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多克隆抗体

多克隆抗体的相关文献在1988年到2022年内共计2788篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、基础医学、分子生物学 等领域,其中期刊论文2040篇、会议论文128篇、专利文献39157篇;相关期刊616种,包括激光生物学报、生物工程学报、生物技术通报等; 相关会议111种,包括中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会、第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医微生物学专业委员会联合学术论坛)、第十三届中南地区实验动物科技交流会等;多克隆抗体的相关文献由9850位作者贡献,包括吴秀山、王硕、袁婺洲等。

多克隆抗体—发文量

期刊论文>

论文:2040 占比:4.94%

会议论文>

论文:128 占比:0.31%

专利文献>

论文:39157 占比:94.75%

总计:41325篇

多克隆抗体—发文趋势图

多克隆抗体

-研究学者

  • 吴秀山
  • 王硕
  • 袁婺洲
  • 江志钢
  • 莫小阳
  • 邓云
  • 万永奇
  • 李宁
  • 王跃群
  • 樊振川
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利文献

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排序:

年份

作者

    • 余国武; 青芸; 何珊; 黄玉碧
    • 摘要: 抗体是蛋白质功能研究的重要试剂.玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展.玉米淀粉合酶IIb与淀粉合酶Ⅱa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸.但对淀粉合酶Ⅱb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶IIb的C端(455~704 aa)GST融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,分离血清制备SSIIb多克隆抗体.Western blot试验发现,SSIIb多克隆抗体不但能识别SSIIb-C(455~704 aa)抗原,而且能识别玉米不同发育阶段胚乳中SSIIb蛋白.利用该多克隆抗体的Western blot试验表明,玉米SSIIb蛋白的表达在授粉后10 d到30 d的胚乳中表达模式是先增后降,授粉后15 d表达量最高,而半定量RT-PCR的结果表明授粉后20 d SSIIb的转录水平最高.这些结果表明成功制备了特异的玉米SSIIb的多克隆抗体,并能在Western blot中特异识别玉米内源SSIIb蛋白,为进一步深入研究SSIIb蛋白功能奠定基础.
    • 余国武; 青芸; 何珊; 黄玉碧
    • 摘要: 抗体是蛋白质功能研究的重要试剂。玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展。玉米淀粉合酶IIb与淀粉合酶IIa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸。但对淀粉合酶IIb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶IIb的C端(455~704 aa)GST融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,分离血清制备SSIIb多克隆抗体。Western blot试验发现,SSIIb多克隆抗体不但能识别SSIIb-C(455~704 aa)抗原,而且能识别玉米不同发育阶段胚乳中SSIIb蛋白。利用该多克隆抗体的Western blot试验表明,玉米SSIIb蛋白的表达在授粉后10 d到30 d的胚乳中表达模式是先增后降,授粉后15 d表达量最高,而半定量RT-PCR的结果表明授粉后20 d SSIIb的转录水平最高。这些结果表明成功制备了特异的玉米SSIIb的多克隆抗体,并能在Western blot中特异识别玉米内源SSIIb蛋白,为进一步深入研究SSIIb蛋白功能奠定基础。
    • 余国武; 青芸; 何珊; 黄玉碧
