水解酶

摘要： 为探究水解酶(果胶酶、纤维素酶)的不同添加方式(单独、顺序和同时添加)对蓝莓细胞壁结构及其吸附单宁能力的影响,采用扫描电镜(SEM)、甲基纤维素沉淀法和高效液相色谱法(HPLC)分别对细胞壁多糖的结构、单宁的含量和组成进行分析。结果表明,酶处理后模拟溶液中半乳糖醛酸和总糖的含量较未添加酶处理显著增加(P<0.05),单宁吸附率显著下降(P<0.05)。相比于其他添加方式,同时添加果胶酶和纤维素酶溶液中的半乳糖醛酸和总糖含量最高,分别为16.52 mg/g和2.93 mg/g,细胞壁对单宁的吸附率最低为30.4%,溶液中剩余单宁的平均聚合度最高为4.03。扫描电镜观察发现,在顺序添加方式中,优先添加果胶酶再添加纤维素酶使蓝莓细胞壁分解得更破碎。

摘要： 红藻多糖是红藻细胞壁的主要组成成分,含量丰富,由于其凝胶特性可被应用于食品和医药行业.然而,大分子红藻多糖的水难溶性限制了其更进一步的应用.基于红藻多糖水解酶的生物加工制用以制备水溶性的功能性红藻寡糖是红藻资源高值化利用的关键.各种类型的红藻多糖水解酶和相关糖苷酶则是实现红藻寡糖生物制备的有力工具,包含琼胶多糖相关的αG琼胶酶、βG琼胶酶、αG新琼二糖水解酶和βG半乳糖苷酶,卡拉胶多糖相关的κG卡拉胶酶、ιG卡拉胶酶和λG卡拉胶酶.本论文详细综述了相关红藻多糖水解酶的研究进展,讨论了将它们应用于各种类型红藻寡糖的特异性制备.同时,提出了需要解决的科学问题,进一步展望了未来相关的研究方向.

摘要： 冠突散囊菌(Eurotium cristatum),俗称“金花”菌,是茯砖茶后发酵过程中的优势微生物,其对茯砖茶特殊品质和功能活性的形成具有重要作用。在发酵过程中冠突散囊菌能分泌丰富的胞外酶,如多酚氧化酶、淀粉酶、β-葡萄糖苷酶等,对茶叶中的酚类物质如儿茶素等具有代谢及转化作用。近年来,大量研究表明冠突散囊菌能作用于其他植物基质,如中草药、豆类、谷物等,对其中的酚类物质进行生物转化并引起结构改变,从而使其功能活性发生显著变化。该文就近年来国内外关于冠突散囊菌对植物酚类成分的转化及生物活性的影响进行综述,为冠突散囊菌在食品及健康保健行业中的应用提供理论依据和指导。

摘要： 苷水解酶是水解苷类化合物的一类酶,对苷类化合物在肠道中的代谢转化具有重要作用,但机体自身基因编码表达的苷水解酶的数量有限,绝大部分苷水解酶由肠道菌群基因编码产生.肠道菌群及其分泌的苷水解酶参与了苷类化合物的脱糖转化并提高其生物利用度,大多数苷类化合物经脱糖转化后生成药效更强的次级苷或苷元从而提高生物利用度,也有少数产生毒性.本文综述了苷水解酶的定义、种类、肠道微生物来源和其对苷类化合物的转化,并探讨了肠道菌群、苷水解酶及苷脱糖转化产物之间的关系,为实现苷水解酶及苷转化产物的高效生产、挖掘新药资源提供参考.

摘要： 石油基塑料产量大、应用广,常见的种类有聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯等聚烯烃类塑料以及聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚氨酯等聚酯类塑料。这些合成塑料分子量大、疏水性高,难以在自然环境中降解,因此大部分也被称作“不可降解塑料”。塑料的生物降解具有条件温和、应用潜力巨大的特点,塑料降解微生物和酶资源的挖掘以及新技术的开发方兴未艾,其中,基于全细胞催化降解与开环式升级再造技术受到越来越多的关注。本文介绍了国内外不可降解塑料全细胞催化转化技术的研究进展,阐述了对塑料废弃物天然全细胞降解体系和人工全细胞降解方法的开发情况,进而以聚对苯二甲酸乙二醇酯为例,探讨了塑料开环升级再造的技术策略,最后对塑料生物降解技术的研发方向和重点进行了讨论和展望。本文将为进一步开展塑料生物降解研究,挖掘塑料降解微生物资源,构建新型人工全细胞催化体系,最终实现不可降解塑料的高效降解和升级再造提供借鉴。

