脐静脉内皮细胞

摘要： 目的:探究氮掺杂硅量子点(N-SiQD)作为人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活细胞荧光标记材料使用的可行性及效能。方法:采用透射电子显微镜、荧光分光光度计对N-SiQD进行表征。体外培养HUVEC,与不同浓度N-SiQD共培养,通过CCK-8法及Calcein-AM/PI染色评估N-SiQD的生物安全性,同时观察其对HUVEC血管形成功能的影响,并对血管形成基因表达进行分析,通过共聚焦显微镜检测N-SiQD对HUVEC的体外荧光标记效应。结果:N-SiQD为平均直径4.62 nm的纳米球粒,分散度良好,在488 nm激发光照下呈绿色荧光。在共孵育24 h后,与对照组比较,浓度≤800μg/mL组的N-SiQD作用下细胞活性无影响,差异无统计学意义(P>0.05),浓度≥1000μg/mL时N-SiQD影响细胞增殖能力,差异有统计学意义(P<0.05);400μg/mL N-SiQD对细胞血管形成功能有促进作用,VEGFA基因表达升高,VEGFB基因表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05);400μg/mL的N-SiQD可以很好地分布于细胞浆,发出稳定绿色荧光;在488 nm激发波长下,N-SiQD在30 min内可维持初始荧光强度的40%左右。结论:新合成N-SiQD具有良好的生物相容性,活细胞荧光标记效果良好,适宜的浓度下促进HUVEC的血管形成功能,可用于HUVEC活细胞标记。

摘要： 背景:组织工程组织血管化问题难以解决,成为制约其临床应用的关键。目的:探讨兔脐静脉内皮细胞与干细胞膜片共培养形成预血管化细胞膜片的可行性,分析其血管形成相关因子基因表达。方法:采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,经抗坏血酸作用形成干细胞膜片。实验组将干细胞膜片与兔脐静脉内皮细胞共培养以形成预血管化细胞膜片,以单独培养的兔脐静脉内皮细胞为对照,培养3,7,14 d时,光镜、苏木精-伊红染色观察细胞形态与组织学改变,RT-PCR检测血管形成相关因子mRNA表达,免疫组化染色观察血管化网络结构。结果与结论:①光镜显示,实验组培养3 d后细胞发生迁移、重排,7 d后可见脐静脉内皮细胞之间发生“联系”,形成网状结构,14 d网状结构更加明显见;对照组细胞密度不断增加,形成细胞团,未见细胞发生重排、迁移形成网状结构;②苏木精-伊红染色显示,实验组培养3 d细胞排列不均匀,7 d时细胞呈条索状排列,14 d时细胞呈网状结构;对照组细胞呈铺路石样堆积且密度不断增大,无条索状、网状结构形成;③RT-PCR检测显示,实验组培养7 d的血管内皮生长因子mRNA表达高于对照组(P<0.05),培养14 d的碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达高于对照组(P<0.05),培养7,14 d的血管生成素1 mRNA表达高于对照组(P<0.05),培养3,7,14 d的血管生成素2 mRNA表达高于对照组(P<0.05);④CD31免疫组化染色显示,实验组形成血管网状结构,对照组无网状结构形成;⑤结果表明,兔脐静脉内皮细胞与干细胞膜片共培养可以成功构建预血管化细胞膜片,显著表达血管形成相关基因。

摘要： 背景:羟基磷灰石/明胶复合材料具有良好的生物相容性及骨诱导性,可作为组织工程支架用于修复骨缺损.目的:观察3D打印羟基磷灰石/明胶支架复合骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞修复兔颅骨缺损的效果.方法:取9只雄性新西兰白兔,建立直径约0.8 cm的颅骨缺损模型,分3组处理:空白组不做处理,对照组植入3D打印羟基磷灰石/明胶支架,实验组植入3D打印羟基磷灰石/明胶支架与骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞复合物,每组3只.术后第8周,对各组白兔进行颅骨锥形束CT扫描与颅骨缺损部位组织学观察.动物实验获得济宁医学院伦理委员会批准.结果 与结论:①锥形束CT扫描:空白组可见明显的骨缺损,缺损区域与周围正常骨组织边缘有点状不透射影;对照组可见有部分新生骨形成,呈不连续状,与周围骨组织亦不连贯;实验组可见新生骨组织呈线性连续,厚度较薄,缺损区域与邻近骨组织边缘融合;②组织学观察:苏木精-伊红染色与Masson三色显示,空白组缺损区见纤维结缔组织生成及少量游离骨细胞;对照组可见少量成骨,材料边缘可见有骨基质沉积,取代材料形成骨小梁;实验组材料空间逐渐被新生骨代替,新生骨和骨小梁结构样组织充填于缺损区域;③结果表明,3D仿生打印羟基磷灰石/明胶支架复合骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞可有效促进骨组织的生长,加快骨缺损修复.

