NK细胞

摘要： 背景:从深低温冻存脐血中获得大量高纯度无滋养层细胞、无动物源成分的NK细胞,以便更好地开展NK细胞杀伤肿瘤的实验研究,此次研究通过使用NK扩增培养试剂盒和血清替代物,以获得安全、高效的体外扩增培养NK细胞的方法。目的:建立一种从冷冻脐血中采用纯细胞因子扩增NK细胞的技术体系并证明其体外杀瘤能力。方法:解冻液氮存储的冻存脐血,优化复苏体系,采用Ficoll密度梯度离心的方法收集脐血单个核细胞,接种于预先铺板的T175培养瓶中,采用细胞因子试剂盒+血清替代物法培养21 d后收集细胞并计数,应用流式细胞术检测细胞中CD3^(-)CD56^(+)的比例,并将所得数据与K562滋养层细胞+胎牛血清的培养方法进行对比分析。同时以髓系白血病细胞K562为靶细胞,采用CCK-8试剂盒检测不同效靶比NK细胞杀伤K562细胞的作用。最后进行了12 h内的模拟储存运输实验,采用流式检测CD3-CD56^(+)的比例变化,并使用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果与结论:(1)采用K562滋养层细胞+胎牛血清的培养方法扩增培养14 d,细胞扩增(51.47±4.28)倍;采用细胞因子试剂盒+血清替代物法扩增培养21 d,细胞数量5×10^(9)以上,细胞扩增(328.32±116.36)倍,细胞扩增倍数明显升高,2种方法获得的CD3^(-)CD56^(+)纯度比例均在80%以上,未见明显差异;(2)纯细胞因子方法培养后的NK细胞对K562细胞的杀伤效果(效靶比=10∶1)达80%以上;(3)在12 h的模拟储运实验中,CD3^(-)CD56^(+)的比例变化不明显,直至第12小时,NK细胞凋亡率<7%;(4)结果表明:优化复苏体系和纯细胞因子扩增方法可以高效培养出高纯度的NK细胞,同时具有有效杀伤K562肿瘤细胞的能力,且经过12 h储运后仍然具有良好的细胞纯度和较低的凋亡率。

摘要： 目的立于“线粒体功能紊乱-细胞异常活化”视角,探讨NK细胞NK2型活化机制。方法将NK-92MI细胞分为空白组、TSLP组、1、5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1组。ELISA法测定各组IL-4、IL-5、IFN-γ水平;蛋白印迹法分析各组p-Drp1、MnSOD蛋白表达;DHE染色及流式检测各组ROS水平;激光共聚焦观察各组线粒体形态。结果ELISA显示,与对照组比较,TSLP组IL-4、IL-5水平明显升高,IFN-γ水平下调(P<0.05);与TSLP组比较,5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1组IL-4、IL-5水平降低,10μmol·L^(-1) Mdivi-1组IFN-γ浓度有所回升(P<0.05)。DHE染色及流式显示,TSLP组ROS水平较对照组升高;而5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1组ROS水平较TSLP组降低(P<0.05)。共聚焦显示,TSLP刺激后,细胞内大量圆球状线粒体生成,5、10μmol·L^(-1) Mdivi-1干预后该现象得到改善。蛋白印迹显示,TSLP组p-Drp1水平明显上调,MnSOD表达下降,Mdivi-1干预则有效逆转了上述变化。结论线粒体动态失衡可能是NK细胞异常活化内在机制之一,其或是调控NK细胞NK2型活化介导的变应性炎症反应的重要靶点。

