碳青霉烯酶

摘要： 目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的危险因素。方法选取我院2019年2月~2020年3月收治的肺炎克雷伯菌感染患者133例作为观察对象,依据耐药性不同分为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯组(观察组)73例和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯组(对照组)60例。结果观察组男52例(71.2%)、女21例(28.8)%,年龄>60岁35例(47.9%)。对照组男42例(70.0%)、女18例(30.0)%;年龄>60岁33例(55.0%)。两组患者主要分布在神经外科、肾内科、神经内科、呼吸内科、急诊内科、重症监护室(ICU);感染部位主要分布在下呼吸道、泌尿道、血液和皮肤软组织,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者营养风险评分≥3分、1个月内应用碳青霉烯类药物、1个月内应用三代头孢/酶抑制剂、尿管留置、经外周静脉穿刺置入中心静脉导管(PICC)、应用抑酸剂≥5d、机械通气≥5d,鼻饲比例等高于对照组,1个月内应用碳青霉烯类药物、1个月内应用三代头孢/酶抑制剂、尿管留置是碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯感染的危险因素,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论1个月内应用碳青霉烯类药物、1个月内应用三代头孢/酶抑制剂、尿管留置是碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯感染的危险因素,应给予针对性措施以降低耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的发生。

摘要： 为了掌握产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)在圈养大熊猫中的流行、耐药和致病情况,本研究采用碳青霉烯酶Carba NP检测法从178株大熊猫源肺炎克雷伯菌中分离鉴定出8株CRKP(4.5%)。进一步采用纸片扩散法(K-B法)和PCR技术分别对CRKP分离株进行耐药性和碳青霉烯酶基因型研究,随机选取其中一株CRKP分离株E28研究其对小鼠的致病性。结果显示大熊猫源CRKP对氨曲南、卡那霉素、庆大霉素、氧氟沙星和诺氟沙星敏感,对碳青霉烯类抗生素耐药严重,其中对亚胺培南耐药率(87.5%)高于美罗培南(12.5%);6株CRKP的碳青霉烯酶基因型为blaKPC2-13酶型,2株为bla KPC2-13+bla NDM-1酶型;CRKP分离株E28对小鼠的半数致死量(LD50)为5.6×10^(7)cfu/mL。本研究首次证实CRKP存在于圈养大熊猫中,在大熊猫的临床治疗中应合理使用抗生素,避免CRKP进一步扩散。

摘要： 目的分析石家庄市人民医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性,检测方法和临床分布情况,为预防医院内感染和临床抗菌药物的合理使用提供有力的理论证据。方法收集2019年12月到2020年11月期间,石家庄市人民医院从临床标本中分离出的129株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法(K-B法)和自动化仪器法对上述菌株进行药物敏感性试验,严格按照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)和美国食品药品管理局(FDA)的标准判定药物敏感性结果。同源性分析、回顾性调查,采用WHONET 5.5软件进行统计分析。结果56株和重症医学科密切相关,占比43.4%;另外73株来自于呼吸内科,神经外科,肾内科等,总占比56.6%。危险因素如下:病情危重、气管插管、病程长、手术后、滥用抗生素等。结论耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)在重症医学科(ICU)、呼吸内科、儿科等科室感染率较高,这与碳青霉烯类抗菌药物过度使用有关,应规范抗菌药物的使用、加强感控监管力度,预防CRKP感染现象的发生。

