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同源重组

同源重组的相关文献在1989年到2022年内共计1025篇,主要集中在分子生物学、基础医学、畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 等领域,其中期刊论文792篇、会议论文38篇、专利文献24591篇;相关期刊334种,包括石河子大学学报(自然科学版)、生物工程学报、生物技术通报等; 相关会议36种,包括中国畜牧兽医学会家禽学分会第十七次全国家禽学术研讨会、第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医微生物学专业委员会联合学术论坛)、第二届中国肉牛选育改良与产业发展国际研讨会暨中国畜牧兽医学会养牛分会八届二次学术研讨会等;同源重组的相关文献由3547位作者贡献,包括王家宁、陈创夫、黄永章等。

同源重组—发文量

期刊论文>

论文:792 占比:3.12%

会议论文>

论文:38 占比:0.15%

专利文献>

论文:24591 占比:96.73%

总计:25421篇

同源重组—发文趋势图

同源重组

-研究学者

  • 王家宁
  • 陈创夫
  • 黄永章
  • 崔玉琳
  • 秦松
  • 邵雷
  • 郑文岭
  • 陈代杰
  • 马文丽
  • 张友明
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利文献

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排序:

年份

    • 周珂辉; 刘延庆; 陶丽
    • 摘要: 同源重组(homologous recombination,HR)与非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)的选择机制是DNA双链断裂损伤修复的前沿科学问题.末端切除是HR修复的标志性事件,53BP1通过竞争BRCA1介导的末端切除将修复途径从HR转向NHEJ进行.近年来,多个课题组同时发现并证实Shieldin复合物是53BP1介导的两种修复途径选择的下游效应因子.Shieldin是由Rev7、SHLD1(C20orf196)、SHLD2(FAM35A)与SHLD3(CTC-534A2.2)组成的复合体蛋白,能够限制末端切除并抑制HR修复,并以53BP1依赖的方式促进NHEJ修复.该文对Shieldin结构组装、工作与活性调节机制的研究进展进行综述,同时关注Shieldin对肿瘤治疗干预的临床价值,以期为肿瘤耐药机制与逆转耐药研究提供新的线索分子.
    • 姜婵娟; 崔天琦; 孙洪娈; 焦念志; 符军; 张友明; 王海龙
    • 摘要: 基因克隆是解析基因功能的重要手段,但仍有很多基因难以克隆,比如高AT含量(>60%)基因组来源的DNA。ExoCET克隆技术通过联合核酸外切酶介导的体外同源重组和大肠杆菌RecET重组酶介导的细胞内同源重组,不仅能从微生物基因组中靶向抓取>100 kb的大片段,而且能高效组装>13个DNA片段,是基因克隆的有力工具,迄今未有利用ExoCET技术从AT含量>63%的基因组克隆大片段的报道。本研究以AT含量为69%的海洋单细胞光合蓝细菌原绿球藻MIT 9301菌株的基因组为研究对象,探究了利用ExoCET技术进行高AT含量基因组大片段克隆的最佳条件。结果显示:①在核酸外切酶介导的体外同源重组时使用Gibson体系较T4聚合酶体系能获得更高的克隆效率;②载体应选择单拷贝的细菌人工染色体(BAC),多拷贝质粒载体会导致克隆失败;③ExoCET可以从原绿球藻基因组上抓取>80 kb的大片段,并且能以100%的正确率组装11个3 kb的DNA片段;④可以一步同时抓取4个7~20 kb的基因组大片段。大规模基因组测序显示高AT含量生物占比超过30%,该研究建立的ExoCET-BAC策略将为高AT含量生物的基因组功能研究提供高效使能技术。
    • 李绍宽; 刘静; 赵楠; 庞民好; 唐博文; 赵斌; 刘颖超
