多巴胺能神经元

摘要： 目的:探索miR-218-5p对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的急性帕金森病(PD)模型小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。方法:18只8周雄性C57小鼠随机分配至MPTP组和PBS组,分别腹腔注射20 mg/kg MPTP或等体积无菌PBS,每隔2 h注射一次,共4次。另将36只8周雄性C57小鼠随机平分为(NC agomir+PBS)组(NCPBS组)、(NC agomir+MPTP)组(NCMPTP组)、(miR-218-5p agomir+PBS)组(218PBS组)、(miR-218-5p agomir+MPTP)组(218MPTP组),每组9只,分别进行双侧黑质立体定位注射miR-218-5p agomir/NC agomir,3 d后腹腔注射MPTP或PBS。免疫荧光染色和Western blot检测小鼠黑质多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶(TH)的表达;荧光定量PCR检测小鼠黑质miR-218-5p和Wnt7a、Ctnnb1、Lef1、Birc5 mRNA的表达。结果:与PBS组相比,MPTP组小鼠黑质miR-218-5p表达显著下降(P<0.05);与NCPBS组相比,NCMPTP组TH+细胞数量和TH蛋白表达减少(P<0.05),Wnt7a、Ctnnb1、Lef1、Birc5 mRNA表达下降(P<0.05);与NCMPTP组相比,218MPTP组TH+细胞数量和TH蛋白表达增加(P<0.05),Wnt7a、Ctnnb1、Lef1、Birc5 mRNA表达上升(P<0.05)。结论:miR-218-5p可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路逆转MPTP诱导的急性PD模型小鼠黑质多巴胺能神经元变性,提示miR-218-5p有可能成为PD的潜在治疗靶点。

摘要： 目的研究脑内奖赏系统中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺(DA)能神经元对灯光线索诱发小鼠自身给糖行为重建的调控作用。方法以转基因DAT-Cre小鼠为研究对象,通过病毒转染的方式,将光敏感通道蛋白特异性表达在小鼠VTA的DA能神经元上。采用10%蔗糖水训练注射过携带光敏感通道蛋白重组腺相关病毒的小鼠建立自身给糖行为,然后进行首次消退训练,达到首次消退期稳定阶段(连续3 d小鼠有效鼻触次数<10%形成期稳定操作值)后,进行线索点燃测试。随后,小鼠进行第2次消退,达到第2次消退期稳定阶段,采用频率20 Hz、脉冲时长15 ms的激光连续100次集中刺激VTA的DA能神经元。最后进行第3次消退,达到第3次消退期稳定阶段,采用频率80 Hz、脉冲时长15 ms的激光连续100次集中刺激VTA的DA能神经元。结果在相关灯光线索刺激下,小鼠出现蔗糖行为重建,表现为有效鼻触次数较首次消退期稳定阶段有效鼻触次数(首次消退期最后3 d的有效鼻触次数平均值)显著升高(P<0.01),提示蔗糖相关灯光线索可显著诱发小鼠觅糖行为重建,实验模型建立成功。20 Hz 15 ms或80 Hz 15 ms的激光刺激小鼠VTA能特异性激活多巴胺能神经元,与第2次消退期稳定阶段或者第3次消退期稳定阶段的有效鼻触次数相比,上述激光刺激对小鼠有效鼻触次数无显著影响。结论在自身给糖小鼠模型中,VTA脑区单一类型DA能神经元的短暂激活不足以诱发小鼠觅糖行为重建。