摘要： 目的对聚合式酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、改良碳青霉烯酶灭活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)+EDTA碳青霉烯酶灭活试验(EDTA-carbapenem inactivation method,eCIM)和GeneXpert三种方法检测碳青霉烯酶的性能进行了比较,为临床选择合适的检测方法提供依据。方法收集2019年1月~2021年5月临床分离的43株碳青霉烯类抗生素耐药及37株碳青霉烯类抗生素敏感克雷伯菌属菌株,用PCR法和GeneXpert试验检测碳青霉烯酶基因,mCIM+eCIM试验检测碳青霉烯酶。以PCR法为金标准,对三种试验方法检测结果进行比较。结果43株耐碳青霉烯克雷伯菌属经PCR扩增检测有40株携带碳青霉烯耐药基因,blaKPC 30株,blaNDM 8株,blaIMP 2株;37株碳青霉烯类敏感克雷伯菌属经PCR扩增均未检出碳青霉烯酶基因。与PCR法结果相比,mCIM+eCIM试验检测丝氨酸酶及金属酶表型结果敏感度和特异度均为100%,Kappa值为1;GeneXpert技术敏感度和特异度分别为94.9%,97.6%,Kappa值为0.925。结论mCIM+eCIM试验和GeneXpert与PCR结果一致程度强,但鉴于临床诊断的时效性,GeneXpert技术操作简单,耗时短,结果准确可信且易于判读,对于有条件的医院,可以用于临床微生物实验室常规开展。

摘要： 高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKP)在临床分离株中检出率日益增加,携带多种毒力基因,致病力强,常导致严重的社区获得性感染。通常hvKP耐药率低,临床治愈率高,但碳青霉烯类耐药株(carbpenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae,CR-hvKP)的出现打破了这一平衡。CR-hvKP集合高毒力、高耐药等特性,亦有“超级细菌”之称,极易造成致命性传播,迅速引发全球高度关注。该文将hvKP对碳青霉烯类耐药机制作如下综述,旨在明确CR-hvKP的形成途径,为遏制CR-hvKP的出现及传播提供参考。

摘要： 目的探讨重症监护病房(ICU)碳青霉烯类抗菌药物耐药肺炎克雷伯菌血流感染患者的临床特征,并分析菌株耐药和毒力基因的检出情况及其与感染严重程度的关系。方法选取2018年1月至2020年12月新疆医科大学第五附属医院检验科首次分离的180株非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR-KP),以上菌株来自180例ICU血流感染患者的血液样本。根据拉丝试验将所有菌株分为耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌(CR-hvKP)组和耐碳青霉烯类非高毒力肺炎克雷伯菌(CR-non-hvKP)组,比较两组CR-KP菌株宿主临床特征、碳青霉烯酶、血清荚膜分型和毒力基因的检出情况,并采用Spearman法分析毒力基因与患者脓毒症相关序贯器官衰竭(SOFA)评分的相关性。结果180株CR-KP宿主中CR-hvKP感染患者62例(34.4%)。CR-hvKP组年龄、合并糖尿病及30 d内死亡比例明显高于CR-non-hvKP组(P0.05)。ICU血流感染患者CR-KP菌株携带的毒力基因以ybtS(95.6%)和entB(81.7%)为主,其中CR-hvKP组菌株中携带rmpA、iutA和rmpA2毒力基因的比例高于CR-non-hvKP组[98.4%(61/62)比12.7%(15/118),87.1%(54/62)比27.1%(32/118),85.5%(53/62)比18.6%(22/118)](P0.05)。Spearman相关性分析结果显示,毒力基因rmpA、iutA和rmpA2与SOFA评分呈正相关(r=0.498,P<0.001;r=0.652,P<0.001;r=0.630,P<0.001)。结论ICU碳青霉烯类抗菌药物耐药肺炎克雷伯菌血流感染患者毒力基因rmpA、iutA和rmpA2与感染严重程度存在密切关系,及时检测菌株毒力基因对临床治疗具有一定意义。

