微管蛋白

摘要： β-微管蛋白8(tubulin beta eight classⅧ,TUBB8)为灵长类动物中一种特有的β-微管蛋白,其编码基因TUBB8与女性不孕的相关性于2016年得到明确。TUBB8基因的百余种不同突变均可不同程度地影响生育过程,导致女性不孕的可能性增高。众多的基因突变可以按照其遗传模式特点和碱基变化特点的不同而进行分类及归纳。从基因水平出发的研究逐步揭示了基因突变所导致的蛋白质转录的错误及功能区作用的异常,再以分子水平异常解释细胞水平异常,进一步可以归纳出7种导致女性不孕的机制,涉及女性妊娠前及妊娠的全过程。目前,对于TUBB8的研究已逐渐应用于临床,在不孕症的诊断、治疗以及辅助生殖技术的改善等方面均有不同程度的进展。

摘要： 秋水仙碱位点微管抑制剂可抑制微管蛋白的聚合,是抗癌药物的有效靶点之一,白藜芦醇衍生物对微管蛋白具有不同程度的抑制作用。采用分子对接方法探索白藜芦醇衍生物与微管蛋白结合的可能作用机制。运用SYBYL-X2.0中Surflex-Dock模块对结构不同的白藜芦醇衍生物与秋水仙碱结合位点进行了打分评价和作用模式探讨。打分评价显示,10个白藜芦醇衍生物与微管蛋白的结合能力强于秋水仙碱,其中8号化合物结合能力最强,Totall score值为12.1207,CScore值为5,并与秋水仙碱结合位点的疏水口袋发生了较强的相互作用。结合模式显示,白藜芦醇衍生物分子体积大,具有可折叠链状结构的更易占据秋水仙碱的结合位点;白藜芦醇苯环上的酚羟基是影响化合物与微管蛋白结合能力的重要因素。通过分析配体-受体结合模式为秋水仙碱位点微管抑制剂的发现以及白藜芦醇衍生物的改造提供一定的理论参考。

摘要： 以微管蛋白抑制剂考布他汀A-4(CA-4)为先导化合物,通过骨架变换,以苯并咪唑环取代CA-4结构中的B环,并引入不同的取代基,设计合成了8个新化合物,结构经NMR,HRMS表征。通过MTT法测定其对A549、HepG2、HCT-116、MCF-7、PC-3以及Siha等6种肿瘤细胞的增殖抑制作用,利用划痕实验评价了化合物对细胞迁移作用的影响,运用分子对接法分析了活性化合物与微管蛋白及PI3K激酶各亚型的作用方式。结果表明,化合物4e对6种肿瘤细胞表现出较好的增殖抑制活性,尤其对宫颈癌细胞Siha的抑制作用最强(IC50=12.18±1.17μmol/L),且能有效抑制细胞迁移,具有进一步研究的价值。分子对接结果表明,化合物4e与微管蛋白的结合能强于CA-4,与PI3Kδ激酶蛋白相互作用最强,结合能为-37.2 kJ/mol。本研究为基于PI3K与微管蛋白的抗肿瘤药物研究提供了一定的理论依据。

摘要： 目的 探讨藏红花素(Crocin)是否通过调控微管蛋白进而影响人胃癌细胞MGC-803的增殖、侵袭和凋亡,以期为胃癌的治疗提供新的思路。方法使用藏红花素处理MGC-803细胞,并用顺铂作为阳性对照药,观察藏红花素对MGC-803细胞生物学的影响。采用MTT分析细胞活性,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell检测细胞的侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力。最后通过蛋白免疫印迹分析藏红花素作用的潜在机制。结果 藏红花素使MGC-803细胞活力、迁移和侵袭能力明显下降,凋亡增加。进一步研究发现,藏红花素对MGC-803细胞的抑制能力与微管蛋白作用密切相关,藏红花素通过降低MGC-803细胞中的微管蛋白表达进而影响其增殖、侵袭和凋亡。结论藏红花素能够显著抑制MGC-803细胞生长、迁移、侵袭能力,并能促进MGC-803胃癌细胞的凋亡反应。