摘要： 背景:组织工程组织血管化问题难以解决,成为制约其临床应用的关键.目的:探讨兔脐静脉内皮细胞与干细胞膜片共培养形成预血管化细胞膜片的可行性,分析其血管形成相关因子基因表达.方法:采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,经抗坏血酸作用形成干细胞膜片.实验组将干细胞膜片与兔脐静脉内皮细胞共培养以形成预血管化细胞膜片,以单独培养的兔脐静脉内皮细胞为对照,培养3,7,14 d时,光镜、苏木精-伊红染色观察细胞形态与组织学改变,RT-PCR检测血管形成相关因子mRNA表达,免疫组化染色观察血管化网络结构.结果 与结论:①光镜显示,实验组培养3 d后细胞发生迁移、重排,7 d后可见脐静脉内皮细胞之间发生"联系",形成网状结构,14 d网状结构更加明显见;对照组细胞密度不断增加,形成细胞团,未见细胞发生重排、迁移形成网状结构;②苏木精-伊红染色显示,实验组培养3 d细胞排列不均匀,7 d时细胞呈条索状排列,14 d时细胞呈网状结构;对照组细胞呈铺路石样堆积且密度不断增大,无条索状、网状结构形成;③RT-PCR检测显示,实验组培养7 d的血管内皮生长因子mRNA表达高于对照组(P<0.05),培养14 d的碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达高于对照组(P<0.05),培养7,14 d的血管生成素1 mRNA表达高于对照组(P<0.05),培养3,7,14 d的血管生成素2 mRNA表达高于对照组(P<0.05);④CD31免疫组化染色显示,实验组形成血管网状结构,对照组无网状结构形成;⑤结果表明,兔脐静脉内皮细胞与干细胞膜片共培养可以成功构建预血管化细胞膜片,显著表达血管形成相关基因.

摘要： 背景:羟基磷灰石/明胶复合材料具有良好的生物相容性及骨诱导性,可作为组织工程支架用于修复骨缺损。目的:观察3D打印羟基磷灰石/明胶支架复合骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞修复兔颅骨缺损的效果。方法:取9只雄性新西兰白兔,建立直径约0.8 cm的颅骨缺损模型,分3组处理:空白组不做处理,对照组植入3D打印羟基磷灰石/明胶支架,实验组植入3D打印羟基磷灰石/明胶支架与骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞复合物,每组3只。术后第8周,对各组白兔进行颅骨锥形束CT扫描与颅骨缺损部位组织学观察。动物实验获得济宁医学院伦理委员会批准。结果与结论:①锥形束CT扫描:空白组可见明显的骨缺损,缺损区域与周围正常骨组织边缘有点状不透射影;对照组可见有部分新生骨形成,呈不连续状,与周围骨组织亦不连贯;实验组可见新生骨组织呈线性连续,厚度较薄,缺损区域与邻近骨组织边缘融合;②组织学观察:苏木精-伊红染色与Masson三色显示,空白组缺损区见纤维结缔组织生成及少量游离骨细胞;对照组可见少量成骨,材料边缘可见有骨基质沉积,取代材料形成骨小梁;实验组材料空间逐渐被新生骨代替,新生骨和骨小梁结构样组织充填于缺损区域;③结果表明,3D仿生打印羟基磷灰石/明胶支架复合骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞可有效促进骨组织的生长,加快骨缺损修复。

