酪氨酸羟化酶

摘要： 背景:1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠模型是较为广泛使用的帕金森病动物模型之一,可以部分反映帕金森病的发病过程和病理特征.目的:利用MPTP诱导建立小鼠亚急性和慢性帕金森病模型,观察两种动物模型在行为学、组织病理学及相关蛋白水平变化上的异同及其与疾病临床症状的差异性.方法:C57BL/6J雄性小鼠40只随机分为4组:亚急性模型组小鼠腹腔注射MPTP,25 mg/kg,1次/d,连续注射7d诱导亚急性模型;对照1组腹腔注射生理盐水;慢性模型组小鼠皮下注射MPTP(25 mg/kg)并腹腔注射丙磺舒(Probenecid,250 mg/kg),每间隔3.5d注射1次,共10次诱导慢性模型;对照2组腹腔注射Probenecid溶剂.通过疲劳转棒实验与爬杆实验测试小鼠行为变化;利用免疫荧光染色检测脑黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞分布;采用免疫印迹法检测脑组织中酪氨酸羟化酶蛋白表达水平.研究所涉及的动物实验获得广东省实验动物监测所AAALAC认证机构动物实验动物使用与管理委员会(IACUC)批准[lACUC2020137].结果 与结论:①在亚急性小鼠模型中,疲劳转棒实验结果显示小鼠在加速转动的转棒上停留时间较对照1组显著降低(P＜0.05);在爬杆实验中,小鼠从杆顶部运动到底部的时间较对照1组显著增加(P＜0.05),但黑质区的酪氨酸羟化酶的阳性细胞数及酪氨酸羟化酶蛋白表达与对照1组相比无显著差异;②在慢性模型小鼠中,疲劳转棒的停留及爬杆实验总时间与对照2组相比均无显著差异,但黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数量及酪氨酸羟化酶蛋白表达水平显著低于对照2组(P＜0.05);③结果说明,MPTP诱导的亚急性和慢性帕金森小鼠模型由于造模方式的差异,分别在运动损伤和病理改变中表现出与人帕金森病部分相似的表型,提示在利用上述两种模型开展相关研究中,需根据实验目的选择适当的动物模型开展.

摘要： 背景:1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠模型是较为广泛使用的帕金森病动物模型之一,可以部分反映帕金森病的发病过程和病理特征。目的:利用MPTP诱导建立小鼠亚急性和慢性帕金森病模型,观察两种动物模型在行为学、组织病理学及相关蛋白水平变化上的异同及其与疾病临床症状的差异性。方法:C57BL/6J雄性小鼠40只随机分为4组:亚急性模型组小鼠腹腔注射MPTP,25 mg/kg,1次/d,连续注射7 d诱导亚急性模型;对照1组腹腔注射生理盐水;慢性模型组小鼠皮下注射MPTP(25 mg/kg)并腹腔注射丙磺舒(Probenecid,250 mg/kg),每间隔3.5 d注射1次,共10次诱导慢性模型;对照2组腹腔注射Probenecid溶剂。通过疲劳转棒实验与爬杆实验测试小鼠行为变化;利用免疫荧光染色检测脑黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞分布;采用免疫印迹法检测脑组织中酪氨酸羟化酶蛋白表达水平。研究所涉及的动物实验获得广东省实验动物监测所AAALAC认证机构动物实验动物使用与管理委员会(IACUC)批准[IACUC2020137]。结果与结论:①在亚急性小鼠模型中,疲劳转棒实验结果显示小鼠在加速转动的转棒上停留时间较对照1组显著降低(P<0.05);在爬杆实验中,小鼠从杆顶部运动到底部的时间较对照1组显著增加(P<0.05),但黑质区的酪氨酸羟化酶的阳性细胞数及酪氨酸羟化酶蛋白表达与对照1组相比无显著差异;②在慢性模型小鼠中,疲劳转棒的停留及爬杆实验总时间与对照2组相比均无显著差异,但黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数量及酪氨酸羟化酶蛋白表达水平显著低于对照2组(P<0.05);③结果说明,MPTP诱导的亚急性和慢性帕金森小鼠模型由于造模方式的差异,分别在运动损伤和病理改变中表现出与人帕金森病部分相似的表型,提示在利用上述两种模型开展相关研究中,需根据实验目的选择适当的动物模型开展。

