细胞表达

摘要： ZBTB40(zinc finger and BTB domain containing 40)是ZBTB转录因子家族中的成员,其在高等动物中的组织表达情况和分子功能尚不清楚.为初步探讨ZBTB40基因的表达和生理功能,本研究系统检测了其在8种人类细胞系和9种小鼠组织中的mRNA及蛋白质相对丰度.结果显示,ZBTB40在大多数(6/8)人类细胞系和3种小鼠组织(肝脏、胸骨及睾丸)中有表达,且在小鼠肝脏中的丰度显著高于其他组织,提示其与肝脏生理功能相关.为验证此假设,进一步检测了ZBTB40在5对人肝细胞癌及癌旁组织中的表达水平.结果显示,ZBTB40在肝癌细胞的细胞核中高表达,在癌基质中表达量很低.生存分析显示,ZBTB40蛋白的表达水平与肝癌病人的生存时间显著负相关,提示其可能为肝癌潜在的预后生物标志物.此外,本研究还构建了ZBTB40基因慢病毒表达质粒,将其感染U2OS细胞后获得了人ZBTB40稳定表达的细胞株,为后续分子机制及功能研究打下了基础.

摘要： cDNA文库免疫筛选到编码暗黑鳃金龟幼虫几丁质脱乙酰酶HpCDA5基因,序列分析表明HpCDA5含有1个几丁质脱乙酰酶结构域,属于Group V类CDA蛋白.构建重组杆状病毒表达载体pFastBac-HpCDA5,转染昆虫细胞sf9,Western blot分析表明HpCDA5在昆虫细胞sf9中成功表达42 kDa的蛋白.利用qRT-PCR方法分析HpCDA5基因组织表达,结果显示HpCDA5基因在中肠中表达最高,为中肠特异表达蛋白.几丁质结合活性表明HpCDA5蛋白只能被强洗脱剂洗脱,具有很强的几丁质结合活性.本研究通过对暗黑鳃金龟几丁质脱乙酰酶HpCDA5的生化特性研究,为进一步明确HpCDA5的生理功能提供理论依据,并为以HpCDA5蛋白为靶标的暗黑鳃金龟生物防治提供支撑.

摘要： 目的:探究在星形细胞瘤中转化生长因子β1(TGF-β1)以及CD105存在的临床意义以及表达形式,以此为星形细胞瘤的生物治疗方案提供参考依据.方法:择取我院于2013年10月至2016年11月期间手术切除星形细胞瘤62例患者的切除标本进行本次研究,通过免疫法对正常切除组织以及高、低级别细胞瘤组织中存在的TGF-β1以及CD105表达形式进行检测.结果:经检测星形细胞瘤组织中CD105-MVD值以及TGF-β1水平相比正常切除标本相应指标数据值更高,且高级星形细胞瘤组织中CD105-MVD值以及TGF-β1水平显著高于低级别相应数据,组间数据差异经过统计学计算存在意义(P<0.05).结论:星形细胞瘤中的TGF-β1以及CD105二者之间的表达关系十分密切,对肿瘤的生长及恶化演进具有促进作用,二者联合检测对肿瘤的恶性程度具有良好的诊断价值.

摘要： 肽聚糖识别蛋白(Peptidoglycan Recognition Proteins,PGRPs)是可以识别肽聚糖和含肽聚糖的细菌的一类模式识别受体,在介导酚氧化酶级联反应中起着重要的作用.本研究以实验室克隆的小菜蛾PxPGRP-SA(GenBank No.EU399240)为基础,RT-PCR克隆了其开放阅读框(ORF),在原核细胞中获得了高效重组表达,利用GST一步纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备了抗血清,滴定效价为1∶51200.Western blot检测表明Micrococcus luteus和Serratia marcescens可以显著提高PxPGRP-SA在小菜蛾血淋巴中的含量.为了检测PxPGRP-SA与酚氧化酶PO的活力关系,本研究将PxPGRP-SA连接到真核表达载体pMT/Bip/V5/HisA构建真核表达质粒pMTAPGRP,转染果蝇S2细胞中,获得稳定的细胞系,硫酸铜诱导获得表达后用anti-V5纯化获得重组蛋白PxPGRP-SA.将重组蛋白PxPGRP-SA与M.luteus和S marcescens分别温育后,可以显著提高小菜蛾血浆中PO的活力.本研究结果阐明了重组蛋白PxPGRP-SA在小菜蛾体PO级联反应中的功能,为进一步研究PxPGRP-SA在小菜蛾体内免疫信号通路中的功能奠定了基础.