摘要： 目的:观察蛋白酶体抑制剂乳胞素对大鼠黑质多巴胺能神经元死亡和氧化损伤的作用,并探讨氧化损伤在蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元死亡中的作用。方法:将70只SD大鼠随机分为乳胞素组和生理盐水组,每组35只。将蛋白酶体抑制剂乳胞素立体定向注射入乳胞素组大鼠右侧黑质中,生理盐水组大鼠注射等体积的生理盐水。旷场实验检测2组大鼠的穿梭距离、下肢站立次数和总跑动时间,前肢使用不对称实验检测2组大鼠前肢使用不对称指数,阿扑吗啡诱导旋转实验检测2组大鼠旋转行为,微量酶标法检测2组大鼠中脑黑质中羟自由基、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、蛋白质羰基和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,免疫组织化学染色检测2组大鼠黑质中酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性神经元毁损程度。结果:与生理盐水组比较,乳胞素组大鼠的穿梭距离、下肢站立次数和总跑动时间明显减少(P<0.05)。与生理盐水组比较,乳胞素组大鼠前肢使用不对称指数明显升高(P<0.05)。乳胞素组大鼠注射阿扑吗啡后出现恒向健侧旋转。给药7和21 d后,与生理盐水组比较,乳胞素组大鼠注射侧黑质中羟自由基、MDA、蛋白质羰基和8-OHdG水平明显升高(P<0.05),GSH水平明显降低(P<0.05)。给药21 d后,乳胞素组大鼠注射侧黑质中TH免疫阳性神经元显著丧失。与生理盐水组比较,乳胞素组大鼠黑质中TH免疫阳性神经元残存率明显降低(P<0.05)。结论:大鼠黑质内注射蛋白酶体抑制剂乳胞素能够诱导大鼠黑质多巴胺能神经元氧化损伤,并最终导致神经元死亡。

摘要： 目的探讨温肾养肝汤保护多巴胺(Dopamine,DA)能神经元,延缓帕金森病(Parkinson's disease,PD)进程的作用机制。方法将50只小鼠随机分为正常组,模型组,温肾养肝汤高、低剂量组,金刚烷胺组,每组10只,除正常组外,其余组小鼠腹腔注射30 mg·kg^(-1)1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),每周2次,连续4周,建立MPTP致小鼠PD模型,灌胃温肾养肝汤,每日1次,连续3周。观察PD小鼠的行为学变化;免疫组化和尼氏染色法检测DA能神经元细胞数;HPLC法检测病理组织中DA、3,4-二羟基苯乙酸(3,4-Dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)和高香草酸(Homovanillic acid,HVA)含量;比色法测定小鼠黑质线粒体中ATP酶(ATPase)、线粒体呼吸链复合物Ⅰ(ComplexⅠ)活性;Western blot测定PINK1、Parkin、VDAC1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白相对表达量。结果行为学检测显示,与模型组相比,温肾养肝汤能明显改善小鼠的肌肉力量和运动平衡(P<0.01),延长小鼠在滚筒上的时间(P<0.01);免疫组化显示,温肾养肝汤高剂量组可观察到大量酪氨酸氢化酶(Tyrosine hydrogenase,TH)免疫反应呈阳性的细胞,明显的细胞突起,与尼氏染色结果一致,同时小鼠纹状体中DA和HVA含量明显提高(P<0.05,P<0.01);黑质线粒体酶活性和自噬通路相关蛋白研究显示,高剂量温肾养肝汤能明显提高ATPase和ComplexⅠ活性(P<0.01),同时还能上调模型小鼠的PINK1(P<0.05)、Parkin(P<0.01)、LC3Ⅱ/Ⅰ(P<0.01)蛋白表达,抑制P62蛋白表达(P<0.01)。结论温肾养肝汤通过提高线粒体功能,激活PINK1/Parkin介导的线粒体自噬过程来保护DA能神经元,改善PD模型小鼠行为学功能障碍,延缓PD进程。