摘要： 目的观察电针干预对帕金森病(PD)小鼠大脑黑质组织中酪氨酸羟化酶(TH)、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx-1)以及氧化应激因子超氧化物歧化酶(SOD)蛋白表达的影响,探讨针刺干预改善帕金森病的作用机制。方法采用随机数字表法将40只健康雄性昆明小鼠分为空白组、帕金森模型(PD)组、针刺组、左旋多巴组,每组10只;除空白组外,其余3组均采用MPTP诱导制作小鼠PD模型,造模2周后随机选取两组进行电针及西药干预。干预结束后先采用步长实验和游泳实验对各组小鼠进行行为学评价,再采用Western blot法检测小鼠脑黑质组织SOD-2、Gpx-1和TH表达,免疫组化法检测TH蛋白的表达。结果与空白组比较,PD组小鼠步长距离、游泳时间显著缩短(P0.05)。与空白组比较,PD组小鼠脑黑质中SOD-2和Gpx-1的表达均显著降低(P<0.05);与PD组比较,针刺组和左旋多巴组SOD-2和Gpx-1的表达水平显著升高(P<0.05)。结论电针干预能提高帕金森模型小鼠的运动功能,其治疗机制可能是通过降低脑黑质中氧化应激蛋白表达实现。

摘要： 目的研究健脾柔肝息风汤对抽动障碍(TD)模型大鼠皮质-纹状体-丘脑-皮质回路中多巴胺和环磷酸腺苷调节的磷蛋白(DARPP-32)、酪氨酸羟化酶(TH)含量的影响及其作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为空白组(10只),造模组(30只),造模成功后,将造模组随机分为模型组、氟哌啶醇组和健脾柔肝息风汤组,每组10只,腹腔注射给药7 d,采用HE染色观察大鼠大脑皮层各区形态结构和神经元细胞形态变化,采用免疫组织化学染色检测DARPP-32及TH的表达。结果与空白组比较,模型组运动行为评分、刻板行为评分均上升,差异有统计学意义(P0.05)。结论健脾柔肝息风汤可升高TD模型大鼠脑组织中DARPP-32、TH的含量,从而调节多巴胺能神经系统功能平衡,减少大鼠抽动症状的产生。

摘要： 目的研究抗血管内皮生长因子(VEGF)融合蛋白康柏西普(Conbercept)玻璃体内注射对小鼠氧诱导视网膜新生血管病变(OIR)模型中视网膜多巴胺(DA)含量的影响。方法普通级7 d龄C57BL/6小鼠100只,随机分为空白对照组、OIR组、OIR+生理盐水(NS)组及OIR+Conbercept组,每组25只。其中空白对照组小鼠在常氧环境中饲养至17 d龄。OIR组、OIR+NS组及OIR+Conbercept组小鼠通过高流量吸氧建立OIR模型,并在此环境中饲养至12 d龄,OIR+NS组和OIR+Conbercept组小鼠分别行右眼玻璃体内注射1μL NS、1μL Conbercept后,在常氧环境中饲养至17 d龄,处死。取各组小鼠右眼眼球行HE染色及视网膜铺片,观察突破内界膜的视网膜血管内皮细胞核数及血管分布;行Western blot检测各组小鼠视网膜中酪氨酸羟化酶(TH)、血管内皮生长因子(VEGF)表达量;行高效液相色谱仪检测各组小鼠视网膜DA含量。结果空白对照组小鼠视网膜各层清晰,未见明显无灌注区及新生血管。与空白对照组相比,OIR组小鼠视网膜各层排列紊乱,视盘周围可见大片无灌注区,突破内界膜的血管内皮细胞核数、VEGF相对表达量均增加,TH相对表达量、DA含量均减少,差异均有统计学意义(均为P0.05);与OIR组及OIR+NS组相比,OIR+Conbercept组小鼠视网膜各层排列较清晰,视盘周围可见小片状无灌注区,突破内界膜的内皮细胞核数、DA含量及VEGF、TH相对表达量均减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论OIR模型中视网膜DA含量及TH相对表达量均降低;玻璃体内注射Conbercept后,视网膜新生血管及VEGF相对表达量均减少,TH相对表达量、DA含量均进一步降低。

