其最佳干预时间和浓度分别为48h和150μg·mL1;③M-AAE干预软骨细胞后,各加药组细胞周期蛋白依赖性激酶-4(Cyclin-dependent kinase,CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin,Cyclin D1)的mRNA与蛋白含量的表达量均明显高于0μg·mL-1组,其中以150μg·mL-1组的表达量最高(P＜0.01),75μg·mL-1组和300μg·mL-1组在CDK4及CyclinD1mRNA上比较,其表达量差异无统计学意义(P＞0.05). 结论：巴戟天-牛膝醇提物可上调CDK4、CyclinDl mRNA及蛋白表达,对SD大鼠软骨细胞具有一定的促增殖作用.

摘要： 本文旨在探究骨形成蛋白6(Bone morphogenetie protein6,BMP6)调控软骨细胞的增殖分化时,Ihh/PTHrP(India hedgehog/parathyroid hormone-related pepttide,Ihh/PTHrP)是否参与其中.收集艾维茵入孵15日鸡胚软骨细胞,利用软骨细胞标志基因ColⅡ鉴定细胞后,利用RNAi技术干扰BMP6在软骨细胞的表达,RT-PCR检测细胞中ColⅡ、Col X、Ihh、PTHrP的表达情况.结果显示,在转染后24h处理组与对照组BMP6表达差异不显著(P＞0.05),48h、72h时处理组BMP6表达量与对照组相比显著(P＜0.05)降低,达到干扰效果.48h和72h时软骨细胞处理组的Ihh表达量都显著(P＜0.05)低于对照组,48h时处理组PTHrP表达量与对照组差异不显著(P＞0.05),72h时处理组PTHrP显著(P＜0.05)低于对照组.与此同时,48h和72h时ColⅡ、Col X处理组表达量显著(P＜0.05)低于对照组,软骨细胞增殖分化受阻.试验结果表明,BMP6表达受阻时,Ihh/PTHrP信号途径受阻,软骨细胞增殖分化受抑制.Ihh/PTHrP途径参与BMP6对软骨细胞的调控.

摘要： 骨与关节疾病是致残的、危害人类健康严重的疾病,世界上约有三分之一的患病人群.其危害程度和发病率等同于或高于糖尿病和心脑血管病.骨关节疾病包括骨坏死,骨髓炎,骨关节炎,骨纤维异常、骨创伤、骨质疏松等,这是骨和软骨细胞的疾病,目前世界上没有促进骨与软骨细胞修复的方法和药品.

摘要： 关节软骨由于受到自身修复能力的限制,软骨的退化会导致骨关节炎,从而引发一系列的疾病如关节疼痛、压痛、活动受限和关节畸形等,至今仍没有有效的治疗方法.人骨髓间充质干细胞(Human mesemchymal stem cells,hMSCs),具有自我更新和多向分化的潜能,可以作为关节软骨修复的重要细胞源.然而,在诱导间充质干细胞分化为软骨细胞的过程中,由于相关生长因子和小分子药物的作用,会导致肥大性分化进而导致新生软骨组织的钙化,阻碍了间充质干细胞应用于软骨修复的临床转化.因此,需要发展一种可控制的共释放体系,不仅能够传递软骨分化所必须的小分子药物帮助干细胞分化为软骨细胞,同时也能够通过传递小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)行使沉默功能避免肥大性分化.在本研究中,开发了一种基于量子点(Quantum dots,QDs)的多功能纳米载体(Nanocarrier).我们的工作证明了,该nanocarrier不仅可以促进hMSCs向软骨细胞的分化,同时也能维持软骨细胞的特性抑制肥大性分化.此外,该nanocarrier可以对hMSCs进行长时间的体内示踪.

摘要： 目的：探讨针刀对膝骨关节炎的长期作用. 方法：48只新西兰家兔,随机分为空白、模型、针刀和电针四组,每组12只,后3组采用左后肢伸直位固定制动法制备模型.造模成功后,针刀组每周1次,电针组每周3次,治疗3周,再正常饲养3周,取材,Realtime PCR法检测软骨整合素β1mRNA,Western blot法检测整合素β1蛋白. 结果：模型组软骨中整合素β1mRNA表达明显降低,较空白组有极显著差异(P＜0.01);针刀组整合素β1mRNA表达水平上升(P＜0.01),与空白组相比无显著性差异(P＞0.05);电针组整合素β1蛋白表达水平上升,较空白组有显著性差异(P＜0.01).针刀和电针均可上调整合素β1蛋白表达水平,但针刀效果比电针更明显. 结论：针刀干预可调节力学信号对软骨的刺激,上调整合素β1基因和蛋白的表达水平,改善软骨基质,在长期观察中显示其含量接近正常,说明了针刀的长期疗效是值得肯定的.

