牙髓再生

摘要： 背景:小细胞外囊泡是细胞旁分泌途径中的重要成分,近些年小细胞外囊泡在口腔组织再生中的应用受到广泛关注。目的:对小细胞外囊泡在牙周和牙髓组织再生中的作用和应用进展做一综述。方法:检索近10年Pub Med、Web of science数据库及中国知网和万方医学数据库,英文检索词为“small extracellular vesicles,exosomes,pulp stem cells,periodontal regeneration,bone regeneration,pulp regeneration,regenerative endodontics,revascularization”,中文检索词为“小细胞外囊泡,外泌体,牙髓干细胞,牙周组织再生,骨再生,牙髓再生,牙髓血运重建”。经过文题、摘要的筛选,排除相关性差及陈旧和重复的文献,对最终符合标准的71篇文献进行综述。结果与结论:(1)小细胞外囊泡由多种细胞分泌,参与细胞间通讯,介导免疫应答反应,在组织再生中具有较大的应用潜力;(2)小细胞外囊泡在牙周组织修复再生中发挥重要的作用,可调控牙周炎症,促进牙周膜和周围骨组织再生;(3)小细胞外囊泡作用于牙源性干细胞可再生功能性牙髓-牙本质复合体。

摘要： 背景:常规根管治疗去除所有牙髓组织会导致牙的生理功能和组织再生能力丧失,体外培养牙髓干细胞并使之形成牙髓样组织,再移植入髓腔内成为了理想的牙髓再生治疗方法。目的:汇总阐述通过共培养体系诱导牙髓干细胞形成牙髓样组织的研究进展,为牙髓组织再生的干细胞治疗方法提供思路。方法:第一作者于PubMed、中国知网和万方数据库检索时限为2022年5月以前发表的相关文献。英文检索词为“dental pulp regeneration,dental pulp stem cell,co-culture,tissue engineering,signaling pathway”,中文检索词为“牙髓再生、牙髓干细胞、共培养、组织工程、支架、信号通路”,纳入67篇符合标准的文献进行总结阐述。结果与结论:①共培养体系由细胞主体和组合细胞通过不同的组合方式构成。②现阶段共培养体系组合方式可分为直接共培养与间接共培养2种,生物支架材料的介入、培养条件的改变等作用又可将共培养结局分为二维和三维再生组织。③直接共培养通过细胞间接触构建生理性的细胞外基质以及利于干细胞增殖分化的微环境。④间接共培养解决了组合细胞来源不足、不同个体间免疫排异反应等问题,组合细胞产生的生物因子更易制成临床使用的药物和生物支架材料。⑤目前共培养体系在成血管有优越表现,但其他结构相关报道较少,且共培养结局形成的再生组织仍具有不确定性。同时,由于牙体解剖结构、排异反应等限制因素,将共培养体系生成的再生组织运用于临床仍然困难。

摘要： 牙髓再生是一种治疗年轻恒牙牙髓感染或坏死的新技术.该方法能促进未发育完全的牙齿根尖孔闭合,使根管壁增厚且牙根增长.为提高牙髓再生的成功率,需有合适的支架提供三维空间位置定位并调节干细胞的分化、增殖或代谢.支架是牙髓再生的关键因素,目前已发现多种支架有应用于牙髓再生的潜力,它们来自生物提取或人工合成,各有优势.生物提取支架主要包括血凝块、富血小板血浆、富血小板纤维蛋白、多糖、胶原、丝、脱细胞细胞外基质等,人工合成支架主要包括聚合物、生物陶瓷及复合支架.本文对上述多种牙髓再生支架材料的性能和应用前景方面的进展作一综述.