摘要： 目的观察技巧性有氧训练(skilled aerobic exercise,SAE)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠运动功能、中脑内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)、血清Irisin含量、酪氨酸羟化酶(TH)和大鼠骨骼肌FNDC5表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、假手术+技巧运动组和模型+技巧运动组,每组15只。其中30只大鼠采用单侧两点注射法定向注射6羟基多巴胺建立PD模型和30只大鼠注射生理盐水建立假手术组模型。将造模后的15只PD大鼠和15只假手术大鼠进行连续28 d技巧性有氧训练,其余大鼠进行28 d随意运动。分别于运动7,14,28 d采用阿扑吗啡(apomorphine,Apo)诱导大鼠的旋转行为、圆柱体试验观察大鼠前肢的运动功能。运动28 d分别采集各组大鼠中脑组织、大鼠左后肢股四头肌组织和腹主动脉血样本,采用免疫组织化学检测中脑酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,Western blot法检测中脑组织Bip/Grp78、CHOP和骨骼肌FNDC5的表达,ELISA法检测血清Irisin水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠中脑TH和骨骼肌FNDC5表达明显下调,血清Irisin含量下降,中脑组织内质网应激水平增加,前肢运动能力下降,Apo诱导的旋转行为明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,经14 d技巧性有氧训练,模型+技巧运动组大鼠的旋转行为明显减少(P<0.05);经28 d技巧性有氧训练,模型+技巧运动组大鼠的前肢运动能力明显增强,中脑TH和骨骼肌FNDC5表达增加,血清Irisin含量升高,内质网应激水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论中长期的技巧性有氧训练可以上调大鼠骨骼肌FNDC5的表达,升高血清Irisin含量,降低中脑的内质网应激水平、减缓中脑黑质DA神经元的丢失,改善PD模型大鼠的运动能力。

摘要： 多巴反应性肌张力障碍(DRD)是一种临床综合征,其特征为儿童期出现的对低剂量左旋多巴有显著且持续反应的肌张力障碍。多巴胺合成通路中任何一个环节的缺失均能导致该病。TH基因突变引起的DRD呈常染色体隐性遗传,并引起酪氨酸羟化酶(TH)合成减少,从而导致广泛性的多巴胺及儿茶酚胺缺乏。但TH缺乏的DRD(TH-DRD)患者临床表现可不典型,轻症患者以肌张力不全为主要表现,可逐渐发展为痉挛性截瘫,可伴有帕金森样表现,多数对左旋多巴反应良好,重症患者则表现为进行性复杂性婴儿脑病,对左旋多巴反应差,且多遗留智力发育问题。多数患者脑脊液中的高香草酸(HVA)下降。但由于该病临床表现不具有特征性,实验室检查也无特异性,故目前基因检测仍是诊断该病的唯一可靠标准。小剂量左旋多巴对大部分轻症患者疗效肯定,对重症患者也可一定程度上改善症状。

摘要： 目的 探讨转录因子EB(TFEB)介导的自噬在帕金森病(PD)发病中的作用和机制,从细胞自噬水平阐明加味五虎追风散的效用机制.方法 将60只PD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,各20只.模型组及中药组大鼠每日按时颈部、背部交替皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液建立PD大鼠模型.造模成功后中药组给予加味五虎追风散灌胃,正常组及模型组给予等体积蒸馏水灌胃.4周后处死大鼠,取脑部黑质组织,分离各组大鼠多巴胺能神经元,免疫印迹法(Western Blot)检测TFEB、α-突触核蛋白(α-syn)、微管相关膜蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、泛素结合蛋白P62(P62)、酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠α-syn、LC3Ⅱ、P62表达量增加,TH表达量减少,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,中药组大鼠TFEB、LC3Ⅱ、TH表达量明显增加,P62、α-syn表达量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 加味五虎追风散可通过调控TFEB介导的自噬减少α-syn异常聚集,增加TH表达,从而发挥神经保护作用.