摘要： 目的·探讨脐静脉内皮细胞外泌体对炎症刺激下小鼠前软骨细胞ATDC5凋亡的影响.方法·采用试剂盒分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)外泌体,采用Western blotting检测外泌体标志蛋白肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,Tsgl01)、白细胞分化抗原9(cluster differentiation 9,CD9)、凋亡相关基因2互作蛋白X(apoptosis linked gene-2-interactingprotein X,Alix)的表达水平.透射电镜观察外泌体形态,粒度检测鉴定外泌体大小.使用荧光显微镜观察外泌体被小鼠前软骨细胞ATDC5摄取过程和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成情况.TUNEL染色和流式细胞术检测外泌体对白细胞介素-ip(interleukin-i[3,IL-ip)刺激下的ATDC5细胞凋亡的影响.Western blotting检测外泌体对于ATDC5细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)k Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、裂解的半胱天冬酶3(cleaved caspase-3,c-caspase-3)和抗氧化应激相关蛋白核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf-2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap-1)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、还原型烟醜胺腺噪呤二核苷酸醒氧化还原酶1(NADPH quinone oxidoreductase-like protein 1,NQO-1)表达水平的影响.结果·透射电镜下观察到HUVEC来源的外泌体呈椭圆形,中空,双层膜,并且阳性表达外泌体标志物CD9、Alix,TsglOl.与IL-i[3刺激下的ATDC5细胞相比,外泌体促进炎症因子作用下的ATDC5细胞内ROS的生成(P=0.000)和凋亡的发生(P=0.000),Bax,c-caspase-3、Keap-l表达升高,Bcl-2,Nrf-2、HO-1、NQO-1表达降低.结论· HUVEC来源的外泌体可能通过抑制ATDC5细胞抗氧化应激的能力,促进IL-1β刺激下ATDC5细胞凋亡的发生.

摘要： 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/乳脂肪球表皮生长因子8(MFG-E8)信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)基质重构调控中的分子生物学机制.方法利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验对AngⅡ和MFG-E8浓度进行筛选,根据实验需求在AngⅡ和MFG-E8浓度筛选实验中分为5组,阴性对照组(DPBS)、AngII 0.1 μmol/L、AngII 1.0 μmol/L、MFG-E8 50.0 pg/L、MFG-E8 100.0 μg/L.并利用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测Ang II和MFG-E8的相互作用关系及对下游基因单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和转化生长因子-[31(TGF-β1)表达的影响.两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果在脐静脉内皮细胞中,1 μmol/L的AngⅡ或100 μg/L MFG-E8能够促进AngⅡ mRNA 的表达(1.62 ±0.30、2.25 ±0.36比1.00±0.00,t = 3.606、6.015,P<0.05),差异有统计学意义.0.1 μmol/L或1.0 μmol/L 的Ang II(1.27 ± 0.11、1.58 ± 0.14比1.00 ±0.00,t = 4.320、6.887,P<0.05),以及50.0 μg/L或100.0 μg/L的MFG-E8能够促进MFG-E8的表达(1.90 ±0.09、2.77 ±0.07比1.00 ±0.00,t= 17.240、43.130,P<0.05),差异有统计学意义.通过Ang Ⅱ刺激HUVECs细胞建立血管高压模型,结果显示,AngⅡ能够显著促进HUVECs内AngⅡ、MFG-E8以及TGF-β1 mRNA 的表达(1.62 ±0.13、4.27 ± 0.47、1.56 ± 0.11 比 1.00 ± 0.00,t = 7.911、12.060、8.710,P<0.01),而AngII受体拮抗剂洛沙钽能抑制AngII的作用,AngII与MFG-E8共处理,则能进一步促进Ang II的作用(1.86 ±0.21 比1.00±0.00,t=7.023,P<0.01),显著协同促进MCP-1 和MMP-2 mRNA 的表达(1.69 ±0.25、1.69 ±0.15比1.00 ±0.00,t= 4.735、7.845,P<0.01),差异均有统计学意义.此外,Ang Ⅱ能够显著促进MFG-E8蛋白水平的表达(0.23 ±0.01比0.16 ±0.03,t=3.895,P<0.05),而洛沙钽能抑制AngII对MFG-E8蛋白表达的促进作用,AngⅡ与MFG-E8共处理,则能够进一步促进AngⅡ对MFG-E8(0.22 ±0.03比0.16±0.03,t=2.493,P<0.05)和TGF-p1蛋白水平表达的促进作用(0.66 ±0.06比0.50±0.03,t=3.870,P<0.01),差异均有统计学意义.结论AngⅡ能够促进MFG-E8的表达,而MFG-E8也能够促进AngⅡ的表达,AngⅡ/MFG-E8信号通路能够促进基质重构标志物MCP-1、MMP-2和TGF-β1的表达.