摘要： 本研究将以生物相容性优异的透明质酸/羧甲基壳聚糖(HA/CMCS)为原料，制备注射型复合水凝胶支架为活性离子(Fe3+和Br-)的释放载体;综合研究复合水凝胶的理化性能和活性离子释放规律及对软骨相关细胞的响应行为的影响。

摘要： 本研究将以生物相容性优异的透明质酸/羧甲基壳聚糖(HA/CMCS)为原料，制备注射型复合水凝胶支架为活性离子(Fe3+和Br-)的释放载体;综合研究复合水凝胶的理化性能和活性离子释放规律及对软骨相关细胞的响应行为的影响。

摘要： 本发明涉及用于诱导软骨细胞分化或使软骨组织再生的组合物，其包含来源于正分化成软骨细胞之干细胞的外排体作为活性成分；涉及用于诱导软骨细胞分化的培养基组合物、用于使软骨组织再生的注射制剂和用于治疗软骨病症的药物组合物，其所有都包含所述组合物；并且涉及用于治疗软骨病症的方法。根据本发明的一个具体实施方案，用于诱导软骨细胞分化或软骨再生的组合物包含来源于正分化成软骨细胞之干细胞的外排体作为活性因子。在干细胞分化期间分泌的外排体包含与软骨细胞分化有关的生长因子以及与干细胞增殖和再生有关的基因和蛋白质，并且因此根据所述组合物使受损的软骨组织再生的诱导是优异的。此外，使用外排体作为细胞源性载剂，所述组合物稳定且快速地将活性物质递送到细胞中，同时使常规细胞治疗剂的副作用最小化。因此，通过借助用于预防和治疗软骨病症的可注射组合物进行简单操作可以减轻患者的疼痛，并且在操作之后可以持续且有效地治疗软骨病症。

摘要： 本发明涉及医学领域，公开了一种软骨细胞冻存保护液及其应用和软骨细胞冻存方法。本发明所述冻存保护液包括DMSO、胎牛血清和脐带间充质干细胞生长因子；所述脐带间充质干细胞生长因子为脐带间充质干细胞经1640培养基培养后的培养基上清液冻干粉。本发明以DMSO、胎牛血清和脐带间充质干细胞生长因子作为冻存保护液的组分，通过各组分的相互作用，可有效保护软骨细胞冻存，并在复苏后维持软骨细胞回收率和存活率在较高水平，同时提高细胞增殖能力，显著优于同类保护液。

摘要： 本发明涉及一种软骨细胞培养基及软骨细胞培养方法。能够降低软骨细胞的去分化，提高软骨细胞的增殖能力。本发明实施例提供的软骨细胞培养基包括：基础培养基、浓度为5‑20％的血清、浓度为1‑20ng/ml的血小板源性生长因子和浓度为(1‑5)*10

摘要： 本发明提供一种可以使在体外培养中等去分化而软骨特性减弱的去分化型软骨细胞有效且容易地再分化成原来的软骨细胞的去分化型软骨细胞向软骨细胞的再分化用培养基和去分化型软骨细胞向软骨细胞的再分化方法。所以，本发明提供用于使去分化而软骨特性减弱的去分化型软骨细胞向原来的软骨细胞再分化并含有胰岛素和从BMP-2及其类似物中选择的至少一种的去分化型软骨细胞向软骨细胞的再分化用培养基，和通过使用该去分化型软骨细胞向软骨细胞的再分化用培养基、培养去分化型软骨细胞，来使该去分化型软骨细胞向原来的软骨细胞再分化的去分化型软骨细胞向软骨细胞的再分化方法。上述去分化型软骨细胞向软骨细胞的再分化用培养基更优选含有T3的方式。

摘要： 本发明涉及用于诱导软骨细胞分化或使软骨组织再生的组合物，其包含来源于正分化成软骨细胞之干细胞的外排体作为活性成分；涉及用于诱导软骨细胞分化的培养基组合物、用于使软骨组织再生的注射制剂和用于治疗软骨病症的药物组合物，其所有都包含所述组合物；并且涉及用于治疗软骨病症的方法。根据本发明的一个具体实施方案，用于诱导软骨细胞分化或软骨再生的组合物包含来源于正分化成软骨细胞之干细胞的外排体作为活性因子。在干细胞分化期间分泌的外排体包含与软骨细胞分化有关的生长因子以及与干细胞增殖和再生有关的基因和蛋白质，并且因此根据所述组合物使受损的软骨组织再生的诱导是优异的。此外，使用外排体作为细胞源性载剂，所述组合物稳定且快速地将活性物质递送到细胞中，同时使常规细胞治疗剂的副作用最小化。因此，通过借助用于预防和治疗软骨病症的可注射组合物进行简单操作可以减轻患者的疼痛，并且在操作之后可以持续且有效地治疗软骨病症。