摘要： 目的研究耐碳青霉烯大肠埃希菌(CREC)的耐药特点、碳青霉烯酶基因型,并分析CREC的同源性。方法收集安徽医科大学第一附属医院临床标本分离的6092株大肠埃希菌,筛选出71株CREC,采用Vitek-2 Compact进行鉴定和药敏试验,改良Hodge试验(MHT)、改良碳青霉烯类灭活法(mCIM)和Carba NP试验进行碳青霉烯酶的表型确证。聚合酶链反应(PCR)检测bla KPC、bla NDM、bla VIM、bla IMP等碳青霉烯酶基因,将阳性菌株扩增产物进行测序,测序结果在Blast程序中进行比对。用肠杆菌科基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)指纹图谱确定CREC不同菌株之间的克隆关系。结果CREC主要分布在重症监护室(ICU)和烧伤科,标本来源以尿液为主。药敏结果显示CREC对环丙沙星、左氧氟沙星和复方新诺明的耐药率都在70%以上,仅对阿米卡星和妥布霉素的耐药率低于50%。71株CREC中MHT、mCIM和Carba NP实验阳性的菌株数分别为45株、67株和69株,阳性率分别为63.38%、94.37%、97.18%。43株CREC检出碳青霉烯酶基因,34株(79.07%,34/43)携带bla NDM,9株(20.93%,9/43)携带bla KPC-2。另外,携带bla NDM的菌株中bla NDM-1占20.59%(7/34),bla NDM-5占79.41%(27/34),未检出bla IMP、bla VIM和bla OXA-48等碳青霉烯酶基因。依据ERIC-PCR指纹图谱,CREC被分为A-S共19种基因型,未发现优势基因型。结论本院临床分离的CREC耐药率较高,呈现多重耐药现象,CREC主要携带的碳青霉烯酶基因是bla NDM,本院流行的CREC具有较高的遗传多样性,同源性分散。

摘要： 目的 探讨希瓦氏菌临床株HDC555对碳青霉烯类耐药的分子机制。方法 希瓦氏菌临床株的鉴定和药敏使用VITEK 2Compact自动仪;碳青霉烯酶的筛选通过免疫金标法;S1核酸酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)检测菌株携带的质粒。基于二代Illumina和三代Nanopore技术获取菌株的全基因组序列,并用一系列软件分析菌株的生物学信息。结果 免疫金标法显示希瓦氏菌HDC555产OXA-48样和NDM酶。高通量测序数据经分析(ANI)表明希瓦氏菌HDC555株是厦门希瓦氏菌,且该株菌携带位于染色体上的blaOXA-199基因和位于质粒上的blaNDM-1基因。结论 厦门希瓦氏菌临床株HDC555对碳青酶烯类耐药的分子机制是因为该菌携带了blaOXA-199和blaNDM-1碳青霉烯酶基因。

摘要： 目的了解3-氨基苯硼酸(PBA)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)用于检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的检测结果。方法使用PBA-EDTA法测定275株经金标准PCR及DNA测序已明确为产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶结果的符合率,并与CLSI推荐的mCIM联合eCIM改良碳青霉烯灭活试验(mCIMeCIM法)检测结果的符合率比较。结果PBA-EDTA法对产KPC酶菌株的符合率为99.2%(118/119),对产金属酶菌株的符合率为100%(109/109),对产KPC+MβL复合酶的符合率为100%(13/13);但不能检出34株D组OXA酶;其检测结果与分子生物学检测结果总体符合率为87.3%(240/275)。mCIM-eCIM法检测结果显示产KPC酶菌株符合率100%(119/119);检测金属酶的符合率94.5%(103/109);未能检出13株产KPC+MβL复合酶,虽能检出34株产D组OXA酶菌株产酶特性但不能分类酶型;与分子生物学检测结果相比较,mCIM-eCIM法检测结果总体符合率为93.1%(256/275)。两种方法对于KPC酶和金属酶的检出虽有差异,但显示此差异无显著统计学意义。PBA-EDTA法对复合酶(KPC+金属酶)的检出优于mCIM-eCIM法。结论PBA-EDTA法可以检测细菌产生的A组丝氨酸碳青霉烯酶、B组金属酶以及同时产A组和B组碳青霉烯酶的菌株;操作较mCIM-eCIM法简单易行;便于临床微生物实验室使用和开展肠杆菌目细菌产生的丝氨酸碳青霉烯酶和金属酶的检测,为临床合理使用抗菌药物、精准治疗患者提供实验室依据。

