胸腺素

摘要： 为提高胸腺素(又名胸腺肽,thymosin)的体外表达效率,本研究采用设计融合标签的方法对胸腺素α1和β4 (Tα1,Tβ4)进行体外重组表达,通过超高效液相色谱-飞行时间质谱联用(LC/MS)法,对融合蛋白的完整分子量进行验证,利用反相超高效液相色谱法对不同表达载体的单位表达量进行测定。结果表明,A18-KEKE、DKL6K两种融合标签能够高效地表达Tα1和Tβ4。LC/MS结果表明,所有被测样品的过表达条带中均含有融合标签的目的多肽,且带有融合标签A18-KEKE的胸腺素的单位表达量达73~123 mg·OD^(-1)·L^(-1)。A18-KEKE、DKL6K 2种融合标签可以有效地促进胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)、胰高血糖素样肽-2 (GLP-2)、甲状旁腺激素(PTH 1-34)和糖依赖性胰样多肽(GIP)的表达,证实了这2种融合标签的广谱适用性。本研究成功筛选到了2种融合标签,可用于多种胸腺素家族多肽在大肠杆菌中的重组表达,且融合蛋白单位表达量较高,提高了胸腺肽类产品重组生产的效率,极大地降低生产成本,具有广泛的应用前景。

摘要： 目的 以C57BL/6小鼠为动物模型,观察美洲大蠊Periplaneta americana胸腺素对小鼠毛发生长及生长周期的影响.方法 将背部脱毛的C57BL/6小鼠分为PBS组(空白处理)、THY1组(给药浓度500μg·mL-1)、THY2组(给药浓度500μg·mL-1)、THY3组(给药浓度500μg·mL-1)和Tβ4组(给药浓度500μg·mL-1),连续给药18 d,记录小鼠皮肤颜色变化时间、脱毛区毛发生长状况以及毛囊组织学特征和毛囊数目的变化.通过实时荧光定量PCR法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、β-连环蛋白(β-catenin)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平.结果 与PBS组相比,给药组小鼠脱毛后皮肤颜色由粉红变黑的时间更短,毛囊数量均明显更多,且给药组小鼠毛发生长更快.在给药第6天,THY1组和THY3组的β-catenin表达明显高于PBS组;给药第18天,THY2组的MMP-2表达明显高于PBS组,且THY1组的IGF-1表达明显高于PBS组.结论 美洲大蠊胸腺素可以促进C57BL/6小鼠的毛发生长,可能通过提高β-catenin、MMP-2和IGF-1的表达来调控小鼠的毛囊发育与毛发生长.

摘要： 目的 探讨胸腺素联合AP方案(培美曲塞二钠+顺铂)治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及对免疫功能的影响.方法 选取2013年1月至2015年1月东南大学医学院附属江阴医院收治的116例Ⅲ/Ⅳ期非小细胞肺癌患者为研究对象,根据治疗方法不同分为对照组(62例)和观察组(54例).两组患者均采用AP化疗方案,第1天给予培美曲塞二钠500mg/m2;第1～3天给予顺铂75mg/m2.21d为1个周期,治疗时间为2个周期.观察组在AP方案治疗的基础上,皮下注射胸腺素注射液20mg,隔日1次,治疗时间为42d.完成42d的治疗后,评价两组患者的临床疗效及不良反应发生情况.应用Kaplan-Meier法进行生存分析,统计1、2、3年生存率.分别于治疗前、治疗后3个月,检测外周血中CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群含量,计算CD4+/CD8+值.结果 两组患者近期临床疗效、不良反应发生情况、累及生存率无明显差异(P>0.05).观察组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05).结论 胸腺素联合AP方案治疗晚期非小细胞肺癌临床疗效良好,能够增加特异性淋巴细胞的功能,调节机体免疫反应.

摘要： 美洲大蠊Periplaneta americana胸腺素基因具有THY1、THY2和THY3三个不同剪接体,其中THY3结构域最多.本研究使用实时荧光定量PCR技术比较分析了THY3在美洲大蠊不同性别、不同发育阶段及不同组织中的表达差异,以及大肠杆菌Escherichia coli诱导对美洲大蠊血淋巴和脂肪体中THY3表达的影响.结果 表明:THY3在成虫期的表达量显著高于其他虫期,雌虫表达量显著高于雄虫,脂肪体表达量显著高于血淋巴、头部、肌肉、体壁组织.雌性成虫体腔注射大肠杆菌3h后血淋巴中THY3表达量显著增高,而在脂肪体中12h后才检测到THY3表达明显上调,研究结果为进一步研究美洲大蠊胸腺素的功能打下了基础.

