结构蛋白

摘要： 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的、在家猪和野猪之间传播的一种高热、高致死性的烈性传染病。由于ASFV的基因组结构庞大、免疫逃逸机制复杂,至今尚未研发出安全有效的疫苗,但是人们对ASFV的认识和研究却在近百年的防控历程中不断前进。本文对ASFV的研究进展进行综述,希望能为及时发现和防控疫情提供理论参考。

摘要： 非洲猪瘟(ASF)是猪的一种烈性病毒病,病死率可达100%。ASF的肆虐,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。ASF的防控依旧是世界性难题,目前尚无有效的疫苗可用,ASF的有效诊断对于该病的防控显得至关重要。该病的致病病原是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV),病毒表位信息是诊断试剂和疫苗的研发基础,论文对ASFV病毒蛋白p72、p30、p54蛋白B细胞表位的研究现状进行概述,了解表位的研究现状有助于ASFV感染机制的研究,同时有助于新型检测试剂及疫苗的研发。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种小的有包膜病毒,基因组约为15 kb,包含11个已知的开放阅读框(ORF)。病毒基因组的3′近端四分之一编码四种包膜糖蛋白(GP2a、GP3、GP4和GP5)、三种非糖基化跨膜蛋白(E、ORF5a和M)和核衣壳蛋白(N)。本文就PRRSV结构蛋白的功能进行综述,以期为接下来的PRRS预防疾病和开发新药提供帮助。

摘要： 盖塔病毒(GETV)属于披膜病毒科甲病毒属。GETV属于虫媒病毒,可以通过蚊虫感染低等脊椎动物。猪群感染GETV后可发生轻微症状,主要导致怀孕母猪繁殖障碍。目前,GETV在世界范围内流行较为广泛,近年来逐步在猪群中暴发,导致部分猪场经济损失严重。因此,加强对猪源GETV的病原、致病机制和疫苗的研究,对于该病的防控具有更重要的意义。本文对猪源GETV分子结构和病毒复制以及近年来研究进展进行了综述和展望。

摘要： A型塞内卡病毒(SVA)是一种新发传染病病原。研究旨在对SVA的衣壳蛋白VP1进行原核表达,并制备其多克隆抗体。以SVA广西分离株SVA-GX01(GenBank登录号:MK039162)RNA为模版,通过RT-PCR扩增结构蛋白VP1基因,构建重组质粒pET-32a-VP1并转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。在非变性条件下,将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。纯化的多克隆抗体进行间接ELISA测定效价,同时进行Western blot与间接免疫荧光分析。结果表明,重组蛋白pET-32a-VP1在大肠杆菌BL21(DE3)以可溶性与包涵体两种形式表达,分子量约为49 kDa。纯化后多克隆抗体效价高达1∶64000。Western blot与间接免疫荧光(IFA)分析显示,多克隆抗体能跟SVA抗原特异性结合。重组SVA-VP1蛋白及其多克隆抗体的成功制备为猪塞内卡病毒血清学检测方法的建立提供了良好的生物材料。

摘要： 为了初步探究鸭坦布苏病毒(DTMUV)介导的鸭体天然免疫反应分子机制,本研究首先筛选出能显著激活IFN-β的DTMUV毒株,并将DTMUV的3个结构蛋白(C、PrM、E)克隆至真核表达载体pCAGGSHA,再分别与鸭源IFN-β启动子的双荧光素酶报告质粒duIFN-β-Luc、内参质粒pRL-TK共转染DEFs,使其在细胞内过表达,通过双荧光素酶报告试验检测DTMUV这3个结构蛋白激活鸭源IFN-β启动子的能力。结果显示,只有囊膜蛋白能显著激活IFN-β启动子,Western-blot试验证实这3个结构蛋白转染至DEFs均能正常表达。本研究结果表明,在DEFs中DTMUV的结构蛋白仅囊膜蛋白在激活机体天然免疫反应方面发挥了一定的作用。