摘要： 多巴反应性肌张力障碍(DRD)是一种临床综合征,其特征为儿童期出现的对低剂量左旋多巴有显著且持续反应的肌张力障碍.多巴胺合成通路中任何一个环节的缺失均能导致该病.TH基因突变引起的DRD呈常染色体隐性遗传,并引起酪氨酸羟化酶(TH)合成减少,从而导致广泛性的多巴胺及儿茶酚胺缺乏.但TH缺乏的DRD(TH-DRD)患者临床表现可不典型,轻症患者以肌张力不全为主要表现,可逐渐发展为痉挛性截瘫,可伴有帕金森样表现,多数对左旋多巴反应良好,重症患者则表现为进行性复杂性婴儿脑病,对左旋多巴反应差,且多遗留智力发育问题.多数患者脑脊液中的高香草酸(HVA)下降.但由于该病临床表现不具有特征性,实验室检查也无特异性,故目前基因检测仍是诊断该病的唯一可靠标准.小剂量左旋多巴对大部分轻症患者疗效肯定,对重症患者也可一定程度上改善症状.

摘要： 目的 探讨牛膝白芍配伍对帕金森病肝阳上亢证小鼠发挥神经保护作用的最佳比例.方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、牛膝白芍不同配比(牛膝与白芍配伍比例分别为0:4、1:4、1:2、1:1、2:1、4:1、4:0)组.采用附子汤[3g/(kg·d)]灌胃联合腹腔注射MPTP[30mg/(kg·d)]法制备帕金森病肝阳上亢病证结合小鼠模型,各配比组造模后灌胃给药14天[6.5g/(kg·d)],模型组与对照组给予相应体积蒸馏水.通过激惹实验、转棒实验观察小鼠行为学改变;运用CompuSyn软件计算牛膝与白芍配伍联合指数(combination index,CI)及效应值(effect value,Fa);采用免疫组化及蛋白印迹实验(Western blot)法测定黑质酪氨酸羟化酶(trosine hydroxylase,TH)的阳性表达水平及蛋白相对表达量.结果 除0:4、4:1、4:0组外,牛膝白芍各配比组均能明显降低小鼠的易激惹程度(P<0.05);各配比组均能明显延长小鼠的掉落潜伏期(P<0.05).CompuSyn软件计算结果表明,牛膝与白芍各配比组的CI值均<1,两药联用具有协同增效作用,以1:2比例联用时为最佳配伍比例(CI=0.860,Fa=0.235).免疫组化及Western blot法实验结果表明,各配比组均可不同程度提高小鼠中脑黑质TH阳性表达及蛋白表达量(P<0.05),且均以1:2组作用显著.结论 牛膝白芍联用抗帕金森病肝阳上亢证的最佳配伍比例为1:2.