摘要： 目的探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)过表达诱导的脐血干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UMSCs)向多巴胺能神经元分化治疗帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型大鼠的效果及其对Tribbles同源蛋白3(TRB3)介导的信号通路的影响。方法建立PD模型,体外培养及诱导UMSCs,将pcDNA-NC、pcDNA-NGF转染至UMSCs中,分为pcDNA-NC组和pcDNA-NGF组。实验设置4组:NC组(大鼠仅进行手术,不进行注射)、PD组(PD模型)、UMSCs组(正常大鼠中注射含有pcDNA-NGF的UMSCs细胞悬液)、UMSCs+PD组(PD模型大鼠中注射含有pcDNA-NGF的UMSCs细胞悬液),每组各9只。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NGF、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元细胞内微管相关蛋白2(MAP2)、微管蛋白(Tubulin)、TRB3 mRNA的表达量;观察各组大鼠旋转圈数;采用免疫组化法检测各组大鼠黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NGF、TRB3的蛋白表达量。结果与pcDNA-NC组比较,pcDNA-NGF组NGF mRNA及蛋白、巢蛋白(Nestin)、GFAP、MAP2、Tubulin mRNA的表达水平升高(P<0.05)。与NC组比较,PD组大鼠旋转圈数增多(P<0.05);与UMSCs组比较,UMSCs+PD组大鼠旋转圈数增多(P<0.05);与PD组比较,UMSCs+PD组大鼠旋转圈数减少(P<0.05)。与NC组比较,PD组大鼠黑质区TH阳性细胞计数减少(P<0.05);与PD组比较,UMSCs+PD组大鼠黑质区TH阳性细胞计数增多(P<0.05)。与NC组比较,PD组大鼠脑组织中TRB3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);与PD组比较,UMSCs+PD组大鼠脑组织中TRB3 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论NGF过表达诱导的UMSCs可促进细胞向多巴胺能神经元分化,从而改善PD大鼠的症状,其作用机制可能是通过调控TRB3信号通路而发挥作用。

摘要： 目的探讨血浆神经轴突导向因子1(Netrin-1)表达水平与帕金森病(PD)的相关性。方法选取无锡市第二人民医院PD门诊就诊的45例患者为PD组,并以同期年龄、性别和受教育水平与PD患者匹配的健康体检者29例为对照组,ELISA法检测血浆Netrin-1水平,采用Hoehn-Yahr(H-Y)分级量表,统一PD评定量表(UPDRS),PD非运动症状评价量表(NMSS),嗅觉减退量表(HRS),PD睡眠量表(PDSS),快速眼动睡眠期行为紊乱筛查量表(RRBDSQ),汉密尔顿抑郁量表(HAMD),简易智能状态检查量表(MMSE),蒙特利尔认知评估量表(MoCA),自主神经症状评定量表(SCOPA-AUT)评估PD患者症状。采用ROC曲线分析Netrin-1诊断PD的价值。结果 PD组Netrin-1水平明显低于对照组[127.7(77.7~183.2)ng/L vs 316.0(131.3~837.1)ng/L,P=0.010]。ROC曲线分析显示,血浆Netrin-1诊断PD的曲线下面积为0.723(95%CI:0.607~0.843,P=0.001)。PD患者血浆Netrin-1水平与H-Y分级、NMSS评分、HRS评分、RBDSQ评分和SCOPA-AUT评分无明显相关性(P>0.05),与UPDRS-Ⅰ评分、UPDRS-Ⅱ评分、UPDRS-Ⅲ评分、HAMD评分呈显著正相关,与PDSS评分、MMSE评分和MoCA评分呈显著负相关(P<0.05)。结论 PD患者血浆Netrin-1表达水平显著降低,可以作为诊断PD的实验室参考指标之一。但在PD患者中,其表达水平与PD运动症状严重程度呈正相关,可能是机体的一种代偿机制,可提示疾病的进展情况。

摘要： 目的探讨鼻内滴注脂多糖(LPS)对小鼠嗅觉和嗅球及内侧前额叶皮质中轻链铁蛋白表达的影响。方法8周龄雄性C57BL/6小鼠16只,随机分为对照组和LPS组,每组8只。LPS组双侧鼻孔交替滴注1 g/L的LPS(每只10μL),对照组给予等体积的生理盐水,隔天1次,给药时长为3周。3周后测试两组小鼠的嗅觉功能,采用免疫印迹法检测嗅球中酪氨酸羟化酶(TH)的表达,并检测嗅球及内侧前额叶皮质中轻链铁蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS组小鼠没有明显的嗅觉障碍;嗅球中TH表达无明显变化;嗅球中轻链铁蛋白表达升高87%,差异有统计学意义(t=4.486,P<0.05);内侧前额叶皮质中轻链铁蛋白水平升高84%,差异有统计学意义(t=2.391,P<0.05)。结论经鼻给LPS能够引起嗅球及内侧前额叶皮质中铁含量上升,但没有造成明显的嗅觉障碍及嗅球内多巴胺能神经元损伤。