摘要： 目的:观察焦油和尼古丁对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在表达的影响.方法:体外分离培养HUVECs,分别与不同浓度焦油(终浓度分别为1mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L和不同浓度尼古丁终浓度分别为(10-9 mol/L、10-7 mol/L、10-5 mol/L、10-3 mol/L)共同孵育6h后,收集细胞,用流式细胞技术、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其ICAM-1蛋白和mRNA表达水平.将不与焦油和尼古丁共培养HUVECS作为对照组.结果:不同浓度焦油组ICAM-1蛋白和mRNA表达水平均与对照组有明显差异(P0.05).结论:焦油可上调HUVECs的ICAM-1表达.

摘要： 目的 利用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)研究芍药苷(PF)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的HUVECs小管形成的影响.方法 将HUVECs细胞株复苏培养,采用噻唑兰(MTT)法测定不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对HUVECs细胞活力及对VEGF引起的细胞活力上升的影响,采用体外小管形成实验评价不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对VEGF引起的HUVECs小管形成的影响,采用细胞划痕实验评价不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对VEGF所致的HUVECs迁移的影响.结果 与空白组比较,不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对HUVECs的细胞活力影响差异无统计学意义(P>0.05).与模型组(给予10 ng/mL的VEGF,下同)比较,不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对VEGF所致的HUVECs细胞活力升高的影响差异无统计学意义(P>0.05).与模型组比较,不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)均能抑制VEGF所致的HUVECs体外小管形成作用.与模型组比较,10、30、100μmol/L PF剂量组24 h划痕/0 h划痕宽度比值均显著高于模型组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).结论 PF具有抑制VEGF诱导的HUVECs体外小管形成的作用,该作用可能通过抑制VEGF所致的HUVECs迁移而实现.

摘要： 目的:研究EphrinB2对TNF-α作用下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与牙髓干细胞(hDPSCs)共培养体系体外成血管的影响.方法:按1:5比例共培养hDPSCs与HUVECs,TNF-α(0～80 ng/mL)处理共培养细胞,检测EphrinbB2蛋白表达水平.用特异性沉默EphrinB2基因的慢病毒载体转导hDPSCs,经不同浓度TNF-α处理后,在共培养第9、12小时检测小管形成情况及EphrinB2通路蛋白表达.结果:Western blot结果显示20 ng/mL的TNF-α显著促进共培养体系EphrinB2的表达(P<0.001).体外小管形成实验结果显示在第12小时,HUVECs+EphrinB2-shRNA-hDPSCs组小管相对分支点数较少(P<0.01),相对长度较短(P<0.01).Western blot结果显示EphrinB2和ephb4表达在TNF-α+HUVECs+hDPSCs组最高(P<0.01),而在HUVECs+EphrinB2-shRNA-hDPSCs组表达量最低(P<0.01).结论:TNF-α可以通过激活EphrinB2/ephb4通路,逆转沉默hDPSCs的EphrinB2引起的小管裂解,从而促进小管形成.

摘要： 目的：研究陈皮、半夏对衰老脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路和磷酸化p38的表达的影响. 方法：0.25％胰岛素-柠檬酸盐诱导建立HUVEC衰老模型.采用Vesternblot方法检测陈皮、半夏干预后衰老HUVEC中PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化p38的表达水平. 结果：与空白对照组和陈皮半夏对照组比较,诱导衰老组PI3K、p-Akt和p-p38表达显著升高(P＜0.01);陈皮半夏干预组、PI3K阻滞组PI3K、p-Akt和p-p38表达均较诱导衰老组显著降低(P＜0.05,P＜0.01). 结论：陈皮、半夏对衰老HUVEC中PI3K-At通路和磷酸化p38的表达有较好的抑制作用.

