摘要:目的:采用高效液相色谱(HPLC)-荧光法和酶联免疫(ELISA)法测定成年大鼠脑微透析液及血清中的褪黑素(MLT)含量,比较2种检测方法的灵敏性、准确性及可靠性. 方法:将微透析引导管置入正常成年大鼠纹状体内1周后,采用脑微透析技术动态收集2:00,6:00,10:00,14:00,18:00和22:00的透析液,并于次日22:00行尾静脉取血;用HPLC-荧光法和ELISA法分别测定透析液及血清样本中的MLT水平. 结果:HPLC-荧光法测定MLT检出限为0.1pg/mL,在1.0~500pg/mL之间呈线性关系,回归方程y=10446x+-8603.5(r=0.9987,P<0.001),日间、日内精密度均<6%;ELISA法检出限为5.92pg/mL,检测线性范围为12.35~1000pg/mL.用HPLC-荧光法测定2:00,6:00,10:00,14:00,18:00和22:00大鼠脑透析液中的MLT含量分别为(32.99±2.22),(18.25±2.27),(4.03±1.70),(2.92±1.08),(12.08±1.77)和(21.83±2.04)pg/mL,具有明显的昼夜节律性,探针回收率为12%~13%;22:00血清中的MLT含量为(82.62±8.09)pg/mL,提取回收率>90%,且血清与透析液中的MLT水平呈高度正相关(r=0.987,P<0.001);用ELISA法测定血清中的MLT含量为(81.31±9.62)pg/mL,且用2种方法测定血清中MLT差别无统计学意义(P=0.115). 结论:用HPLC-荧光法测定大鼠脑微透析液和血清中的MLT含量具有灵敏、快速、准确、重复性好等特点,且HPLC-荧光法和ELISA法测定血清中的MLT具有较好的一致性.