摘要： 从临床医院一患者痰液中分离出一株病原菌,采用全自动快速生物质谱检测系统鉴定该菌株为肺炎克雷伯菌。用标准纸片扩散法检测该菌株对头孢他啶、环丙沙星、呋喃妥因、复方新诺明、阿米卡星、哌拉西林、亚胺培南、美罗培南、厄他培南的耐药性,进行m CIM表型筛选试验和采用PCR法扩增碳青霉烯酶基因bla_(KPC-2),bla_(BIC),bla_(IMP),bla_(AIM),bla_(GIM),bla_(NDM),bla_(DIM),bla_(SME),bla_(OXA-48)和外膜孔蛋白基因bla_(Ompk-35),bla_(Ompk-36),最后对该菌株进行多位点序列分型分析。结果显示该菌株为多重耐药菌株,仅对阿米卡星敏感,对其他8种药物耐药。该菌株的m CIM表型筛选试验结果为阳性,通过PCR进一步鉴定该菌株携带1个耐药相关基因bla_(KPC-2),且外膜孔蛋白基因未发生片段缺失。该菌株的MLST分型为ST11。该研究为肺炎克雷伯菌的临床用药和治疗提供一定的参考依据。

摘要： 着随抗菌的药物的滥用,临床上耐药细菌不断出现,给感染性疾病的诊断与治疗带来了严重的困难,严重威胁广大人民群众的身体健康,给公共卫生事业带来了严峻挑战.然而KPC型碳青霉烯酶的流行让碳青霉烯类抗生素作为革兰阴性菌的最后一道防线的地位收到严重威胁,所以有必要对KPC型碳青霉烯酶进行综述,增进对耐药菌传播机制与流行情况的了解,以指导临床用药与科研.产KPC酶在全世界范围内快速爆发流行令人担忧，随着多重耐药产KPC酶细菌的出现，给临床抗感染治疗提出了更严峻的挑战，由KPC生成的细菌引起的感染意味着高病死率和经常性的治疗失败，现如今临床治疗数据有限，新型的抗菌药物没有开发出来，适合KPC感染治疗方案也没有明确的界定。单一疗法比复合疗法的失败率高，在控制KPC产生的细菌造成的感染，尤其是重症感染时多茹菌素和氨基糖昔类单独使用时比复合使用治疗失败率更高。

摘要： 目的:鲍曼不动杆菌复合群细菌是临床可造成感染的重要条件性致病菌,本研究旨在调查和分析三亚地区临床来源鲍曼不动杆菌复合群细菌对常用β-内酰胺类药物的耐药性及菌株碳青霉烯酶携带情况,探讨其耐药流行性特点.rn 方法:采用微量肉汤稀释法对103株采集自2012年-2013年三亚市某大型综合医院的非重复鲍曼不动杆菌复合群细菌进行7种抗菌药物的药敏检测;应用PCR对收集的鲍曼不动杆菌复合群细菌进行9种碳青霉烯酶编码基因的筛查.rn 结果:103株鲍曼不动杆菌复合群细菌对哌拉西林、头孢他啶、头孢噻肟的耐药率较高(接近50％),对头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为40％,对亚胺培南和美罗培南的耐药率均在20％左右;PCR检测显示有38株携带blaOXA-58基因,62株blaOXA-66基因,其中25株同时携带有这两种基因;其余7种碳青霉烯酶编码基因筛查结果为阴性.rn 结论:本研究中鲍曼不动杆菌复合群细菌对β-内酰胺类药物耐药性较高,菌株携带的blaOXA-58和blaOXA-66的基因编码的碳青霉烯酶对菌株的耐药表型有一定贡献意义,但仍有其他耐药机制参与到碳青霉烯耐药表型的贡献中.本研究为研究我国热带地区临床鲍曼不动杆菌复合群的β-内酰胺类药物耐药表型和分析其耐药机理提供了可靠的数据.

摘要： 目的：比较两种方法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌体外药敏结果的差异.方法：采用纸片扩散法和E-test法比较替加环素对23株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌体外药敏结果差异.结果：E-test法检测23株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌对替加环素的敏感率达100％;而纸片扩散法检测该菌对替加环素敏感率为95.7％,出现4.3％的中介菌株.若以E-test法为标准,纸片扩散法检测替加环素对23株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌敏感性的次要误差率为4.3％,无重要误差和严重误差.结论：应用纸片扩散法和E-test法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的敏感性时,其结果存在差异.

