摘要:目的:以“合募配穴”中医针灸理论为指导,从脊髓水平强啡肽(Dynorphin,Dyn)系统探讨温和灸天枢、上巨虚穴缓解肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)慢性内脏痛的镇痛机制.方法:采用乳鼠直结肠扩张(colorectal distention,CRD)刺激制备IBS慢性内脏痛大鼠模型.①大鼠随机分为正常组、模型组、i.t.Dyn组、i.t生理盐水(Normal saline,NS)组、i.t.k受体拮抗剂(nor-Binaltorphimine,nor-BNI)组、i.t.Dyn+nor-BNI组.i.t.Dyn、i.t.NS、i.t.nor-BNI、i.t.Dyn+noroBNI组,于大鼠出生后第36天分别给予鞘内注射Dyn、NS、nor-BNI、Dyn+nor-BNI.干预结束后,采用腹部撤回反射(abdominal withdrawl reflex,AWR)评分作为检测大鼠内脏痛的行为学指标.②大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、i.t.nor-BNI+艾灸组、i.t.Dyn+艾灸组、i.t.nor-BNI组、i.t.Dyn组.艾灸组大鼠出生后第36-42天接受温和灸双侧天枢、上巨虚穴干预;i.t.nor-BNI+艾灸、i.tDyn+艾灸组,于每次艾灸干预前15分钟分别给予i.tnor-BNI、Dyn:i.t.nor-BNI、i.t.Dyn组大鼠每天同一时间分别给予i.tnor-BNI、Dyn.所有干预结束后,采用AWR评分作为检测内脏痛的行为学指标.③大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、假艾灸组,艾灸组、假艾灸组大鼠出生后第36-42天分别接受温和灸与假温和灸干预.所有干预结束后,采用AWR评分作为检测内脏痛的行为学指标:采用原位杂交法观察L6-S1脊髓节段前强啡肽原(Preprodynorphin,PPD) mRNA、x受体nRNA的表达:免疫组织化学法观察相应脊髓节段byn的表达;酶联免疫法(Enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)检测相应脊髓节段Dyn的浓度.结果:①在不同强度(20、40、60、80mmHg)的内脏痛诱发刺激下,与正常组大鼠相比,模型组AWR评分上升(P<0.01),与模型组相比,i.t.Dyn组大鼠AWR评分降低(P<0.01),与i.t.Dyn组相比,i.tDyn+nor-BNI组大鼠AWR评分升高(P<0.05).②与模型组相比,艾灸组大鼠AWR评分降低(P<0.01):在一定强度的内脏痛诱发刺激下,与艾灸组相比,艾灸+ i.t.nor-BNI组大鼠AWR评分升高(P<0.01),艾灸+i.t.Dyn组大鼠AWR评分降低(P<0.01).③与正常组相比,模型组大鼠脊髓背角PPD mRNA、Dyn、κ受体mRNA阳性表达总面积与OD值、Dyn含量均明显增加(P<0.01.P<0.05);与模型组相比,艾灸组大鼠PPD mRNA、Dyn、c受体mRNA阳性表达总面积与OD值、Dyn含量均升高(P<0.01,P<0.05).结论:艾灸镇痛作用能被i.t.nor-BNI部分阻断,且能被鞘内注射Dyn加强,提示脊髓髓平Dyn系统参与艾灸镇痛过程.温和灸天枢、上巨虚穴促进慢性内脏痛大鼠L6-S1脊髓节段Dyn的合成、κ受体mRNA的表达,提示温和灸通过激活脊髓水平Dyn系统是实现镇痛作用.