摘要： 目的观察血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)多向诱导分化以及自噬相关蛋白表达的影响;建立异位牙髓再生模型,探讨PDGF-BB对再生牙髓样组织中自噬相关蛋白表达的影响。方法体外分离鉴定大鼠BMSCs,随机分为4组,每组培养基中分别加入0、10、50、100 ng/mL PDGF-BB,通过CCK-8、Transwell、qRT-PCR及细胞免疫荧光染色技术,检测不同浓度PDGF-BB对BMSCs增殖、迁移、多向诱导分化及自噬相关蛋白表达的影响,确定PDGF-BB趋化BMSCs细胞归巢的最佳工作浓度范围。依据是否放入PDGF-BB,将试验大鼠随机分为两组:对照组(Collagen TypeⅠ),PDGF-BB诱导组(50 ng/mL PDGF-BB+Collagen TypeⅠ),将PDGF-BB联合Collagen TypeⅠ支架移植入经过根管预备后的离体牙根管内,并移植于大鼠腹部皮下。分别于术后2、4个月,采用免疫组化染色技术观察异位再生牙髓样组织的再生效果及其自噬相关蛋白ATG5和LC3的表达。结果CCK-8结果显示,BMSCs增殖活性随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);Transwell结果显示,细胞迁移数随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);qRT-PCR结果显示,OPN、Runx2、MAP2、β-Ⅲ-tubulin mRNA表达量随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05),当PDGF-BB浓度达到100 ng/mL时,mRNA表达量达到最大值;细胞免疫荧光染色结果显示,ATG5和LC3阳性细胞数量随PDGF-BB浓度升高递增,50 ng/mL PDGF-BB诱导后,ATG5和LC3阳性细胞数最大;术后4个月PDGF-BB诱导组得到的再生牙髓样组织形态与天然人牙髓组织相近,其ATG5、LC3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs增殖,对BMSCs具有显著趋化作用。PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs向成骨细胞及神经细胞分化,并促进自噬相关蛋白的表达。联合使用PDGF-BB可以有效获得内源性BMSCs迁移,促进大鼠体内牙髓样组织异位再生,及自噬相关蛋白表达。

摘要： 组织工程为牙髓再生提供了新的可能,支架作为组织工程三要素之一,受到了越来越多的关注。由于根管系统受长而狭窄的管腔独特解剖结构的限制,预成型支架虽应用方便但无法完全布满整个根管空间,因此,可注射性支架可能是牙髓组织工程的较理想选择。水凝胶是一种亲水聚合物网络,具有类似软组织的物理特性,并可提供多孔的亲水性微环境,后者方便扩散氧气和营养物质。近年来,研究者们用不同力学性能和(或)载生物活性成分的可注射性水凝胶作为支架来促进血运重建和牙髓再生,研究结果表明天然高分子水凝胶、合成高分子水凝胶、结合天然和合成高分子的复合型水凝胶均具有优异的生物相容性;水凝胶的类型和力学性能、生物活性成分的添加可影响干细胞行为;明胶基水凝胶及纤维蛋白基水凝胶等还可实现快速血管化,这为牙髓样组织形成创造了条件。其中,光交联甲基丙烯酰化明胶/透明质酸水凝胶、与具有抗菌及温敏性能的壳聚糖相结合的双/多组分水凝胶及新型自组装肽由于优异的性能成为近年来的研究热点。为了开发适宜水凝胶支架并促进其在牙髓再生方面的应用,本文对用于牙髓再生的可注射水凝胶的种类、制备和应用等方面的研究进展进行综述。

摘要： 牙髓炎是常见的口腔疾病之一,目前常采取的治疗手段难以恢复牙髓的结构和功能,通过再生医学原理探索牙髓再生的策略成为目前的研究热点。根管和牙髓腔的形态具有特殊性,牙髓组织再生的难点在于牙髓血管网络的重建。牙髓血管形成策略研究目前主要集中于两个方向:原位血管生成策略和移植物预血管化技术。本文系统分析了基于牙髓干细胞的牙髓再生中血管再生的研究成果,重点讨论了体内原位血管生成的基本原理和促进血管再生过程中的信号分子、理化因素以及细胞外囊泡的调控作用;对预血管化系统所采用的细胞来源、血管网络构建条件、凝胶支架选择与微环境的配置进行了总结和讨论;同时对目前相关预血管化技术的临床研究情况进行了归纳,并对预血管化技术在牙髓再生中血管网络重建中的可行性和应用前景进行了探讨和展望。

摘要： 口腔颌面部组织缺损会严重影响患者的美观与功能,有效修复缺损是当前临床工作的重点。口腔组织工程通过支架、生长因子及干细胞等的应用,实现了组织再生与功能重建。干细胞与支架的复合材料以其良好的再生性能广泛应用于口腔组织再生,但干细胞生物相容性差、可用率低,存在临床应用瓶颈。外泌体相较于干细胞免疫原性低、产量高,有望代替干细胞应用于临床。日益丰富的支架材料与结构可有效保护并递送外泌体到达靶组织。目前,有关外泌体复合支架应用的研究覆盖了颌骨、关节软骨、牙髓及牙周组织再生。本文就外泌体复合支架在口腔颌面部组织再生中的研究作一综述。