摘要： 目的：了解我院临床分离鲍曼不动杆菌中鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)碳青霉烯酶OXA-58基因存在状况,及多利培南对其抗菌活性.方法：收集我院分离的72株鲍曼不动杆菌,通过PCR扩增,克隆测序等方法对鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶OXA-58基因的检测及测序分析,区分出OXA-58阳性组及OXA-58阴性组.通过微量稀释法检测碳青霉烯类抗生素多利培南、亚胺培南、美罗培南对鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),并分别对多利培南、亚胺培南、美罗培南对OXA-58阳性组的MIC,多利培南对OXA-58阳性组及OXA-58阴性组鲍曼不动杆菌的MIC进行统计学分析.结果：72株鲍曼不动杆菌中,碳青霉烯酶OXA-58基因阳性组为18株,阳性率为25％.分离的Ab菌中,碳青霉烯酶OXA-58基因携带率较高.多利培南对Ab菌的MIC50、MIC90均明显低于亚胺培南及美罗培南.对OXA-58阳性组鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度,多利培南组与亚胺培南组、美罗培南组比较差异有显著统计学意义(t值分别为5.657、6.216,p＜0.01).多利培南对OXA-58阳性组的MIC50、MIC90均低于OXA-58阴性组的MIC50、MIC90.多利培南对OXA-58阳性组的MIC,与OXA-58阴性组比较差异有显著统计学意义(t值为7.493,p＜0.01).结论OXA-58编码的碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌耐药的原因.多利培南对产OXA-58碳青霉烯酶的Ab菌,MIC50、MIC90均低于不产OXA-58基因碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌.相比亚胺培南、美罗培南,对携带OXA-58基因的Ab菌,多利培南具有更低的MIC.

摘要： 目的:调查临床分离碳青霉烯类耐药非发酵菌产碳青霉烯酶的情况,探讨产酶菌株可移动遗传元件分布.方法:对中南大学湘雅医院2011年10月—2012年3月临床各类标本中非重复碳青霉烯类耐药非发酵菌进行细菌培养、鉴定及药敏试验；采用2种改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型确证；聚合酶链式反应(PCR)检测主要碳青霉烯酶基因blaKPC、blaIMP、blaVIM-1、blaVIM-2、blaSPM、blaNDM-1、blaOXA-23、blaOXA-40和blaOXA-58;对碳青霉烯酶基因扩增阳性菌株再进行11种可移动遗传元件如整合子遗传标记(intI 1、intI2、intI 3)、转座子遗传标记(merA、tnpU、tnp513、tnpA)、插入序列遗传标记(ISAba1、IS26)及接合性质粒遗传标记(traA、trbC)的PCR扩增.结果:分离的82株碳青霉烯类耐药非发酵菌,包括27株铜绿假单胞菌和55株鲍曼不动杆菌,对多数抗菌药物耐药严重,耐药率大多在60％以上而对阿米卡星和头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低.采用大肠埃希菌ATCC 25922作为指示菌株的改良Hodge试验阳性菌株37株(45.1％),阴性菌株38株(46.34％),不确定结果7株(8.5％).采用肺炎克雷伯菌ATCC 700603作为指示菌株的改良Hodge试验阳性菌株14株(17.1％),阴性菌株66株(80.5％),不确定结果2株(2.4％).1株铜绿假单胞菌携带VIM-2型基因,11株鲍曼不动杆菌携带blaOXA-23基因,这12株菌每株至少检出3种可移动遗传元件,最多检出5种可移动遗传元件,其中大部分受试菌携带4种可移动遗传元件.未扩增出其他碳青霉烯酶基因及可移动遗传元件基因.结论:我院碳青霉烯类耐药非发酵菌以鲍曼不动杆菌为主,大部分为多重耐药菌株,仅对头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星较敏感,主要耐药机制为携带碳青霉烯酶基因blaOXA-23和blaVIM-2,且这些菌株易携带多种可移动遗传元件.