摘要： 目的 研究胸腺素β4对体外培养大鼠皮质神经细胞氧糖剥夺-复氧(OGD/R)损伤的保护作用及其机制.方法 分离并鉴定原代培养的皮质神经细胞,通过OGD/R法建立皮质神经细胞模拟缺血-再灌注损伤模型(氧糖剥夺6 h,复氧12 h).实验分为对照组、模型组、治疗组(建模前2 h加入胸腺素β4).CCK8法确定胸腺素β4的最佳作用浓度,流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,Western blotting检测78000葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bax的表达水平并进行组间比较.应用SPSS 19.0软件分析处理数据,正态分布的计量资料3组间比较采用单因素方差分析.结果 大鼠皮质神经细胞被正确分离.胸腺素β4最佳作用浓度为10μg/L.与对照组比较,模型组皮质神经细胞存活率明显下降(P=0.002),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),GRP78、CHOP、Bax表达水平明显升高(P值分别为0.034、0、0.045),Bcl-2的表达水平明显下降(P=0.006);与模型组比较,治疗组(10μg/L外源性胸腺素 β4)细胞活力明显增高(P=0.008),细胞凋亡率明显降低(P=0.002),GRP78、CHOP、Bax表达水平明显下降(P值分别为0.032、0.027、0.019),Bcl-2表达水平明显升高(P=0.028),差异均有统计学意义.结论 胸腺素β4能抑制OGD/R诱导的内质网应激依赖性细胞凋亡,为胸腺素β4在脑缺血-再灌注损伤治疗中的应用提供了理论依据.

摘要： 目的 探讨应用恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)或胸腺素治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者的效果.方法 在88例代偿期乙型肝炎肝硬化患者中,接受恩替卡韦治疗者38例,接受恩替卡韦联合PEG-IFNα-2a治疗者17例,联合胸腺素治疗者33例,随访2年.结果 恩替卡韦治疗组治疗前和治疗104 w末血清HBV DNA水平分别为(5.6±1.7)IU/ml和(1.0±0.7)IU/ml(P0.05).结论 恩替卡韦能有效抑制HBV DNA复制,维持代偿期肝硬化患者的肝功能,本研究结果看不出联合用药有任何好处,需要进一步观察.

摘要： 目的：构建表达重组胸腺素α1(Tα1)的pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌。方法：将人工合成的Tα1序列进行PCR扩增,将扩增的片段和pMAL-C2x质粒载体分别经BamHI和EcoR I双酶切后,用T4 DNA快速连接酶连接构建pMAL-C2x-Tα1融合表达质粒,再经测序正确后,将重组体转化至大肠埃希菌TB1菌中,pMAL-C2x-Tα1/TB1菌在LB液体培养基中培养,经IPTG诱导表达麦芽糖结合蛋白与Tα1的融合蛋白(MBP-Tα1),采用Westernblot对MBP-Tα1进行鉴定。结果：pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌能有效表达MBP-Tα1,融合蛋白占菌体蛋白的33.6％,分子量约为45×103.结论：工程菌的成功构建和表达为重组Tα1的纯化、生物学活性等研究奠定了基础。

摘要： 胸腺素(Tal)是一种针对T淋巴细胞的免疫增强剂,临床上主要作为肿瘤病人和慢性活动性肝炎病人的免疫调节剂.作为肽类药物,Tal具有给药剂量大、用药周期长、生物利用度低,半衰期短,药效难以维持等不足之处. 为了改善Tal的代谢行为,延长半衰期,本研究根据Tal二级构象的特点,选择N-末端(1-)、C-末端(28-)及β-转角区域(5-、8-)的位点,采用半胱氨酸(Cys)对Tal以上不同位点的氨基酸进行替换,合成TC系列;然后将大分子聚乙二醇(PEG)与TC系列的Cys偶联,合成了PT系列,即PEG化的Tal.本文以大鼠肝匀浆为代谢模型,研究Tal及其系列结构修饰物TC系列和PT系列的体外代谢性质,考察了PEG对于抗酶解作用的影响,为进一步通过结构改造研发长效、高活性的肽类药物提供了有价值的数据.