摘要： 目的:探讨肌醇的跨膜激酶/核酸内切酶1α(inositol-requiring transmembrane kinase/endonuclease 1α,IRE1α)调控CD155表达对自然杀伤(nature killer,NK)细胞杀伤结肠癌细胞作用的影响。方法:免疫组织化学法检测结肠癌组织及癌旁组织中IRE1α的表达;qRT-PCR与Western blot检测IRE1α与CD155的mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测人外周血CD3^(-)CD56^(+)NK细胞百分比及与其纯度和NK细胞表面T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(T cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains,TIGIT)的表达;乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞对结肠癌细胞的杀伤率。结果:IRE1α在结肠癌组织和细胞中的表达高于癌旁组织及人正常结肠上皮细胞;结肠癌患者外周血CD3^(-)CD56^(+)NK细胞百分比低于健康者。si-IRE1α组结肠癌细胞的IRE1α表达水平低于si-NC组(P<0.05),CD155表达水平高于si-NC组(P<0.05),NK细胞对si-IRE1α组结肠癌细胞的杀伤率高于si-NC组的杀伤率(P<0.05),NK细胞对si-IRE1α+TIGIT-mcAb组结肠癌细胞的杀伤率高于si-IRE1α组的杀伤率(P<0.05)。Pc-IRE1α组结肠癌细胞的IRE1α表达水平高于Pc组(P<0.05),CD155表达水平低于Pc组(P<0.05),NK细胞对Pc-IRE1α组结肠癌细胞的杀伤率低于Pc组的杀伤率(P<0.05)。Pc-IRE1α+si-CD155组结肠癌细胞CD155表达水平高于Pc-IRE1α+si-NC组(P<0.05),NK细胞对Pc-IRE1α+si-CD155组结肠癌细胞的杀伤率高于Pc-IRE1α+si-NC组(P<0.05),NK细胞对Pc-IRE1α+si-CD155+TIGIT-mcAb组细胞的杀伤率高于Pc-IRE1α+si-CD155组(P<0.05)。结论:结肠癌组织和细胞中IRE1α高表达,IRE1α负调控结肠癌细胞CD155的表达,影响NK细胞对结肠癌细胞的杀伤敏感性。

摘要： 多发性骨髓瘤是一种以骨髓中单克隆浆细胞的恶性增殖为特征的血液系统肿瘤。骨髓微环境对骨髓瘤细胞的增殖与存活起到关键的支撑作用,其中大量免疫细胞处于免疫抑制状态是该疾病重要的发病机制之一。本文以近年来开展的骨髓瘤免疫微环境研究为基础,就目前多发性骨髓瘤免疫治疗手段、现存问题进行阐述,同时对免疫治疗未来发展方向提出思考和建议,为多发性骨髓瘤诊治研究领域的同道提供参考。

摘要： 目的分析常见血液病患者的外周血淋巴细胞亚群变化,并探究其临床意义。方法收集六种常见血液病患者250例作为观察组,再根据不同类型进行疾病分组,另选取同期在本院进行健康体检者30例作为对照组。应用流式细胞术对所有研究对象进行淋巴细胞亚群检测,比较各类型血液病组与对照组淋巴细胞亚群检测结果的差异。结果与对照组比较,再生障碍性贫血患者的CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例增高;特发性血小板减少性紫癜患者的CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例增高、NK细胞(CD3^(-)CD56^(+))比例降低;缺铁性贫血患者的CD3^(+)、CD4^(+)及CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例均增高,CD4^(+)/CD8^(+)比值降低;自身免疫性疾病患者的13细胞(CD3^(-)CD19^(+))比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值增高、NK细胞(CD3^(-)CD56^(+))比例降低;急性白血病患者的总T(CD3^(+))、CD3^(+)CD4^(+)T细胞、NK细胞(CD3^(-)CD56^(+))比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低,CD3^(+)CD8^(+)T细胞及NK细胞(CD3^(-)CD56^(+))比例相对增高;非霍奇金淋巴瘤患者的总T(CD3^(+))、CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例增高,CD3^(+)CD4^(+)T细胞、B细胞(CD3^(-)CD19^(+))比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低;各项指标比较差异均有统计学意义(P<0.05),六种血液病患者均存在细胞免疫功免疫能紊乱。结论外周血淋巴细胞亚群检测对于了解血液病患者的细胞免疫功能、发病机制研究、辅助诊断及判断预后具有重要意义,且简便易行。