摘要： 微管是真核细胞骨架的基本成分,由alpha/beta微管蛋白二聚体组成。其二聚体的结构在进化上高度保守,却可承担多种功能,主要原因是其结构和性质可以受多种机制的调控,特别是微管蛋白翻译后修饰。目前已发现多种微管蛋白翻译后修饰,其中甘氨酸化是一种重要的修饰方式,它与谷氨酸化修饰的位点均为微管蛋白的C端谷氨酸残基。但与谷氨酸化不同的是,甘氨酸是中性氨基酸,不会增加微管蛋白C末端的净负电荷。这种修饰主要由微管蛋白酪氨酸连接酶类似酶系(TTLL)催化,其中在甘氨酸化起始过程中发挥重要作用的酶为TTLL3和TTLL8,延伸过程中起重要作用的酶是TTLL10。这种翻译后修饰可通过改变微管蛋白C端的空间构像,进而改变C端的旋转半径和结合结构,提高微管的稳定性,从而维持纤毛的结构稳定和功能正常。在中枢神经中,甘氨酸化对谷氨酸化有竞争抑制作用,可能是神经退行性改变的保护机制之一;在视网膜中,抑制小鼠微管蛋白甘氨酸化,导致连接纤毛的数量下降,导致视网膜退行性改变;在结直肠癌的发生发展中,抑制甘氨酸化会增加结直肠癌的发病风险;在精子中,抑制甘氨酸化会阻碍精子的直线游动,导致雄性不育。在其他微管蛋白翻译后修饰丰富的组织或生命活动中,如血小板、肌细胞、细胞有丝分裂等,微管蛋白甘氨酸化的功能及其调控机制还有待深入研究。

摘要： 目的 合成吲哚查尔酮衍生物FC58,考察其对白血病细胞的抑制活性.方法 以3,4,5-三甲氧基苯乙酮和吲哚-3-甲醛为原料,经羟醛缩合得到目标化合物.采用CellTiter-Blue法测试体外抗肿瘤活性,并通过细胞周期实验分析其作用特点.结果 FC58对多种白血病细胞均有较强活性,活性抗耐药指数远高于传统微管蛋白抑制剂紫杉醇、长春碱和多柔比星,并使细胞周期停滞在G2/M期.结论 FC58是一个极具潜力的抗耐药白血病的先导化合物.

摘要： 目的 探讨胃癌患者乳腺癌易感基因1(BRCA1)和微管蛋白β3(TUBB3)的表达及其临床意义,为胃癌的精确诊治提供依据.方法 收集2018年12月至2020年5月在安徽省马鞍山市人民医院住院治疗并且接受胃镜活组织检查或手术的46例胃癌患者资料.采用免疫组织化学法检测胃癌组织和癌旁组织中BRCA1 和TUBB3蛋白的表达情况.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BRCA1和TUBB3 mRNA在胃癌组织和癌旁组织中的表达情况.分析胃癌组织BRCA1和TUBB3表达间的关系及二者与患者临床病理学特征之间的关系.结果 胃癌组织BRCA1和TUBB3蛋白阳性率均高于癌旁组织[43.5％(20/46)比 16.7％(5/30),65.2％(30/46)比6.7％(2/30),均 P＜0.05].qRT-PCR检测结果显示,胃癌组织中BRCA1 mRNA的相对表达量高于癌旁组织(15.5±6.8比5.0±1.6,t=9.41,P＜0.01),胃癌组织中TUBB3 mRNA的相对表达量高于癌旁组织(22.1±6.3比5.7±1.9,t=3.51,P＜0.01).女性患者TUBB3蛋白阳性率低于男性[15.4％(2/13)比84.8％(28/33)],人表皮生长因子受体2(HER2)阳性患者的BRCA1蛋白阳性率高于HER2阴性患者[87.5％(7/8)比47.4％(18/38)],有家族史患者的BRCA1蛋白阳性率高于无家族史患者[85.7％(6/7)比35.9％(14/39)],差异均有统计学意义(均P＜0.05).胃癌组织BRCA1和TUBB3蛋白表达阳性均与胃癌分期、分化程度有相关性(均P＜0.05).BRCA1和TUBB3蛋白表达相关(x2=33.52,P＜0.01).结论 BRCA1和TUBB3可能与胃癌的发生、发展有关,且BRCA1与TUBB3、BRCA1与HER2之间可能有一定联系.BRCA1和TUBB3可能在胃癌的诊断和治疗中有一定意义.