摘要： 目的探讨沉默N-cadherin对人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)增殖和迁移能力的影响,为基于DPSCs的牙髓再生提供实验依据。方法采用N-cadherin shRNA慢病毒转染DPSCs,qRT-PCR、Western blot检测N-cadherin的表达水平,验证沉默效率。实验分为阴性对照组(shRNA-NC)和N-cadherin shRNA沉默组。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Transwell法检测细胞迁移能力。结果N-cadherin shRNA可显著降低DPSCs的N-cadherin mRNA和蛋白的表达水平(P<0.001)。N-cadherin shRNA组细胞增殖活性分别在细胞接种的第3、4天高于shRNA-NC组,第6~8天低于shRNA-NC组,差异均具有统计学意义(P<0.05);在第3天时,N-cadherin shRNA组处于S期和G2期的细胞比例大于shRNANC组(P<0.05);在第6天时,N-cadherin shRNA组细胞处于S期和G2期的比例小于shRNA-NC组(P<0.05),同时N-cadherin shRNA组凋亡细胞比例大于shRNA-NC组(P<0.01);分别以低细胞密度和高细胞密度接种于Transwell上室培养20 h,N-cadherin shRNA组穿过Transwell上室小孔的细胞数量均多于shRNA-NC组(P<0.001)。结论沉默N-cadherin表达可促进DPSCs早期的增殖和迁移能力。

摘要： 再生性牙髓治疗可以作为治疗年轻恒牙牙髓坏死的首选治疗方案,其原理是通过细胞归巢作用实现组织修复和牙髓再生,具有促进牙根继续发育、根尖孔闭合以及根管壁增厚的优点。目前再生性牙髓治疗已经实现初步临床应用,并取得了良好的疗效,但缺乏统一的临床疗效评估手段和影响其成功的因素分析。本文就再生性牙髓治疗的评判标准和影响其成功的因素进行综述。

摘要： 牙髓再生技术是近年来的研究热点,也是根管治疗的良好替代治疗手段。目前对于牙髓再生的研究主要集中在年轻恒牙,而实际上需要接受牙髓治疗的成熟恒牙远多于年轻恒牙,因此牙髓再生技术应用于成熟恒牙有巨大的应用前景。相比年轻恒牙,成熟恒牙的根尖孔已发育完全、解剖结构多样、微环境复杂,牙髓再生难以实现。本文对成熟恒牙在牙髓再生中的根管预备、根管感染控制、干细胞来源及生长因子及支架的应用面临的困难及应对策略作一综述,为成熟恒牙牙髓再生技术的应用提供参考。

摘要： 以生物学组织工程为基础的牙髓再生是是将干细胞辅以支架，移植到根管，通过各种生长因子诱导干细胞分化为成牙本质细胞，同时形成含神经血管分布的新生牙髓。牙髓血运重建，为组织工程牙髓提供一个可以生存的环境是实现牙髓再生的一个必备条件。环氧二十碳四烯酸（EETs）具有抗炎、止痛、促进微血管形成和促进组织再生功能。使用可溶性环氧化物水解酶抑制剂（s EHi）抑制体内环氧化物水解酶水解从而内源性增加体内EETs水平。使用牙髓再生组织工程方法，研究环氧化物水解酶抑制剂（sEHi）药物是否能促进牙髓的再血管化促进牙髓再生。

摘要： 以组织工程技术为基础的牙髓再生为年轻恒牙牙髓病或根尖周病的治疗提供了新的方向。富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin, PRF）是第二代血小板浓缩物，包含大量生长因子，为干细胞提供生物性的生长环境和支架。本研究拟在培养根尖牙乳头干细胞（stem cells from apical papilla, SCAP）细胞膜片并对其组织学形态和生物学性能进行研究的基础上，构建裸鼠背部牙根片段种植模型，联合应用SCAP细胞膜片和PRF观察牙髓再生，为优化年轻恒牙牙髓再生治疗提供实验基础。

摘要： 细胞外基质材料是一种有效促进目标组织再生和修复的生物材料.在牙髓组织再生领域,牙髓组织细胞外基质材料能够有效促进牙髓组织的再生和修复.然而,异种来源牙髓细胞外基质材料本身存在基质材料体积大,形态与正常人体牙髓腔不相符的问题.本研究拟通过对小型猪来源的牙髓细胞外基质材料进行物理改性后使该生物材料的移植方式变为注射移植方式,提高该生物材料使用效率.

摘要： 细胞外基质材料是一种有效促进目标组织再生和修复的生物材料.在牙髓组织再生领域,牙髓组织细胞外基质材料能够有效促进牙髓组织的再生和修复.然而,异种来源牙髓细胞外基质材料本身存在基质材料体积大,形态与正常人体牙髓腔不相符的问题.本研究拟通过对小型猪来源的牙髓细胞外基质材料进行物理改性后使该生物材料的移植方式变为注射移植方式,提高该生物材料使用效率.