摘要： 目的:观察酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)0-糖基化和磷酸化水平在6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞(入神经母细胞瘤细胞)帕金森病细胞模型中的变化,探讨0-糖基化在酪氨酸羟化酶功能调节中的作用.rn 方法:用不同浓度的6-OHDA处理SH-SY5Y细胞,通过观察细胞形态学变化、细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,了解6-OHDA导致的SH-SY5Y细胞损伤的情况,选择适当浓度的6-OHDA处理SH-SY5Y细胞作为模型.用相同终浓度的6-OHDA加上4mmol/L四氧嘧啶(O-糖基化转移酶抑制剂)处理SH-SY5Y细胞相同时间作为模型治疗组;用4mmol/L的四氧嘧啶处理SH-SY5Y细胞相同时间作为治疗对照组.提取各组培养细胞总蛋白,用Western印迹检测SH-SY5Y细胞TH的表达以及其0-糖基化和磷酸化水平的变化,采用多巴胺酶联免疫吸附测定试剂盒ELISA法检测各组细胞多巴胺的浓度.rn 结果:6-OHDA以浓度依赖性地引起SH-5YSY细胞存活率下降,12.5-50μmol/L 6-OHDA处理细胞24小时,细胞存活率为对照组的96.9％-72.3％;100umol/L 6-OHDA处理细胞24小时后存活率低于50％.50μmol/L 6-OHDA处理SH-SY5Y细胞24小时引起细胞TH表达的下降、糖基化水平升高和磷酸化水平下降;采用四氧嘧啶处理SH-SY5Y细胞24小时后,其THO-糖基化水平下降、磷酸化水平升高,但TH的表达无改变;用四氧嘧啶+50μmol/L6-OHDA处理SH-SY5Y细胞24小时后,与模型组比较,TH表达无明显改变,0-糖基化水平下降,磷酸化水平上升.多巴胺浓度检测的结果显示,与空白对照组比较,四氧嘧啶处理SH-SY5Y细胞24小时后,总的多巴胺的浓度升高了11.5±3.4％(P＜0.01);与模型组比较,四氧嘧啶处理后模型治疗组总多巴胺浓度升高8.7±2.0％(P＜0.01).rn 结论:在6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病细胞模型中,TH的O-糖基化水平升高,磷酸化水平的下降;通过抑制酪氨酸羟化酶的O-糖基化水平可以上调其活性,引起多巴胺生成分泌的增多,这一作用可能同0-糖基化与磷酸化的竞争性抑制有关.

摘要： 酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase，TH)是中枢神经系统的DA合成的限速酶，其可能与精神分裂症的发病机制有关，而目前针对TH基因与精神分裂症的关系的研究较多，但所得结论不尽一致，可能与精神分裂症系异质性疾病有关，为了进一步明确TH基因与精神分裂症的关系，另外为了减少精神分裂症研究中的样本异质性。在汉族人群中选择了早发精神分裂症患者作为研究对象，探讨TH基因多态性rs11042978，rs2070762及rs6356与精神分裂症的相关性。通过实验证明在中国汉族人群中酪氨酸羟化酶基因可能是早发精神分裂症的易感基因。

摘要： 多巴胺能神经元主要分布于中脑黑质(SN)和腹侧被盖区(VTA)，它在调节大脑多种复杂的生理功能中发挥着重要作用，包括随意运动以及奖赏、成瘾等动机行为，其功能异常与帕金森病(Parkinson disease，PD)和药物成瘾(drug dependence/drug addiction)等多巴胺系统疾病密切相关。从酪氨酸到多巴胺(Dopamine，DA)需要经过两个酶解过程，第一个限速酶为酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase，TH)，它能将酪氨酸代谢为多巴胺前体L-多巴，后者再经过芳香左旋氨基酸脱羧酶(AADC)代谢为DA。

摘要： @@多巴胺能神经元主要分布于中脑黑质(SN)和腹侧被盖区(VTA)，它在调节大脑多种复杂的生理功能中发挥着重要作用，包括随意运动以及奖赏、成瘾等动机行为，其功能异常与帕金森病(Parkinson disease，PD)和药物成瘾(drug dependence/drug addiction)等多巴胺系统疾病密切相关。从酪氨酸到多巴胺(Dopamine，DA)需要经过两个酶解过程，第一个限速酶为酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase，TH)，它能将酪氨酸代谢为多巴胺前体L-多巴，后者再经过芳香左旋氨基酸脱羧酶(AADC)代谢为DA。而L-多巴可以透过血脑屏障，并被内源性AADC代谢为DA，从而成为PD的主要治疗药物。

