人血浆

摘要： 目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中普芦卡必利(prucalopride,PCP)的浓度。方法血浆样品采用乙酸乙酯进行液液萃取。液相分离采用Agilent ZORBAX SB C18(3.0×100 mm,3.5μm)色谱柱进行等度洗脱,流动相为1 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液/甲醇=20/80。质谱检测采用电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测扫描模式,PCP和内标PCP-^(13)CD_(3)(dPCP)的监测离子对分别为m/z 368.4/196.0和374.4/198.0。结果血浆中PCP在0.05896~7.547μg·L^(-1)范围内线性良好,r为0.9963~0.9996,准确度为98.29%~108.2%,CV均<5.2%;正常、溶血和高脂3种血浆基质的基质效应为96.48%~106.3%,PCP提取回收率为89.88%~95.27%;血浆样本室温放置6 h、-80°C冰箱保存56 d或反复冻融3次、-20°C冰箱保存60 h,以及样品处理后自动进样器(8°C)放置24 h均稳定;全血样品室温放置4 h稳定性良好。结论建立的PCP人血药浓度的LC-MS/MS测定方法简便、准确、灵敏、特异性强、重复性好,适用于PCP相关制剂的临床药代动力学和生物等效性研究。

摘要： 目的:建立一种3-硝基苯肼化学衍生化与UPLC-MS联用技术的快速检测人血浆中短链脂肪酸(SCFAs)含量的方法.方法:用5倍量的甲醇沉淀蛋白后,上清液中加入3-硝基苯肼(3-NPH)与EDC进行衍生化反应,通过考察反应时间、温度、反应物浓度对衍生化产物峰面积的影响,优化反应条件.采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱,以乙腈-甲醇(V(乙腈)︰V(甲醇)=2︰1)及水(含0.1%甲酸)为流动相,分离11个SCFAs.采用ESI离子源,多反应监测正离子模式进行检测.结果:最佳反应条件为25 mmol·L^(−1)3-NPH作为衍生化试剂和30 mmol·L^(−1) EDC作为催化剂,40°C反应30 min;11个SCFAs在11 min内能实现基线分离;衍生化产物的峰面积与浓度有良好的线性关系(r>0.999),日内与日间精密度良好(RSD均小于15%),提取回收率在80%~120%范围内.结论:衍生化方法反应条件温和、操作简单;UPLC-MS/MS方法准确、简易、可重复,可用于人血浆中SCFAs的含量测定.

摘要： 目的:建立人类细小病毒B19实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测方法,并对该方法进行方法学验证。方法:针对B19病毒三种基因型的高度保守区设计特异性引物和探针,建立B19 Q-PCR标准曲线。并分别从检测限和定量限、型别覆盖能力、特异性、定量范围及定量线性、精密度、回收率、不同机型、以及不同混样模式进行方法学验证。结果:当B19病毒定量参考品范围为2.0×10^(1)~1.0×10^(8) IU·mL^(-1)时,R^(2)>0.99,扩增效率>97.2%,线性范围相关性良好。定量下限为20 IU·mL^(-1),检测下限为10 IU·mL^(-1),针对B19病毒3种基因型样本均能检出,具有相同的定量下限和检测下限。特异性结果显示,本方法检测甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒1型、人巨细胞病毒、戊型肝炎病毒、单纯疱疹病毒1型、梅毒螺旋体等核酸阳性血浆,均无非特异反应,且在上述病原体存在的情况下,B19病毒的定量下限和检测下限均能稳定检出,不受干扰。回收率结果显示,本方法回收率在50%-150%之间,RSD<30%。此外,本方法的精密性变异系数均小于3%,在ABI 7500和伯乐CFX-96机型上,相关技术指标均能达标。且采用48混合96混检测模式检测终浓度10^(4) IU·mL^(-1)和20 IU·mL^(-1)的样本,定量要求符合标准。结论:本方法线性范围广、灵敏度高、特异性和精密度好,回收率高,且可用于不同品牌的荧光定量PCR仪,适用范围广,检测模式灵活,可用于人血浆B19病毒核酸筛查,本研究将为血液制品质量标准提高提供技术储备。