摘要： 本研究的目的是对碳青霉烯类抗生素不敏感肠杆菌产生碳青霉烯酶情况进行研究，结果表明，儿科临床分离对碳青霉烯不敏感肠杆菌产生碳青霉烯酶均为IMP基因型，其中以IMP-4亚型为主，少部分为IMP-8亚型。在儿科加强对碳青霉烯不敏感肠杆菌的耐药监测，防止此类菌株耐药基因的流行，对指导临床合理使用抗菌药物和有效控制医院感染的传播都具有十分重要的意义。

摘要： 目的:研究北京朝阳医院近三年临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型,了解我院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染现状.方法:收集我院2006年-2009年7月临床分离存活的非重复的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌,进行扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)分子鉴定菌种，采用琼脂稀释法测定菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的MIC;采用基因间重复序列引物PCR(REP-PCR)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性;用多重PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶包括TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型、PER-型及IMP-、VIM-型碳青霉烯酶和OXA型碳青霉烯酶分布特点。结果:274株CRAB对头孢菌素类、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、喹喏酮类敏感率<10％,米诺环素为41.2％;对多粘菌素B100％敏感。2006年-2009年7月发现有五个克隆，主要为A1耐药克隆株于不同病房的暴发流行。β-内酰胺酶检测出OXA-23、-24、58型碳青霉烯酶及PER-1型酶.blaOXA-23-like与blaOXA-51-like基因同时存在53.6％(147/274).未检出IMP-、VIM-型碳青霉烯酶及TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型β-内酰胺酶。结论:CRAB克隆株的传播是造成我院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因.OXA-51-like、OXA-23型酶为对我院CRAB对碳青霉烯类耐药的主要碳青霉烯酶.

摘要： 目的：探讨腹腔感染肠杆菌科细菌的菌群分布及产碳青霉烯酶现状.rn 方法：收集该院2012年1月至2013年12月腹腔感染的肠杆菌科细菌157株,用VITEK 2 compact分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,采用改良Hodge试验和双纸片增效试验分别进行碳青霉烯酶和金属酶表型确认,设计通用引物行PCR检测KPC、NDM-1、IMP、VIM、SME、OXA-23和NMC 7种基因.rn 结果：157株肠杆菌科细菌中大肠埃希菌84株(占53.5％)、肺炎克雷伯菌47株(占29.9％)、阴沟肠杆菌8株(5.1％),其它肠杆菌18株(占11.5％).药敏显示亚胺培南、美洛培南和阿米卡星对肠杆菌科细菌具有较好的抗菌活性,敏感率均高于95％;除头孢呋辛、头孢噻肟和复方新诺明的耐药率稍高外,其余9种抗菌药物的耐药率均低于40％.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的发生率为52.4％和29.8％,产ESBLs大肠埃希菌对12种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株(P＜0.05).发现6株对碳青霉烯类不敏感的细菌,经PCR检测,结果有一株肺炎克雷伯菌携带KPC-2基因.rn 结论：该院腹腔感染的肠杆菌科细菌主要以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,感染类型以胆道感染多见,发现有KPC-2型碳青霉烯酶的流行传播.

摘要： 目的：了解温州医科大学附属第一医院临床分离的鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶基因及流行病学特点.rn 方法：40株鲍曼不动杆菌分离自温州医科大学附属第一医院,菌株的鉴定及药敏通过Vitek2compact微生物鉴定及药敏分析系统;通过PCR扩增碳青霉烯B类(blaIMP,blaVIM,blaNDM,blaSIM,blaGIM)和D类(blaOXA-23,blaOXA-48,blaOXA-58)基因及16S rRNA甲基化酶基因(armA、rmtB);采用琼脂稀释法检测对碳青霉烯类及氨基糖苷类药物的MIC;挑取blaOXA-23和armA基因阳性的菌株分别通过PFGE和S1-PFGE电泳及转膜,进而Southern杂交分析blOXA-23和armA基因所在质粒或染色体的位置,最后通过多位点序列分型(MLST)分析菌株的流行病学特点.rn 结果：40株鲍曼不动杆菌,除对多粘菌素、头孢哌酮/舒巴坦和左氧氟沙星外,对其他药物的耐药率都在80％以上,属于多重耐药菌.blaOXA-23、blaIMP、annA、ISAba1基因阳性率分别为90％、10％、95％和87.5％,其它基因未检出;碳青霉烯类药物的MIC50和MIC90分别为16μg/ml和32μg/ml,氨基糖苷类药物的MIC50和MIC90都＞256μg/ml;Southern杂交结果显示鲍曼不动杆菌blaOXA-2,和armA基因位于染色体上;本研究共发现ST191,ST381,ST373,ST426,ST208和ST207共6种ST型,其中主要为ST191(23/40)和ST381(10/40).rn 结论：多耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物和氨基糖苷类药物都是高水平耐药.鲍曼不动杆菌blaOXA-23和armA基因位于染色体上,菌株可以通过单个克隆垂直传播.目前本院存在同时携带blaOXA-23和armA基因的ST191型多耐药鲍曼不动杆菌的克隆播散.