    • 摘要: 抗体是蛋白质功能研究的重要试剂。玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展。玉米淀粉合酶Ⅱb与淀粉合酶Ⅱa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸。但对淀粉合酶Ⅱb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶Ⅱb的C端(455~704 aa) GST融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,分离血清制备SSⅡb多克隆抗体。Western blot试验发现, SSⅡb多克隆抗体不但能识别SSⅡb-C (455~704 aa)抗原,而且能识别玉米不同发育阶段胚乳中SSⅡb蛋白。利用该多克隆抗体的Western blot试验表明,玉米SSⅡb蛋白的表达在授粉后10 d到30 d的胚乳中表达模式是先增后降,授粉后15 d表达量最高,而半定量RT-PCR的结果表明授粉后20 d SSⅡb的转录水平最高。这些结果表明成功制备了特异的玉米SSⅡb的多克隆抗体,并能在Western blot中特异识别玉米内源SSⅡb蛋白,为进一步深入研究SSⅡb蛋白功能奠定基础。
    • 陈曦; 杨金先; 李英英; 陈强; 黄小红; 宋铁英; 葛均青
    • 摘要: 【目的】克隆鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)ORF87基因,分析其序列特征并制备多克隆抗体,为揭示ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用机制提供技术支持。【方法】根据GenBank已公布AngHV参考株(NC_013668)的ORF87基因序列设计引物,从AngHV-FJ株基因组中扩增出ORF87基因,构建重组质粒pMD19-ORF87经酶切鉴定和测序验证后,采用Softberry、ProtParam、CDD、TMHMM、SignalP 5.0、PSORT及BepiPred等在线软件进行生物信息学分析;将ORF87基因克隆至p ET-32a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测及Western blotting鉴定;以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备ORF87多克隆抗体。【结果】克隆获得的AngHV-FJ株ORF87基因为2127 bp,与GenBank已发布的参考序列高度同源(相似性为99.72%),仅存在4个碱基突变;其编码蛋白分子量为80.1 kD,理论等电点(pI)为7.62,不稳定系数为42.38,总平均亲水性为-0.271。ORF87蛋白具有蛋白激酶C超家族(PKC-like Superfamily)的保守结构域,但不具信号肽和跨膜结构域;其亚细胞定位可能位于细胞核和细胞质膜,存在19个潜在B细胞抗原表位,即具有良好的免疫原性。AngHV-FJ株ORF87基因可在大肠杆菌中高效表达,表达获得的融合蛋白约100.0 kD,主要以包涵体形式存在;以融合蛋白免疫新西兰大白兔制备获得的ORF87多克隆抗体效价达1∶16000,能特异性识别AngHV的ORF87蛋白。【结论】AngHV-FJ株源ORF87基因经原核表达载体诱导表达获得的融合蛋白ORF87具有Serine/threonine蛋白激酶活性,以其免疫新西兰大白兔制备获得的ORF87多克隆抗体具有高效价,能特异性识别AngHV感染,可作为亚细胞定位及表达时相分析等蛋白特性研究的工具,用于解析ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用。
    • 曹艳桃; 樊江峰; 余四九; 周应聪; 杜培岩; 李一娟; 马进彪; 赵生贤
    • 摘要: 本试验旨在制备牦牛早孕因子(early pregnancy factor,EPF)多克隆抗体,为牦牛妊娠早期高效快速诊断技术研究奠定基础。采用RT-PCR方法,从牦牛胎盘和卵巢组织中提取RNA,反转录为模板后进行EPF基因扩增,并将其克隆到改造后的载体pET28-His10-Sumo上,构建pET28-His10-Sumo-EPF重组质粒,经PCR和测序鉴定后将阳性重组质粒转化至感受态大肠杆菌BL21(DE3)中。用IPTG诱导表达并优化表达条件,使用His标签镍柱纯化重组EPF蛋白并免疫小鼠制备抗体。结果显示,经PCR扩增的牦牛EPF基因在300 bp左右,符合预期结果,并通过测序验证获得重组阳性质粒。pET28-His10-Sumo-EPF重组质粒转化后经IPTG的诱导,表达分子质量大小为29 ku的蛋白(其中包括早孕因子目标蛋白和SUMO标签蛋白),且在37°C、IPTG浓度为300 nmol·L^(-1)、诱导6 h时获得最高表达量。Western blot结果显示,蛋白在上清和包涵体中均有表达,免疫后的小鼠抗血清能够与纯化后的重组蛋白发生免疫反应。本试验通过原核表达系统成功表达了重组牦牛EPF蛋白,制备了免疫原性较好的鼠抗EPF多克隆抗体
    • 夏叶; 孙莹慧; 李春华; 缪德年
    • 摘要: 为制备单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白及其多克隆抗体,采用PCR方法扩增参考菌株10403S的sig B基因片段,并克隆至原核表达载体pET-30a构建重组质粒,测序验证后转化至大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞进行原核表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化Sig B蛋白,通过免疫兔体获得多克隆抗体。结果表明:成功构建SigB重组质粒,并诱导表达出可溶性Sig B蛋白,其相对分子质量约30 ku,纯化后的SigB蛋白质量浓度约为1.5 mg∕mL,获得的多克隆抗体效价为1∶51200。经Western-blot验证,该多克隆抗体能特异性检测Sig B蛋白,表现出良好的抗体特异性。本研究可为探究单增李斯特菌的应激调控机制奠定基础。