摘要： 目的检测帕金森病(PD)模型中分泌粒蛋白(SCG)3在多巴胺能神经元、神经胶质细胞的表达与分布,并探讨其参与PD的可能机制。方法应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射C57BL6小鼠建立PD动物模型,采用免疫组织化学检测黑质纹状体多巴胺能神经元的分布,脑组织小胶质细胞及星形胶质细胞的活化,采用免疫组织化学及组织免疫荧光检测SCG3在脑组织的表达与分布;应用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导多巴胺能神经细胞SH-SY5Y、星形胶质细胞U118模拟PD细胞模型,采用细胞免疫荧光检测SCG3表达与分布。结果与对照组比较,模型组黑质纹状体多巴胺能神经元密度降低,小胶质细胞及星形胶质细胞显著增多并活化(P<0.05);毒素处理后多巴胺能神经元及SH-SY5Y细胞SCG3表达显著降低,神经胶质细胞及U118细胞SCG3表达显著升高且以细胞核周围最显著(P<0.05)。结论毒素影响多巴胺能神经元、神经胶质细胞内SCG3的表达与分布,SCG3可能参与PD发病。

摘要： 目的探讨芍药苷对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用及机制。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、司来吉兰组(10mg/kg)、芍药苷低剂量组(7.5mg/kg)和芍药苷高剂量组(30mg/kg),除对照组外其余各组采用MPTP(25mg/kg)腹腔注射给药7d,同时在注射结束1h后进行灌胃治疗,为期14d。通过爬杆、转棒实验观察小鼠的行为学变化,通过免疫组化实验检测小鼠黑质区域TH阳性细胞的表达水平,采用Annexin V-FITC双染法检测细胞凋亡率,通过分光光度法检测小鼠脑组织caspase-3酶活性,免疫印迹法检测α-突触核蛋白(α-syn)表达情况,实时定量PCR法检测α-syn基因的表达水平。结果与模型组比较,司来吉兰、芍药苷低、高剂量组可以显著缩短PD小鼠爬杆时间,延长小鼠在棒时间(P<0.05),提高TH阳性细胞的表达(P<0.05),抑制黑质多巴胺能神经元凋亡(P<0.05),减少caspase-3酶活性(P<0.05);司来吉兰及芍药苷高剂量组可显著降低α-syn蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论芍药苷具有保护MPTP诱导的PD模型小鼠黑质多巴胺能神经元的作用,其机制可能与抑制α-syn表达有关。

摘要： 目的探讨应用改良的小鼠脑内微量注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)装置制备稳定帕金森病(PD)模型小鼠的可行性。方法随机将C57BL/6J雌性小鼠分为实验组(10只)和对照组(10只),实验组应用新型微量注射装置进行单侧纹状体内6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射,对照组则使用普通微量注射器。建模后,观测记录小鼠异常行为并统计分析黑质和纹状体组织学改变。结果旋转实验提示,实验组小鼠均出现阿扑吗啡(Apo)诱导的旋转行为,对照组仅5只小鼠出现旋转行为。建模28 d,对照组小鼠30 min旋转圈数较7 d显著下降(P<0.05),且与实验组差异显著(P<0.05)。免疫组化染色发现,实验组小鼠的黑质多巴胺能神经元较对照组显著减少(P<0.05)。对照组小鼠患侧纹状体内反应性增生的星形胶质细胞增多,部分具有神经前体细胞特征。结论用于颅内立体定向注射的新型微量注射装置可显著提高制备PD模型小鼠的成功率。