摘要： 目的研制冰冻人血浆醛固酮国家二级标准物质,用于血浆醛固酮的量值溯源、室内质量控制、实验室能力验证、相关试剂和方法的评估及验证等,促进血浆醛固酮检测标准化进程,实现结果互认。方法收集无肉眼可见溶血、乳糜和黄疸的混合血浆材料,经过浓度配比、过滤、分装后,-70°C保存。参照JJG 1006-1994和JJF 1343-2012文件要求用常规测量方法评价标准物质的均匀性和稳定性。6家通过JCTLM认可和/或CNAS认可的实验室采用醛固酮ID-LC/MS/MS候选参考测量方法联合定值。分析不确定度来源并进行不确定度评定,定值结果用“认定值±不确定度”表示。参照美国国家临床实验室标准委员会EP14-A3文件要求评价互通性。结果研制了2个浓度水平标准物质,均匀性良好(P>0.05),瓶间变异均<4%。-70°C以下条件可稳定半年;冰袋运输可稳定5d;复融后室温条件下可稳定4 h,2~8°C条件下可稳定168h。2个浓度水平标准物质的定值结果分别为56.9±4.3和147±12pg/mL,k=2。标准物质在ID-LC/MS/MS法和2个常规方法间与临床血浆样本具有良好的互通性。结论研制的2个浓度水平冰冻人血浆醛固酮标准物质均匀性、稳定性、互通性良好,定值准确,已获得国家批准文号GBW(E)091171和GBW(E)091172。

摘要： 采用单因素试验和正交试验优化硫酸催化反应条件,以气相色谱-质谱法测定人血浆样品中37种脂肪酸含量。样品于4°C融化,分取100μL,加入500μL含0.4 mol·L^(-1)氢氧化钾的甲醇溶液,涡旋30 s,室温放置10 min。加入2 mL正己烷,离心5 min,在上清液中加入含7%(体积分数)硫酸(催化剂)的甲醇溶液1 mL,吹氮至干,加入200μL水,于65°C反应20 min。冷却至室温,加入2 mL正己烷,分取上层清液注入附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪,目标物经Rt-2560色谱柱固定后在程序升温条件下分离,以配电子轰击离子源的质谱仪检测。结果显示:影响脂肪酸测定的催化反应因素分别为反应温度、硫酸体积分数、反应时间,其中反应温度具有显著性影响(P≤0.05);37种脂肪酸可在78 min内完成色谱分离,其质量浓度均在0.1~50 mg·L内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.003 0~0.411 0 mg·L;对质控样品进行3个浓度水平(1,5,10 mg·L)的加标回收试验,回收率为80.0%~118%。对质控样品重复测定5次和连续测定5 d,所得测定值的相对标准偏差分别为0.27%~6.2%(日内精密度试验)和0.91%~8.7%(日间精密度试验)。方法用于分析云南4个特有少数民族人群1 913个血浆样品,发现肥胖组脂肪酸总含量高于正常组,且脂肪酸种类及含量在各民族血浆间分布存在差异。