摘要： 随着生物技术的迅速发展,人们越来越重视瘢痕疙瘩和增生性瘢痕发生的生物学机制,研究发现瘢痕发生可能与某些基因相关.本研究前期实验通过构建瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的cDNA文库,并进行消减杂交,发现胸腺素β4在瘢痕疙瘩组织中表达减少,初步提示与瘢痕形成负相关.本实验对其在组织中的mRNA表达进行研究,进一步验证其与瘢痕形成的关系,并对其作用机制进行初步探讨.

摘要： 胸腺素是由胸腺上皮细胞合成和分泌的多种生化性质不同的具有激素样活性的多肽类物质的总称。近年来的研究显示胸腺素具有延缓衰老的作用。该文从延缓机体免疫衰老的角度阐述了胸腺素对胸腺、T淋巴细胞、B淋巴细胞、红细胞、LAK细胞、NK细胞的免疫调节作用及其机理。

摘要： 将胸腺素α基因4串体克隆于pTHioHisA融合表达载体(pTHioHisA-T(α④)，转化大肠杆菌TOP10。在IPTG诱导下，融合蛋白得到了高效表达。SDS-PAGE分析确定诱导表达 的融合蛋白占菌体总蛋白的40℅，一表达的融合蛋白主要以可溶形式存在。反用离子交换层析可纯化出目的蛋白进行CNBr化学裂解，经简单的离子交层析可纯化出胸腺素α单体，HPLC鉴定胸膛素α的纯度达98℅。利用H-TdR进行生物活性测定，证实融合蛋白和胸腺素α单体均具有在致有丝分裂原ConA存在的条件下，刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力，具有和化学合成的胸腺素α相似的生物活性。此研究为胸腺素α的大规模开发生产奠定了基础。

摘要： 本试验以佳粉2号番匣和美味樱桃番茄为材料,利用农杆菌侵染子叶叶盘的方法,成功地将胸腺素基因转入到番茄中.美味樱桃番茄共得到34棵再生植株,PCR检测阳性株为4棵,占总株数的11.8℅.佳粉2号共得到17棵再生植株,PCR检测阳性株为15棵,占总株数的88.2℅.

摘要： 目的:探讨胸腺因子D对垂体生长激素老龄性改变的逆转作用.方法:雌、雄21月老龄SD大鼠各随机分成两组,一组隔日背部皮下注射胸腺因子D 2mg kg,另一组及6月青龄雌、雄对照组注射等量生理盐水;连续处理3个月后,用放射免疫法测定腺垂体组织和血清生长激素.结果:与雄性青龄对照组相比,雄性老年组血清GH升高,垂体组织GH呈下降趋势,给药后,这些老年性改变可部分得到改善;血清GH在各雌性大鼠间无差异.结论:胸腺因子D可逆转老龄雄性大鼠生长激素的老龄性改变,从而延缓衰老.

摘要： 目的:探讨胸腺因子D对垂体生长激素老龄性改变的逆转作用.方法:雌、雄21月老龄SD大鼠各随机分成两组,一组隔日背部皮下注射胸腺因子D 2mg kg,另一组及6月青龄雌、雄对照组注射等量生理盐水;连续处理3个月后,用放射免疫法测定腺垂体组织和血清生长激素.结果:与雄性青龄对照组相比,雄性老年组血清GH升高,垂体组织GH呈下降趋势,给药后,这些老年性改变可部分得到改善;血清GH在各雌性大鼠间无差异.结论:胸腺因子D可逆转老龄雄性大鼠生长激素的老龄性改变,从而延缓衰老.

摘要： 目的:探讨胸腺因子D对垂体生长激素老龄性改变的逆转作用.方法:雌、雄21月老龄SD大鼠各随机分成两组,一组隔日背部皮下注射胸腺因子D 2mg kg,另一组及6月青龄雌、雄对照组注射等量生理盐水;连续处理3个月后,用放射免疫法测定腺垂体组织和血清生长激素.结果:与雄性青龄对照组相比,雄性老年组血清GH升高,垂体组织GH呈下降趋势,给药后,这些老年性改变可部分得到改善;血清GH在各雌性大鼠间无差异.结论:胸腺因子D可逆转老龄雄性大鼠生长激素的老龄性改变,从而延缓衰老.