摘要： 目的，探究脓毒症患儿Th17细胞的表达和临床研究。方法，选取2013年5月～2015年4月21例脓毒症患儿，作为实验组（分为脓毒症组、严重脓毒症组、脓毒症休克组），同时选取20例其他疾病患儿，作为对照组。对2组受检患儿的Th17细胞表达情况进行比较分析。结果，实验组脓毒症患儿在Th17以及血清中IL-17、PCT、CRP水平均与对照组相比，存在较大的差异（P＜0.05）。同时，IL-17、PCT、CRP水平越高，患儿的脓毒症约严重。结论，Th17有关的炎性介质水平在患儿体内出现异常升高的情况，则Th17表达上失衡，这表明Th17在脓毒症患儿的发病中起着重要的作用。

摘要： 研究了培养基中添加不同浓度丁酸钠对CHO细胞表达EPO的影响。细胞计数、dotblot、唾液酸含量等检测结果表明，丁酸钠能够抑制细胞生长，影响细胞活率，增加EPO表达并且提高唾液酸含量。

摘要： 目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)基因,实现GGT基因在人胃癌上皮细胞SGC-7901中的表达和定位.方法:本实验从胃癌患者胃黏膜组织中分离培养获得H.pylori,提取其基因组DNA,对GGT基因进行PCR扩增,将利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)融合GGT基因全长序列和成熟肽序列,克隆进pcDNA3质粒中,观察GGT基因表达后在人胃癌上皮细胞SGC-7901中的定位,观察SGC-7901细胞形态、生长以及运动性的变化.推测其可能诱导细胞凋亡的途径.结果:pcDNA3-GGT-EGFP质粒转染SGC-7901细胞后,在SGC-7901细胞中表达外源基因,在显微镜下可见转染的细胞产生明显的病变,细胞由梭形变成圆形、变大、胞核扩大.转染60 h后,在共聚焦显微镜下观察,发现荧光信号主要集中在细胞质中.结论:成功克隆了GGT基因,经酶切和测序验证正确,成功构建了pcDNA3-GGT-EGFP质粒.

摘要： 目的：探讨研究抑制CD24对卵巢癌“失巢凋亡”影响的实验.rn 方法：选取2015年9月-2016年9月在本院就诊的卵巢癌患者300例,按照卵巢癌细胞株的类型,将其分为高表达细胞株HO-8910PM150例的研究组和低表达细胞株HO-8910150例的对照组.研究组使用软琼脂培养基培养进行悬浮培养,对照组使用聚羟乙基异丁烯酸处理过的培养进行悬浮培养,然后采用siRNA方法抑制CD24的表达.rn 结果：CD24在研究组高表达卵巢癌细胞株HO-8910PM表达明显高于对照组低表达卵巢癌细胞株HO-8910(P＜0.05).悬浮培养后,研究组高表达CD24的细胞株形成的集落的大小和数目大于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05);研究组抗失巢凋亡能力也明显高于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05).使用siRNA方法后,两种细胞株的集落形成能力均明显降低(P＜0.05),卵巢凋亡的发生率明显提高(P＜0.05).rn 结论：CD24分子能够在高表达卵巢癌细胞中高表达,并能够明显降低卵巢癌“失巢凋亡”的发生率,提高抗失巢凋亡能力.

摘要： 目的：探讨研究抑制CD24对卵巢癌“失巢凋亡”影响的实验.rn 方法：选取2015年9月-2016年9月在本院就诊的卵巢癌患者300例,按照卵巢癌细胞株的类型,将其分为高表达细胞株HO-8910PM150例的研究组和低表达细胞株HO-8910150例的对照组.研究组使用软琼脂培养基培养进行悬浮培养,对照组使用聚羟乙基异丁烯酸处理过的培养进行悬浮培养,然后采用siRNA方法抑制CD24的表达.rn 结果：CD24在研究组高表达卵巢癌细胞株HO-8910PM表达明显高于对照组低表达卵巢癌细胞株HO-8910(P＜0.05).悬浮培养后,研究组高表达CD24的细胞株形成的集落的大小和数目大于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05);研究组抗失巢凋亡能力也明显高于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05).使用siRNA方法后,两种细胞株的集落形成能力均明显降低(P＜0.05),卵巢凋亡的发生率明显提高(P＜0.05).rn 结论：CD24分子能够在高表达卵巢癌细胞中高表达,并能够明显降低卵巢癌“失巢凋亡”的发生率,提高抗失巢凋亡能力.