摘要： 目的评价冰冻人血浆醛固酮国家二级标准物质在临床实验室血浆醛固酮量值传递中的效果。方法采用同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)和A、B、C 3种免疫法测量原理的常规系统同时测量2个浓度醛固酮标准物质和20份无肉眼可见溶血、乳糜和黄疸的临床单人份血浆样本。以标准物质各常规系统的测量结果为X轴,标准物质的认定值为Y轴作直线回归并计算临床样本经量值递后的值。以ID-LC/MS/MS法测量临床样本结果为X轴,分别以量值传递前后临床样本在A、B、C常规系统与ID-LC/MS/MS法之间结果的相对偏倚为Y轴,绘制改良Bland-Altman图,评价常规系统量值传递前后测量结果的正确性。通过比较量值传递前后平均偏倚及偏倚范围的变化评价醛固酮标准物质在量值传递中的效果。结果根据正确性评价标准判断,A、B、C常规系统量值传递前后测量结果均不正确。量值传递前临床样本在A、B、C常规系统与ID-LC/MS/MS法之间结果的平均偏倚分别为39.34%、41.45%和97.71%,偏倚波动范围分别为16.93%~95.71%、-3.11%~101.5%和4.55%~319.85%。量值传递后的平均偏倚分别为-12.29%、-8.88%和18.49%,偏倚波动范围分别为-26.81%~22.79%、-36.86%~24.00%和-36.08%~138.52%。结论应用冰冻人血浆醛固酮标准物质进行量值传递可以明显改善各常规系统与ID-LC/MS/MS法之间测量结果的偏倚,但是不能完全解决不同测量原理的测量方法间结果的一致性问题。

摘要： 目的研究布洛芬颗粒剂在中国健康受试者体内的生物等效性,为一致性评价提供依据。方法采用单中心、随机、开放、单剂量、两周期、两序列、交叉试验设计,将纳入的空腹、餐后各24名健康志愿者分别随机分为2组,分别口服受试制剂和参比制剂0.2 g,采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)技术,建立了快速、简单、灵敏的测定人血浆中布洛芬浓度的分析方法,用于布洛芬颗粒人体生物等效性试验研究。采用Phoenix WinNonlin 8.2软件计算其药动学参数,评价其生物等效性。结果空腹给药后布洛芬受试制剂和参比制剂的主要药动学参数为:C_(max)分别为(21.8±4.21)μg/ml和(23.3±4.74)μg/ml;T_(max)分别为1.00 h和0.25 h;AUC_(0-t)分别为(71.83±16.08)μg/ml和(69.02±16.34)μg/ml;AUC_(0-∞)分别为(72.89±16.27)μg/ml和(70.04±16.53)μg/ml。餐后给药后布洛芬受试制剂和参比制剂的主要药动学参数为:C_(max)分别为(10.7±2.25)μg/ml和(10.6±2.57)μg/ml;T_(max)分别为4.00 h和4.00 h;AUC_(0-t)分别为(65.27±13.79)μg/ml和(65.76±16.37)μg/ml;AUC_(0-∞)分别为(66.45±14.13)μg/ml和(67.12±16.93)μg/ml。结论空腹和餐后受试制剂AUC_(0-t)、AUC_(0-∞)和C_(max)的90%置信区间均在参比制剂相应参数的80.00%~125.00%范围内。方差分析及双单侧t检验结果显示,受试制剂布洛芬颗粒剂与参比布洛芬颗粒剂具有生物等效性。

摘要： 目的 建立LC-MS/MS法测定人血浆中格列喹酮的浓度,并应用于人体药代动力学研究.方法 以格列吡嗪为内标,含药血浆50μL经乙腈5倍沉淀后,在Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×50 mm,5μm)上进行色谱分离,以60％乙腈-40％甲醇溶液为有机相(A),10 mmol·L-1甲酸铵-5％甲醇水溶液(B)为水相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1.采用电喷雾离子源(ESI源),多反应离子监测负离子模式检测,格列喹酮和格列吡嗪的MRM离子对分别为m/z 526.4→m/z 401.2和m/z 444.3→m/z 319.1.结果 本方法测定的人血浆中格列喹酮浓度在5～1000 ng·mL-1线性关系良好,质控样品结果显示,格列喹酮的批内及批间精密度不超过4.93％,准确度偏差在±5.00％,经内标归一化后的基质效应因子在92.90％ ～97.01％,提取回收率在94.01％～98.60％.结论 本方法操作简单、血浆用量少、灵敏、快速,适用于人血浆中格列喹酮浓度的测定,满足人体药代动力学研究.