摘要： 本发明公开了一种胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因及其重组蛋白的制备方法。本发明的经改造后的胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明同时公开了该基因表达的重组蛋白制备及活性检测的方法，具体涉及胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的改造、基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达、重组蛋白的制备和发酵培养条件，以及活性检测方法等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行，成本较低，实现了胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白在毕赤酵母中高效稳定分泌表达，表达的重组融合蛋白具有高水平的抗病毒活性和调节免疫细胞活性，为提供具有治疗猪病毒性疾病及免疫调节功能的绿色无残留生物制品奠定了基础。

摘要： 本发明涉及一种胸腺肽与干扰素的融合蛋白，含有人胸腺肽α1的氨基酸序列以及人干扰素α2b的氨基酸序列，所述人胸腺肽α1的氨基酸序列位于人干扰素α2b的氨基酸序列的氨基端。所述的融合蛋白具有比干扰素α2b标准对照品更强的抗病毒活性；可增强T细胞的增殖；抑制肿瘤细胞的生长。实验表明，融合蛋白对免疫细胞功能、抗体水平的影响更优于单纯的干扰素α2b和胸腺素α1。

摘要： 本专利涉及一种高效融合蛋白，特征为将胸腺素a1和胸腺生成素-2通过基因工程重组技术连接组成高效的融合蛋白，经表达、纯化出的融合蛋白具有很强的促进伤口愈合的功效。应用本发明得到的融合蛋白，用于创伤与溃疡性肠炎的治疗。

摘要： 本发明涉及人胸腺素α原胸腺九肽融合蛋白及其制备方法和医药用途。该融合蛋白的cDNA为序列表中序列1所示，制备方法包括合成富含A、T的引物、用合成的引物为模板合成融合蛋白cDNA、将得到的cDNA克隆到表达载体中、用所述的表达载体转化原核细胞、培养所述的原核细胞和分离纯化所表达的融合蛋白等步骤。该融合蛋白具有调节机体免疫力、细胞增殖和机体细胞因子的合成与分泌等作用，在抗病毒、抗肿瘤方面也有较广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因及其重组蛋白的制备方法。本发明的经改造后的胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明同时公开了该基因表达的重组蛋白制备及活性检测的方法，具体涉及胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的改造、基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达、重组蛋白的制备和发酵培养条件，以及活性检测方法等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行，成本较低，实现了胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白在毕赤酵母中高效稳定分泌表达，表达的重组融合蛋白具有高水平的抗病毒活性和调节免疫细胞活性，为提供具有治疗猪病毒性疾病及免疫调节功能的绿色无残留生物制品奠定了基础。

摘要： 本发明提供了人干扰素α-2b和人胸腺素α1的融合蛋白中人干扰素α-2b和人胸腺素α1之间的连接方式以及融合蛋白的制备方法。

摘要： 本发明涉及一种胸腺肽与干扰素的融合蛋白，含有人胸腺肽α1的氨基酸序列以及人干扰素α2b的氨基酸序列，所述人胸腺肽α1的氨基酸序列位于人干扰素α2b的氨基酸序列的氨基端。所述的融合蛋白具有比干扰素α2b标准对照品更强的抗病毒活性；可增强T细胞的增殖；抑制肿瘤细胞的生长。实验表明，融合蛋白对免疫细胞功能、抗体水平的影响更优于单纯的干扰素α2b和胸腺素α1。

摘要： 本发明涉及一种人胸腺素α1与人复合干扰素的融合蛋白及该蛋白表达、纯化方法以及应用该蛋白作为抗病毒、抗肿瘤药物的应用。

摘要： 一种治疗丙型肝炎的方法和药物组合，包括给丙型肝炎患者施用有效量的至少一种胸腺素或有效量的至少一种胸腺素片段，同时给所述丙型肝炎患者联合施用有效量的至少一种聚乙二醇化干扰素(pegylated interferon)。

摘要： 一种治疗丙型肝炎的方法和药物组合，包括给丙型肝炎患者施用有效量的至少一种胸腺素或有效量的至少一种胸腺素片段，同时给所述丙型肝炎患者联合施用有效量的至少一种干扰素，另外还联合施用有效量的抗病毒剂。