摘要： 目的：观察山核桃叶总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的保护作用,以探讨其抗衰老作用.rn 方法：体外培养HUVECs细胞株以AngⅡ诱导48h复制衰老细胞模型.采用MTS法检测细胞存活率,β-半乳糖苷酶检测内皮细胞衰老程度,流式细胞术分析细胞周期,硝酸还原酶法检测NO含量.rn 结果：与正常对照组比较,模型组细胞存活率明显下降(p＜0.05),β-半乳糖苷酶染色阳性细胞率明显增加(p＜0.01),细胞周期多停滞在G0/G1期(p＜0.05),S期细胞比例减小,表明成功诱导了衰老模型.而给与山核桃叶总黄酮预处理后明显改善了细胞衰老状态,β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显减少(P＜0.05),G0/G1期细胞比例明显减少(P＜0.05),S期细胞比例增加(P＜0.05),NO浓度增加(p＜0.05).rn 结论：山核桃叶总黄酮对AngⅡ诱导的HUVECs细胞衰老有明显的保护作用,具有抑制内皮细胞衰老,保护内皮功能的作用.

摘要： 目的：研究苦荞麦总黄酮对软脂酸损伤脐静脉内皮细胞的保护作用.rn 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞(Eahy926),分为正常组、模型组、苦荞麦总黄酮组Ⅰ、苦荞麦总黄酮组Ⅱ、苦荞麦总黄酮组Ⅲ和二甲双胍组.用软脂酸建立Ⅱ型糖尿病状态下的血管内皮细胞模型,MTT法检测细胞增殖率、LDH试剂盒检测细胞LDH的漏出量、流式细胞技术检测细胞的凋亡率.rn 结果：与正常组比较,模型组细胞增殖率明显降低(P＜0.01),LDH漏出量显著增高(P＜0.01),凋亡率明显增高(P＜0.01).同模型组相比,苦荞麦总黄酮保护各组及二甲双胍组以上指标均有明显改善,苦荞麦总黄酮各组改善程度呈剂量依赖关系.rn 结论：苦荞麦总黄酮对软脂酸损伤的脐静脉内皮细胞具有明显的保护作用.

摘要： 目的:观察分离培养的羊水于细胞分泌细胞因子情况,及其对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的作用.方法：①贴壁法分离培养羊水干细胞，分为2组:缺氧羊水干细胞组和常规羊水干细胞组；②取体外分离培养的第2代人脐静脉内皮细胞.分为3组:对照组、常规羊水干细胞组和缺氧羊水干细胞组。结果：缺氧诱导条件下血管内皮细胞生长因子水平明显增加(P<0.01).培养3d后常规羊水干细胞组、缺氧羊水干细胞组内皮细胞数均明显增加(P<0.05)，肿瘤坏死因子a诱导凋亡24h后内皮细胞凋亡率均明显降低(P<0.05)，且缺氧羊水干细胞组变化幅度大于常规羊水干细胞组(P<0.05)。结论:羊水干细胞可分泌血管内皮细胞生长因子、肝细胞生长因子，羊水干细胞培养液能促进内皮细胞增殖，抑制内皮细胞凋亡。经缺氧处理后，羊水干细胞分泌血管内皮细胞生长因子的能力增加，对内皮细胞的增殖和凋亡干预作用增强。

摘要： 目的:探讨尿酸对人脐静脉内皮细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂1蛋白的作用和可能的信号通路.方法:分别用不同尿酸浓度干预体外培养的HUVECS24h,观察其形态、增殖、培养液中PAI-1蛋白的影响.观察476μmol/L尿酸干预培养时,不同时间对HUVECS培养液PAI-1蛋白及不同时间细胞外信号调节激酶(ERK)1/2磷酸化水平的影响.用ERK1/2通路阻滞剂阻断尿酸诱导HUVECS分泌PAI-1蛋白.结论:尿酸抑制HUVECS增生，增加PAI-1蛋白表达，同时增加ERK1/2磷酸化水平，ERK1/2通路阻滞剂PD98059部分抑制尿酸诱导HUVECS分泌PAI-1蛋白，尿酸通过ERK1/2信号通路诱导HUVECS分泌PAI-1蛋白。