摘要： 目的：探讨研究抑制CD24对卵巢癌“失巢凋亡”影响的实验.rn 方法：选取2015年9月-2016年9月在本院就诊的卵巢癌患者300例,按照卵巢癌细胞株的类型,将其分为高表达细胞株HO-8910PM150例的研究组和低表达细胞株HO-8910150例的对照组.研究组使用软琼脂培养基培养进行悬浮培养,对照组使用聚羟乙基异丁烯酸处理过的培养进行悬浮培养,然后采用siRNA方法抑制CD24的表达.rn 结果：CD24在研究组高表达卵巢癌细胞株HO-8910PM表达明显高于对照组低表达卵巢癌细胞株HO-8910(P＜0.05).悬浮培养后,研究组高表达CD24的细胞株形成的集落的大小和数目大于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05);研究组抗失巢凋亡能力也明显高于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05).使用siRNA方法后,两种细胞株的集落形成能力均明显降低(P＜0.05),卵巢凋亡的发生率明显提高(P＜0.05).rn 结论：CD24分子能够在高表达卵巢癌细胞中高表达,并能够明显降低卵巢癌“失巢凋亡”的发生率,提高抗失巢凋亡能力.

摘要： 目的：探讨研究抑制CD24对卵巢癌“失巢凋亡”影响的实验.rn 方法：选取2015年9月-2016年9月在本院就诊的卵巢癌患者300例,按照卵巢癌细胞株的类型,将其分为高表达细胞株HO-8910PM150例的研究组和低表达细胞株HO-8910150例的对照组.研究组使用软琼脂培养基培养进行悬浮培养,对照组使用聚羟乙基异丁烯酸处理过的培养进行悬浮培养,然后采用siRNA方法抑制CD24的表达.rn 结果：CD24在研究组高表达卵巢癌细胞株HO-8910PM表达明显高于对照组低表达卵巢癌细胞株HO-8910(P＜0.05).悬浮培养后,研究组高表达CD24的细胞株形成的集落的大小和数目大于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05);研究组抗失巢凋亡能力也明显高于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05).使用siRNA方法后,两种细胞株的集落形成能力均明显降低(P＜0.05),卵巢凋亡的发生率明显提高(P＜0.05).rn 结论：CD24分子能够在高表达卵巢癌细胞中高表达,并能够明显降低卵巢癌“失巢凋亡”的发生率,提高抗失巢凋亡能力.

摘要： 目的：探讨研究抑制CD24对卵巢癌“失巢凋亡”影响的实验.rn 方法：选取2015年9月-2016年9月在本院就诊的卵巢癌患者300例,按照卵巢癌细胞株的类型,将其分为高表达细胞株HO-8910PM150例的研究组和低表达细胞株HO-8910150例的对照组.研究组使用软琼脂培养基培养进行悬浮培养,对照组使用聚羟乙基异丁烯酸处理过的培养进行悬浮培养,然后采用siRNA方法抑制CD24的表达.rn 结果：CD24在研究组高表达卵巢癌细胞株HO-8910PM表达明显高于对照组低表达卵巢癌细胞株HO-8910(P＜0.05).悬浮培养后,研究组高表达CD24的细胞株形成的集落的大小和数目大于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05);研究组抗失巢凋亡能力也明显高于对照组低表达CD24细胞株(P＜0.05).使用siRNA方法后,两种细胞株的集落形成能力均明显降低(P＜0.05),卵巢凋亡的发生率明显提高(P＜0.05).rn 结论：CD24分子能够在高表达卵巢癌细胞中高表达,并能够明显降低卵巢癌“失巢凋亡”的发生率,提高抗失巢凋亡能力.

摘要： 为研究奶牛子宫内膜炎时急性相蛋白SAA和HP的分子表达规律,采集了奶牛子宫组织,通过病理学研究鉴定出不同炎症强度的子宫组织样本;同时体外培养了奶牛子宫内膜上皮细胞,以致炎因子细菌脂多糖(LPS)诱导建立了细胞炎症模型.应用RT-qPCR技术研究了子宫组织和细胞炎症模型中SAA和HP基因的表达变化,以Western Blot技术研究了子宫组织中SAA的蛋白表达变化.结果显示,在子宫组织中,SAA基因与蛋白的表达水平均与子宫内膜炎强度呈正相关,然而HP基因表达水平与组织炎症强度无显著相关性.此外,在子宫内膜上皮细胞体外炎症模型中,SAA基因表达水平与LPS剂量呈正相关,而HP基因表达水平呈负相关.结果表明,子宫组织中和体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中都能表达SAA和HP.作为急性期反应的生物标记,与SAA相比,HP可能对炎症更敏感,其基因表达更早更迅速.