摘要： 为了系统分析八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)微管蛋白基因家族,从八肋游仆虫大核基因组中共鉴定得到20个微管蛋白基因,基于同源比对及系统进化分析,将其归入α、β、γ、δ、ε及η六个微管蛋白亚家族;多序列比对及Western blot结果显示八肋游仆虫η微管蛋白基因在翻译过程中需发生一次+1位编程性核糖体移码,其移码位点为AAA-TAA;所有自由生纤毛虫都含有多个α和β微管蛋白基因亚型,可能用于组成不同的微管结构.研究为后续深入探讨八肋游仆虫微管蛋白的生物学功能及微管多样性奠定了基础.

摘要： 微管存在于所有的真核生物中,主要由α/β-微管蛋白异源二聚体组成,在细胞内呈网状和束状分布,参与细胞很多重要的过程,包括有丝分裂、细胞运动、维持细胞形态和细胞表面受体的活性等,对细胞的各种生命活动起着非常重要的作用.已经成为很多抗肿瘤药物,驱虫剂,除草剂和杀菌剂的作用靶标.但随着抗微管药物的广泛使用,随之而来的抗药性问题也日益严重.因此,在分子水平上研究微管蛋白药剂的抗性机理显得日益迫切,以助于更好地去开发多靶点,对寄主低毒,高亲和力的药剂.由于微管蛋白在许多细胞中丰度非常低,因此如何大量表达微管蛋白以及纯化出有生物活性的微管蛋白成为首要面临的难题.本文着重介绍了目前几种常用的微管蛋白的大量表达方法以及成功纯化出微管蛋白的案例.

摘要： 本文概述了生物体微管蛋白的制备方法、原核表达及纯化、三维结构及药物结合位点的模拟、体外聚合、同药剂的体外结合,分析了以微管蛋白为靶标进行药物离体筛选的可能性.

摘要： 微管中的微管蛋白已被认定是癌症化疗的潜在靶向目标.光致开关荧光探针结合超分辨率荧光成像技术可为纳米级微管和超痕量变化的微管蛋白的检测和显微成像提供良好的契机.在该项研究中,设计合成了一例以螺吡喃的衍生物(SP)为荧光团,以生物碱秋水仙碱(Tu)为识别基团的低毒性的光致荧光开关探针分子(Tu-SP).通过光驱动的分子逻辑开关重建技术验证了该探针分子可以在活的肿瘤细胞中实现对微管中超痕量变化微管蛋白的超分辨成像,分辨率可达到20±5nm.该工作不仅提供了一例可用于微管蛋白分子高分辨率识别成像及定量检测的荧光分子,而且为相关的荧光分子提供了一个设计平台.

