荧光定量聚合酶链反应

摘要： 目的探讨荧光定量聚合酶链反应(PCR)联合抗酸染色在肾结核组织病理诊断中的应用价值。方法回顾性收集2013年6月至2019年6月河北省胸科医院通过后腹腔镜技术或开放技术行肾切除术后肾病组织标本65例,其中肾结核病30例(阳性组),非结核肾病35例(阴性组)。采用Taqman探针法荧光定量PCR技术和抗酸染色技术检测每个石蜡标本的结核杆菌病原体。采用单独和联合统计比较两种检测方法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性。结果抗酸染色在肾结核组织标本中的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别是53.3%、94.3%、88.9%、70.2%和75.4%;荧光定量PCR的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别是83.3%、97.1%、96.2%、87.2%和90.8%;荧光定量PCR的灵敏度较抗酸染色的灵敏度提高了30.0%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.24,P=0.012)。荧光定量PCR检测的准确性也高于抗酸染色检测的准确性,两者比较差异有统计学意义(χ^(2)=5.47,P=0.019)。抗酸染色和荧光定量PCR联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别是96.7%、94.3%、93.5%、97.1%和95.4%。联合检测的灵敏度、阴性预测值、准确性均明显高于抗酸染色、荧光定量PCR的单独检测值,差异有统计学意义(P0.05)。结论荧光定量聚合酶链反应联合抗酸染色可提高肾结核组织标本病原体检测的灵敏度、阴性预测值和准确性,在肾结核的病理诊断中具有良好的应用价值。

摘要： 结核病是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的特异性炎症,在甲醛固定石蜡包埋组织切片中查见MTB是确诊结核的“金标准”。目前,结核病诊断的主要辅助检测方法是特殊染色和qRT-PCR检测。在临床病理诊断中,部分结核病患者由于获取标本困难,穿刺标本微小,病理组织多被用于HE染色、特殊染色,所剩组织太少无法进行相关分子检测。

摘要： 荧光定量聚合酶链反应是临床检验微生物中比较可靠的手段之一,指的是在聚合酶链反应(PCR)体系加荧光基团,通过荧光信号的累积,实现对整个PCR进程进行实时监控的目的,最终可利用标准曲线完成未知模版定量分析的效果[1]。该技术距今已有20多年历史,首次由美国Applied Biosystems公司推出,实时监控PCR全程,可快速、灵敏及可重复地定量初始模版浓度,实现PCR定性分析向定量分析的突破。

摘要： 目的研究宁波大学附属人民医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的耐药情况及分子流行病学特征等,为CRE的院内防控提供依据。方法收集宁波大学附属人民医院2017—2020年细菌室保存的CRE样品,对其进行细菌鉴定、药敏试验、耐药基因检测及同源性分析。结果共收集222株CRE,检测出大肠埃希菌78株,肺炎克雷伯菌71株,阴沟肠杆菌28株,其他肠杆菌45株,仅对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、米诺环素具有较好的敏感性。碳青霉烯酶耐药基因分布:NDM基因131株,KPC基因56株,IMP基因13株,VIM基因1株,OXA-48基因1株,未检出20株。49株产KPC酶肺炎克雷伯菌MLST分型显示:ST11型26株,ST15型7株,其余还有9种ST分型。结论宁波大学附属人民医院分离的CRE主要是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,其中NDM和KPC为主要耐药基因型。

摘要： 目的探讨EB病毒(EBV)DNA在血浆样本溶血和脂血状态下的表达差异。方法收集40例EBV DNA阳性样本,随机分为2组,每组20例。将EBV DNA阳性样本与灭菌蒸馏水按照1∶1比例混合,作为对照样本,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测其在模拟溶血(血红蛋白浓度分别为60.50、30.25、15.13 g/L)及模拟脂血(三酰甘油浓度分别为6.36、4.24、2.12 mmol/L)状态下EBV DNA含量,并进行统计学分析。结果血红蛋白浓度为60.50和30.25 g/L时,EBV DNA阳性血浆溶血样本和对照样本的PCR检测结果差异有统计学意义(P0.05)。EBV DNA阳性血浆各浓度脂血样本和对照样本的PCR检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血红蛋白≤15.13 g/L的溶血样本和三酰甘油≤6.36 mmol/L的脂血样本对EBV DNA检测结果无影响。

摘要： Roussel Uclaf因果关系评估法Roussel Uclaf Causality Assessment Method(RUCAM)荧光定量聚合酶链反应fluorescent quantitative polymerase chain reaction(FQ⁃PCR)营养不良线丝dystrophic neurites(DN)原发性错配修复缺陷型IDH突变型星形细胞瘤primary mismatch repair deficient IDH⁃mutant astrocytoma(PMMRDIA)早发型视神经脊髓炎谱系疾病.