摘要： 聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是应用最广泛的合成聚酯,被广泛用于饮料、食品包装材料以及纺织纤维等方面,其废弃物不可自然降解,形成了较严重的环境污染。利用环境友好的生物法将废弃塑料降解为低分子量的单体,使其循环再利用,将能显著促进节能减排。目前多个PET塑料降解酶被筛选和鉴定出来,它们的蛋白结构和功能也被广泛研究,在PET塑料的酶法降解与催化机制方面的研究取得了重大进展。本文总结了已有PET塑料降解酶在蛋白质结构、催化机制方面的研究情况,综述了利用酶工程技术对提升活性、提升耐热性、增强底物结合能力和解除产物抑制等适合工业应用方面的研究进展,为开发高效的PET酶法降解技术提供新思路。

摘要： 为研究冻融作用对泥炭沼泽土壤酶活性的影响,选取金川草本泥炭沼泽为研究对象,采集表层(0—15 cm)和深层(15—30 cm)土壤样品,进行室内冻融模拟实验。实验设置(-5—5°C)和(-10—10°C)两个冻融幅度,分析经0、1、3、5、7、15次冻融循环处理后土壤3种水解酶活性(β-1,4-葡萄糖苷酶(BG)、β-1,4-N-乙酰葡糖胺糖苷酶(NAG)和酸性磷酸酶(AP))和2种氧化酶(过氧化物酶(PER)和多酚氧化酶(PPO))的变化特征,并结合土壤有机碳、氮组分,探讨泥炭沼泽土壤酶活性与土壤活性有机碳、氮组分间的相关关系。结果表明,冻融频次与冻融幅度均显著影响了土壤有机碳、氮组分及土壤酶活性。-10—10°C冻融作用下,土壤可溶性有机碳(DOC)与可溶性有机氮(DON)含量呈现先增加后降低的变化趋势。-5—5°C的冻融作用下土壤DOC与DON释放相对-10—10°C冻融作用更为缓慢,在冻融结束后呈现增加趋势。冻融循环增加了土壤微生物碳(MBC)含量,而降低了土壤微生物氮(MBN)含量。冻融幅度对土壤MBC和MBN的影响表现为-5—5°C15—30 cm。冻融循环降低了土壤水解酶活性和氧化酶活性。冻融幅度对土壤水解酶活性的影响表现为-5—5°C>-10—10°C,对土壤氧化酶活性的影响表现为-5—5°C15—30 cm。土壤酶活性与土壤MBC和MBN含量呈正相关,而与土壤DOC含量呈显著负相关(P<0.05)。研究结果表明冻融作用初期促使部分微生物死亡,其死亡残体释放的可利用养分,促进了适应冻融作用的微生物生长,但在培养后期随着土壤养分的消耗,土壤微生物量呈现下降趋势,进而最终降低了土壤酶活性。

摘要： 目的 分析乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者分离株菌种及药敏。方法 回顾性分析123例河池市人民医院收治的乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者的临床资料,收集痰液标本,分析分离株菌种分布情况,并进行药敏试验。结果病原菌中60.40%为革兰阴性菌,38.26%为革兰阳性菌,1.34%为真菌,革兰阴性菌为主要病原菌。患者革兰阴性菌和革兰阳性菌主要分离菌株均对多种抗菌药物耐药,肺炎克雷伯菌对厄他培南、亚胺培南和阿米卡星敏感率>70%,大肠杆菌对头孢他啶、氨曲南、厄他培南、亚胺培南和阿米卡星敏感率>70%,金黄色葡萄球菌对万古霉素、环丙沙星、左氧氟沙星等敏感率>70%,凝固酶阴性葡萄球菌对万古霉素敏感率>70%。肺炎克雷伯菌及大肠杆菌菌株有一定超广谱β-内酰胺酶(ESBL)阳性率(>30%)及碳青霉烯酶阳性率(<30%)。结论 乙型肝炎肝硬化伴肺部感染患者分离株菌种以革兰阴性菌为主,革兰阴性及革兰阳性主要分离菌株均对多种抗菌药物耐药,肺炎克雷伯菌及大肠杆菌菌株存在ESBL阳性。