摘要： 目的：探讨瑞舒伐他汀对同型半胱氨酸(Hcy)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响.rn 方法：原代培养HUVEC,2～3代进行实验,用一定浓度Hcy损伤HUVEC建立细胞损伤模型,然后瑞舒伐他汀干预研究,采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD的活性,硝酸还原酶法检测细胞上清的一氧化氮(NO)含量,硫代巴比妥酸法检测MDA的水平;Real-time PCR检测SOD1mRNA表达的变化.rn 结果：Hcy刺激24h SOD1mRNA表达量、NO、SOD浓度较空白对照组显著降低,MDA含量较空白对照组显著升高(P＜0.05);瑞舒伐他汀预处理2h后再加入等浓度Hcy,刺激24h后SOD1mRNA表达量、NO、SOD浓度显著升高,MDA含量显著下降(P＜0.05).rn 结论：瑞舒伐他汀可通过改善SOD活性和减低MDA水平发挥抗氧化作用,且这种作用独立于它的降脂作用.

摘要： 为探索大黄素对脐静脉内皮细胞的保护作用。脐静脉内皮细胞分为对照组、LPS组、不同浓度大黄素处理组5个组，采用RT-PCR测定TLR4及ICAM-1 mRNA水平，采用Western-blot方法测定脐静脉内皮细胞对于TLR4及ICAM-1蛋白的表达水平。结果显示，5μg/ml，10μg/ml的大黄素可下调LPS诱导的人脐静脉内皮细胞 TLR4、ICAM-1mRNA及蛋白水平的表达。结果表明，大黄素可能通过抑制TLR4诱导人脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达，从而可能减轻局部炎症反应。

摘要： 目的：根据脐静脉内皮细胞在接受热刺激以后,细胞内保护性蛋白HSP70和HSP90表达发生的变化,探讨灸络治疗可以在细胞层面自发形成保护和调节的作用. 方法：利用人脐静脉内皮细胞的体外培养搭建脉络系统的研究平台,将脐静脉血管内皮细胞分为37°C组对照组、40°C温度刺激组、43°C温度刺激组,温度刺激30min,每日2次,共3日.倒置显微镜下观察细胞形态的动态变化.应用QPCR和western-bolt技术,检测热刺激后细胞中HSP70和HSP90的mRNA和蛋白质表达情况. 结果：①用倒置显微镜观察：细胞经热刺激都会立刻出现浊肿现象,43°C细胞的浊肿程度较40°C细胞更为明显.浊肿约在刺激结束后6-8小时逐渐减弱.总刺激结束24小时后,40°C组的肿浊程度较前减轻,同37°C组相比细胞形态差异不大,且细胞膜边缘的颗粒状物质减少.而43°C组细胞胞浆内颜色较37°C组明显加深,细胞体积明显减小,细胞间隙明显增大.②HSP70和HSP90的mRNA和蛋白质的表达量情况为：40°C温度刺激组各指标较37°C正常体温对照组显著增强(P＜0.05);43°C组与37°C之间各指标差异不显著(P＞0.05);40°C组同43°C组相比HSP70的mRNA和蛋白质及HSP90的mRNA含量有显著差异(P＜0.05),40°C组同43°C组相比HSP90的蛋白含量无显著差异(P＞0.05). 结论：适宜的温度刺激可以使内皮细胞中负责蛋白质保护和修复的热休克蛋白HSP70和HSP90的表达明显提高.不仅有利于细胞的热耐受,并可进在细胞层面直接调节细胞的生命物质的结构,改善细胞的功能.

摘要： 目的：探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)对NF-κB信号通道P65和P50的影响及对炎症因子TNF-a和IL-6表达的变化.方法：设立空白对照组,不同诱导时间及浓度的ox-LDL 诱导组及NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氢基甲酸盐(PDTC)干预+ox-LDL诱导组.提取核蛋白,Western blot法检测NF-κB信号通道P65和P50的蛋白表达;ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-a(TNF-a),白细胞介素-6(IL-6)的浓度变化.结果：Western blot结果显示ox-LDL诱导HUVECs后P65和P50随ox-LDL诱导时间延长及诱导浓度增加而表达增加,各诱导组之间均存在统计学差异(P＜0.05).而给予PDTC干预后,P65和P50蛋白表达较ox-LDL诱导组明显降低,存在统计学差异(P＜0.05).ELISA结果显示经ox-LDL诱导24h后，细胞上清液中的TNF-a和IL-6显著高于正常对照组，而用PDTC干预+ox-LDL诱导后TNF-a和IL-6浓度明显降低。各组存在统计学差异(P<0.05)。结论：ox-LDL激活NF-κB信号通道存在时间和浓度效应关系，使通道下游TNF-a和IL-6表达增高。