摘要： 观察一次性离心运动对大鼠骨骼肌微管蛋白以及相关蛋白的影响,分析微管相关蛋白对微管的调控作用.研究表明:离心运动后大鼠骨骼肌比目鱼肌中的微管蛋白出现一过性的表达降低，提示离心运动后微管解聚增加，表现为离心运动后出现一过性的微管损伤。离心运动后，比目鱼肌MAP4蛋白出现一过性的升高；Op18蛋白表达及磷酸化均出现一过性的降低，但磷酸化表现更为明显。离心运动后微管蛋白的解聚主要是由MAP4聚合作用和Opl8磷酸化的解聚作用相互协调调控完成的。

摘要： 目的:本研究以骨骼肌超微结构中的骨架蛋白—微管作为研究视角,观察大负荷强度运动和针刺对微管及其结合蛋白的影响,探究针刺对大负荷强度运动后的微管的作用,从而为针刺治疗骨骼肌损伤提供理论依据.方法:以SD大鼠作为实验对象,随机分为4组.运动方案为:一次性离心跑台运动,-16°,20m/min,90min.针刺方案:在运动后即刻,对运动针刺组和单纯针刺组大鼠进行针刺干预,用针灸针沿小腿三头肌的纵向从远端斜刺穿到肌腹,留针2min.本实验选取运动(或针刺)后即刻、6h、12h、24h、48h和72h作为实验观察点,取比目鱼肌.Western Blot方法检测α-tubulin(α型微管蛋白)和MAP4(微管结合蛋白4)的蛋白表达.结果:α-tubulin蛋白在运动后即刻表达有下降趋势,6h和12h均比安静对照显著降低了54.0％和60.3％,24h逐渐回升,48h和72h已恢复至安静水平.α-tubulin蛋白在针刺后即刻表达有下降趋势,6h回升至安静水平,12h、24h和48h均无明显变化,72h比安静对照显著升高了40.7％.运动针刺组α-tubulin蛋白表达的变化趋势与运动组相似,但变化幅度减小.MAP4蛋白在运动后即刻、6h和12h表达均比安静对照显著升高1.13倍、4.49倍和6.01倍,24h表达迅速下调,但仍比安静对照显著升高75.9％,在48h和72h表达回升,显著升高2.39倍和4.04倍.MAP4蛋白在针刺后即刻和6h表达有下降趋势,12h、24h和48h回升,在72h又回落至安静水平.在运动针刺后即刻蛋白表达显著升高4.48倍,6h继续显著升高5.36倍,12h、24h和48h下降,72h蛋白表达回升.结论:大负荷强度运动后不同时程骨骼肌α-tubulin蛋白出现一过性的表达下调,MAP4蛋白出现一过性的表达上调;针刺干预有效地抑制运动后α-tubulin蛋白表达下调以及MAP4蛋白表达上调,从而有效地缓解了骨骼肌微管的解聚.

摘要： 背根神经节(Dorsal root ganglion neuron,DRG)神经元为假单极神经元,其发出的轴突外周支构成了脊神经感觉部分,损伤后可以有效的再生,例如腰椎间盘突出症患者经手术减压后下肢疼痛、麻木症状缓解明显;其发出的轴突中枢支经后根进入脊髓,其中由腰骶部(腰3以下)DRG发出的中枢支轴突构成了马尾神经的感觉部分,损伤后再生困难,例如由中央型腰椎间盘突出压迫引起的马尾神经综合征(cauda equina syndrome,CES)患者的会阴区感觉麻木等症状恢复困难.DRG轴突中枢支和外周支损伤后再生能力差别显著的内在原因目前尚不完全清楚.我们拟在大鼠上建立马尾神经压迫模型和相应节段已出椎间孔的脊神经结扎模型，然后分离相应DRG组织，筛选鉴定在两组DRG中具有显著表达差异的乙酞化和去乙酞化PTM酶。初步探究微管PTM的差异是否在其中起到重要作用。