摘要： 塞内卡病毒A(Senecavirus A)是小RNA病毒科塞内卡病毒属的唯一成员,仔猪感染后死亡率高达30%~70%,给全球养猪业造成了巨大的损失。开展抗原表位的研究对于病原学研究、免疫监测、疾病诊断及表位疫苗设计具有重要意义,细胞免疫作为清除胞内微生物最有效的防御手段,在免疫应答中起到了十分重要的作用。为了筛选塞内卡病毒A结构蛋白T细胞抗原表位,我们构建了真核表达质粒pcDNA3.1-P1,验证体外表达情况后,将其作为DNA疫苗免疫小鼠,通过流式细胞术检测免疫小鼠后刺激淋巴细胞增殖情况,通过酶联免疫斑点试验筛选SVA结构蛋白T细胞抗原表位,最终选择重复率高且效果较好的多肽,经检测,该多肽具有刺激淋巴细胞产生IFN-γ的能力。结果表明,通过对SVA结构蛋白的筛选,发现1号肽(SFDTASGTF)、9号肽(MPFQSLGTY)、11号肽(ITLTFCGPM)、21号肽(TSVDISVPYI)的效果较好,为塞内卡病毒A的T细胞抗原表位。

摘要： 为在昆虫细胞中表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和M蛋白,并探讨S和M蛋白能否自动组装成病毒样颗粒(VLPs)分泌至培养基中,本研究构建了3种不同的重组质粒(pFastBac-S、pFastBac-M和pFastBac-S-M),转化入DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选及PCR鉴定获得重组Bacmid,通过转染昆虫细胞Sf9获得重组杆状病毒(BV-S、BV-M和BV-S-M)。在悬浮培养的昆虫细胞Sf9中进行表达,表达分泌的上清通过蔗糖梯度离心进行浓缩纯化,最终获得分泌型的S-MVLPs。通过Western-blotting分析S和M蛋白的表达和分泌特性,透射电镜观察VLPs形态,间接ELISA检测VLPs与猪PEDV阳性血清的反应性,最后免疫小鼠后检验其免疫原性。结果显示,S和M蛋白均能以单独或共表达的形式(S-M)分泌至培养基中。电镜下可观察到由S-M蛋白形成的直径约为90~190 nm的VLPs。间接ELISA结果显示,S、M和S-M蛋白可与PEDV猪阳性血清发生特异性反应,免疫小鼠3次后可产生高水平特异性Ig G抗体。以上结果表明,在Sf9昆虫细胞中共表达S和M蛋白可以获得分泌型S-MVLPs,并具有良好的免疫原性。

摘要： 【目的】设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)S、M及E蛋白的多表位疫苗。【方法】本研究选用IEDB预测SADS-CoV S、M及E蛋白T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子结合表位;用NetMHCIIpan 4.0 Serve预测T淋巴细胞MHCⅡ类分子结合表位;用Immunomedicine Group、IEDB预测B淋巴细胞表位。将各个服务器预测结果筛选出重叠表位区域作为优势表位,运用IEDB、AllerTOP v 2.0 Servers筛选出高保守性、非致敏性的优势表位区域,通过柔性linker串联成多表位疫苗。对构建的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。使用分子对接评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力,最后进行基因克隆。【结果】经筛选后的高保守性、非致敏性优势表位构建的多表位疫苗相对分子质量为35.30 ku,为稳定亲水蛋白,具有良好的抗原性,存在1个N-糖基化位点,在二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和β-转角分别占22.11%、20.35%、50.88%和6.67%。三级结构Ramachandran作图显示优势区域中含有残基数占到90.00%,进行细化后优势区域的残基数增加到91.92%,三级结构突出表位作图也证明多表位疫苗具有良好的免疫原性,分子对接表明多表位疫苗与TLR3具有高亲和力。经密码子优化、反向翻译和基因克隆确保设计的多表位疫苗在大肠杆菌K12表达系统中高效、稳定的表达。【结论】构建的多表位疫苗抗原可有效表达并可能诱导强烈的T细胞和B细胞免疫应答。本研究为SADS-CoV多表位疫苗的设计提供了一种新的方法,为SADS-CoV多表位疫苗的研发提供了理论依据及数据支持。