    • 摘要: 拟轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)是玉米穗腐病的主要病原菌之一,其产生的伏马毒素是一种有毒次级代谢产物,严重降低玉米品质,威胁食品安全。DHOD基因编码二氢乳清酸氧化酶(DHOD),主要通过参与生命体中的嘧啶合成途径来影响机体的DNA、RNA合成,进而调控次生物质代谢等过程。为明确DHOD基因在拟轮枝镰孢伏马毒素生物合成中的作用,首先分析拟轮枝镰孢DHOD的系统发育关系,然后通过同源重组法创制拟轮枝镰孢DHOD基因敲除突变体,采用高效液相色谱法(HPLC)检测拟轮枝镰孢野生型与DHOD基因敲除突变体伏马毒素产生量的差异,并利用RT-qPCR技术分析DHOD基因及伏马毒素合成相关基因的表达量。系统发育分析及序列同源比对结果表明,DHOD基因在镰孢菌中较保守;PCR和RT-qPCR分析表明,采用同源重组法获得了拟轮枝镰孢DHOD基因敲除突变体;HPLC分析显示,DHOD基因敲除突变体的毒素产量较野生型显著下降88.32%~93.56%;RT-qPCR检测结果表明,拟轮枝镰孢DHOD基因敲除突变体中fum1、fum6、fum8和fum13基因表达量较野生型均显著下降。综上所述,拟轮枝镰孢中DHOD基因表达量与伏马毒素的产量呈正相关。
    • 史玉洁; 李芳; 王昕
    • 摘要: 规律成簇间隔短回文重复序列(Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeat,CRISPR)及其相关蛋白(Cas)系统是一种新型的基因编辑技术,具有操作简单,编辑高效率等优点,在基因治疗、制作抗体药物、构建模式动物等领域广泛应用。山羊和绵羊作为重要的家畜类型,CRISPR/Cas9基因编辑技术出现后,在山羊、绵羊的遗传修饰中得到迅速应用。本文概述了CRISPR/Cas系统的发展历程、组成及分类、作用方式和原理,总结了CRISPR/Cas系统近年来在提升山羊和绵羊生产性能方面的应用,并对该技术的发展前景作简要阐述,以期为解决畜禽种业的瓶颈问题以及我国畜禽种业的快速、健康和持续发展提供参考。
    • 刘洋; 王攀琦; 王芳; 刘星吟; 董兰; 魏瑶璐; 宁志丰; 沈定文
    • 摘要: 目的构建肿瘤转移相关基因1短式(MTA1s)原核表达载体并诱导其蛋白表达,为后续MTA1s的相关研究奠定基础。方法取对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞,提取细胞总RNA并反转录成cDNA,并以此为模板扩增MTA1s基因的蛋白编码区。采用一步克隆的方法将目的片段插入表达载体pET-28a(+)中并构建重组原核表达载体(命名为:pET-28a-MTA1s),将构建的重组载体用双酶切、菌液聚合酶链式反应(菌液PCR)、和测序进行鉴定。将pET-28a-MTA1s导入细菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达MTA1s重组蛋白,通过SDS-PAGE进行鉴定重组蛋白(MTA1s)表达情况以及蛋白免疫印迹分析(Western blot)鉴定重组蛋白(MTA1s)表达量。结果以MCF-7乳腺癌细胞为模板扩增出大小位置正确的片段;构建的pET-28a-MTA1s重组载体经双酶切、菌液PCR验证正确,DNA测序证实序列正确。考马斯亮蓝染胶和Western blot结果显示IPTG诱导表达的重组蛋白分子量正确且条带单一。结论成功构建pET-28a-MTA1s原核表达载体,为后续进行下游实验的研究奠定基础。
    • 郭雨萱; 严顺平; 王应祥
    • 摘要: 减数分裂(meiosis)是有性生殖细胞中发生的特殊分裂方式,在这个过程中DNA复制一次,细胞核分裂两次,最终产生单倍体的配子。雌雄配子融合后基因组又恢复到二倍体水平,不仅保证了有性生殖过程中世代间基因组的稳定性,还导致后代的遗传多样性。减数分裂同源重组(homologous recombination,HR)是其前期I的核心事件之一,它不仅保证了后续同源染色体的正确分离,而且允许同源染色体之间遗传信息发生交换,增加了后代的遗传多样性。RAD51(RADiation sensitive 51)和DMC1(disruption Meiotic cDNA 1)是HR过程中必需的重组酶,二者有一定的共性和特性。本文从起源、进化、结构和功能等方面总结并比较了它们间的保守和分化,并对未来的研究方向提出了展望,为进一步深入研究减数分裂的重组机制提供了借鉴。
    • 陆泓雨; 付玮; 丁士刚
    • 摘要: Rad51是同源重组的中心分子,其基本作用原理是形成Rad51-ssDNA核蛋白丝结构,在染色体联会配对期间侵入模板链。Rad51在恶性肿瘤中的作用主要包括:(1)与p53、p38和p21等细胞周期检查点分子相互作用,影响肿瘤的发展和转移;(2)Rad51表达减少导致了部分上皮间质转化过程的逆转;(3)Rad51不同位点的突变可以显著影响肿瘤发展的风险和抗肿瘤治疗的结果;(4)部分微小RNA和长链非编码RNAs可以靶向Rad51的编码区并调控基因表达。近年来,各项研究中卵巢癌、乳腺癌和肺癌Rad51的高表达证实了上述机制,提示Rad51高表达与肿瘤转移和耐药高度相关。调节Rad51的表达可以逆转肿瘤耐药过程,有望成为肿瘤治疗和逆转肿瘤耐药的全新靶点。