摘要： 目的探讨复发性流产(RSA)患者血清维生素D水平与NK细胞、淋巴细胞亚群的关系。方法选取2019年1月至2021年6月就诊于本院的150例RSA患者作为研究对象,将血清25-(OH)D<50 nmol/L的110例患者作为观察组,血清25-(OH)D≥50 nmol/L的40例患者作为对照组。比较两组CD16^(+)CD56^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+),分析25-(OH)D水平与CD16^(+)CD56^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)的相关性。结果观察组CD16^(+)CD56^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组(P<0.05)。RSA患者的25-(OH)D水平与CD16^(+)CD56^(+)、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(P<0.05)。结论RSA患者血清维生素D水平与NK细胞及CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关,维生素D水平下降可能会增加RSA的发生风险。

摘要： 目的探讨低剂量辐照后IFN-γ分泌性T、NK细胞修复能力及熟地的保护作用。方法采用X线2.5Gy建立小鼠辐照模型,部分辐照小鼠建立黑色素瘤肺癌模型或进行熟地治疗。采用流式细胞术检测各组小鼠Tc1、Th1和NK1细胞及其IL^(-1)2R、IL^(-1)5R表达。RT-qPCR检测IL^(-1)2、IL^(-1)5、STAT4和T-bet转录水平。结果辐照后4 d内,Th1、Tc1和NK1细胞显著降低(P<0.05,P<0.01);IL^(-1)2R、IL^(-1)5R在Th1、Tc1细胞表达下降,在NK1细胞表达升高(P<0.05)。辐照d 8,NK1和Tc1细胞恢复至正常或超正常水平,但Th1仍低于正常水平(P<0.05);辐照小鼠较对照肿瘤小鼠肿瘤载量明显升高(P<0.01)。与辐射组对比,熟地可提高NK1、Tc1、Th1比例和数量(P<0.05,P<0.01),减少辐照后肿瘤载量(P<0.05)。结论辐照后Th1细胞修复能力较弱,影响整体抗肿瘤能力;熟地可促进辐射后IFN-γ分泌性T和NK细胞修复,减少肿瘤转移风险。

摘要： 急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)可导致心力衰竭、心律失常甚至猝死,是世界范围内残疾和死亡的主要原因之一。NK细胞作为机体固有免疫的重要组成部分,与ACS的发生、发展及心肌梗死后的损伤修复密切相关。本文针对NK细胞在ACS中的作用及机制进行综述,以期为ACS发病机制阐明及治疗提供新思路。

摘要： 紫锥菊简介紫锥菊原产于北美东部及中部,是一种著名的药用植物和产品,紫锥菊制剂的作用机制通常是通过抗病毒、免疫调节、抗炎和抗氧化来发挥作用。部分研究表明,紫锥菊制剂具有一定的抗癌活性,其提取物是NK细胞的有效激活剂。

摘要： 随着科技的进步和各种生活条件的不断改善,人类的平均寿命持续增加,随之而来的癌症成为人类社会的一个主要的健康问题。目前根据不同的癌症指征,患者可以选择手术、放疗和全身化疗等不同治疗方法,并取得较好的疗效。手术仍然是应对局部原发肿瘤和相关区域淋巴癌的最有效治疗,晚期癌症需要系统性的细胞毒性化疗。然而,这些治疗的副作用限制了其临床应用。在过去的十年里,肿瘤免疫疗法的蓬勃发展已经彻底改变了癌症的治疗格局,为广大癌症患者带来了新的希望。癌症患者可以从向治疗中获益,如单克隆抗体或小分子药物,它们可以消耗肿瘤细胞或靴向肿瘤细胞生长信号级联。尽管这些疗法取得了重大进展,但仍未真正满足一些癌症治疗的医疗需求,这就促使产生第二波免疫肿瘤学治疗。其中,基于自然杀伤(natural killer,NK)细胞的免疫疗法是目前免疫治疗研究的前沿。