摘要： 铜绿假单胞菌是引起冷却肉腐败的重要菌属,能够使蛋氨酸腐败产生硫化物.而金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌(MPPA)具有更强的药物耐受力,对食品安全(肉制品)造成极大威胁.同时MPPA能够使人和动物致病,引起的肺炎致死率极高;能够水解几乎所有(除单环内酰胺类抗生素)的β-内酰胺类抗生素.耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)携带的金属β-酰胺酶包括VIM、IMP、NDM、SPM、FIM等多种类.编码这些β-内酰胺酶基因多定位在整合子、转座子、质粒或者染色体等特定的组件上,且常伴有其他耐药基因嵌存;这是造成MPPA快速传播耐药和多重耐药的重要原因.可见,了解MPPA在食品动物和人群中流行趋势以及金属β-酰胺酶耐药机制对人畜健康、食品安全以及农业经济发展十分重要.

摘要： 本发明制备出碳青霉烯中间产物，以供有效生成厄他培南(Ertapenem)、美罗培南(Meropenem)与多尼培南(Doripenem)，并利用有效率方法从结晶母液中进行产物回收。

摘要： 本发明涉及碳青霉烯酶酶型的检测技术领域，具体而言，涉及用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂和方法。检测试剂的原料包括乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸，且含有所述乙二胺四乙酸类化合物的溶液的浓度为0.8‑1.2mol/L，含有所述三氨基苯硼酸的浓度为40‑60mg/ml。该检测试剂不仅能实现碳青霉烯酶的分型，同时操作简单，结果易读，成本低，非常适合临床用于碳青霉烯酶表型检测。

摘要： 本发明利用质粒构建和电转化技术，构建了含有荧光素酶簇(luciferase gene cassette,lux)的产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌，最终获得了可稳定表达荧光素酶的产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(KPC‑KP‑LUX)。该菌稳定性好，操作简便，同时为筛选合适的杀菌方法、抗生素、制备动物模型等提供重要的可视化研究工具。

摘要： 本发明涉及临床微生物细菌检测技术领域，具体涉及用酶抑制剂分类检测碳青霉烯酶的方法。该方法为先选用抗生素纸片和EDTA纸片，将已经检测的耐药待检菌制成0.5麦氏单位菌悬液并均匀涂抹至M‑H平皿表面，在涂布有待检菌的M‑H平皿表面上，将EDTA纸片置于M‑H平皿表面中央，在EDTA纸片周围分别贴上头孢他啶(CAZ)抗生素纸片、厄他培南(ETP)抗生素纸片、美罗培南(MER)抗生素纸片、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)抗生素纸片、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)抗生素纸片，且EDTA纸片与各抗生素纸片、两相邻抗生素纸片留有间距；采用35°C孵育16～18h，观察并分别记录EDTA纸片、各抗生素纸片抑菌环直径。本发明的用酶抑制剂分类检测碳青霉烯酶的方法成本低廉，结果可靠，重复性好，不需要特殊实验条件，易于推广应用。