摘要： 目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中安立生坦浓度并应用于人体药代动力学研究。方法:采用液-液萃取法从人血浆中提取安立生坦和内标后,在Waters Symmetry C 18柱(4.6 mm×100 mm,5μm)上进行色谱分离,有机相:40%甲醇-60%乙腈,水相:5 mmol/L乙酸铵-10%乙腈,流速:0.5 mL/min,电喷雾离子化源,多反应监测,负离子模式,安利生坦和内标的监测离子对分别为m/z 377.1→301.2和m/z 380.4→301.0。结果:安立生坦在2~2000 ng/mL浓度范围内线性良好,定量下限为2 ng/mL,批内精密度小于2.72%,批间精密度小于8.98%,经内标归一化后的基质效应在92.3%~98.3%之间,提取回收率在74.6%~80.5%之间。结论:该方法灵敏、经济、可靠,适用于人血浆中安立生坦浓度的测定,满足人体药代动力学研究。

摘要： 目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度.方法:经抗氧化剂(抗坏血酸,VC)预处理过的血浆样品,通过甲醇蛋白沉淀等一系列操作后进行LC-MS/MS分析.以沙丙蝶呤-13C 15N3为内标,使用的色谱柱为Kinetex?EVO C18100?(4.6 mm×100 mm,5μm),流动相为含0.1％1 mol·L-1乙酸铵的水溶液-乙腈(93:7,v/v),等度洗脱分离,柱温为30°C,流速为0.6 mL·min-1,进样量为15μL.质谱检测采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测(MRM)模式扫描分析.沙丙蝶呤和沙丙蝶呤-13C15N3的目标离子对分别为m/z 242.3→166.1和m/z 246.1→170.2.结果:沙丙蝶呤血药浓度在1～300 ng·mL-1范围内线性关系良好;质控样本批内精密度(RSD)在1.2％～4.7％,批间精密度(RSD)在1.5％～4.3％;沙丙蝶呤的平均提取回收率为98.0％～101.2％;无明显空白血浆基质效应,不影响待测物的定量分析;血浆样本稳定性符合接受标准;制备后样本稳定性符合接受标准;方法 重现性良好;浓度超出定量上限的血浆样本经空白血浆稀释5倍后可以准确测定.结论:本方法能够快速、简便、准确地测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度.该方法经验证后,成功用于沙丙蝶呤临床样本的血药浓度的检测.

摘要： 目的:建立液质联用(LC-MS/MS)测定人血浆中氯吡格雷活性代谢产物的方法.rn 方法:采用蛋白沉淀法,以氯雷他定为内标,使用Aglient ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0ml/min,柱温40°C,进样量2μL,分析时间为10min.质谱采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行定量分析.rn 结果:氯吡格雷活性代谢物的衍生物(CAMD)在0.05～200ng·mL-1血清浓度范围内线性关系良好;CAMD的最低定量限为0.05ng·mL-1;CAMD质控样品的日内RSD小于4.36％,日间RSD小于4.53％,提取回收率在80.07％～102.42％内.rn 结论:本方法灵敏度高,测定准确,干扰小,可用于人血清中CAMD浓度测定和药动学研究.

摘要： 头孢特仑新戊酯(cefteram pivoxi,CFTM-PI)为第3代口服头孢菌素酯化物。口服经肠管壁酯酶水解成为有抗菌活性的头孢特仑(CFTM)发挥抗菌活性。抗菌谱广，口服给药组织体液中迅速达有效杀菌浓度。头孢特仑主要经肾脏排泄，少部分经胆汁排泄。国内外头孢特仑新戊酯相关LC-MS/MS测定方法测定文献报道较少，多采用HPLC方法，耗时较长且灵敏度不高。本实验建立了人血浆中头孢特仑血浆浓度的LC-MS/MS测定方法。方法简便、特异性高、适用于头特仑血药浓度测定，可用于人体头孢特仑新戊酯片口服制剂药动学及生物等效性研究。