摘要： 细胞外基质材料是一种有效促进目标组织再生和修复的生物材料.在牙髓组织再生领域,牙髓组织细胞外基质材料能够有效促进牙髓组织的再生和修复.然而,异种来源牙髓细胞外基质材料本身存在基质材料体积大,形态与正常人体牙髓腔不相符的问题.本研究拟通过对小型猪来源的牙髓细胞外基质材料进行物理改性后使该生物材料的移植方式变为注射移植方式,提高该生物材料使用效率.

摘要： 细胞外基质材料是一种有效促进目标组织再生和修复的生物材料.在牙髓组织再生领域,牙髓组织细胞外基质材料能够有效促进牙髓组织的再生和修复.然而,异种来源牙髓细胞外基质材料本身存在基质材料体积大,形态与正常人体牙髓腔不相符的问题.本研究拟通过对小型猪来源的牙髓细胞外基质材料进行物理改性后使该生物材料的移植方式变为注射移植方式,提高该生物材料使用效率.

摘要： 本发明涉及口腔医学领域，具体而言，涉及一种基于牙髓牙本质复合体的再生构建方法及构建牙髓牙本质复合体结构的生物支架材料。该方法，首先制备牙髓组织细胞外基质材料；其次将牙髓组织细胞外基质注射材料与干细胞混合，得到混合材料；最后将这种混合材料与蛋白因子复合。从而获得牙髓牙本质复合体的再生复合体结构，实现牙髓牙本质复合体的完整再生。通过将DPEM制备成可注射用材料，改善了DPEM制备过程中脱细胞制备时间、异种核酸残留量将进一步减少。将该DPEM注射材料中在牙髓‑牙本质交界表面添加了生长因子，有效调控细胞的粘附、迁移与分布，从而促进牙髓牙本质复合体的再生，实现牙髓组织的完整再生。

摘要： 本发明涉及一种诱导牙髓牙本质组织再生的双层复合支架制备方法，包括以下步骤：(1)以植酸为前驱体合成的生物活性玻璃(PSC)的制备；(2)PSC的多肽改性；(3)支架外层部分的制备；(4)支架内层部分的制备；(5)双层支架的交联完成：将步骤(4)中获得的支架浸泡于0.1％‑0.5％戊二醛交联剂中，使内外层支架交联形成具有双层结构的复合支架。本发明具有分层诱导能力且顺应牙的根管形态，用于诱导牙髓牙本质复合组织再生的生物活性支架材料；支架内层能够趋化干细胞的迁移爬入，利于牙髓样软组织的生成；支架外层能够进一步诱导细胞成牙本质向分化，促进牙本质样硬组织的生成；最终形成具有类似天然牙齿的特殊软硬组织。

摘要： 本发明涉及一种牙髓和/或牙本质再生的可降解水凝胶，其特征在于所述水凝胶以壳聚糖和二4‑醛基苯甲酸聚乙二醇酯的反应物作为支架材料，所述水凝胶还含有表皮生长因子（EGF）和白细胞介素‑2。本发明的水凝胶具有自我修复功能，可以方便地注射到需要治疗的牙髓腔中，通过表皮生长因子（EGF）、白细胞介素‑2和支架材料的共同协同作用，修复细胞进入牙髓腔并发挥修复作用，从而再生和修复患病牙髓和牙本质。

摘要： 本发明涉及口腔医学领域，具体而言，涉及一种基于牙髓牙本质复合体的再生构建方法及构建牙髓牙本质复合体结构的生物支架材料。该方法，首先制备牙髓组织细胞外基质材料；其次将牙髓组织细胞外基质注射材料与干细胞混合，得到混合材料；最后将这种混合材料与蛋白因子复合。从而获得牙髓牙本质复合体的再生复合体结构，实现牙髓牙本质复合体的完整再生。通过将DPEM制备成可注射用材料，改善了DPEM制备过程中脱细胞制备时间、异种核酸残留量将进一步减少。将该DPEM注射材料中在牙髓‑牙本质交界表面添加了生长因子，有效调控细胞的粘附、迁移与分布，从而促进牙髓牙本质复合体的再生，实现牙髓组织的完整再生。