摘要： 目的：探讨针刺百会和大椎穴对帕金森病(PD)小鼠多巴胺能(DA)神经元的保护作用及可能机制. 方法：C57BL/6雄性小鼠随机分为5组：正常组、模型组、针刺组、美多巴组、针刺结合美多巴组.应用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立PD动物模型,造模后动物存活56天.采用免疫组织化学技术检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数目,透射电镜观察其神经元的超微结构,并测定各组小鼠脑线粒体复合物的活性. 结果：与正常组相比,模型组TH阳性神经元数目较正常组减少(P＜0.05),针刺组、针刺结合美多巴组较模型组明显增多(P＜0.05).电镜观察下发现模型组神经元有不同程度的损伤,各治疗组神经元损伤有所减轻,针刺结合美多巴组神经元损伤最轻.与正常组相比,模型组小鼠线粒体复合物活性均显著下降(P＜0.05);与模型组相比,针刺组线粒体复合物Ⅱ、Ⅲ活性,针刺结合美多巴组线粒体复合物Ⅰ、Ⅳ活性显著上升(P＜0.05). 结论：针刺百会、大椎穴可能通过抑制脑内线粒体复合物活性的下降来维持其线粒体的功能,以达到保护多巴胺能神经元活性的目的.

摘要： 帕金森病(parkinson's disease,PD)是一种常见的老年性神经退行性疾病,其显著性病理学特征为中脑黑质致密部(SNc)多巴胺能神经元损伤缺失。病人表现出静止性震颤、肌肉僵直、运动徐缓、姿势步态异常等典型临床症状。PD病因尚不十分清楚,多数学者认为其发病为遗传易感性与环境因子共同作用的结果。流行病学研究显示,环境和职业因素接触杀虫剂、除草剂和金属与 PD发病危险增加相关联。约90%的散发性 PD与环境因素有关,其中农药接触史是诱发PD的一个重要的危险因素。另外,PD 病人SNc铁水平显著增高,提示中枢神经系统铁代谢可能与PD发病相关联。

摘要： [目的]锰可选择性的使多巴胺能神经元损伤,促进星形胶质细胞活化。本文拟探讨进入鼠脑的纳米二氧化锰(namo-MnO2)对多巴胺能神经元及星形胶质细胞的影响并观察大鼠相关行为学改变。[方法]通过Morris水迷宫训练测试筛选出健康雄性SD大鼠20只,随机分为nano-MnO2实验组和6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)阳性对照组,每组10只。立体定位下脑内注射方法染毒,各组于染毒1周后再次进行Morris水迷宫实验,灌流取脑,免疫组织化学染色检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的变化。[结果](1)Morris水迷宫检测结果显示,nano-MnO2 实验组和6-OHDA对照组染毒后1周逃避潜伏期均比造模前明显延长,搜索平台策略评分结果有显著差异。造模后1周nano-MnO2实验组和6-OHDA对照组逃避潜伏期及搜索平台策略评分无明显差异。(2)免疫组织化学染色结果显示,nano-MnO2实验组及6-OHDA对照组染毒后1周,毁损侧TH阳性细胞均明显少于健侧,毁损侧GFAP阳性细胞均明显多于健侧。[结论]nano-MnO2进入大鼠脑组织可损伤多巴胺能神经元,增加GFAP的表达,影响大鼠的空间学习记忆能力。

摘要： [目的]大脑黑质及腹侧被盖区的多巴胺能神经元与运动、成瘾等行为密切相关。铁离子能导致鼠脑该区域多巴胺能神经元变性死亡，表现出帕金森氏病样行为学改变。本文拟探讨进入大脑黑质的纳米氧化铁(nano-Fe2O3)对多巴胺能神经元的影响及相关行为改变。[方法]对雄性成年SD大鼠进行Morris水迷宫检测，筛选符合标准者随机分为nano-Fe2O3染毒组和阳性对照6-羟基多巴胺(6-OHDA)染毒组，每组10只。将nano-Fe2O3(10 nm，20μg/μL)及6-OHDA(9μg/μL)染毒液在立体定位下分别注入大鼠脑黑质及腹侧被盖区各1μL染毒，分别于染毒后第7、14、21、28天时再次进行Morris水迷宫实验，染毒4周后实施心脏灌注固定、取脑组织进行免疫组织化学染色并计数抗酪氨酸羟化酶阳性(TH+)细胞，印多巴胺能神经元。[结果]在脑黑质及腹侧被盖区定位染毒条件下，6-OHDA染毒组大鼠成功构建为帕金森氏病模型，表现为脑毁损侧TH+细胞数明显减少，出现典型行为学改变。nano-Fe2O3染毒组大鼠在Morris水迷宫试验中平均游泳速度降低，发现平台时间、平均潜伏期以及搜索平分策略评分无显著改变。与健侧脑组织相比，nano-Fe2O3组鼠脑毁损侧TH+细胞数有减少的趋势。[结论]nano-Fe2O3进入大鼠脑黑质及腹侧被盖区可损伤多巴胺能神经元，影响大鼠的运动能力，具有潜在导致神经退行性病变的可能。