摘要： 本文构建了烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(HvAV-3h)第122个基因(3h-122)的原核表达载体并制备多克隆抗体。利用蛋白免疫印迹、RT-PCR、免疫组织化学染色等技术检测3h-122的转录表达时相以及组织特异性。结果表明,3h-122编码大小16.1 kD的结构蛋白(3H-122)。HvAV-3h感染棉铃虫幼虫后3 h开始检测到3h-122的转录并稳定持续至第168 h。3H-122在棉铃虫感毒后24 h至168 h可持续检测到其表达。此外,3H-122主要在脂肪体组织中表达。本研究为阐明囊泡病毒结构蛋白的功能及其在囊泡病毒致病机制中的作用奠定了基础。

摘要： 蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起的反刍动物虫媒(如库蠓、伊蚊等)传染病.蓝舌病病毒基因组由10个大小不同的双股RNA组成,分别编码7种结构蛋白(VP1～VP7)和4种非结构蛋白(NS1、NS2、NS3/NS3A、NS4).其中VP2蛋白由L2基因(2900bp左右)编码,以三聚体的形式存在;VP5蛋白是由M6基因(1639bp)编码,也以三聚体形式存在,VP5蛋白比较保守,是BTV的另一个型特异性抗原,它与VP2共同决定BTV的血清型;VP7蛋白是由S7基因(1156bp)编码的,它高度保守,是BTV的主要核心粒子,含有群特异性抗原决定簇.本实验分别构建了酵母双杂交系统中三个诱饵质粒pGBKT7-VP2、pGBKT7-VP5与pGBKT7-VP7,并验证其自激活和毒性作用,为今后利用绵羊肾细胞的cDNA文库筛选互作蛋白,以及开展BTV与宿主细胞的相互作用研究奠定了基础.本实验所构建的三个诱饵质粒经验证均无自激活活性和毒性作用，以期进一步筛选与其相互作用的宿主细胞靶蛋白并研究其在病毒感染和致病性方面所起的重要作用，为今后利用酵母双杂交系统筛选相关蛋白，深入研究BTV的侵染机制奠定了基础。

摘要： 紧张的生活方式:睡眠少、压力大、"快餐"食品等是引起皮肤老化的主要原因,因为它提升了体内毒素水平,其中之一就是糖毒素.rn 糖化是糖及其自由基衍生物与蛋白质的一种非特定非酶促反应,可产生网状物、晚期糖化终产物(AGEs)及其它糖毒素.糖化降低了线粒体蛋白质产生能量的能力,同时降低了胶原蛋白和弹性蛋白等持久性结构蛋白对机械应力的反应能力.rn 针对皮肤糖化过程的细节,以及抑制或甚至逆转该反应的作用机理将会进行详细讨论.

摘要： 为获得具有活性的A型FMDV VP1蛋白,以A型vp1重组质粒pMD19T-A-vp1为模板,利用PCR扩增得到A型FMDV vp1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET28a连接,构建重组质粒pET-A-vp1.经IPTG诱导表达含重组质粒pET-A-vp1的E.coli BL21 (DE3)菌后,SDS-PAGE显示VP1蛋白以包涵体形式获得高效表达,蛋白分子质量约为29 ku.通过对IPTG浓度及诱导时间进行优化,发现在37°C条件下,IPTG终浓度为0.3 mmol/L,诱导表达6h后,VP1蛋白的表达量最大.Western-Blot分析表明,VP1重组蛋白能够被A型口蹄疫阳性血清特异性识别.ELISA检测结果显示VP1包涵体蛋白经洗涤纯化,尿素浓度梯度透析复性后具有较高的活性.A型FMDV VP1活性蛋白的成功表达为进一步研制口蹄疫基因工程疫苗和诊断试剂盒奠定了基础.