摘要： 目的：本实验采用线刀损毁大鼠内侧前脑束(MFB)的帕金森病(Parkinson's Disease,PD)模型,观察100Hz高频电针对PD大鼠黑质多巴胺能神经元的影响。rn 方法：单侧损伤的PD大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、0Hz、2Hz和100Hz电针治疗组.观察电针治疗对大鼠平衡运动能力的影响,Western-blot检测中脑部位酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase, TH)的蛋白表达变化,高效液相检测纹状体多巴胺的含量。rn 结果：100Hz电针治疗有效增加了PD大鼠的平衡运动时间,2 Hz电针治疗有改善趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05),0 Hz电针无治疗作用;100Hz电针治疗增加了中脑部位的TH蛋白表达,但对损伤侧纹状体内的DA含量没有明显影响。rn 结论：100Hz电针对PD大鼠的治疗作用,可能是通过一种非多巴胺依赖性的机制而产生的神经保护效应。

摘要： 目的：本实验采用线刀损毁大鼠内侧前脑束的帕金森病(PD)模型，观察了100 Hz高频电针对PD大鼠黑质多巴胺能神经元的影响。方法：单侧损伤的PD大鼠模型，随机分为假手术组、模型组、0 Hz、2 Hz和100 Hz电针治疗组，观察电针治疗对大鼠平衡运动能力的影响;Western-blot检测中脑部位酪氨酸羟化酶(TH)的蛋白表达变化，高效液相检测纹状体多巴胺的含量。结果：100 Hz电针治疗明显增加了PD大鼠的平衡运动时间，2Hz治疗有改善趋势但未见显著性，0 Hz则没有治疗作用。同时，100Hz的电针治疗增加了中脑部位的TH蛋白表达，但对损伤侧纹状体内的DA含量没有显著影响。结论：100 Hz电针对PD大鼠的治疗作用，可能是通过一种非多巴胺依赖性的机制而产生一定的神经保护效应。

摘要： 目的：克隆小鼠酪氨酸羟化酶(TH)启动子,并对其特异性调控能力进行研究。rn 方法：采用了重叠延伸PCR高保真扩增出小鼠TH启动子片段,测序正确后,重组构建质粒,并用TH启动子调控EGFP基因的表达，并分别转染MN-9D细胞(TH+)和ECV细胞(TH-),观察EGFP基因在细胞内表达情况。rn 结果：扩增出小鼠TH启动子序列与Genebank报道一致；单酶切和质粒PCR鉴定证实小鼠TH启动子和EGFP基因已经克隆入重组质粒中；小鼠TH启动子能调控EGFP在MN-9D细胞中表达,不能调控EGFP在ECV细胞内表达。rn 结论：初步确定了克隆的小鼠TH启动子具有特异性调控目的基因表达的能力。

摘要： 目的：探讨帕金森病(PD)的发病机理及天麻防治PD的作用机制。方法：采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)大鼠模型，利用免疫组织化学技术观察天麻对PD大鼠黑质ca8pase-3表达及TH阳性神经元的影响。结果：与正常组比较，模型组PD大鼠黑质致密部(SNpc)酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的数目减少了约45％;各天麻治疗组可部分减少SNpc区TH阳性神经元的丢失，其丢失程度较模型组明显减低，其中，小剂量组减少约18％，大、中剂量组和美多巴组分别减少约。34％、30％和13％。相应的小剂量caspase-3阳性神经元表达较模型组明显减少。各组caspase-3阳性神经元的表达与TH阳性神经元的表达呈相反趋势。结论：细胞凋亡可能是PD大鼠中脑多巴胺神经元丢失的主要方式。天麻可通过调节Caspase-3减少细胞凋亡，其中，天麻小剂量组有较好的作用。提示天麻可不同程度地保护多巴胺神经元。