摘要： 本发明涉及临床微生物细菌检测技术领域，具体涉及同时分类检测碳青霉烯酶、AmpC酶和超广谱β‑内酰胺酶的方法。该方法为：选用抗生素纸片和EDTA纸片，将已经检测耐药待检菌制成0.5麦氏单位菌悬液并均匀涂抹至M‑H平皿表面，在涂布有待检菌的M‑H平皿表面上，将含EDTA纸片置于M‑H平皿表面中央，以EDTA纸片为中心周围分别贴上头孢他啶(CAZ)抗生素纸片、厄他培南(ETP)抗生素纸片、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)抗生素纸片、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)抗生素纸片、亚胺培南(IMP)抗生素纸片、头孢西丁(FOX)抗生素纸片，且EDTA纸片与各抗生素纸片、两相邻抗生素纸片留有间距，采用35°C孵育16～18h，观察并分别记录EDTA纸片、各抗生素纸片抑菌环直径。成本低廉，检出率高，易于在临床实验室推广应用。

摘要： 本发明公开用于检测革兰氏阴性杆菌碳青霉烯酶基因的LAMP引物组及应用，LAMP引物组包括两条外引物，两条内引物和两条环引物，序列如SEQ ID NO.1‑6所示。本发明所设计的LAMP引物组能够用于扩增68种KPC亚型，可检测范围广泛，最低检测限可达到10 CFU/μL；能够用于肺炎克雷伯菌等革兰氏阴性杆菌常见碳青霉烯酶基因的鉴定，具有灵敏度高、特异性强，操作简单便捷等优点。

摘要： 本发明创造提供了一种碳青霉烯酶保守抗原、抗体及其应用，所述保守抗原包含具有如SEQ ID NO：1～15中的任意一条或几条所示的氨基酸序列。本发明使用的抗原为碳青霉烯酶保守抗原，在常见亚型中均存在的氨基酸片段，用其免疫动物获得的单克隆抗体或多克隆抗体对常见亚型均有识别，出现假阴性的概率极低。

摘要： 本发明提供鼠抗OXA‑48型碳青霉烯酶杂交瘤细胞株，单克隆抗体及应用，通过小鼠杂交瘤单克隆抗体筛选及RT‑PCR法克隆Ig可变区基因，获得稳定分泌鼠抗OXA‑48型碳青霉烯酶抗体的杂交瘤细胞株及其可变区序列；通过系统性评价，鼠抗OXA‑48型碳青霉烯酶抗体在各方面均有较佳表现，效价达到了1:1280000以上，适合作为免疫诊断试剂用于制备碳青霉烯酶耐药菌株体外诊断试剂盒。

摘要： 本发明提供鼠抗NDM型碳青霉烯酶杂交瘤细胞株，单克隆抗体及应用，通过小鼠杂交瘤单克隆抗体筛选及RT‑PCR法克隆Ig可变区基因，获得稳定分泌鼠抗NDM型碳青霉烯酶抗体的杂交瘤细胞株及其可变区序列；通过系统性评价，鼠抗NDM型碳青霉烯酶抗体在各方面均有较佳表现，效价达到了1:1280000以上，适合作为免疫诊断试剂用于制备碳青霉烯酶耐药菌株体外诊断试剂盒。

摘要： 本发明公开了用于检测细菌内碳青霉烯酶的免疫层析试纸条及检测方法。用于检测细菌内碳青霉烯酶的免疫层析试纸条，包括依次粘贴在底板上的样品垫、NC膜、吸水垫和底板，其中NC膜上设有检测线和质控线，检测线包被有青霉素‑BSA，质控线包被有His融合标签抗体。本发明还提供用于检测细菌内碳青霉烯酶的试剂盒，包括细菌裂解液、反应孔I、II和所述试纸条；反应孔I包被有美罗培南，反应孔II包被有胶体金标记的PBP 4’受体蛋白复合物。本发明选用性质稳定的美罗培南作为底物，以金标青霉素结合蛋白PBP 4’作为受体，通过检测底物消耗情况间接检测样品中碳青霉烯酶的有无。为细菌内碳青霉烯酶的快速检测提供有力技术手段。