摘要： 靶点抗肿瘤药物早已成为当今抗肿瘤新药研发的重点,但是目前上市或处在临床试验阶段的多靶点药物,其多靶点效应往往是随机的,靶点之间可能并不存在协同作用,进而不能有效发挥多靶点药物的优势,因此通过合理的药物设计有效的整合多靶点优势成为当下新型多靶点抑制剂研发的热点.据文献报道,组蛋白去乙酰化酶抑制剂和微管蛋白抑制剂具有显著的协同抗肿瘤作用,本课题组前期以HDAC抑制剂MGCD0103为母核,融合另一抗肿瘤靶点——微管聚合抑制剂Colchicine的关键药效团,合成一系列对HDAC/Tubulin双靶点具有潜在抑制活性的化合物.本实验旨在分子、细胞和整体动物水平对这一系列化合物的抗肿瘤活性进行评价，并对其作用机制进行研究。以组蛋白去乙酰化酶抑制剂MGCD0103和微管抑制剂Colchicine为母核设计的双靶点抑制剂ZX-1302，不仅保持了MGCD0103对组蛋白去乙酰化酶的抑制作用，而且具有对微管聚合的抑制作用，因此较母核药物表现出更为显著的抗肿瘤活性。本研究为此类药物的设计合成提供了实验依据，为多靶点药物的研发提供了新的思路。

摘要： 目其前紫杉醇的临床应用受到肿瘤细胞耐药的严重限制,对于耐药机理的深入理解能够为临床用药和新紫杉烷的合成提供有力的帮助.其中微管蛋白/微管系统的改变对于紫杉醇的耐药有着重要影响,包括微管蛋白点突变,β-微管蛋白亚型表达水平改变,微管相关蛋白(MAP)表达水平改变,β-微管蛋白和MAP翻译后修饰的改变以及微管蛋白含量减少等,这些改变影响了药物与靶点的相互作用,从而导致了耐药的出现.

摘要： 从天然产物中挖掘和发现具有生物活性的物质是新农药创制的有效途径之一.中药土槿皮是我国特有植物,本研究以芒果胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)为离体抑菌活性供试菌种,采用活性追踪法,从其乙醇提取物中分离获得8个单体化合物,经MS、1H NMR和13C NMR鉴定其化学结构为:pseudolaric acid A(1)、ethyl pseudolaric acid B(2)、pseudolaric acid B(3)、pseudolaric acid B-O-β-D-glucoside (4)、piperonylic acid (5)、propionic acid (6)、3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid (7)和4-(3-formyl -5-methoxypheny butanoic acid(8).

摘要： 从天然产物中挖掘和发现具有生物活性的物质是新农药创制的有效途径之一.中药土槿皮是我国特有植物,本研究以芒果胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)为离体抑菌活性供试菌种,采用活性追踪法,从其乙醇提取物中分离获得8个单体化合物,经MS、1H NMR和13C NMR鉴定其化学结构为:pseudolaric acid A(1)、ethyl pseudolaric acid B(2)、pseudolaric acid B(3)、pseudolaric acid B-O-β-D-glucoside (4)、piperonylic acid (5)、propionic acid (6)、3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid (7)和4-(3-formyl -5-methoxypheny butanoic acid(8).

摘要： 本发明公开了培育荧光蛋白mCherry标记微管蛋白的转基因植物的方法及其相关生物材料。该方法包括向受体植物中导入P

摘要： 由于需要开发新的治疗剂和其有效合成方法，本发明提供组蛋白脱乙酰基酶、微管蛋白脱乙酰基酶的新颖抑制剂、和/或聚集体抑制剂、和其医药上可接受的盐和衍生物。本发明化合物分成两类，即“异图巴森(isotubacin)”类和“二异图巴森(isoisotubacin)”类，这两类都包括1，3-二噁烷核。本发明进一步提供治疗由组蛋白脱乙酰基酶活性、微管蛋白脱乙酰基酶活性、和/或所述聚集体调节的病症(例如，增生性疾病、癌症、发炎性疾病、原虫感染、蛋白降解病症、蛋白沉积病症等)的方法，所述方法包含将治疗有效量的本发明化合物投与给有需要的个体。本发明还提供制备本发明化合物的方法。