摘要： 酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)是促进酪氨酸(Tyrosine,Tyr)合成多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(nor-adrenalin,NE)和肾上腺素(epinephrine,E)的催化剂,提高和抑制州的活力可大幅度地影响儿茶酚胺(catecholamine,CA)的合成.TH作为CA合成的限速酶在应激反应中具有重要的作用.本实验采用反复制动限制活动空间的方法制成心理应激大鼠模型,在此基础上观察了应激大鼠下丘脑TH和下丘脑及海马Tyr含量的变化以及调肝、健脾、补肾方药及人参总皂甙对其的影响,现将结果报道。

摘要： 应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型,观察HIBD大鼠远期焦虑行为的变化,并通过胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的干预来探讨IGF-1对HIBD大鼠远期焦虑行为的影响和相关机制。研究结果表明，1、初生时的HI损伤可导致大鼠青春期原本具有的焦虑样行为被抑制，是大鼠远期焦虑行为的病因之一，与脑黑质TH表达减少相关;2、初生时给予IGF-1干预对大鼠HIBD远期焦虑行为的异常不产生作用，且IGF-1不影响脑黑质TH的表达，SD大鼠青春期焦虑样行为的改变可能不受IGF-1调控。

摘要： 本发明的课题在于提供一种能够有效地制造羟基‑L‑赖氨酸的方法。本发明提供一种羟基‑L‑赖氨酸的制造方法，其特征在于，使2‑酮戊二酸依赖型L‑赖氨酸羟化酶或包含该2‑酮戊二酸依赖型L‑赖氨酸羟化酶的细胞、所述细胞的制备物或者对所述细胞进行培养而得到的培养液与L‑赖氨酸作用，生成下述通式(I)(式中，R

摘要： 本发明的课题在于提供一种能够有效地制造羟基-L-赖氨酸的方法。本发明提供一种羟基-L-赖氨酸的制造方法，其特征在于，使2-酮戊二酸依赖型L-赖氨酸羟化酶或包含该2-酮戊二酸依赖型L-赖氨酸羟化酶的细胞、所述细胞的制备物或者对所述细胞进行培养而得到的培养液与L-赖氨酸作用，生成下述通式(I)(式中，R

摘要： 本发明涉及一种高活性Fe2+和α‑酮戊二酸依赖型羟化酶的筛选方法，该方法首先构建α‑酮戊二酸脱氢酶编码基因和异柠檬酸裂解酶编码基因缺失菌株，采用易错PCR技术扩增Fe2+和α‑酮戊二酸依赖型羟化酶编码基因获得其突变体并连接至表达载体，然后将其转化至上述α‑酮戊二酸脱氢酶编码基因和异柠檬酸裂解酶编码基因缺失菌株并于含α‑酮戊二酸和相应底物的培养基中筛选生长速度快的菌株，提取其质粒并扩增羟化酶编码基因突变体。实现了高活性Fe2+和α‑酮戊二酸依赖型羟化酶的高通量筛选，加快了该类酶的应用进程。

摘要： 本发明提供了用于在有此需要的受试者中治疗肠渗透性过高的方法、组合物和试剂盒，所述肠渗透性过高包括诸如高血糖症等病症和诸如糖尿病、孤独症、纤维肌痛、炎性肠病(IBD)、移植物抗宿主病(GVHD)、HIV/AIDS、多器官功能障碍综合征、肠易激综合征(IBS)、乳糜泻、湿疹、银屑病、急性胰腺炎、帕金森病、抑郁症、慢性疲劳综合症、哮喘、多发性硬化、关节炎、强直性脊柱炎、非酒精性脂肪肝病、酒精性肝硬化、环境性肠病变或恶性营养不良病等基础性疾病。