摘要： 本发明涉及结缔组织(例如骨、牙本质或牙髓)再生领域中的再生材料。更确切地，本发明涉及一种结缔组织再生材料，优选为骨、牙本质或牙髓再生材料，其包含：‑具有相互连接的孔的多孔聚合物基质；和‑非水合硅酸钙颗粒；其中：所述聚合物基质是无水的；所述非水合硅酸钙颗粒的d50粒度优选为0.05μm至小于基质孔的平均直径大小；和所述非水合硅酸钙颗粒覆盖在基质孔的内壁上。本发明还涉及制备所述结缔组织再生材料的方法。本发明还涉及所述再生材料例如在牙科领域的用途；特别是为再生材料提供改善的生物力学和骨诱导特性(即良好的细胞迁移、黏附和增殖；增强的机械特性；以及最佳且可控制的生物降解性)。

摘要： 本发明提供一种用于牙髓再生的多能干细胞MDPSCs，属于组织工程技术领域。所述MDPSCs为从牙间充质组织中分离的CD24a阳性细胞，所述MDPSCs在3D培养条件下展现自更新能力，形成阳性表达多能相关标志基因Sox2，Nanog，Oct4和Ki67的细胞小球。本发明还提供所述多能干细胞的制备方法及应用。本发明多能干细胞MDPSCs用3D培养的方法对其成功分离和富集，并结合流式细胞术定义了MDPSCs的特征性表面标记。MDPSCs裸鼠体内移植能够再生牙髓，可替代传统根管治疗，在消除牙髓炎症的前提下保存活髓。本发明多能干细胞MDPSCs具有形成血管化牙髓‑牙本质复合体的能力，为研究功能性牙髓再生以及临床转化应用提供了细胞基础。

摘要： 本发明提供一种促内源性牙髓再生注剂、制法及BMP7在制备牙髓再生注剂中的应用，通过胶原凝胶搭载BMP7细胞因子，诱导根尖部的静止干细胞向根管内部迁移，再生缺失的牙髓组织。其中，BMP7细胞因子通过诱导内源性干细胞归巢和牙向分化触发牙髓组织再生，并且作为促血管生成因子介导再生牙髓组织中的血管形成，而胶原凝胶提供了良好的再生微环境，支持干细胞的粘附，伸展，自我更新。相较于细胞移植，注剂具有更可靠的安全性和经济性。此外，本发明提供的含BMP7注剂用于因牙髓部分或全部坏死导致的牙髓丧失临床问题，能够有效简化基于细胞移植策略的牙髓再生治疗步骤，促进内源性的牙髓组织再生，减少病患痛苦。

摘要： 本发明涉及属于生物材料领域。具体涉及一种促牙髓‑牙本质复合体再生支架及其制备方法与应用。本发明提供一种促牙髓‑牙本质复合体再生的脱落乳牙干细胞细胞外基质支架（extracellular matrix scaffold of stem cells from exfoliated deciduous teeth，SHED‑ECMS）及其制备方法。首次应用脱落乳牙干细胞细胞外基质成功制备牙髓仿生型SHED‑ECMS，其具有牙髓组织形态和结构，可以实现个性化制备。SHED‑ECMS能够为参与牙髓再生的干细胞定植、增殖、分化提供适宜的微环境，能够定向诱导骨髓间充质干细胞成牙本质向分化，形成管状修复性牙本质，网状牙髓样组织，以促进牙髓‑牙本质复合体再生，减少再生性牙髓治疗术后根管内不规则骨样钙化物形成。SHED‑ECMS具有优秀的生物相容性，无细胞毒性，适宜的降解性能，低免疫源性，适于临床应用。

摘要： 本发明涉及一种生物活性根充材料的制备方法，用于牙髓再生性治疗。该生物活性根充材料由乳牙牙髓干细胞聚合体及其外泌体构成，即先将乳牙牙髓干细胞诱导培养形成聚合体，再复合其来源的大量外泌体植入根管内，形成生物活性牙髓。本发明的根充材料，在体内可形成新生富含血管的类牙髓样组织、牙髓‑牙本质复合体结构，恢复牙齿的活性及功能。该根充材料具有可塑性强、生物相容性好、活性物质丰富、便于应用操作等优点，具有良好的临床应用前景。

摘要： 本公开涉及生物材料与临床医学技术领域，提供了一种注射剂、注射剂的制备方法及其在牙髓再生中的应用。该注射剂包括作为分散相的复合制剂和作为连续相的分散液。复合制剂包括药物、微载体和干细胞，药物被包裹于微载体内部，干细胞贴附于微载体表面。分散液是选自平衡盐溶液、无血清培养基、可注射水凝胶所组成的群组中的至少一种。该注射剂主要应用于临床功能性牙髓组织再生，实现患牙根管内牙髓再生。利用本公开，能够实现根管内神经化及血管化的牙髓样组织形成，恢复牙髓组织的营养、防御、感觉功能，提高患牙使用寿命。