摘要： 目的 探讨在产前诊断中限制性胎盘嵌合体(CPM)的发现及意义.方法 收集2013年至2020年在广州市妇女儿童医疗中心于产前诊断中无创胎儿D N A检测结果 或早孕期11～13+6周绒毛样本染色体非整倍体检测结果 与羊水或脐血染色体非整倍体检测结果 不一致的病例6例;胎儿分娩后留取胎盘组织,多位点取样,用荧光定量聚合酶链反应(QF-PCR)方法 对胎盘组织进行染色体非整倍体检测,并进行分析.结果 在6例病例中,羊水或脐血样本检测结果 分别为:21号染色体单亲二倍体(UPD21)、46,XX、46,XX、46,XY、46,XX、46,XY;而其胎盘组织中均检测到两种核型类型的细胞嵌合,分别为UPD21/47,XX,+21、46,XX/45,XO、46,XX/45,XO、46,XY/47,XY,+13、46,XX/45,XO、46,XY/47,XY,+21,确认均为CPM.结论 CPM可导致以胎盘绒毛或胎盘来源物为检测靶标的核型检测结果 与胎儿实际核型结果 不一致,在产前诊断中认识到限制性胎盘嵌合现象的存在可以解释绒毛样本检测结果 与羊水或脐血样本结果 不一致的现象,避免因CPM导致误诊的发生.

摘要： 目的:探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核苷酸(HBV-DNA)的价值。方法:选取安阳市肿瘤医院2018年1月至2021年4月期间收治的145例慢性乙型肝炎患者,其均接受乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)检测以及FQ-PCR技术检测血清HBV-DNA。比较不同HBV-M患者血清HBV-DNA水平以及不同病情患者HBV-DNA水平。结果:乙型肝炎核心抗体(HBcAb),乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb),乙型肝炎E抗体(HBeAb)、HBcAb阳性患者的HBV-DNA水平低,三者比较,差异无统计学意义(F=1.052,P=0.339);HBsAg、HBeAg、HBcAb,HBsAg、HBeAg,HBsAg、HBeAb,HBsAg、HBsAb、HBcAb,HBsAg、HBsAb、HBcAb阳性患者的HBV-DNA水平高,差异有统计学意义(F=4680.180,P<0.001);重度患者的HBV-DNA水平显著高于中度和轻度患者,且中度患者显著高于轻度患者,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用FQ-PCR技术检测患者的HBV-DNA水平,可反映乙型肝炎患者病情程度以及疾病类型。

摘要： 目的 通过染色体非整倍体分析和Y染色体STR分析,对一例染色体核型为46,X,+mar的羊水标本进行遗传学分析.方法 采用多重荧光定量聚合酶链反应(QF-PCR)进行常见染色体非整倍体检测;利用AGCU Y-STRs多重荧光复合扩增分析系统检测DYS391等22个STR位点.结果 羊水标本在13、18、21号染色体基因座上,为峰高1:1的双峰或两倍峰高的单峰,AMELY、XY3基因座的STRs峰高两倍于X染色体基因座峰高.AGCU Y-STR多重荧光复合扩增分析系统检测结果显示,其父亲外周血在22个Y-STR位点上均检测到单峰.胎儿羊水标本在DYS456、DYS458、DYS393、DYS19、DYS522五个基因座上检测到单峰,其余17个基因座未检测到扩增产物.在以上五个基因座上,其基因型均与父亲一致.结论 羊水标本性别染色体Y和X比例为2:1,Y染色体有部分缺失,Y染色体上5个基因座的基因型来源于父亲.