摘要： 目的：探讨高压氧对酵母多糖诱导的脓毒症小鼠早期NK细胞的影响. 方法：选用成年的SPF级雄性C57BL/6小鼠,随机分为4组：Ⅰ组-"生理盐水+空气"组、Ⅱ组-"脓毒症+空气"组、Ⅲ组-"生理盐水+HBO"组和Ⅳ组-"脓毒症+HBO"组.Ⅱ组和Ⅳ组进行腹腔注射500mg/kg酵母多糖(zymosan,ZY)诱导脓毒症模型;而Ⅰ组和Ⅲ组动物给予等量的生理盐水.在注射完成后的4小时和11小时分别对Ⅲ组和Ⅳ组进行HBO干预;而Ⅰ组和Ⅱ组无干预措施.造模成功18小时后分离小鼠外周血的单个核细胞,通过流式细胞术检测NK细胞的表型分子和功能分子. 结果：Ⅱ组小鼠外周血中NK细胞的比例较工组小鼠明显上升(P<0.05)，但Ⅳ组小鼠NK细胞比例较II组的上升明显下调少<0.05); Ⅱ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达水平较工组显著升高(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达升高水平较II组显著降低(P<0.05); Ⅱ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较工组显著下降(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较Ⅱ组显著恢复并上调(P<0.05) 。 结论：HBO可降低脓毒症早期小鼠NK细胞的数量，抑制NK细胞表面活化性受体分子的表达，提高抑制性受体的表达，从而抑制机体脓毒症状态下的炎症反应。

摘要： 目的：探讨高压氧对酵母多糖诱导的脓毒症小鼠早期NK细胞的影响. 方法：选用成年的SPF级雄性C57BL/6小鼠,随机分为4组：Ⅰ组-"生理盐水+空气"组、Ⅱ组-"脓毒症+空气"组、Ⅲ组-"生理盐水+HBO"组和Ⅳ组-"脓毒症+HBO"组.Ⅱ组和Ⅳ组进行腹腔注射500mg/kg酵母多糖(zymosan,ZY)诱导脓毒症模型;而Ⅰ组和Ⅲ组动物给予等量的生理盐水.在注射完成后的4小时和11小时分别对Ⅲ组和Ⅳ组进行HBO干预;而Ⅰ组和Ⅱ组无干预措施.造模成功18小时后分离小鼠外周血的单个核细胞,通过流式细胞术检测NK细胞的表型分子和功能分子. 结果：Ⅱ组小鼠外周血中NK细胞的比例较工组小鼠明显上升(P<0.05)，但Ⅳ组小鼠NK细胞比例较II组的上升明显下调少<0.05); Ⅱ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达水平较工组显著升高(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达升高水平较II组显著降低(P<0.05); Ⅱ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较工组显著下降(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较Ⅱ组显著恢复并上调(P<0.05) 。 结论：HBO可降低脓毒症早期小鼠NK细胞的数量，抑制NK细胞表面活化性受体分子的表达，提高抑制性受体的表达，从而抑制机体脓毒症状态下的炎症反应。

摘要： 目的：探讨高压氧对酵母多糖诱导的脓毒症小鼠早期NK细胞的影响. 方法：选用成年的SPF级雄性C57BL/6小鼠,随机分为4组：Ⅰ组-"生理盐水+空气"组、Ⅱ组-"脓毒症+空气"组、Ⅲ组-"生理盐水+HBO"组和Ⅳ组-"脓毒症+HBO"组.Ⅱ组和Ⅳ组进行腹腔注射500mg/kg酵母多糖(zymosan,ZY)诱导脓毒症模型;而Ⅰ组和Ⅲ组动物给予等量的生理盐水.在注射完成后的4小时和11小时分别对Ⅲ组和Ⅳ组进行HBO干预;而Ⅰ组和Ⅱ组无干预措施.造模成功18小时后分离小鼠外周血的单个核细胞,通过流式细胞术检测NK细胞的表型分子和功能分子. 结果：Ⅱ组小鼠外周血中NK细胞的比例较工组小鼠明显上升(P<0.05)，但Ⅳ组小鼠NK细胞比例较II组的上升明显下调少<0.05); Ⅱ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达水平较工组显著升高(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达升高水平较II组显著降低(P<0.05); Ⅱ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较工组显著下降(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较Ⅱ组显著恢复并上调(P<0.05) 。 结论：HBO可降低脓毒症早期小鼠NK细胞的数量，抑制NK细胞表面活化性受体分子的表达，提高抑制性受体的表达，从而抑制机体脓毒症状态下的炎症反应。