摘要： 表达神经营养因子和酪氨酸羟化酶双顺反子重组腺病毒的构建方法，属于基因工程。步骤有：将NTN和TH基因分别插入双顺反子表达质粒pcDNA3.0BA多克隆位点，用筛选出的模板和引物PCR扩增得到双顺反子表达盒，插入腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV转录和翻译，电转感受态细胞BJ-5183，筛选阳性克隆，经鉴定转化XL-10(Gold)宿主菌,在AD-293细胞中包装成双顺反子重组腺病毒。本发明重组腺病毒Ad-NTN-TH感染宿主细胞后能稳定转录和共表达NTN和TH，表达的功能蛋白NTN在体外促进鸡胚背根神经节生长突触，还能促进胎鼠多巴胺能神经元的存活，酪氨酸羟化酶TH在体外催化L-Tyrosine反应生成L-DOPA。

摘要： 本申请涉及蛋白转导域-人酪氨酸羟化酶催化区域的融合蛋白，以及编码该融合蛋白的核酸。本申请也涉及所述融合蛋白的表达纯化及复性方法。本申请也提供含有所述蛋白转导域-人酪氨酸羟化酶催化区域融合蛋白的药物组合物，所述组合物可以用于治疗帕金森病。

摘要： 本发明公开了一种利用模拟酪氨酸羟化酶制备的纳米酶仿生合成左旋多巴的方法，该方法包含以下步骤：将六水合氯化铁、四水合氯化亚铁以及乙二胺四乙酸二钠(EDTA‑2Na)，在氨水提供碱性条件下以共沉淀的方式制备成Fe3O4@EDTA，然后将Fe3O4@EDTA中的EDTA与六水合硫酸亚铁铵溶液中Fe2+络合制备成Fe3O4@EDTA‑Fe2+纳米酶材料。该材料在还原剂抗坏血酸和氧化剂双氧水存在的情况下可以作为纳米酶催化酪氨酸生成左旋多巴。

摘要： 本发明涉及一种基于抗酪氨酸羟化酶抗体的免疫探针及其制备与应用，免疫探针为近红外荧光染料与抗酪氨酸羟化酶抗体的偶联物；制备方法包括以下步骤：1)将抗酪氨酸羟化酶抗体与还原剂混合，之后振荡反应，再加入溶解在有机溶剂中的近红外荧光染料，得到混合物；2)将步骤1)中的混合物加入至脱盐柱，除去残余的近红外荧光染料，之后离心收集上清液，即得到免疫探针。与现有技术相比，本发明中的免疫探针最大吸收在600‑1000nm区域，具有较大的摩尔吸光系数，适用于光声成像，在肾去交感神经消融术中可以通过光声成像提供实时手术指导和术后效果评估，可应用于与酪氨酸羟化酶过表达的生物细胞、组织或器官的靶向性活体成像和相关疾病的手术指导。

摘要： 本发明涉及用于治疗肠渗透性过高的酪氨酸羟化酶抑制剂，提供了用于在有此需要的受试者中治疗肠渗透性过高的方法、组合物和试剂盒，所述肠渗透性过高包括诸如高血糖症等病症和诸如糖尿病、孤独症、纤维肌痛、炎性肠病(IBD)、移植物抗宿主病(GVHD)、HIV/AIDS、多器官功能障碍综合征、肠易激综合征(IBS)、乳糜泻、湿疹、银屑病、急性胰腺炎、帕金森病、抑郁症、慢性疲劳综合症、哮喘、多发性硬化、关节炎、强直性脊柱炎、非酒精性脂肪肝病、酒精性肝硬化、环境性肠病变或恶性营养不良病等基础性疾病。

摘要： 本发明公开了黄野螟酪氨酸羟化酶基因全序列及其克隆方法，属于生物基因工程技术领域。克隆方法如下：首先用黄野螟的成虫进行总RNA的提取，其次采用RACE扩增技术获得该基因的3′端序列，最后与实验室构建的黄野螟cDNA文库中的酪氨酸羟化酶基因5′端序列进行无重复拼接获得该基因全长序列。该序列全长2220bp，起始密码子ATG，终止密码子TGA，ORF序列共编码558个氨基酸。本发明对深入研究黄野螟黑色素水平调控及黄野螟防止新方法奠定了基础。本发明是由国家自然科学基金(31470653)和广东省自然科学基金(1414050001666)支持。