摘要： 目的:用胰岛素、血管紧张素Ⅱ、血脂康体外刺激培养人脐静脉内皮细胞,通过观察细胞形态、增殖能力,粘附分子VCAM-1、ICAM-1mRNA及蛋白表达水平,探讨胰岛素、AngⅡ的促进AS作用机制和血脂康的抑制AS作用及可能的作用机制.方法:在体外培养HUVECs,分成八组:正常对照组、血脂康组,胰岛素组,AngⅡ组, AngⅡ+胰岛素组、胰岛素+血脂康组、删+血脂康组、AngⅡ+胰岛素+血脂康组。结论:胰岛素、血管紧张素Ⅱ能导致细胞形态学改变，增殖能力降低，促进血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1的mRNA及蛋白表达，且两者具有协同作用;而血脂康本身对内皮细胞没有毒性作用，且在一定程度上可抑制高胰岛素、血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞ICAM-1,VCAM-1的mRNA及蛋白表达上调:改善胰岛素、AngⅡ对HUVECs抑制作用，为研究胰岛素抵抗、血管紧张素Ⅱ参与动脉粥样硬化(AS)及他汀类调脂外的抗AS作用提供实验依据。

摘要： 本发明公开了肿节风有效成分保护LPS损伤的脐静脉血管内皮细胞的用途，肿节风有效成分为金粟兰内酯A，肿节风有效成分减少LPS诱导的HUVEC上清液中NO的含量、降低其活性氧水平，以及抑制细胞凋亡和炎症因子表达，肿节风有效成分能治疗血栓闭塞性脉管炎，并能作为脐静脉血管内皮细胞培养基。

摘要： 本实用新型公开了一种便于操作的提取脐静脉血管内皮细胞灌流装置，包括四通阀、上导管、下导管、三通阀，四通阀上部的三个输入通道分别连接三个药物袋，四通阀下部的输出通道连通上导管，下导管正对上导管并连通三通阀上部的输入通道，三通阀下部的两个输出通道则分别连通收集袋，上导管和下导管的端部设有紧固用夹子，上导管和下导管之间的脐带固定区域套设有加热膜；四通阀和三通阀之间连接有距离调节结构；上导管的下端和下导管的上端设有负压吸附头，负压吸附头连通微型气泵。本实用新型培养细胞得率高，细胞活性高，操作快捷方便，工作效率高，收集过程污染几率低；适用于各种脐带血管内皮细胞收集的工序中。

摘要： 本实用新型公开了一种提取脐静脉血管内皮细胞的恒温灌流装置，其关键在于：包括上部的四通阀、上导管、下导管、下部的三通阀，其中所述四通阀上部的三个输入通道分别连接三个药物袋，该四通阀下部的输出通道连通上导管，所述下导管正对所述上导管并连通所述三通阀上部的输入通道，该三通阀下部的两个输出通道则分别连通收集袋，所述上导管和下导管的端部设有紧固用夹子，所述上导管和下导管之间的脐带固定区域套设有加热膜。本实用新型一种提取脐静脉血管内皮细胞的恒温灌流装置，培养细胞得率高，细胞活性高，操作快捷方便，工作效率高，收集过程污染几率低；适用于各种脐带血管内皮细胞收集的工序中。

摘要： 本发明提供公开了涉及一株具有保护人脐静脉内皮细胞损伤的虫生真菌菌株及应用。其特征在于该菌株编号为CH180672，分类为simplicillium lamellicola，保藏号CGMCC No.19145。本发明用高糖建立人脐静脉内皮细胞损伤模型；体外实验结果表明：该菌株与模型组相比，可以提高细胞存活率，降低细胞内ROS、MDA水平，升高超氧化物歧化酶SOD的水平；蛋白免疫印迹法可知，此真菌使Nrf‑2、HO‑1、NQO1的蛋白表达水平上调；可以改善由高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤。