摘要： 目的总结儿童百日咳疑似病例,了解其病原,分析儿童百日咳临床特点。方法采用回顾性研究方法,对2015年6月至2019年5月在首都儿科研究所附属儿童医院感染科就诊的百日咳疑似病例临床资料进行分析。结果1.400例百日咳疑似病例完成呼吸道分泌物百日咳杆菌核酸检测,检测阳性198例(49.5%)。2.百日咳以<1岁患儿为主要发病年龄(158/198例,79.8%),有咳嗽患者密切接触史113例(113/198例,57.1%),未接种或未完成全程百白破疫苗接种共162例(162/198例,81.8%)。痉挛性咳嗽发生率73.7%(146/198例),发病至确诊病程为(17.2±12.3)d,咳嗽后发绀31.3%(62/198例),咳嗽伴呕吐17.7%(35/198例),吸气性吼声12.1%(24/198例),其他伴随症状有喘息、流涕、发热、腹泻等。3.病例分为百日咳杆菌核酸检测阳性组(198例)、其他病原组(104例)、病原未明组(98例),3组临床症状比较显示,百日咳杆菌核酸检测阳性组咳嗽后发绀发生率最高(χ^(2)=15.334,P<0.001),其他病原组喘息、呼吸困难、发热、肺部啰音、喘鸣音发生率最高(χ^(2)=79.208、38.214、16.709、44.794、42.480,均P<0.001)。百日咳杆菌核酸检测阳性组血白细胞、淋巴细胞比例及血小板均高于其他2组(F=15.812、18.198、10.819,均P<0.001)。结论儿童百日咳疑似病例感染病原多样,完善百日咳杆菌核酸检测及呼吸道病毒检测有助于明确诊断。儿童百日咳以1岁以下婴儿、未完成疫苗接种者更为常见,临床症状以痉挛性咳嗽最突出,与其他病原感染相比,咳嗽后发绀症状发生率更高。

摘要： 目的：本研究旨在建立一种适用于鹅细小病毒检测的荧光定量TaqMan-PCR技术.rn 方法：根据GenBank中首次发现的鹅细小病毒SYG61株VP3基因的全序列(序列号:DQ299421),设计一对特异性引物及TaqMan探针,扩增位于VP3基因第1380-1459位长度为80-bp的片段.以SYG61株DNA为模板,建立检测鹅细小病毒的实时荧光定量PCR方法.构建含有上述目的片段的质粒作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性.同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测.与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测,并将GPV GD株毒液倍比稀释后经鸭胚接种,收获其尿囊液进行检测,以确定该方法的可行性.rn 结果：本文所构建的荧光定量TaqMan-PCR方法能在鹅细小病毒SYG61株DNA样本中检出荧光信号。最低检出量为1.56×l01拷贝／反应；线性范围达9个数量级。采用质粒标准品106~102拷贝／μl这五个稀释度进行重复性检测，每个稀释度五个重复，所得批内变异系数为0.38%-0.74%；相同的五个样品连续三天每天复检一次，所得批间变异系数为1.23%~2.48%。检测禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、鸭甲型肝炎病毒l型、鸭甲型肝炎病毒3型、禽白血病病毒、鸭坦布苏病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等非鹅细小病毒，均未出现非特异性荧光信号。将GPV GD株毒液倍比稀释为100、10-1和10-2，每个稀释度接种三枚9日龄鸭胚，六日内死亡率为88.9%(8/9)，收获尿囊液进行检测，GPV检出率为100%(9/9)，Ct值范围在21.03-28.55之间。rn 结论：本方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性，可在获得样品后三小时以内得到检测结果，因此适用于临床样品中的鹅细小病毒快速检测。