摘要： 本发明公开了一种软骨细胞外基质的制备方法及其用到的脱细胞组合液和制得的软骨细胞外基质。该软骨细胞外基质的制备方法包括以下步骤：S1、对动物源关节软骨进行研磨得到骨粉；S2、用包含了蛋白酶抑制剂的缓冲液冲洗软骨粉末，并进行离心得到离心沉淀；S3、缓冲液清洗离心沉淀物，过滤并冷冻干燥得到软骨粉末；S4、采用脱细胞液A、脱细胞液B、脱细胞液C依次对软骨粉末进行去细胞处理，并用包含了蛋白酶抑制剂的缓冲液冲洗脱细胞处理的软骨组织并离心处理，得到去细胞的软骨组织；S5、对去细胞的软骨组织用核酸酶处理并离心，用缓冲液清洗离心沉淀物，冷冻干燥得到软骨细胞外基质。本发明制得的软骨细胞外基质品质高。

摘要： 本发明公开了一种成软骨细胞培养基及成软骨细胞的培养方法；其中，培养基包括1%~10%胎牛血清的DMEM培养基、终浓度为0.5~1.5g/ml的鹿角胶、终浓度为0.1~0.2g/m的氨基葡萄糖、终浓度为0.8~1.2ng/ml的TGF‑β及PBS缓冲液。培养基中的鹿角胶和氨基葡萄糖能刺激脂肪干细胞向成软骨细胞分化，且分化效率可达到72%；TGF‑β细胞因子保证细胞原有的活性，同时具有调节刺激活性、促进成软骨细胞生长。

摘要： 本发明涉及医学领域，公开了一种软骨细胞冻存保护液及其应用和软骨细胞冻存方法。本发明所述冻存保护液包括DMSO、胎牛血清和脐带间充质干细胞生长因子；所述脐带间充质干细胞生长因子为脐带间充质干细胞经1640培养基培养后的培养基上清液冻干粉。本发明以DMSO、胎牛血清和脐带间充质干细胞生长因子作为冻存保护液的组分，通过各组分的相互作用，可有效保护软骨细胞冻存，并在复苏后维持软骨细胞回收率和存活率在较高水平，同时提高细胞增殖能力，显著优于同类保护液。

摘要： 本发明涉及一种软骨细胞培养基及软骨细胞培养方法。能够降低软骨细胞的去分化，提高软骨细胞的增殖能力。本发明实施例提供的软骨细胞培养基包括：基础培养基、浓度为5-20％的血清、浓度为1-20ng/ml的血小板源性生长因子和浓度为(1-5)*10

摘要： 本发明是关于一种用移植可注射软骨细胞来进行同源软骨细胞移植的方法。为此本发明提供了一种用移植可注射软骨细胞来进行同源软骨细胞移植的方法，包括当向软骨损伤区注射基质时，用注射器前端混合动物软骨细胞主要组分：血纤维蛋白、透明质酸和胶原蛋白作为基质。进一步说，发明提供了一种用移植可注射软骨细胞来进行同源软骨细胞移植的方法，包括：将1号瓶(红色)内的软骨细胞培养物1ml放入1ml灭菌注射器中，将注射器垂直插入装有白色或浅黄色血纤蛋白原冻干粉末的2号瓶(蓝色)，并将软骨细胞培养物注入2号瓶，纤维蛋白源的最终浓度范围是10mg/mL至200mg/mL；将注射器垂直插入3号瓶中，缓慢的将1ml 1号瓶(红色)中的细胞培养物(红色液体)注入含有白色冻干粉末(凝血酶)的3号瓶(红色，小瓶)中；用1ml注射器从含有1ml内容物的3号瓶(红色，小瓶)中收集0.1cc内容物，然后注入4号瓶(黄色)的底部，凝血酶的浓度范围是IU/mL至200IU/mL；用1ml灭菌注射器将两个小瓶中的软骨细胞悬浮物全部加入4号瓶(黄色)中，然后用注射器将其反复混合2－3次；确认2号瓶(蓝色)中的物质完全溶解后将其全部注入1ml注射器中；将4号瓶(黄色)中混合好细胞治疗剂注入1ml注射器中，将两支装满2号瓶(蓝色)和4号瓶(黄色)内容物的1ml注射器置于固定的支架上，并将一个螺旋头置于注射器上，当要将最终混合物通过注射移植到动物损伤的软骨区域时，使用注射器前端的螺旋头混合注射器内的物质。