摘要： 目的:测定人血浆中重组人甲状旁腺素rhPTH(1-84)及代谢产物RhPTH 1-34的浓度并进行药代动力学研究，为临床制定安全合理用药方案提供理论依据。方法:采用ELSA-PTH放射免疫分析法测定人血浆中rhPTH(1-84)的浓度，RK-055-08 PTH(1-34)测定人血浆中代谢产物RhPTH(1-34)的浓度。结果: rhPTH(1-84)在24～520 pg·mL-1范围内呈线性关系，线性回归方程：Y=19.791X(R2=0.9989)；rhPTH(1-34)在10～1280 pg·mL-1范围内呈线性关系，方程：y=A2+(A1-A2)/(1+(x/x0)＾p)，A1=0.989，A2=0.1074，x0=2.1892，p=6.9808，R2=0.9964。rhPTH(1-84)药代动力学主要参数Cmax：114.71±15.3(1μg/kg)，194.98±15.3(2μg/kg)，396.95±46.4(4μg/kg)；rhPTH(1-34)主要参数Cmax：86.09±8.35(1μg/kg)，93.08±10.4(2μg/kg)，119.15±7.24(4μg/kg)。结论:采用ELISA-PTH试剂盒测定人血浆中rhPTH(1-84)的含量和采用RK-055-08 PTH(1-34)测定人血浆中rhPTH(1-34)的方法是可行的，其特异性、灵敏度、精密度和准确度均符合我国生物制品药代动力学研究的要求。

摘要： 本研究的目的为采用高效液相色谱-串联质谱(High performance liquid chromatography-tandemmass spectrometry，HPLC-MS／MS)方法定量分析人血浆中CPRC-161的浓度。rn 实验部分，主要仪器与试剂美国Appliedbiosystems公司API-4000型三重串联四级杆质谱仪;日本岛津公司20A型高效液相色谱仪;本研究所用其它设备还有Mettler AX-150型十万分之一分析天平等。

摘要： 伊立替康(Irinotecan，以下简称CPT-11)是一种半合成的喜树碱衍生物，它能特异性抑制DNA拓扑异构酶I，阻止拓扑异构酶I对断裂的DNA链的修复，抑制细胞分裂。在临床研究中，发现伊立替康对晚期直肠癌有肯定疗效。

摘要： 紫杉醇是从红豆杉属(Taxus)植物中分离得到的一个具有独特抗癌活性的二萜类化合物，能够促进微管双聚体装配成微管，使微管超稳定，从而抑制微管网动力学重组，最终使细胞增殖停止在有丝分裂期的G2/M阶段。其为目前治疗肿瘤的一线药物，广泛用于治疗卵巢癌、乳腺癌和非小细胞肺癌，在体内主要是通过人细胞色素P450 3A4和2C8进行生物转化。

摘要： 吗啡是当前国际毒品犯罪中主要的一类毒品，有3位酚羟基和6位醇羟基，在体内经过初步代谢后，生成3-β-D-葡萄糖醛酸吗啡和6-β-D-葡萄糖醛酸吗啡。吗啡对中枢神经系统兼有兴奋与抑制作用，治疗量的吗啡具有镇痛、镇静和镇咳作用。大剂量可引起呼吸中枢麻痹而死亡，长期使用能造成强烈的精神依赖和身体依赖[1]。

摘要： EGFR(表皮细胞生长因子受体)表达于多种类型的肿瘤细胞，和其配体EGF、TGF-α结合后，激活EGFR细胞浆部分的激酶，导致EGFR羧基端的酪氨酸磷酸化，然后通过不同的信号传导途径调节多种基因的转录，从而调控肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡和肿瘤的转移等。盐酸埃克替尼是一种EGFR酪氨酸激酶抑制剂，能特异的、竞争性的结合在EGFR激酶功能区，抑制其激酶活性从而阻断癌细胞增殖、转移等相关的信号传导。