摘要： 目的：本研究旨在建立一种适用于鹅细小病毒检测的荧光定量TaqMan-PCR技术.rn 方法：根据GenBank中首次发现的鹅细小病毒SYG61株VP3基因的全序列(序列号:DQ299421),设计一对特异性引物及TaqMan探针,扩增位于VP3基因第1380-1459位长度为80-bp的片段.以SYG61株DNA为模板,建立检测鹅细小病毒的实时荧光定量PCR方法.构建含有上述目的片段的质粒作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性.同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测.与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测,并将GPV GD株毒液倍比稀释后经鸭胚接种,收获其尿囊液进行检测,以确定该方法的可行性.rn 结果：本文所构建的荧光定量TaqMan-PCR方法能在鹅细小病毒SYG61株DNA样本中检出荧光信号。最低检出量为1.56×l01拷贝／反应；线性范围达9个数量级。采用质粒标准品106~102拷贝／μl这五个稀释度进行重复性检测，每个稀释度五个重复，所得批内变异系数为0.38%-0.74%；相同的五个样品连续三天每天复检一次，所得批间变异系数为1.23%~2.48%。检测禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、鸭甲型肝炎病毒l型、鸭甲型肝炎病毒3型、禽白血病病毒、鸭坦布苏病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等非鹅细小病毒，均未出现非特异性荧光信号。将GPV GD株毒液倍比稀释为100、10-1和10-2，每个稀释度接种三枚9日龄鸭胚，六日内死亡率为88.9%(8/9)，收获尿囊液进行检测，GPV检出率为100%(9/9)，Ct值范围在21.03-28.55之间。rn 结论：本方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性，可在获得样品后三小时以内得到检测结果，因此适用于临床样品中的鹅细小病毒快速检测。

摘要： 目的：本研究旨在建立一种适用于鹅细小病毒检测的荧光定量TaqMan-PCR技术.rn 方法：根据GenBank中首次发现的鹅细小病毒SYG61株VP3基因的全序列(序列号:DQ299421),设计一对特异性引物及TaqMan探针,扩增位于VP3基因第1380-1459位长度为80-bp的片段.以SYG61株DNA为模板,建立检测鹅细小病毒的实时荧光定量PCR方法.构建含有上述目的片段的质粒作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性.同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测.与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测,并将GPV GD株毒液倍比稀释后经鸭胚接种,收获其尿囊液进行检测,以确定该方法的可行性.rn 结果：本文所构建的荧光定量TaqMan-PCR方法能在鹅细小病毒SYG61株DNA样本中检出荧光信号。最低检出量为1.56×l01拷贝／反应；线性范围达9个数量级。采用质粒标准品106~102拷贝／μl这五个稀释度进行重复性检测，每个稀释度五个重复，所得批内变异系数为0.38%-0.74%；相同的五个样品连续三天每天复检一次，所得批间变异系数为1.23%~2.48%。检测禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、鸭甲型肝炎病毒l型、鸭甲型肝炎病毒3型、禽白血病病毒、鸭坦布苏病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等非鹅细小病毒，均未出现非特异性荧光信号。将GPV GD株毒液倍比稀释为100、10-1和10-2，每个稀释度接种三枚9日龄鸭胚，六日内死亡率为88.9%(8/9)，收获尿囊液进行检测，GPV检出率为100%(9/9)，Ct值范围在21.03-28.55之间。rn 结论：本方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性，可在获得样品后三小时以内得到检测结果，因此适用于临床样品中的鹅细小病毒快速检测。

摘要： 为建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针,并以E基因重组质粒作为标准品,建立检测JEV的TqMan荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的灵敏度可达到10个拷贝,是常规PCR灵敏度的100倍.该方法对其它相关猪病病毒的检测显示均为阴性,特异性好.重复性试验表明该方法的组间和组内的变异系数均小于2％.通过检测未免疫猪和免疫减毒活疫苗猪在感染JEV后的病毒血症及内脏病毒载量,将该方法与JEV传统病毒分离方法进行比较,结果表明该方法与乳鼠脑内接种方法灵敏度相同,比细胞分离方法灵敏度高.本研究可以作为临床检测JEV病毒及评价疫苗保护效力的检测方法.

摘要： 为建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针,并以E基因重组质粒作为标准品,建立检测JEV的TqMan荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的灵敏度可达到10个拷贝,是常规PCR灵敏度的100倍.该方法对其它相关猪病病毒的检测显示均为阴性,特异性好.重复性试验表明该方法的组间和组内的变异系数均小于2％.通过检测未免疫猪和免疫减毒活疫苗猪在感染JEV后的病毒血症及内脏病毒载量,将该方法与JEV传统病毒分离方法进行比较,结果表明该方法与乳鼠脑内接种方法灵敏度相同,比细胞分离方法灵敏度高.本研究可以作为临床检测JEV病毒及评价疫苗保护效力的检测方法.