摘要： 目的：探讨高压氧对酵母多糖诱导的脓毒症小鼠早期NK细胞的影响. 方法：选用成年的SPF级雄性C57BL/6小鼠,随机分为4组：Ⅰ组-"生理盐水+空气"组、Ⅱ组-"脓毒症+空气"组、Ⅲ组-"生理盐水+HBO"组和Ⅳ组-"脓毒症+HBO"组.Ⅱ组和Ⅳ组进行腹腔注射500mg/kg酵母多糖(zymosan,ZY)诱导脓毒症模型;而Ⅰ组和Ⅲ组动物给予等量的生理盐水.在注射完成后的4小时和11小时分别对Ⅲ组和Ⅳ组进行HBO干预;而Ⅰ组和Ⅱ组无干预措施.造模成功18小时后分离小鼠外周血的单个核细胞,通过流式细胞术检测NK细胞的表型分子和功能分子. 结果：Ⅱ组小鼠外周血中NK细胞的比例较工组小鼠明显上升(P<0.05)，但Ⅳ组小鼠NK细胞比例较II组的上升明显下调少<0.05); Ⅱ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达水平较工组显著升高(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠NK细胞表面的活化性受体分子NKp46和NKG2D的表达升高水平较II组显著降低(P<0.05); Ⅱ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较工组显著下降(P<0.05)，而Ⅳ组小鼠的NK细胞表面的抑制性受体CD94和NKG2A的表达水平较Ⅱ组显著恢复并上调(P<0.05) 。 结论：HBO可降低脓毒症早期小鼠NK细胞的数量，抑制NK细胞表面活化性受体分子的表达，提高抑制性受体的表达，从而抑制机体脓毒症状态下的炎症反应。

摘要： 尽管所有外周T细胞淋巴瘤(PTCLs)均不常见,但某些亚型更为罕见,如肠病相关T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、结外NK/T细胞淋巴瘤和皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤,在美国每种亚型年发病率小于500例.由于这些亚型非常罕见,用于指导临床决策的相关数据十分有限.因此,的治疗通常基于推测、病例研究、个人经验和观点.总结了这些疾病现有的初始诊治数据,并与已建立的常见T细胞淋巴瘤诊治方案进行了比较.

摘要： 尽管所有外周T细胞淋巴瘤(PTCLs)均不常见,但某些亚型更为罕见,如肠病相关T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、结外NK/T细胞淋巴瘤和皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤,在美国每种亚型年发病率小于500例.由于这些亚型非常罕见,用于指导临床决策的相关数据十分有限.因此,的治疗通常基于推测、病例研究、个人经验和观点.总结了这些疾病现有的初始诊治数据,并与已建立的常见T细胞淋巴瘤诊治方案进行了比较.

摘要： 尽管所有外周T细胞淋巴瘤(PTCLs)均不常见,但某些亚型更为罕见,如肠病相关T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、结外NK/T细胞淋巴瘤和皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤,在美国每种亚型年发病率小于500例.由于这些亚型非常罕见,用于指导临床决策的相关数据十分有限.因此,的治疗通常基于推测、病例研究、个人经验和观点.总结了这些疾病现有的初始诊治数据,并与已建立的常见T细胞淋巴瘤诊治方案进行了比较.

摘要： 尽管所有外周T细胞淋巴瘤(PTCLs)均不常见,但某些亚型更为罕见,如肠病相关T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、结外NK/T细胞淋巴瘤和皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤,在美国每种亚型年发病率小于500例.由于这些亚型非常罕见,用于指导临床决策的相关数据十分有限.因此,的治疗通常基于推测、病例研究、个人经验和观点.总结了这些疾病现有的初始诊治数据,并与已建立的常见T细胞淋巴瘤诊治方案进行了比较.