摘要： 帕金森病的病因病机目前尚未完全清楚,近年的一些研究表明细胞凋亡可能与帕金森病的黑质多巴胺能神经元死亡关系密切.深入了解帕金森病中细胞凋亡的机制,有助于寻找新的神经保护途径,延缓神经退行性疾病的进展.

摘要： 多巴胺参与了奖赏和运动反馈效应.脑内奖赏环路主要是中脑腹侧被盖区(VTA)的多巴胺能神经元投射到伏核(NAc)这条通路,同时NAc内的GABA能中型多棘神经元(MSN)神经元也可以投射到VTA.VTA-NAc奖赏环路参与奖赏的识别和消费,但是也对部分厌恶刺激产生应答.VTA位于中脑,70％的神经元是多巴胺能神经元,是脑内富含多巴胺能神经元的三个脑区之一(其他两个脑区是黑质网状部和结节漏斗部),其他30％的神经元主要是GABA能神经元以及少量的谷氨酸能神经元.VTA的多巴胺能神经元除了支配着NAc外,还支配着前额叶皮层(mPFC)、杏仁核、海马等其他脑区.VTA-NAc奖赏环路在镇痛中发挥着重要作用，其可能是各种镇痛药发挥治疗作用的关键环路。然而目前关于VTA-NAc奖赏环路参与镇痛作用的研究多集中在急性热痛和急性炎性痛模型，对于其是否参与慢性的炎性痛和慢性神经病理性疼痛有待于进一步研究。各种药物在VTA-NAc奖赏环路参与的镇痛作用的研究主要集中在受体水平上，对于胞内下游通路水平的研究还需要进一步加强。进一步寻找与VTA-NAc奖赏环路参与镇痛相关的其他脑区内递质或外源性药物，将有可能为临床疼痛治疗提供更多的策略与方向。

摘要： 丙烯酰胺(Acrylamide,AA)近年来被广泛在食品中检出,其健康风险受到关注.AA具有神经毒性,但其作用机制尚未定论.本研究以无血脑屏障的秀丽线虫为模式生物,观察慢性暴露对线虫运动行为及多巴胺能神经元的毒性效应.

摘要： 异菝葜皂甙元是从滋阴中药知母中分离纯化的,研究表明,异菝葜皂甙元可以提高多种模型鼠记忆功能.而帕金森病主要是黑质致密部多巴胺能神经元进行性丢失,临床上主要表现为静止性震颤、僵直、运动迟缓等.根据中医辨证,帕金森病可分为肝肾阴虚型、气血不足型、气滞血瘀型、痰热风动型,老年患者以肝肾阴虚居多,所以滋补肾阴可作为防治老年神经退行性病变的一个重要途径.本文研究旨在阐明知母活性成分异菝葜皂甙元是否对于慢性MPTP联合丙磺舒模型鼠具有神经保护和修复作用。研究发现SMI对于慢性MPTP损伤的模型鼠多巴胺能神经元退行性病变不仅具有预防作用还有修复作用。放射配基结合分析发现模型鼠多巴胺受体D2受体下调，而D1受体变化不明显，给予SMI预保护或者治疗后能不同程度的上调多巴胺受体的密度；SMI能升高模型鼠中纹状体GDNF和BDNF蛋白含量。异菝葜皂甙元不仅可以预防而且还能修复慢性MPTP损伤的模型小鼠的多巴胺能神经元的退行性变，延缓或逆转疾病的进展。