摘要： 为研究奶牛子宫内膜炎时急性相蛋白SAA和HP的分子表达规律,采集了奶牛子宫组织,通过病理学研究鉴定出不同炎症强度的子宫组织样本;同时体外培养了奶牛子宫内膜上皮细胞,以致炎因子细菌脂多糖(LPS)诱导建立了细胞炎症模型.应用RT-qPCR技术研究了子宫组织和细胞炎症模型中SAA和HP基因的表达变化,以Western Blot技术研究了子宫组织中SAA的蛋白表达变化.结果显示,在子宫组织中,SAA基因与蛋白的表达水平均与子宫内膜炎强度呈正相关,然而HP基因表达水平与组织炎症强度无显著相关性.此外,在子宫内膜上皮细胞体外炎症模型中,SAA基因表达水平与LPS剂量呈正相关,而HP基因表达水平呈负相关.结果表明,子宫组织中和体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中都能表达SAA和HP.作为急性期反应的生物标记,与SAA相比,HP可能对炎症更敏感,其基因表达更早更迅速.

摘要： 为研究奶牛子宫内膜炎时急性相蛋白SAA和HP的分子表达规律,采集了奶牛子宫组织,通过病理学研究鉴定出不同炎症强度的子宫组织样本;同时体外培养了奶牛子宫内膜上皮细胞,以致炎因子细菌脂多糖(LPS)诱导建立了细胞炎症模型.应用RT-qPCR技术研究了子宫组织和细胞炎症模型中SAA和HP基因的表达变化,以Western Blot技术研究了子宫组织中SAA的蛋白表达变化.结果显示,在子宫组织中,SAA基因与蛋白的表达水平均与子宫内膜炎强度呈正相关,然而HP基因表达水平与组织炎症强度无显著相关性.此外,在子宫内膜上皮细胞体外炎症模型中,SAA基因表达水平与LPS剂量呈正相关,而HP基因表达水平呈负相关.结果表明,子宫组织中和体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中都能表达SAA和HP.作为急性期反应的生物标记,与SAA相比,HP可能对炎症更敏感,其基因表达更早更迅速.

摘要： 为研究奶牛子宫内膜炎时急性相蛋白SAA和HP的分子表达规律,采集了奶牛子宫组织,通过病理学研究鉴定出不同炎症强度的子宫组织样本;同时体外培养了奶牛子宫内膜上皮细胞,以致炎因子细菌脂多糖(LPS)诱导建立了细胞炎症模型.应用RT-qPCR技术研究了子宫组织和细胞炎症模型中SAA和HP基因的表达变化,以Western Blot技术研究了子宫组织中SAA的蛋白表达变化.结果显示,在子宫组织中,SAA基因与蛋白的表达水平均与子宫内膜炎强度呈正相关,然而HP基因表达水平与组织炎症强度无显著相关性.此外,在子宫内膜上皮细胞体外炎症模型中,SAA基因表达水平与LPS剂量呈正相关,而HP基因表达水平呈负相关.结果表明,子宫组织中和体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中都能表达SAA和HP.作为急性期反应的生物标记,与SAA相比,HP可能对炎症更敏感,其基因表达更早更迅速.

摘要： 为研究奶牛子宫内膜炎时急性相蛋白SAA和HP的分子表达规律,采集了奶牛子宫组织,通过病理学研究鉴定出不同炎症强度的子宫组织样本;同时体外培养了奶牛子宫内膜上皮细胞,以致炎因子细菌脂多糖(LPS)诱导建立了细胞炎症模型.应用RT-qPCR技术研究了子宫组织和细胞炎症模型中SAA和HP基因的表达变化,以Western Blot技术研究了子宫组织中SAA的蛋白表达变化.结果显示,在子宫组织中,SAA基因与蛋白的表达水平均与子宫内膜炎强度呈正相关,然而HP基因表达水平与组织炎症强度无显著相关性.此外,在子宫内膜上皮细胞体外炎症模型中,SAA基因表达水平与LPS剂量呈正相关,而HP基因表达水平呈负相关.结果表明,子宫组织中和体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中都能表达SAA和HP.作为急性期反应的生物标记,与SAA相比,HP可能对炎症更敏感,其基因表达更早更迅速.