摘要： 度洛西汀(Dutoxetine，DLX)能抑制神经元对5-羟色胺和去甲肾上腺素的再摄取，以提高两种神经递质在大脑和脊髓中的浓度，现临床主要用于成人严重抑郁症、广泛性焦虑症、妇女中至重度应激性尿失禁症、成人糖尿病外周神经病性疼痛治疗和成人纤维肌痛疼痛缓解。有关血药浓度测定方法的报道较多，如HPLC法、HPLC-荧光检测法、LC／MS[4-6]或LC-MS／MS法，其最低定量浓度为0.1～2μg／L之间;本实验采用HPLC-MS／MS法，MRM模式检测，最低定量限达到0.02 ng／mL，具有灵敏、简便、快速测定血浆中DLX的浓度等特点。

摘要： A rapid and sensitive method using liquid chromatography-tandem mass spectroscopy (LC-MS/MS) was developed and validated for simultaneous quantitative determination of valproic acid and three major metabolites (3-OH-valproic acid, 4-ene-valproic acid and 5-OH-valproic acid) in human plasma. Methods：The analytes and internal standard were isolated from 200μL samples by solid phase extraction using a ZORBAX SB-C8 column (3.5 μm, 2.1 × 100 mm) with an isocratic mobile phase consisting of methanol-10mM ammonium acetate (80:20, v/v)containing 0.1% formic acid at a flow rate of 0.3 mL/min. The method had a chromatographic total run time of 2.0 min. The Agilent G6410A triple quadrupole LC/MS system was operated under a multiple reaction monitoring and single ion monitoring mode using the electrospray ionization technique in a negative mode. Results：The lower limit of quantification of valproic acid, 3-OH-valproic acid, 4-ene-valproic acid and 5-OH-valproic acid of the method was 2030, 51.5, 50.15 and 51.25 ng/mL, respectively. The method was linear for valproic acid and the three metabolites with correlation coefficients > 0.995 for all analytes. The intra-day andinter-day accuracy and precision of the assay were less than 15.0%. Conclusions：This analytical method was successfully used to assay plasma concentrations of valproic acid and the three metabolites in human plasma from epileptic patients.

摘要： 由10％或更多属于非高加索人群的供者收集的人用血浆，血浆可以如此获得：混合A血型和B血型、任选地AB型的血或血浆，而不混合相当大量的O血型的血或血浆，其特征在于，4-8份血或血浆来自具有A血型的供者，超过3份-7份血或血浆来自具有B血型的供者，0-2份血或血浆来自具有AB血型的供者。

摘要： 由10％或更多属于非高加索人群的供者收集的人用血浆，血浆可以如此获得：混合A血型和B血型、任选的AB型的血或血浆，而不混合相当大量的O血型的血或血浆，其特征在于，4－8份血或血浆来自具有A血型的供者，超过3份－7份血或血浆来自具有B血型的供者，0－2份血或血浆来自具有AB血型的供者。

摘要： 本发明提供了一种从人血浆或人血浆衍生原料中去除内毒素的方法。包括如下步骤：S1.配制平衡液，并调节至设定的pH和电导率；S2.将待处理的人血浆或人血浆衍生原料进行预处理至设定的pH和电导率；S3.将深层滤器进行平衡处理；S4.将步骤S2中预处理好的人血浆或人血浆衍生原料溶液通过泵系统泵入步骤S3中平衡完成的深层滤器中进行过滤；S5.待溶液经深层滤器过滤完成后，再次泵入平衡液进行过滤后的后平衡，将后平衡滤液和步骤S4中过滤后制品进行混合。通过采用深层滤器对人血浆或人血浆衍生原料制品进行过滤，并在工艺条件范围内选择合适的pH、电导率及参数组合，可以有效去除制品中的内毒素，并且不影响制品的蛋白质含量和澄清度。

摘要： 本发明涉及能够同时结合人血浆激肽释放酶和血浆前激肽释放酶的抗体，以及这些抗体在用于制备预防或治疗受试者中血浆激肽释放酶或血浆前激肽释放酶相关的疾病的药物中的用途。