摘要： 目的:在多种中脑原代细胞培养体系中，研究微毒剂量0.5ng/mL的细菌内毒素脂多糖(LPS)和20nM的α-突触核蛋白(α-Synuclein，Syn)对多巴胺(DA)能神经元的协同损伤及小胶质细胞在协同损伤中的作用。结论:LPS和Syn协同激活小胶质细胞，通过多种作用方式协同损伤DA能神经元，表明PD是由内、外源性因素共同作用的结果。

摘要： 目的:研究Fe2+激活小胶质细胞、损伤DA能神经元的潜在靶点及分子机制。结论:Fe2+引起MAPK通路信号分子，包括P38、ERK和JNK的磷酸化，导致小胶质细胞NOX2胞浆亚单位P47向胞膜转移，并与胞膜亚单位gp91结合，是Fe2+激活NOX2、产生细胞外02-、进而损伤DA能神经元的分子机制。因此，小胶质细胞NOX2是铁损伤DA能神经元的潜在靶点，抑制铁过度激活小胶质细胞NOX2及其信号通路可能成为治疗PD的新策略。

摘要： 本发明涉及用于指示中脑多巴胺神经前体细胞或神经元的报告系统及方法。具体而言，本发明涉及一种包含双报告基因的经遗传修饰的细胞，其能够高效准确指示向中脑多巴胺神经细胞的分化或转分化，从而用于诱导产生中脑多巴胺神经前体细胞及神经元过程中的分选和分化条件或转分化条件的优化。本发明还涉及产生所述经遗传修饰的细胞的方法，以及所述经遗传修饰的细胞用于分化或转分化产生中脑多巴胺神经前体细胞的用途。

摘要： 本发明涉及从人羊膜上皮细胞中诱导分化出多巴胺能神经元的方法，该方法包括以下步骤：取新鲜人胎盘，将人羊膜剥离，用生理盐水反复冲洗除后，用无菌D-hank’s液浸泡，再用生理盐水漂洗；将人羊膜置于0.25％胰蛋白酶溶液中，在36.5°C-37.5°C温度下消化；用含有10％胎牛血清的DMEM/F12终止上述人羊膜在胰蛋白酶溶液中的消化，然后用细胞筛对上述溶液进行过滤，收集得到的细胞为人羊膜上皮细胞；分离所获得的人羊膜上皮细胞，用10％无胎牛血清的培养基对分离出来的上述人羊膜上皮细胞进行体外传代培养；选择生长状态良好的3或4或5或6代人羊膜上皮细胞，然后用神经干细胞分化培养基继续培养；收获上述多巴胺能神经元样细胞。

摘要： 本发明涉及一种从非神经细胞转化制备保留年龄特征的多巴胺能神经元的方法。本发明的制备方法优化了关键的细胞直接转分化基因组合及调控表达水平的启动子，包装可以高效感染各种年龄供体源细胞的病毒，并采用合适的包被基质促进供体源细胞及转化后的神经细胞贴壁生长，并利用含有可以促进转分化的小分子化合物与生长因子的诱导分化培养液，在10‑14天内经过若干次更换分化培养液后转分化得到大量的多巴胺能神经元，最后经过分离纯化获得高纯度的多巴胺能神经元。

摘要： 本发明部分基于化学上定义的由人多能干细胞(hPSC)生成神经干细胞(NSC)和多巴胺能(DA)神经元的方法。本发明的所述DA神经元可衍生自hPSC和NSC。本发明还提供了用于由人多能干细胞衍生神经干细胞和多巴胺能神经元的试剂和试剂盒。

摘要： 本发明提出一种将人神经干细胞体外定向诱导分化为多巴胺能神经元的方法，该方法包括：人神经干细胞的贴壁培养；多巴胺能神经元前体细胞的诱导；多巴胺能神经元的定向诱导；人神经干细胞和多巴胺能神经元前体细胞的冻存和复苏。通过本发明的步骤，可以在体外获得丰富的多巴胺能神经元，与目前众多多巴胺能神经元生产方式相比，具有成本低廉、安全性高、生产效率高、可操作性强的特点。这一体外多巴胺能神经元生产方式，为多巴胺能神经元临床移植治疗帕金森氏症的应用提供新的思路。