    • 王晨玺; 邓霞; 赵志聪; 蔡珍生; 张盼盼; 李莲; 李昊翔; 赵丽; 王东; 杨玲; 袁国跃
    • 摘要: 目的构建及鉴定携带小鼠PTG基因(NM_016854)的过表达重组腺病毒载体,为深入研究PTG的功能奠定基础。方法化学合成小鼠PTG基因的编码序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增、酶切,后插入GV314载体(CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP),得到重组穿梭质粒pGV314-PTG;进一步BamHⅠ/AgeⅠ双酶切,产物交换入线性化表达载体pDC315,构建重组腺病毒Ad-PTG,将其转染HEK293T细胞包装成重组病毒颗粒,经在HEK293T细胞反复扩增数代后,进行纯化及滴度检测,最后利用PCR、Western blot及测序验证重组腺病毒。结果经PCR、Western blot及测序后,结果显示成功构建pGV314-CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-PTG过表达腺病毒载体(Ad-PTG),终点稀释法测得病毒滴度为4×10^(10)PFU/ml,Western blot和荧光定量PCR显示PTG的蛋白和mRNA表达水平显著升高。结论成功构建携带小鼠PTG基因的重组过表达腺病毒载体,且能有效上调肝细胞中PTG基因的表达。
    • 柯竹芳; 徐旭东; 高宏
    • 摘要: 在蓝藻合成生物学中,对大片段进行无标记删除可以加快基因组简化的进程。研究以聚球藻PCC 7942为材料,基于同源重组技术对基因组中大于10 kb的3个非必需区域进行无标记删除。构建带有两侧同源片段的不可在聚球藻复制的质粒,利用接合转移将其导入藻细胞获得同源单交换株,再借助于条件致死基因sacB筛选第二步交换的克隆,获得无标记删除突变株。研究证明了传统的同源重组和筛选技术可用于蓝藻基因组的大片段无标记删除。
    • 杨明珠; 陈晓春; 张媛; 王秀丽; 李俊平
    • 摘要: 为探寻伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)基因缺失株rPRV-bc-8基因组UL4-UL3基因间区域是否可作为外源基因的插入位点,在实验室已构建的含有增强型绿色荧光蛋白(Enhance Green fluorescent protein,EGFP)基因的转移质粒pMD-US6+7-EGFP-US2的基础上,通过DNA体外分子克隆技术将UL4序列替换左同源臂US6+7序列,UL3序列替换右同源臂US2序列,并将PolyA引入转移质粒,得到转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3。利用脂质体转染法将转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3与亲本毒rPRV-bc-8共转染PK-15细胞,经蚀斑纯化成功得到一株能够稳定表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3。通过倒置荧光显微镜观察以及PCR鉴定确定EGFP基因已成功插入到伪狂犬基因组的UL4-UL3之间,并通过细胞传代试验分析得到重组毒的遗传稳定性良好。通过体外增殖试验分析得到重组病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3在细胞内的增殖速度较快,接种后12 h内滴度始终高于亲本毒rPRV-bc-8,接种后40 h达到最高滴度108.3 TCID50/mL,与亲本毒的最高滴度接近,但是最高滴度的出现时间晚于亲本毒,并且在达到平台期后病毒滴度下降的比亲本毒快。通过对病毒培养液中荧光蛋白浓度进行测定,结果显示在接种后56 h时荧光蛋白浓度达到最高值4793.9 ng/mL,之后进入平台期。综上结果表明构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,并且外源基因EGFP在此位点具有良好的表达效果,为进一步相关重组病毒的构建奠定了基础。
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