摘要： 本发明涉及一种人工合成的内含子、哺乳动物细胞重组表达载体、哺乳动物宿主细胞、表达方法及其应用，属于生物技术领域。本发明利用人工合成的内含子，构建哺乳动物细胞重组表达载体，可以增强转录产物的稳定性，进而提高外源基因的表达量，降低哺乳动物细胞重组蛋白的生产成本。

摘要： 本发明公开了一种利用流式细胞仪检测单细胞RNA表达的单细胞基因表达分析方法，使锁式探针或者双连接探针进入悬浮的细胞中识别并杂交到其目标RNA上的靶序列，通过连接酶将探针连接成环后经过滚环扩增得到滚环扩增产物；未杂交连接的探针无法成环，因此没有扩增产物；滚环扩增产物与荧光标记的检测探针杂交，多余的检测探针通过离心洗涤除去；制备好的样品可以通过流式细胞仪进行荧光信号测定，根据测定荧光信号强度判定目标RNA在单细胞中的表达情况。本发明高度整合了核酸技术、滚环扩增技术和流式细胞术，实现对单细胞RNA表达在流式细胞仪上进行检测分析。

摘要： 本发明属于重组蛋白筛选系统的构建领域，具体涉及一种CHO细胞蛋白表达系统用表达载体及CHO细胞的筛选方法。本发明的表达载体含有启动子、F2A序列和Poly A序列，在所述F2A序列的上游插入有目的基因，下游插入有荧光标记和筛选标记融合基因；所述F2A序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的上述表达载体，下游荧光标记基因的表达与上游目的基因的表达呈正相关，可利用荧光显微镜直观观察荧光标记基因的表达量，进而可以通过荧光强度强弱确定生长旺盛、表达量高的细胞株，利用半固体培养基更能方便该类细胞株的克隆筛选。

摘要： 本发明涉及一种人工合成的内含子、哺乳动物细胞重组表达载体、哺乳动物宿主细胞、表达方法及其应用，属于生物技术领域。本发明利用人工合成的内含子，构建哺乳动物细胞重组表达载体，可以增强转录产物的稳定性，进而提高外源基因的表达量，降低哺乳动物细胞重组蛋白的生产成本。

摘要： 本发明涉及一种人工合成的polyA、哺乳动物细胞重组表达载体、哺乳动物宿主细胞、表达方法及应用，属于生物技术领域。本发明polyA可用于哺乳动物细胞重组表达载体，polyA可以通过控制mRNA的稳定性，提高mRNA的翻译效率来增强哺乳动物或者其他来源蛋白质的分泌表达，能有效提高哺乳动物细胞中蛋白质的产量并降低生产成本。

摘要： 提供了包括至少一种选自由SEQ ID NO：1到7组成的组的多核苷酸的启动子、包括该启动子的表达盒、包括该表达盒的载体、包括该载体的宿主细胞，和使用该宿主细胞表达基因的方法。

摘要： 提供了包括至少一种选自由SEQ ID NO：1到7组成的组的多核苷酸的启动子、包括该启动子的表达盒、包括该表达盒的载体、包括该载体的宿主细胞，和使用该宿主细胞表达基因的方法。

摘要： 本发明涉及双特异性分子，其能够将表达激活受体的免疫效应细胞定位至病毒感染的细胞，从而利于杀伤病毒感染的细胞。在优选的实施方式中，使用对免疫效应细胞的激活受体和对感染病毒的细胞表达的抗原具有免疫反应性的双特异性分子实现这样的定位，其中抗原可检测地存在于被病毒感染的细胞上，所述抗原存在的水平大于通过双特异性分子在病毒上检测的抗原水平，和涉及这样的双特异性分子在治疗潜伏性病毒感染中的用途。

摘要： 提供了包括至少一种选自由SEQ ID NO：1到7组成的组的多核苷酸的启动子、包括该启动子的表达盒、包括该表达盒的载体、包括该载体的宿主细胞，和使用该宿主细胞表达基因的方法。

摘要： 提供了包括至少一种选自由SEQ ID NO：1到7组成的组的多核苷酸的启动子、包括该启动子的表达盒、包括该表达盒的载体、包括该载体的宿主细胞，和使用该宿主细胞表达基因的方法。