    • 于涵; 王丽娜; 郭东华; 贺显晶
    • 摘要: 为制备牛坏死杆菌截短43K OMP多克隆抗体,以A25菌株基因组DNA为模板,特异性扩增43K OMP基因的4个相互重叠的截短片段,构建原核表达载体,利用大肠杆菌原核表达系统对截短基因进行表达并纯化蛋白,同时免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明:43K OMP基因截短片段经IPTG诱导成功表达,蛋白大小分别为32 kDa、30 kDa、28 kDa和30 kDa,运用蛋白制备的多克隆抗体43K OMP-1、43K OMP-2、43K OMP-3和43K OMP-4的效价分别为1∶25600、1∶51200、1∶25600和1∶51200,且制备的抗体能识别天然43K OMP。
    • 郭东光; 陈明艳; 冯春花; 王丰; 卞爽丽; 李文明; 王凯露; 吕薇薇; 郑文珺; 陈子怡; 孙国鹏; 李雪华; 田金河; 李鹏; 朱艳平; 岳锋; 王选年
    • 摘要: 为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定后,通过免疫新西兰大白兔获得抗ZIL多抗血清,并对抗体效价、半数抑制浓度(IC_(50))和特异性进行鉴定。HPLC-MS检测结果显示,改造后的主产物分子质量为348.21 u,约占整个反应体系产物的92.23%,与ZIL-丁酸盐分子质量完全相符;SDS-PAGE电泳结果显示,BSA/OVA在电泳中的迁移速率明显大于偶联产物;UV结果显示,相比载体蛋白,偶联产物ZIL-BSA/OVA的特征吸收峰均发生了明显变化;ELISA效价检测结果表明,ZIL多抗血清效价在1∶6400以上,通过建立标准曲线测得IC_(50)分别为0.38 ng/mL和1.13 ng/mL,并且与沙丁胺醇(SAL)、特布他林(TBL)、溴布特罗(BRO)、西马特罗(CIM)、克仑特罗(CLB)、盐酸多巴胺(DH)、莱克多巴胺(RAC)、达氟沙星(DAN)、泰乐菌素(TYL)均不存在任何交叉反应。成功制备了ZIL完全抗原ZIL-BSA/OVA,获得了一种高灵敏度和高特异性的抗ZIL pAb,为后续建立ZIL免疫学快速检测方法奠定了基础。
    • 李芳; 章元; 张业
    • 摘要: 目的制备兔抗鼠MORF4L1 a变体的多克隆抗体以区分MORF4L1的a、b变体。方法根据对小鼠MORF4L1 a、b变体差异序列的抗原性、同源性的分析结果,合成MORF4L1 a的N端第52~66位的序列作为抗原肽(15肽,KSAVRPRRSEKSLKT),偶联KLH载体作为抗原免疫家兔,用Dot blot鉴定抗血清的特异性。对特异性良好的1号家兔抗血清进行抗原亲和层析纯化,用间接ELISA测定抗体效价。此外,构建MORF4L1 a、b变体的原核表达质粒和真核表达质粒。利用原核表达系统表达纯化后和在细胞中表达的MORF4L1 a、b蛋白进行Western blot鉴定抗体的特异性。结果1号免疫兔抗血清能特异性识别多肽;纯化后抗体的效价达到1∶512000;成功构建pGEX-4T-2-M4S、pGEX-4T-2-M4L原核表达质粒和pCMV-3Tag-6-M4S、pCMV-3Tag-6-M4L真核表达质粒,并在原核系统和真核系统中成功表达。该抗体能与MORF4L1 a特异结合。结论成功制备了效价高、特异性较强的兔抗鼠MORF4L1 a抗体,为进一步揭示MORF4L1可变剪接的生物学意义和不同变体的生物学功能奠定了实验基础。
    • 运莹豪; 宋东蓥; 和子杰; 米佳丽; 王璐明; 聂国兴
    • 摘要: 目前,水产养殖动物肌肉发育的研究多集中于转录水平,而蛋白质水平的研究较少,这种局限性制约了对水产养殖动物肌肉发育及生长的深入研究。本研究以黄河鲤白肌为原材料,采用原核表达的技术获得含抗原决定簇的配对盒转录因子7(Pax7)、肌肉转录调节因子(MyoD)、肌细胞生成素(MyoG)和生肌调节因子4(MRF4)4种融合蛋白,经纯化后免疫新西兰大耳兔,获得相应黄河鲤兔源多克隆抗体。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测效价,并以此抗体为工具,随机选取3尾黄河鲤,检测其白肌中Pax7、MyoD、MyoG和MRF4在蛋白质水平的表达情况。结果显示:4种融合蛋白的分子质量分别为15.60、16.90、16.91和19.35 ku,抗体的效价均达到2.4×106;经检测,黄河鲤白肌中Pax7、MyoD、MyoG和MRF4蛋白分子的免疫荧光信号强度无显著差异(P>0.05)。本研究制备的黄河鲤肌肉发育关键因子的多克隆抗体可为进一步定量分析黄河鲤肌肉发育关键标志性蛋白分子的表达提供有力的工具。
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