摘要： 郫县豆瓣是我国优势传统发酵食品,其高品质生产具有重要的工业与文化价值。蚕豆曲制备是郫县豆瓣生产的重要工序,目前使用米曲霉沪酿3.042纯菌株作为工业菌剂。米曲霉沪酿3.042水解酶活力较高却酶系不均,获得新的、具有更高且更均匀酶系的优质菌种或复合菌剂用于蚕豆曲生产,将对郫县豆瓣生产品质提升有极大促进作用。该研究自传统酿造食品微生物菌种库中筛选获得并鉴定2株米曲霉菌株,LBM 30007及LBM 30008,经基础发酵表型研究,2株菌在发酵性能方面优势互补:LBM 30007分泌的水解酶活力及分布均匀度高,LBM 30008孢子萌发速率极快。基于此,结合工业米曲霉沪酿3.042的发酵性能,该研究设计了3菌株复合菌剂制曲。经检测,经复合菌剂制作的蚕豆曲中,酸性和中性蛋白酶活力、亮氨酸氨肽酶活力、氨基酸态氮含量及鲜味氨基酸含量较沪酿3.042单菌制曲均有所提升,特别是对郫县豆瓣酿造至关重要的酸性蛋白酶活力提高了23.25%,鲜味氨基酸含量上升11.33%。该研究获得的优质米曲霉菌株/菌剂及复合菌剂构建思路,对包括郫县豆瓣在内的传统高盐高氮发酵食品生产有潜在应用价值。

摘要： 粘细菌隶属于δ变形菌纲(Deltaproteobacteria),是重要的药源微生物类群,但是其分离培养困难,严重限制了粘细菌资源的发掘和开发利用.粘细菌是微生物捕食者,通过产生丰富多样的胞外水解酶,如淀粉酶、蛋白酶、几丁质酶、纤维素酶、磷酸酶、蛋白酶等来裂解其他微生物或分解纤维素等作为营养物质来源.目前,粘细菌分离纯化技术主要是利用被捕食菌或纤维素诱导法.可以说,粘细菌胞外水解酶是研究其分离培养方法的物质基础.然而,目前研究者们对粘细菌产生的水解酶类关注较少.本文主要对粘细菌产生的水解酶种类、性质及其功能进行归纳总结,为今后粘细菌分离培养技术和开发利用等相关研究提供参考.

摘要： 为研究土壤酶活性变化和重金属污染的关系,借助于室内正交实验考察了重金属Cu、Zn和Pb复合污染对转化酶、脲酶和碱性磷酸酶三种水解酶活性的影响,结果发现:Cu对三种酶都有抑制作用,效果最显著,Zn次之,Pb主要体现为激活效应;考虑交互作用时,Cu×Zn对脲酶活性有显著影响(p＜0.5),在95％置信区间下,Cu×Zn、Cu×Pb对碱性磷酸酶酶活性影响显著;三种水解酶中以碱性磷酸酶活性对重金属的影响反应最敏感.表明碱性磷酸酶活性可以表征土壤重金属Cu的污染程度.

摘要： 活性污泥中的水解酶主要由污泥中各种微生物分泌产生,是不同类别水解酶的混合物,污水生物处理系统中活性污泥水解酶与其催化有机物分解的过程特征和反应结果密切相关,本文从污水处理活性污泥水解酶的来源和分布,活性污泥水解酶活性的测定方法,活性污泥水解酶参与的生化反应过程,影响活性污泥水解酶的主要因素,pH值和温度、新陈代谢中间产物、胞外聚合物(EPS)、污泥预处理等方面,分析探讨了有关污水生化处理系统中水解酶的若干问题.