摘要： 为建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针,并以E基因重组质粒作为标准品,建立检测JEV的TqMan荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的灵敏度可达到10个拷贝,是常规PCR灵敏度的100倍.该方法对其它相关猪病病毒的检测显示均为阴性,特异性好.重复性试验表明该方法的组间和组内的变异系数均小于2％.通过检测未免疫猪和免疫减毒活疫苗猪在感染JEV后的病毒血症及内脏病毒载量,将该方法与JEV传统病毒分离方法进行比较,结果表明该方法与乳鼠脑内接种方法灵敏度相同,比细胞分离方法灵敏度高.本研究可以作为临床检测JEV病毒及评价疫苗保护效力的检测方法.

摘要： 为建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针,并以E基因重组质粒作为标准品,建立检测JEV的TqMan荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的灵敏度可达到10个拷贝,是常规PCR灵敏度的100倍.该方法对其它相关猪病病毒的检测显示均为阴性,特异性好.重复性试验表明该方法的组间和组内的变异系数均小于2％.通过检测未免疫猪和免疫减毒活疫苗猪在感染JEV后的病毒血症及内脏病毒载量,将该方法与JEV传统病毒分离方法进行比较,结果表明该方法与乳鼠脑内接种方法灵敏度相同,比细胞分离方法灵敏度高.本研究可以作为临床检测JEV病毒及评价疫苗保护效力的检测方法.

摘要： 根据C亚型禽肺炎病毒F基因序列,设计了1对针对C亚型禽肺炎病毒的特异性引物,应用该引物建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测C亚型禽肺炎病毒的方法,并对建立的方法进行特异性、敏感性测定和临床样品检验.结果显示该方法特异性好,能特异性地鉴别检测禽肺炎病毒;敏感性可检测到10个拷贝的禽肺炎病毒质粒DNA模板;对收集的54份鸡肺病料样品进行检测,结果没有检测到C亚型禽肺炎病毒阳性病料.由此可见本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法检测C亚型禽肺炎病毒具有特异、敏感、快速、定量等优点,用该方法检测证实采集的临床样品中还没有C亚型禽肺炎病毒的存在.

摘要： 根据C亚型禽肺炎病毒F基因序列,设计了1对针对C亚型禽肺炎病毒的特异性引物,应用该引物建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测C亚型禽肺炎病毒的方法,并对建立的方法进行特异性、敏感性测定和临床样品检验.结果显示该方法特异性好,能特异性地鉴别检测禽肺炎病毒;敏感性可检测到10个拷贝的禽肺炎病毒质粒DNA模板;对收集的54份鸡肺病料样品进行检测,结果没有检测到C亚型禽肺炎病毒阳性病料.由此可见本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法检测C亚型禽肺炎病毒具有特异、敏感、快速、定量等优点,用该方法检测证实采集的临床样品中还没有C亚型禽肺炎病毒的存在.

摘要： 根据C亚型禽肺炎病毒F基因序列,设计了1对针对C亚型禽肺炎病毒的特异性引物,应用该引物建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测C亚型禽肺炎病毒的方法,并对建立的方法进行特异性、敏感性测定和临床样品检验.结果显示该方法特异性好,能特异性地鉴别检测禽肺炎病毒;敏感性可检测到10个拷贝的禽肺炎病毒质粒DNA模板;对收集的54份鸡肺病料样品进行检测,结果没有检测到C亚型禽肺炎病毒阳性病料.由此可见本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法检测C亚型禽肺炎病毒具有特异、敏感、快速、定量等优点,用该方法检测证实采集的临床样品中还没有C亚型禽肺炎病毒的存在.

摘要： 本发明涉及一种双色竞争性荧光定量共扩增聚合酶链反应试剂盒，首先根据21号染色体特异序列DSCR区段序列和2号染色体上的USC2序列分别合成其特异共用引物和特异性双色Taqman探针，然后在PCR扩增缓冲反应体系中在多色荧光定量热循环仪上进行高温、低温、中温的反复热循环，实现两个DNA片段的竞争性扩增。在PCR扩增的同时检测扩增过程中由于降解Taqman探针获得的两个DNA片段扩增的荧光信号的强弱变化情况，获得扩增动力学曲线图，进而得出各个标本的上述两个DNA片段扩增的Ct值，从而计算它们的拷贝数比值，再根据两个基因拷贝数的比值进一步判断21号染色体的倍性。