摘要： 目的：探讨HBV相关慢加急性(亚急性)肝衰竭(HBV-AClF)患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化趋势及其与预后的关系.rn 方法：选取HBV-ACLF患者46例,慢性乙型肝炎(CHB)患者40例,健康志愿者(NC)20例,采用流式细胞仪检测外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞及NK细胞计数,用SPSS 18.0软件对其进行统计学分析.rn 结果：HBV-ACLF组外周血CD3+、CD4+T细胞、NK细胞计数与慢性乙肝组、健康对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);HBV-ACLF组外周血CD8+T细胞与健康对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).HBV-ACLF患者死亡组中CD3+、CD4+、CD8+T细胞及NK细胞计数均低于存活组,两组CD3+、CD4+、CD8+T细胞比较差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：HBV-ACLF患者存在T细胞亚群失衡和细胞免疫紊乱,提示细胞免疫参与了HBV-ACLF的发病和进展.

摘要： 目的：探讨HBV相关慢加急性(亚急性)肝衰竭(HBV-AClF)患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化趋势及其与预后的关系.rn 方法：选取HBV-ACLF患者46例,慢性乙型肝炎(CHB)患者40例,健康志愿者(NC)20例,采用流式细胞仪检测外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞及NK细胞计数,用SPSS 18.0软件对其进行统计学分析.rn 结果：HBV-ACLF组外周血CD3+、CD4+T细胞、NK细胞计数与慢性乙肝组、健康对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);HBV-ACLF组外周血CD8+T细胞与健康对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).HBV-ACLF患者死亡组中CD3+、CD4+、CD8+T细胞及NK细胞计数均低于存活组,两组CD3+、CD4+、CD8+T细胞比较差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：HBV-ACLF患者存在T细胞亚群失衡和细胞免疫紊乱,提示细胞免疫参与了HBV-ACLF的发病和进展.

摘要： 本发明的目的在于，提供能够使T细胞或NK细胞高效地增殖并且维持该细胞的状态(例如未分化性)的T细胞或NK细胞的制造方法、T细胞或NK细胞的培养用培养基、T细胞或NK细胞的培养方法、维持未分化T细胞的未分化状态的方法和T细胞或NK细胞的增殖促进剂。本发明涉及T细胞或NK细胞的制造方法等，其包括如下步骤：在含有式(X‑1)或式(X‑2)所示的双苄基异喹啉生物碱或者其中的1个醚键断裂后的化合物或其药学上可接受的盐的培养基中培养T细胞或NK细胞。

摘要： NK细胞活化方法中，通过CD52激动剂刺激含T细胞和NK细胞的单核细胞而使NK细胞活化。采用CD52激动剂的单核细胞的刺激在细胞因子的存在下进行。

摘要： 本申请针对可用于减少受试者中髓系衍生的抑制细胞(MDSC)、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)或两者的数量的方法和组合物。所述方法包括向受试者施用与由MDSC和/或TAM表达的抗原结合的抗原结合蛋白，或施用表达与由MDSC和/或TAM表达的抗原结合的抗原结合蛋白的经修饰的T细胞或NK‑92细胞，或施用两者的组合。例如，所述抗原结合蛋白可以结合由MDSC和/或TAM表达的CD33。所述方法和组合物可用于治疗与MDSC和/或TAM浸润到组织或肿瘤中有关的疾病。

摘要： 本发明公开了一个提高NK细胞杀伤肿瘤细胞毒力的方法。在体外模拟肿瘤缺氧条件下，(1)NK细胞杀伤肿瘤细胞的能力下降，与此同时，NK细胞毒力相关分子GranzymeB，IFN‑γ，脱颗粒标志物CD107a以及细胞表面杀伤活性受体NKp30，NKp46和NKG2D的表达被显著降低。(2)同时，缺氧所引起的NK细胞毒力降低还与ERK和STAT3这两个NK细胞毒力相关信号通路的活化受到削弱有关，其磷酸化水平被缺氧降低。(3)在NK细胞中，缺氧所降低的ERK和STAT3磷酸化与活化与SHP‑1的表达有关：缺氧会升高SHP‑1表达，而用小分子化合物TPI‑1抑制SHP‑1或利用基因敲低SHP‑1基因表达后，均成功地逆转了缺氧所导致的NK细胞杀伤肿瘤细胞活性的降低。