摘要： 手性环氧氯丙烷是一类有重要价值的有机合成中间体,以手性环氧氯丙烷为前体物,可以获得很多高光学纯的药物中间体.论文通过基因工程方法合成了环氧化物水解酶基因,定向克隆环氧化物水解酶基因到表达载体pET28b上,并将重组表达质粒pET28b-EH 转入大肠杆菌E. coli BL21(DE3),经酶切和菌落PCR 鉴定,成功构建了重组菌E. coli BL21(DE3)/pET28b-EH.重组菌经IPTG 诱导表达后,SDS-PAGE分析结果显示,在47.0 kDa 处出现蛋白表达条带,经活力测定,重组菌的比酶活可达3.4 U/mg(dry cell).

摘要： MazG编码一种核苷酸焦磷酸水解酶，广泛存在于细菌、古菌和真核生物中。但是，目前仅仅对E.coli和M.tuberculosis的MazG有功能方面的研究报道。已有的发现对mazG的功能有两种观点。第一种观点认为mazG参与调节由mazEF介导的细菌细胞的程序性死亡，这种观点在大肠埃希菌中得到了实验的证实。在大肠埃希菌基因组上，mazG与mazE和mazF组成一个操纵子(mazEFG)，该操纵子位于relA的下游。

摘要： 构建能高效表达L-ATC水解酶的重组菌。用PCR方法扩增假单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因片段，将该DNA片段插入T载体上测序得到522bp的DNA序列；将此序列插入表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,重组菌在0.5mmol/LIPTG诱导5h后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白分子量为20.3kD。所构建的表达菌株用于转化DL-ATC,以DTNB法检测转化率达83.65%。L-ATC水解酶在大肠杆菌中实现了高效表达,获得了具有生物转化活性的L-ATC水解酶重组蛋白。

摘要： 旋毛虫幼虫囊包在消化液作用下脱囊后,在小肠内首先被激活为肠道感染性幼虫(IIL）,然后才能侵入肠粘膜继续发育,因此,IIL是旋毛虫的第1个侵入期;从IIL的排泄分泌蛋白与表面蛋白中筛选出与肠上皮细胞(IEC）的互作蛋白,对于了解旋毛虫与宿主的相互作用与侵入机制具有重要意义.

摘要： β-甘露聚糖酶是一种能降解甘露聚糖、葡萄甘露聚糖和半乳甘露聚糖主链的水解酶，属于半纤维素酶类其在食品、医药、造纸、饲料和石油等工业中有广泛的应用。本文概述了β-甘露聚糖酶的作用方式,菌种来源以及应用。

摘要： 大蒜(Allium sativum L.)果聚糖占大蒜干重的75%以上，其果聚糖水解酶(FEH)能抑制大蒜发芽和生产高质量大蒜果聚糖。采用硫酸铵分级沉淀确定FEH沉淀组分，采用薄板层析和离子色谱法研究酶解产物，通过DNS法测定还原糖的变化量计算酶活力，进而研究FEH的酶切位点，研究温度、pH、离子强度、底物浓度对FEH活力的影响。结果表明：大蒜FBH存在于0%~20%硫酸铵饱和度组分，根据酶解产物判断该酶属于外切酶，最适反应温度为45°C，最适反应pH为5.5，最适离子强度为1.5 mol/L氯化钠，最适反应浓度为4 mg/mL大蒜果聚糖。为大蒜果聚糖产品的开发和抑制大蒜发芽提供科学依据。

摘要： 市场迫切需求高纯度高活力高稳定性的β-淀粉酶应用于食品的酶制剂80％以上为水解酶，其中最重要的一组水解酶是淀粉酶。在解决了淀粉液化、葡萄糖生产和固定化异构酶制造果葡糖这三大技术问题后，开发生产和应用β-淀粉酶，生产各种麦芽糖浆来满足食品工业和啤酒生产的需求，已成为当前生产上亟待解决的问题。