摘要： 本发明具体涉及一种血浆样品前处理技术结合UPLC‑MS/MS测定人血浆中头孢地尼含量的方法，属于体内药物痕量分析领域。血浆样品经10%三氯醋酸沉淀蛋白后，以超高效液相色谱‑质谱（UPLC‑MS/MS）为检测工具，直接测定人血浆中头孢地尼的含量。本发明对检测条件进行了考察和优化，建立了最优的UPLC‑MS/MS分析方法，并成功运用于实际血浆样品的测定。与传统方法相比，本方法具有灵敏度高、分析速度快、重现性好等优点。

摘要： 本发明公开了一种从人血浆中纯化人凝血因子Ⅶ的方法，包括以下步骤：(1)去冷胶血浆；(2)第一次阴离子交换层析；(3)洗脱液过滤、调节制品电导率、pH值；(4)第二次离子交换层析。本方法经过第一次离子交换层析采用谷氨酸钠作为洗脱液能从去冷胶血浆中将人凝血因子Ⅶ分离，经过两次层析能将人凝血因子Ⅶ进一步纯化，大大提高血浆的利用率且人凝血因子Ⅶ能达到较高比活。

摘要： 本发明公开了一种从人去冷沉淀血浆中分离纯化人抗凝血酶-Ⅲ的方法，步骤如下：去冷沉淀人血浆层析，S/D病毒灭活，第二次亲和层析：超滤；除菌过滤；20nm纳滤膜过滤去除病毒；分装；冻干：干热病毒灭活。本发明方法制得的AT-Ⅲ制品质量稳定可靠，安全，同时，本发明方法的收率高达25％，具有良好的市场应用前景。

摘要： 本发明公开了一种从人去冷沉淀血浆中分离纯化人抗凝血酶-Ⅲ的方法，其具体操作步骤如下：去冷沉淀人血浆层析，S/D病毒灭活，第二次亲和层析：超滤；除菌过滤；20nm纳滤膜过滤去除病毒；分装；冻干：干热病毒灭活；从人去冷沉淀血浆中分离纯化人抗凝血酶-Ⅲ；经过预过滤处理后，采用亲和层析技术直接将血浆中的抗凝血酶-Ⅲ（AT-Ⅲ）分离纯化出来；经加入适当保护剂以S/D病毒灭活工艺代替巴氏病毒灭活工艺，既减少了活性损失，又缩短了制备时间；然后进行第二次亲和层析进一步纯化AT-Ⅲ，最后经过超滤、20NM纳米膜纳滤除病毒、冻干等步骤，最终制品纯度在95%以上；比活在6IU/mg以上，病毒安全性高，且制备过程中不会影响血浆用来生产下游产品。

摘要： 本发明提供一种人血浆中色氨酸及其代谢产物检测方法，属于生物技术检测领域，其先向生物样品加入同位素标记的色氨酸及代谢物作为内标，再通过液‑液萃取法提取样品混合物中的色氨酸及其代谢物，使用高效液相将样本中的色氨酸及其代谢物分离后，采用内标标准曲线法进行串联质谱分析，通过优化提取方法步骤，质谱上机检测参数等因素，解决目前对这类物质检测存在着的一些关键技术问题，具有灵敏度高、特异性强、准确且前处理方法简单的优点。

摘要： 本发明公开了一种人血浆肾素活性液相色谱质谱联用检测方法，包括以下步骤：1)配制缓冲体系，对样本进行孵育，所述缓冲体系中包含血管紧张素转化酶抑制剂；2)向孵育后的样本中加入内标液和蛋白沉淀剂，对样本进行前处理；3)取经过前处理后的上清液，采用液相色谱质谱联用仪进行检测，采用内标法，结合色谱系统和质谱系统，将进样样品中的物质分离并对血管紧张素I进行定量及定性检测；4)计算单位时间内单位体积的样本中的血管紧张素I的生成速率。本方法的前处理操作简单，无需固相萃取，无需氮吹复溶，且本发明方法采用液相色谱分离定量，检测速度快，同时保证了检测的灵敏度和可靠性，有利于临床样本的高通量筛查。