摘要： 本发明实施例公开了一种NK细胞培养基及NK细胞的培养方法，属于细胞培养技术领域。本发明的NK细胞培养基中IL‑2、IL‑15和IL‑21协同增效，共同作用于脐带血来源的单个核细胞，得到大量高纯度、高杀伤活性、高细胞毒活性的NK细胞。本发明的NK细胞培养方法具有诱导效率高、扩增速度快的优点；在采用本发明的培养基进行NK细胞的培养过程中，无需引入肿瘤细胞，无需添加动物血清，避免了安全隐患，具有安全性高的优点；本发明的NK细胞培养基添加因子少，成本低，培养方法操作简便、高效，能够满足临床对NK细胞的需求。

摘要： 本发明提供一种NK细胞培养基及体外扩增NK细胞的方法，涉及细胞培养领域。该NK细胞培养基，包括基础培养基70‑80％、自体血浆10‑12％、活化剂0.5‑2％、白细胞介素100‑210μg/L、补充剂3‑6％、平衡剂1‑3％和0.6μg/ml‑30μg/ml的单抗CD3，余量为蒸馏水。本发明的培养基设置有补充剂和平衡剂，可通过在培养过程中持续添加补充剂和平衡剂保证培养基环境的稳态，防止由于pH值和渗透压的波动影响细胞活性，提高了扩增效率，加强了本发明的新颖性。

摘要： 本发明公开了一种选择性扩增同种反应性NK细胞的NK细胞体外培养方法，该方法包括将NK细胞置于含饲养细胞的培养液中培养的步骤；所述的饲养细胞为与NK细胞HLA‑Cw位点不合的PMBC。本发明采用与NK细胞Cw位点不合的PMBC作为饲养细胞，则NK细胞中表达不能和饲养细胞表面Cw位点结合的KIR表型的NK细胞亚群即被活化，产生优势扩增；因此，在器官移植前的配型阶段，选择与受者Cw位点不合的供者，并采用受者PMBC作为饲养细胞对供者NK细胞进行饲养，即可使同种反应性NK细胞优先扩增，经过2‑3周的培养，NK细胞数量能够增殖至初始时的40‑70倍，且同种反应性NK细胞的纯度可达90％以上。

摘要： 本发明提供一种NK细胞无动物源培养基以及NK细胞的培养方法，涉及细胞培养领域。该NK细胞无动物源培养基，包括以RPMI‑1640为基础培养基、坚果提取液、单细胞藻类提取液、白介素‑2、白蛋白和抗生素，以每升所述RPMI‑1640基础培养基加入坚果提取液40～80ml、单细胞藻类提取液20～60ml、白介素‑2 30～80μg、白蛋白35～45g和抗生素8×105～106U。通过选取坚果和藻类进行提取，并将提取液加入基础培养基中，实现微量元素的供给，该方式微量元素的添加简单快捷。

摘要： 本发明公开了一种NK细胞培养基，通过在培养基中加入1,3‑二咖啡酰奎宁酸，能够显著增强NK细胞对K562的杀伤活性,并且该促进作用随着效靶比的增高而增强。利用本发明的NK细胞培养基及体外扩增NK细胞的方法，可扩增出活性高、杀伤性更强的NK细胞。

摘要： 本发明提供了NK细胞的应用、NK细胞回输制剂以及组合制剂，NK细胞回输可以预防巨细胞病毒感染、清除巨细胞病毒感染、促进NK细胞的免疫重建，NK细胞回输是安全且耐受性良好的，没有发生与输注相关的严重副作用，并且，采用NK细胞回输不会导致病毒耐药株的出现，也不会引起明显的骨髓抑制和肾功能损害等一系列药物副作用，并且，NK细胞回输后患者体内重建的NK细胞表型更成熟，功能更强。