摘要： 本发明公开了一种新的多肽——含有Tau和MAP蛋白中结合微管蛋白区域特征的蛋白9.02,编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法,如周期性瘫痪、心律失常、支气管哮喘、消化性溃疡、糖尿病、胚胎发育畸形、肿瘤等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这种新的含有Tau和MAP蛋白中结合微管蛋白区域特征的蛋白9.02的多核苷酸的用途。

摘要： 本发明提供一种微管蛋白组蛋白去乙酰化酶双靶点抑制剂及其用途，属于生物医药技术领域。本发明的微管蛋白组蛋白去乙酰化酶双靶点抑制剂具有如式Ⅰ所示的结构。本发明的抑制剂具有较好的体外抗肿瘤细胞增殖活性，可用于制备抗肿瘤药物。

摘要： 本发明公开了一种蛋白精氨酸甲基转移酶5（PRMT5）和微管蛋白的双靶点抑制剂及其在抑制肿瘤细胞增殖中的用途，其结构式如图1所示。

摘要： 本发明涉及一种从生物提取物中纯化具有微管蛋白羧肽酶活性的蛋白质的方法，所述方法包括在微管存在下对生物提取物进行聚合/解聚循环。本发明还涉及一种用于治疗动物中涉及微管去酪氨酸化改变的病症的基于肽的抑制剂，其中所述基于肽的抑制剂包含由1至20个氨基酸构成的肽部分，所述肽部分在C‑末端位置处具有选自Y或F的氨基酸，并且其中所述基于肽的抑制剂至少部分抑制微管蛋白羧肽酶活性。

摘要： 本公开提供了特定肽，以及来自微管蛋白β‑3链蛋白(TUBB3)的肽的衍生电离特征，特别有利于通过选择反应监测(SRM)质谱在福尔马林中固定的生物样品中直接定量TUBB3蛋白。使用Liquid Tissue试剂和方案从生物样品制备蛋白质样品，并通过样品的SRM/MRM质谱分析对TUBB3蛋白进行定量，其中特定肽被定量。本公开提供了治疗方法，其中将患者肿瘤样品中TUBB3的测量水平与参考水平进行比较，并且当测量的TUBB3水平低于参考水平时，用基于紫杉烷的治疗方案治疗患者。合适的参考水平例如是约700amol/μg组织。

摘要： 本发明公开了培育荧光蛋白mCherry标记微管蛋白的转基因植物的方法及其相关生物材料。该方法包括向受体植物中导入P

摘要： 由于需要开发新的治疗剂和其有效合成方法，本发明提供组蛋白脱乙酰基酶、微管蛋白脱乙酰基酶的新颖抑制剂、和/或聚集体抑制剂、和其医药上可接受的盐和衍生物。本发明化合物分成两类，即“异图巴森(isotubacin)”类和“二异图巴森(isoisotubacin)”类，这两类都包括1，3－二噁烷核。本发明进一步提供治疗由组蛋白脱乙酰基酶活性、微管蛋白脱乙酰基酶活性、和/或所述聚集体调节的病症(例如，增生性疾病、癌症、发炎性疾病、原虫感染、蛋白降解病症、蛋白沉积病症等)的方法，所述方法包含将治疗有效量的本发明化合物投与给有需要的个体。本发明还提供制备本发明化合物的方法。

摘要： 本发明公开了一种降解微管蛋白的偶氮类化合物及其合成方法和应用。本发明以具有微管蛋白抑制作用的偶氮类小分子为原料，进一步反应得到降解微管蛋白的偶氮类化合物。本发明降解微管蛋白的偶氮类化合物的制备方法，具有成本低、方法操作简单、条件温和等特点。本发明降解微管蛋白的偶氮类化合物在黑暗环境中不显示药理活性，但因其特有的光致异构性能，在特定波长的光照下对微管蛋白显示出亲合性，并进一步促使微管蛋白降解，这可能在制备预防或治疗因微管蛋白过度增长而引起的疾病的药物中有所应用。