VTIQ评价UTMD介导NET-1siRNA对肝细胞癌荷瘤鼠的体内治疗效果

摘要

目的：本研究探索制备载NET-1siRNA以及GPC3脂质纳米微泡,并采用声触诊组织成像和定量(VTIQ)技术评价该微泡对人肝癌荷瘤鼠的体内治疗效果. 方法：采用薄膜水化联合机械振荡法制备载NET-1siRNA以及GPC3脂质纳米微泡.将人肝癌细胞系(SMMC-7721)与BD基质胶混合液注射于Balb/c雌性裸鼠背部皮下,建立24只荷瘤鼠模型.当肿瘤大小达到5mm时,将荷瘤鼠随机分为空白对照组,阴性对照组,Lipo2000组以及微泡组.第1,5,9,13天各组分别注射生理盐水，载阴性对照基因脂质纳米微泡，Lipo2000+NET-1siRNA，载NET-1siRNA脂质纳米微泡。第0,7,14,21天采用西门子S3000的VTIQ技术测量各组荷瘤鼠肿瘤弹性值，在肿瘤组织选取7个感兴趣区，测定平均和最大剪切波速度(SWSmean,SWSmax)，同时记录肿瘤生长曲线和荷瘤鼠生存时间。第60天或者肿瘤达到2cm时，将荷瘤鼠处死，取肿瘤组织以及肝肾标本，进行免疫组化检测NET-1蛋白表达情况以及肝肾毒性检测。 结果:肿瘤生长曲线显示，微泡组和Lipo2000组肿瘤明显小于空白和阴性对照组。各组裸鼠中位生存期分别为28，35，56，60天。免疫组化显示，微泡组NET-1蛋白水平相对于空白和阴性对照组有明显下降（P<0.05）。微泡组SWSmean与肿瘤大小呈正相关(r=0.9806,P=0.0194)，与其他组均有显著差异(P<0.05)。治疗后，肿瘤组织剪切波速度SWSmean，SWSmax较对照组明显变小。另外，肝肾标本HE染色显示治疗后无明显损伤。 结论:本研究制备的载NET-1siRNA脂质纳米微泡具有粒径小、低毒、高效转染等优点，不仅为今后肝癌的基因治疗提供了有效载体，而且为进一步研究肿瘤组织软硬度变化探索了一种新的弹性成像技术。VTIQ能够无创、准确地测量肿瘤组织弹性变化，并与肿瘤的发展阶段有关。