摘要： 本实验将禽传染性支气管炎病毒(IBV)结构基因上的多个线性B细胞抗原表位进行不同的串联表达,通过添加柔性氨基酸以保持各表位的独立，用IBV标准血清对不同组合的串联蛋白进行抗原性鉴定和分析,表明与IBV标准血清都具有良好的反应性，为下一步建立血清抗体检测方法奠定基础。

摘要： 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性,热性,高度接触传染性动物疫病。尽管已经证实FMDV引起免疫抑制,但其引起免疫抑制的分子机制尚不清楚。本研究确认了FMDV的结构蛋白VP1与宿主细胞可溶性耐药相关钙结合蛋白(Sorcin)的相互作用。进一步研究发现,VP1通过Sorcin抑制TNF-α或SeV诱导的I型干扰素的表达,影响病毒(VSV)复制。

摘要： 山羊关节炎脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒(Caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)引起的慢性进行性传染病,严重威胁养羊业发展.干扰素β(Interferonβ,IFN-β)是评价先天免疫反应的重要标志分子,具有广谱的抗病毒和免疫调节作用.CAEV感染机体对IFN-β的影响尚不明确.为了解CAEV感染对宿主细胞先天性免疫的影响,本文研究了参与CAEV增殖调节的蛋白酶RVP、dUTP酶DU、利于病毒RNA合成的蛋白Tat、促进病毒基因组整合的蛋白IN、调节蛋白Vif及主要抗原蛋白P25共6种CAEV基因编码蛋白在IFN-β产生过程中的分子机制,为认识CAEV的致病及免疫机理提供依据.

摘要： 山羊关节炎脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒(Caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)引起的慢性进行性传染病,严重威胁养羊业发展.干扰素β(Interferonβ,IFN-β)是评价先天免疫反应的重要标志分子,具有广谱的抗病毒和免疫调节作用.CAEV感染机体对IFN-β的影响尚不明确.为了解CAEV感染对宿主细胞先天性免疫的影响,本文研究了参与CAEV增殖调节的蛋白酶RVP、dUTP酶DU、利于病毒RNA合成的蛋白Tat、促进病毒基因组整合的蛋白IN、调节蛋白Vif及主要抗原蛋白P25共6种CAEV基因编码蛋白在IFN-β产生过程中的分子机制,为认识CAEV的致病及免疫机理提供依据.

摘要： 山羊关节炎脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒(Caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)引起的慢性进行性传染病,严重威胁养羊业发展.干扰素β(Interferonβ,IFN-β)是评价先天免疫反应的重要标志分子,具有广谱的抗病毒和免疫调节作用.CAEV感染机体对IFN-β的影响尚不明确.为了解CAEV感染对宿主细胞先天性免疫的影响,本文研究了参与CAEV增殖调节的蛋白酶RVP、dUTP酶DU、利于病毒RNA合成的蛋白Tat、促进病毒基因组整合的蛋白IN、调节蛋白Vif及主要抗原蛋白P25共6种CAEV基因编码蛋白在IFN-β产生过程中的分子机制,为认识CAEV的致病及免疫机理提供依据.

摘要： 山羊关节炎脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒(Caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)引起的慢性进行性传染病,严重威胁养羊业发展.干扰素β(Interferonβ,IFN-β)是评价先天免疫反应的重要标志分子,具有广谱的抗病毒和免疫调节作用.CAEV感染机体对IFN-β的影响尚不明确.为了解CAEV感染对宿主细胞先天性免疫的影响,本文研究了参与CAEV增殖调节的蛋白酶RVP、dUTP酶DU、利于病毒RNA合成的蛋白Tat、促进病毒基因组整合的蛋白IN、调节蛋白Vif及主要抗原蛋白P25共6种CAEV基因编码蛋白在IFN-β产生过程中的分子机制,为认识CAEV的致病及免疫机理提供依据.