摘要： 本发明为一种一步法实时荧光定量RT‑PCR检测人细胞角蛋白7 试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人细胞角蛋白7(CK7) 的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者外周血、淋巴结等标本中CK7的表达，用以辅助诊断、指导治疗结直肠癌及提示预后。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人基质金属蛋白酶1 (MMP1) 的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者结直肠癌手术切除标本中MMP1的表达，用以结直肠癌患者辅助诊断、指导治疗是否存在肝转移的指标。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人基质金属蛋白酶11的试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人基质金属蛋白酶11(MMP11)的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者结直肠癌手术切除标本中MMP11的表达，用以结直肠癌患者的辅助诊断、指导治疗及提示预后。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人miR‑1290试剂盒，该试剂盒以总mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人miR‑1290的表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者外周血标本中miR‑1290的表达，用以结直肠癌辅助诊断、指导治疗、复发及提示预后。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人上皮细胞粘附分子试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人上皮细胞粘附分子(Ep‑CAM) 的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者外周血标本中EP‑CAM的表达，用以结直肠癌辅助诊断、指导治疗及提示预后。

摘要： 本发明涉及一种能够定量检测人、大鼠、小鼠等多个物种的ACTB基因表达的荧光定量体外扩增检测试剂盒；其中包含ACTB特异的引物、探针和耐热DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、镁离子、PCR缓冲液、超纯水等组成的PCR扩增缓冲反应体系，以及标准ACTB模板；其中所用引物和探针序列分别为：上游引物：SEQ ID NO 1；下游引物：SEQ ID NO 2；探针序列：SEQ ID NO 3；引物和探针浓度为每条0.25umol/L、Taq DNA聚合酶1.5U/50ul、dNTPs底物0.3mmol/L、模板cDNA若干、Mg++2.5mmol/L、缓冲液1XPCR；标准ACTB模板序列为：SEQ ID NO 4。

摘要： 本发明属生物技术领域，涉及定量RT-PCR检测试剂盒，具体是一种实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测的鸡高迁移率族蛋白B1的试剂盒。该试剂盒含有逆转录反应液、莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶、RNA酶抑制剂、聚合酶链反应液、耐热DNA聚合酶、标准品、对照品。本发明试剂盒通过逆转录(RT)mRNA样品得到cDNA，再结合实时荧光定量PCR检测技术，可以精确定量检测标本中鸡高迁移率族蛋白B1的mRNA表达量。该试剂盒可以用于鸡体内各组织脏器中HMGB1的表达分析，也可以用于检测不同状态下细胞中鸡HMGB1表达水平的变化。该发明为研究鸡HMGB1表达水平提供了一种快速、准确、可重复的检测方法。

摘要： 本发明涉及一种亚历山大藻荧光定量聚合酶链反应标准品的构建方法，通过提取A.catenella ACDH01的DNA，聚合酶链反应扩增A.catenella的18SrDNA到28S rDNA基因片段，并将扩增产物和T载体连接，构建重组质粒。经确认的重组质粒梯度稀释成聚合酶链式反应标准品；以5.8S-b5’和5.8S-b3’为引物，以重组质粒标准品为模板，real-time聚合酶链反应，根据反应中的临界循环数以及重组质粒标准品的梯度浓度对数值制备标准曲线。本发明建立了带有A.catenella的18S rDNA-28S rDNA基因片段的重组质粒real-time聚合酶链反应标准品，采用一对通用引物，可以准确、高效、快速地对待测的亚历山大藻real-time聚合酶链反应检测。

摘要： 本实用新型公开了一种实时荧光定量聚合酶链反应仪，涉及荧光检测技术领域，能够提高内部器件之间的固定稳定性，进而提高仪器的检测准确性和使用寿命。包括一侧铰接的底座和盖板，在底座上设置有待测标本固定架，以及围绕待测标本固定架设置的弹性部件、温控部件和通风部件，盖板上设置有光学模组，光学模组的光学扫描通道朝向待测标本固定架。实时荧光定量聚合酶链反应仪还包括开关组件，开关组件包括相互配合卡合的第一开关部件和第二开关部件，第一开关部件设置在底座的一侧，第二开关部件设置在盖板的一侧。