摘要： The diversity of filamentous fungi associated with traditional red glutinous rice wine fermentation starters obtained from Fujian province, China, was investigated by traditional culture-dependent method and molecular identification approach. Fifty-six filamentous fungi were separated by traditional culture-dependent means from 10 fermentation starters and classified into 16 different species based on morphological examination, cultural properties and the internal transcribed spacer（ITS）sequences analysis. The main filamentous fungi noted varied with wine starters. Among them Rhizopus oryzae was the most frequent species. The enzyme-producing properties of these isolates were also evaluated. Asp. flavus, Rhi. oryzae and Monascus purpureus exhibited higher activity of glucoamylase; Asp. flavus, Rhi. oryzae and Asp.oryzae had higher activity of α-amylase; Asp. flavus and Asp. oryzae had higher protease activity. Four typical filamentous fungi（Rhi. oryzae, Asp. flavus, Asp. niger and Asp. oryzae）were screened out and incubated into a previously steamed glutinous rice mass, respectively. Of the four, Rhi. oryzae degraded starch into reducing sugars most rapidly and effectively, identifying it as a promising candidate for fermented red glutinous rice wine brewing using pure strains.

摘要： 本发明涉及琼胶寡糖水解酶及一种通过利用该琼胶寡糖水解酶从琼脂糖中生成3,6‑脱水‑L‑半乳糖和半乳糖的方法。更具体地，通过使用对琼脂三糖具有水解活性的β‑琼胶寡糖水解酶，提高来自琼脂糖中的3,6‑脱水‑L‑半乳糖和半乳糖的产率，即糖化率。

摘要： 本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10A基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10A的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10A对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10A可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。

摘要： 本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10B基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10B的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10B对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10B可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。

摘要： 本发明的课题在于提供一种高活性的纤维二糖水解酶。通过将作为从序列号1所示纤维二糖水解酶的N末端起第62位氨基酸的天门冬酰胺、或者在与所述纤维二糖水解酶具有同源性的纤维二糖水解酶的氨基酸序列中的对应于该位置的天门冬酰置换为丙氨酸，可以提高纤维二糖水解酶的活性。

摘要： 本申请属于生物技术领域。本申请提供了一种胆盐水解酶基因工程菌、胆盐水解酶及其应用。胆盐水解酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，胆盐水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过胆盐水解酶的编码基因构建了表达胆盐水解酶的重组载体质粒，并通过大肠杆菌诱导表达，得到的胆盐水解酶基因工程菌具有很好的蛋白表达能力，表达的胆盐水解酶能够用于催化分解或合成N‑酰基氨基酸表面活性剂，且催化能力强、酶活稳定性好，有潜力开发为合成氨基酸表面活性剂的生物催化剂。

摘要： 本发明公开了一种复合水解酶，是厌氧菌Aspergillus oryza所分泌的胞外蛋白酶、α‑淀粉酶和脂质酶三者的混合复配物，三者的混合质量比为(5～10):(5～10):(1～2)。所述复合水解酶应用于污泥脱水调理的技术方法，将复合水解酶干粉加入30～40°C水中搅拌3～5h以配制复合水解酶的储备液(质量浓度2～5wt.％)；向待调理污泥加入上述复合水解酶储备液，使得复合水解酶最终投加量为待调理污泥干基质量的0.5～1％；在特定反应温度(20～30°C)和污泥初始pH值(6～11)的条件下密闭孵育10～20h，过程中施以100～300rpm磁力搅拌，充分反应后即可实现污泥脱水性能的有效提升，污泥毛细吸水时间大幅降低。

摘要： 本发明涉及一种耐热琼脂水解酶和使用此耐热琼脂水解酶的单糖制备方法。更具体来说，在本发明中，耐热琼脂水解酶可用于通过有效地分解琼脂糖或琼脂来以高产率制备半乳糖和3，6‑脱水‑L‑半乳糖，而无需化学预处理、中和过程或琼胶三糖水解酶处理过程。

摘要： 本发明涉及琼胶寡糖水解酶及一种通过利用该琼胶寡糖水解酶从琼脂糖中生成3,6‑脱水‑L‑半乳糖和半乳糖的方法。更具体地，通过使用对琼脂三糖具有水解活性的β‑琼胶寡糖水解酶，提高来自琼脂糖中的3,6‑脱水‑L‑半乳糖和半乳糖的产率，即糖化率。

摘要： 本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10B基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10B的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10B对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10B可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。

摘要： 本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10A基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10A的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10A对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10A可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。