摘要： 为了在体外研究GPS表达对猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV易感细胞Mac-145的影响，本研究通过慢病毒介导成功构建稳定表达GP5蛋白的Marc-145细胞系;首先对该细胞系的细胞活性，细胞凋亡检进行了检测，结果显示GP5在Marc-145内表达并未影响细胞活性和诱导细胞凋亡;然后为了分析GP5蛋白表达对PRRSV感染的影响，利用不同致病性PRRSV毒株VR-2332,HP-PRRSV/JXA1,HP-PRRSV/SD 16分别感染高效表达GP5的Marc-145细胞，结果显示，GP5蛋白在Marc-145细胞内的预表达显著抑制了PRRSV的后续感染;为了明确对PRRSV感染的抑制作用是阻断了病毒的吸附还是抑制了病毒的复制，通过荧光定量PCR对病毒的吸附和病毒吸附后在细胞的复制进行了测定，结果显示GPS蛋白表达没有影响病毒对细胞的吸附，而是抑制了病毒在细胞内的复制，通过对1型干扰素基因转录水平和启动子活性进行分析，GP5的表达导致细胞内INF-β的mRNA水平显著升高，启动子活性明显增强。由此，GPS蛋白体外细胞内表达对PRRSV感染具有明显的抑制作用，这种抑制作用极可能是由GP5的表达诱导了细胞内INF-β的产生导致的。

摘要： 本发明涉及一种坦布苏病毒非结构蛋白NS4B截短蛋白的表达方法及其产品和应用，通过将非结构蛋白NS4B截短，然后进行重组表达，截短后容易表达，且表达量高；表达中通过优化表达条件使重组蛋白在包涵体内表达，便于纯化，纯化的蛋白具有免疫原性，免疫动物后能够获得效价高的多抗血清，并且制得的抗体灵敏度高，可用于坦布苏病毒非结构蛋白NS4B的检测以及并检测坦布苏病毒在感染不同时期非结构蛋白NS4B在细胞内的定位变化情况，对坦布苏病毒的研究具有重要意义。

摘要： 本发明公开了抗病毒蛋白C19orf66作为寨卡病毒非结构蛋白NS3抑制剂在抗病毒药物中的应用。本发明提供了抗病毒蛋白C19orf66具有高效地靶向寨卡病毒非结构蛋白NS3，促进NS3的溶酶体途径降解，从而抑制寨卡病毒在宿主中的增殖的新应用。这开拓了人源化抗病毒蛋白在抗病毒防治领域的临床应用新领域，从而为靶向寨卡病毒非结构蛋白NS3的药物开发提供新的思路及方向，为抗寨卡病毒药物的开发提供科学依据，并为临床抗病毒治疗提供新思路。

摘要： 本发明提供一种严重急性呼吸道综合征SARS冠状病毒非结构蛋白nsp2的羧基端区域的晶体三维结构，其中SARS冠状病毒非结构蛋白nsp2的氨基端区域为所述SARS冠状病毒非结构蛋白nsp2的从约110～约150位氨基酸至在约600至638位范围内的氨基酸，其中所述晶体三维结构中的原子具有表1中所列的至少40％的原子坐标，或者SARS冠状病毒非结构蛋白nsp2的氨基端的晶体三维结构中至少40％氨基酸的主链碳骨架的原子结构坐标与表1中的坐标的平均根方差小于或等于1.5埃。本发明还提供对SARS冠状病毒非结构蛋白nsp2的表达、纯化和结晶的方法；以及SARS冠状病毒非结构蛋白nsp2的晶体结构及晶体结构在功能研究、潜在药物筛选及药物设计方面的理论指导意义和应用。

摘要： 提供了一种起形成蛋白质纳米纤维的核的作用的结构蛋白微体。其由结构蛋白构成，并满足下述(i)～(iii)中至少2个的结构蛋白微体。(i)硫黄素T染色荧光强度测试，其峰值处于480～500nm范围内。(ii)在小角度X射线散射(SAXS)的修正克拉特基图中，在Q不大于0.15的区域有峰值。(iii)是2个以上结构蛋白质分子的缔合体。