摘要： 本发明公开了一种长链非编码RNA XLOC_025806及其在人脐静脉内皮细胞中的应用。本发明检通过基因工程技术外源合成lncRNA XLOC_025806的超表达载体和沉默试剂lncRNA XLOC_025806 Silencer，检测超表达/沉默lncRNA XLOC_025806后人脐静脉内皮细胞的增殖、凋亡情况，结果证实了lncRNA XLOC_025806能够参与抑制人脐静脉内皮细胞的增殖、促进人脐静脉内皮细胞的凋亡，并促进内皮细胞体外小管的形成，进一步说明lncRNA XLOC_025806通过调控人脐静脉内皮细胞的功能参与血管新生过程。

摘要： 本发明公开一种长链非编码RNA XLOC_102237及其在人脐静脉内皮细胞中的应用。本发明检通过基因工程技术外源合成lncRNA XLOC_102237的超表达载体和沉默试剂lncRNA XLOC_102237 Silencer，检测超表达/沉默lncRNA XLOC_102237后人脐静脉内皮细胞的增殖、凋亡情况，结果显示lncRNA XLOC_102237能够参与抑制人脐静脉内皮细胞的增殖、促进人脐静脉内皮细胞的凋亡，并抑制内皮细胞体外小管的形成，进一步说明lncRNA XLOC_102237可能通过抑制人脐静脉内皮细胞的增殖而抑制血管新生。

摘要： 本发明属于肿瘤预防技术方法领域，具体涉及一种由肿瘤微环境诱导的肿瘤化的人脐静脉内皮细胞疫苗及其在抗结肠癌肿瘤血管生成中的应用的专利申请。所述疫苗制备时包括：收CT26细胞的上清、CT26细胞上清诱导HUVEC细胞、收集、戊二醛固定等步骤。本申请将肿瘤血管内皮细胞作为肿瘤免疫治疗中的靶点，属于主动免疫治疗中的一种。本申请通过体外模拟肿瘤微环境，诱导制备了肿瘤化的HUVEC疫苗。初步实验结果表明，所制备的肿瘤化HUVEC疫苗，能够产生更有效的抑制肿瘤血管生成的作用，进而发挥抗结肠癌肿瘤生长的作用，表现出了较好的应用效果，同时也为基于抗肿瘤血管生成治疗方法的应用提供了新的可能。

摘要： 本发明提供了一种间充质干细胞条件培养基保护受损内皮细胞的机制，在TNF‑α诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型中，间充质干细胞条件培养基能促进受损内皮细胞的横向迁移，增强细胞活力，降低细胞内炎症因子的表达水平，抑制p38‑MAPK信号通路的激活，从而发挥保护作用。该条件培养基是通过激活PPARγ进而抑制p38‑MAPK信号通路，使用PPARγ抑制剂GW9662能够阻断间充质干细胞的治疗作用，该机制为内皮细胞损伤的修复提供了可行的思路及方法，对急性肺损伤的治疗提供重要的理论依据。

摘要： 本发明公开了lncRNACACF吸附miR‑520b‑3p在调控人脐静脉内皮细胞周期中的应用。本发明采用细胞生物学的方法第一次证实了长链非编码RNA CACF在人脐静脉内皮细胞中竞争性吸附miR‑520b‑3p，并通过Annexin V‑FITC/PI技术以及miR‑520b‑3p和lncRNA CACF超表达载体共转染回复实验，证实了lncRNA CACF吸附miR‑520b‑3p促进人脐静脉内皮细胞周期进程中的应用。

摘要： 本实用新型公开了一种带有固定机构的人脐静脉内皮细胞培养用吸管，包括管体与吸头，所述管体外表壁固定连接有固定套，所述固定套外表壁通过开设的螺纹槽旋合连接有环形顶板，所述环形顶板底部固定连接有两组相对称的弧形板，所述环形顶板底板滑动连接有两组相对称的夹块，两组所述夹块与弧形板交替分布。本实用新型中，将吸管插入培养瓶内时，可将管体部分伸入培养瓶内，通过拉动夹块两端的拉块使夹块张开，再次伸入吸管，使两夹块夹持在瓶口外壁，实现吸管的稳定，此时通过人工操作，避免了吸管发生抖动，并落入瓶内造成污染的情况发生，加强了对吸管的可操作性。