摘要： 本发明涉及一种生物工程技术，具体地说是一种利用基因重组病毒诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的方法：重组慢病毒载体构建；神经干细胞的分离、培养及鉴定；重组病毒转染NSCs；重组慢病毒转染NSCs的鉴定；重组病毒转染NSCs：取传代3次后的NSCs消化制备成单细胞悬液，接种至培养板中；转染TH+Brn4基因重组慢病毒；加入慢病毒和ploybrene，摇晃混匀后将培养板置培养箱中培养，12小时后更换新鲜分化培养基；同时用嘌呤霉素进行筛选，以获得稳定转染的细胞；本发明的优点在于：通过构建目的基因TH和Brn4的慢病毒载体，转染NSCs后外源性基因能在细胞内稳定表达；分化后产生高比例的TH阳性多巴胺能神经元；Brn4能促进神经营养因子的高表达，且具有抑制细胞凋亡的功能。

摘要： 本发明涉及从人羊膜上皮细胞中诱导分化出多巴胺能神经元的方法，该方法包括以下步骤：取新鲜人胎盘，将人羊膜剥离，用生理盐水反复冲洗除后，用无菌D-hank’s液浸泡，再用生理盐水漂洗；将人羊膜置于0.25％胰蛋白酶溶液中，在36.5°C-37.5°C温度下消化；用含有10％胎牛血清的DMEM/F12终止上述人羊膜在胰蛋白酶溶液中的消化，然后用细胞筛对上述溶液进行过滤，收集得到的细胞为人羊膜上皮细胞；分离所获得的人羊膜上皮细胞，用10％无胎牛血清的培养基对分离出来的上述人羊膜上皮细胞进行体外传代培养；选择生长状态良好的3或4或5或6代人羊膜上皮细胞，然后用神经干细胞分化培养基继续培养；收获上述多巴胺能神经元样细胞。

摘要： 本发明涉及一种从非神经细胞转化制备保留年龄特征的多巴胺能神经元的方法。本发明的制备方法优化了关键的细胞直接转分化基因组合及调控表达水平的启动子，包装可以高效感染各种年龄供体源细胞的病毒，并采用合适的包被基质促进供体源细胞及转化后的神经细胞贴壁生长，并利用含有可以促进转分化的小分子化合物与生长因子的诱导分化培养液，在10‑14天内经过若干次更换分化培养液后转分化得到大量的多巴胺能神经元，最后经过分离纯化获得高纯度的多巴胺能神经元。

摘要： 本发明涉及医学领域，公开了一种神经干细胞增殖和诱导其分化为多巴胺能神经元的培养基以及应用和增殖诱导方法。本发明增殖培养基以DMEM/F12为基础培养基，其中包括人胰岛素、孕酮、氢化可的松、地塞米松、雌二醇、转铁蛋白、EGF、FGF、CTGF、B‑NGF、VEGF、大豆胰酶抑制剂、L‑谷胱甘肽、油酸、吐温80、磷脂酸、亚硒酸钠、三七总皂苷、白藜芦醇、氯化锂、胆固醇、WNT3a、谷氨酰胺。本发明采用多种适宜、成本低廉、来源广泛的组分组成一种新神经干细胞培养基，其能够显著提高神经干细胞的增殖速度，同时在其基础上添加其他多种诱导分化组分，可见神经干细胞诱导分化为多巴胺能神经元，并显著提高其分化比例。

摘要： 本发明涉及干细胞治疗技术领域的干细胞分化技术，特别涉及一种诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元的方法：取1-2代前脑来源的神经干细胞用神经干细胞基础培养基培养至神经球直径0.5-1mm大小时，更换培养基为诱导培养基使细胞贴壁生长，培养3-10天后获得多巴胺能神经元；诱导培养基中含有诱导剂aFGF，TPA，毛喉素，普拉克索,BMP-7。利用诱导培养基培养前脑神经干细胞后，神经干细胞分化为多巴胺能神经元的比例达到了30%，大大提高了其分化率，神经元分泌多巴胺的分泌量提高了20倍以上，前脑神经干细胞被有效的诱导为多巴胺能神经元。