摘要： 本发明属于材料科学领域，生物医用材料领域，具体是一种蚕丝蛋白和结构蛋白高分子复合纳米颗粒的制备及其应用。水凝胶材料由复合蛋白颗粒通过颗粒表面的静电作用、氢键作用、疏水作用自组装形成连续多孔的胶体凝胶网络；复合蛋白颗粒是由蚕丝蛋白和其他结构蛋白高分子通过所述两类蛋白质分子之间相互作用形成蛋白复合物，蛋白复合物再由蚕丝蛋白的β折叠实现两类蛋白的固化交联，形成所述复合蛋白颗粒，蚕丝蛋白与结构蛋白的质量比为0.01～100；复合蛋白颗粒的尺寸为10nm‑500μm。本发明水凝胶兼具高机械强度和变形能力的力学特征，降解周期长，在医学领域具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明公开了新型抗病毒蛋白C19orf66作为寨卡病毒非结构蛋白NS3抑制剂在抗病毒药物中的应用。本发明提供了新型抗病毒蛋白C19orf66具有高效地靶向寨卡病毒非结构蛋白NS3，促进NS3的溶酶体途径降解，从而抑制寨卡病毒在宿主中的增殖的新应用。这开拓了人源化抗病毒蛋白在抗病毒防治领域的临床应用新领域，从而为靶向寨卡病毒非结构蛋白NS3的药物开发提供新的思路及方向，为抗寨卡病毒药物的开发提供科学依据，并为临床抗病毒治疗提供新思路。

摘要： 本发明涉及一种坦布苏病毒非结构蛋白NS4B截短蛋白的表达方法及其产品和应用，通过将非结构蛋白NS4B截短，然后进行重组表达，截短后容易表达，且表达量高；表达中通过优化表达条件使重组蛋白在包涵体内表达，便于纯化，纯化的蛋白具有免疫原性，免疫动物后能够获得效价高的多抗血清，并且制得的抗体灵敏度高，可用于坦布苏病毒非结构蛋白NS4B的检测以及并检测坦布苏病毒在感染不同时期非结构蛋白NS4B在细胞内的定位变化情况，对坦布苏病毒的研究具有重要意义。

摘要： 本发明涉及一种坦布苏病毒非结构蛋白NS2A截短蛋白的表达方法及其产品和应用，通过将非结构蛋白NS2A截短，然后进行重组表达，截短后容易表达，且表达量高；表达中通过优化表达条件使重组蛋白在包涵体内表达，便于纯化，纯化的蛋白具有免疫原性，免疫动物后能够获得效价高的多抗血清，并且制得的抗体灵敏度高，可用于坦布苏病毒非结构蛋白NS2A的检测以及并检测坦布苏病毒在感染不同时期非结构蛋白NS2A在细胞内的定位变化情况，对坦布苏病毒的研究具有重要意义。

摘要： 本发明公开了猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒的主要囊膜蛋白和非结构蛋白共表达载体及其构建和表达方法，所述的共表达载体基于分子克隆技术将猪瘟病毒的主要囊膜蛋白(E2c)和非结构蛋白(NS2-3c)及牛病毒性腹泻病毒的主要囊膜蛋白(E2b)和非结构蛋白(NS2-3b)的编码基因分别与双表达载体pETDuet-1、pRSFDuet-1连接。本发明的共表达载体能够同时表达猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒的主要囊膜蛋白和非结构蛋白，可用于制备多价亚单位疫苗、防控猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒。

摘要： 本发明公开了一种携带牛病毒性腹泻病毒(BVDV)非结构蛋白NS3优势区的融合蛋白及其重组表达方法与应用。本发明的融合蛋白是将BVDV非结构蛋白NS3优势区的氨基(N)端连接折叠酶DsbA后得到的。经过突变后的DsbA与BVDV非结构蛋白NS3优势区融合可实现NS3基因的胞内可溶性有活性的高表达，表达量大于30％。本发明融合蛋白的表达方法中采用携带T7启动子和DsbA基因的pET-DsbA表达载体，选用凝血酶切割位点作为BVDV非结构蛋白NS3优势区基因的插入位点，表达的牛病毒性腹泻病毒NS3免疫优势蛋白具有很好的抗原性，可用于牛病毒性腹泻病毒的ELISA检测。