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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会

召开年：2015
召开地：太原
出版时间： 2015-07-24

主办单位：中国畜牧兽医学会;中国病理生理学会

会议文集：中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会论文集

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1.1日龄大通牦牛肺血管低氧适应的组织学特点
- 张晶晶;张勤文;俞红贤;李莉;荆海霞;常建军;魏青;王志强
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：探讨新生大通牦牛肺血管对高原低氧环境适应的遗传学特点及适应机制，研究其是否存在高原低氧环境适应的独特性。本研究发现1日龄牦牛肺动脉平滑肌含量丰富，表现为随着管腔直径的变细，血管平滑肌含量逐渐增加，这种组织结构的特征性变化有利于动脉血液灌注到末梢，使得牦牛肺脏对高原的低氧环境更具有适应性。高海拔牦牛气－血屏障的算术平均厚度比低海拔地区的牦牛薄，减少了气体通过气－血屏障的厚度和阻力，适应于高原低氧环境下气体的交换。
2.糜蛋白酶的毒理学试验研究
- 苏亚楠;周君;宗昕如;白庚辛;史宁花;张玉彦;张春兰;鲍恩东
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：糜蛋白酶是从牛或猪胰脏中提取的一种蛋白水解酶,具有较强的抗炎消肿作用,但其毒理学特性尚不清楚.本试验依据农业部兽药研究技术指导原则汇编的要求,进行了小鼠急性毒性、大鼠30d亚慢性毒性试验,以期对其毒性有初步了解,为临床应用提供参考.结果表明,糜蛋白酶对小鼠的经口半数致死量LD50＞5000mg/kg,根据兽药急性毒性分级标准可判定为基本无毒.大鼠的亚慢性毒性试验结果显示大鼠的血常规、血生化指标中虽有个别指标与阴性对照组大鼠有显著差异,但仍处于正常波动范围之内;脏器系数与阴性对照组相比无显著差异且所有受试鼠均未见明显的病理组织学异常.说明按兽医临床推荐剂量使用糜蛋白酶原料是安全可行的.
3.绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的评价和初步应用
- 刘月;刘淑英;张宇飞;孙晓林
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：对本实验室建立的检测绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(Env)的双抗体夹心ELISA方法进行敏感性、特异性、重复性的评价,检测临床样品,将该方法初步应用于临床实践,分别将羊的主要常见疫病(羊布病,口蹄疫,小反刍兽疫,羊痘,羊快疫、羊猝狙、羊黑疫和羊肠毒血病)的疫苗作为待检样品进行双抗体夹心ELISA试验,确定与制备的抗体有无交叉反应,确定方法的特异性.本实验室利用内外源性JSRV高可变区之一的胞子尾区多肽制备的抗JSRV-Env572–615绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的特异性鼠单克隆抗体和有较多抗原表位；保守的截短囊膜蛋白JSRV-Env54–394制备的抗JSRV-Env54–394绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的特异性兔多克隆抗体，这两种不同动物源的单克隆抗体和多克隆抗体分别做检测抗体和包被抗体，建立检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白双抗体夹心ELISA方法特异、稳定且灵敏快速，有利于JSRV感染羊的活体检测。
4.鸡传染性贫血病毒凋亡素蛋白在不同宿主菌内的表达比较
- 陈桂华;程相朝;郁川;廖成水;余祖华;李静;翟崇凯;田文静;龙塔
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：本研究为获得高表达量的Apoptin蛋白,利用不同宿主菌结构上的区别,构建了三种不同的重组菌,比较研究Apoptin蛋白在不同宿主菌中的表达情况,为进一步研究Apoptin蛋白的抗肿瘤作用奠定了基础，结果表明，本研究成功克隆并构建了能高效表达Apoptin蛋白的原核表达载体pET-32a-Apoptin，并获得了能抑制细胞增殖的Apoptin蛋白，可为进一步研究Apoptin的抗肿瘤作用提供一定的材料。
5.兔豆状囊尾蚴的囊液对免疫器官的影响
- 潘耀谦;李瑞珍;张慧辉;刘兴友
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：兔豆状囊尾蚴病是由豆状带绦虫的中绦期蚴虫寄生于肝脏、胃大网膜和肠系膜所引起的.轻度感染时,病兔表现为消化不良,腹泻,体重减轻等;大量感染时可导致消化紊乱,甚至死亡,造成轻大的经济损失.该病呈世界性分布,在我国广泛流行,并且,随着养犬的增多和养兔业的发展,具有恶化的趋势.目前,临床上没有成型的血清学诊断方法.为了研究有效的血清学诊断方法，本研究用纯化的豆状囊尾蚴的囊液，对3只健康兔（对照兔2只）和3只健康雌性BALB/c小鼠（对照鼠2只）进行免疫，第四次超免后，采血处死受免动物，并采出外周免疫器官，包括淋巴结、脾脏、回肠和圆小囊进行固定和切片，通过普通染色、酯酶染色、免疫组织化学染色和细胞分化抗原染色（CD3,CD4,CD8,CD20和CD21），详细观察了免疫器官的形态学变化。通过a-ANAE染色、CD3、CD4、和CD8染色，在淋巴结的副皮质区、淋巴小结的外周和髓索中有较多的T细胞，生发中心和髓索部见较的CD20、CD21和sABC染色的B细胞。在淋巴窦和淋巴小结及髓索也能检出a-ANAE染色呈阳性反应的巨噬细胞。在脾脏和圆小囊相应的T、B细胞区域，也可检出大量T细胞、B细胞和巨噬细胞。据此认为纯化的兔豆状囊尾蚴囊液可引起T细胞和B细胞增殖，免疫器官发育，各种免疫细胞活化，而且T细胞和B细胞的比值保持正态。因此，纯化的兔豆状囊尾蚴囊液能刺激机体，引起良好的免疫应答。
6.鼠伤寒沙门菌SL1344株sipB和crp基因缺失对其侵袭力影响的比较
- 陈松彪;张春杰;程相朝;李静;廖成水;郁川;何雷;龙塔
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：鼠伤寒沙门菌是一种常见的能引起哺乳动物胃肠炎的食源性病原菌，全球每年有2千万人感染沙门菌病，有大约20万人死于沙门菌病，在公共卫生方面具有重要的意义。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344△crp和SL1344△sipB基因缺失株为研究对象，研究crp和sipB基因缺失后对细菌侵袭能力的影响。研究结果发现crp基因缺失株失去了利用麦芽糖、半乳糖、山梨醇等的能力，并且生长速度较亲本菌株相比也发生了显著的下降。而sipB基因缺失株仍然保持着利用麦芽糖、半乳糖、山梨醇等的能力，并且其生长速度较亲本菌株相比没有发生明显的变化，说明sipB基因缺失后不影响菌株参与碳水化合物、氨基酸和小肽代谢等功能。体外和体内侵袭力的实验对crp基因缺失株和sipB基因缺失株进行了比较，在小鼠体内的动态分布试验结果显示缺失菌株较亲本菌株相比在肝脏和脾脏上面分离到的细菌数明显的低于亲本菌株，细胞的黏附和侵入试验结果也显示出缺失sipB基因后能够显著降低对上皮细胞的黏附和侵入能力，而crp基因缺失株实验组与亲本菌株对照组无明显差别，均与前面的小鼠试验模型结果相一致。
7.鼠伤寒沙门菌SL1344株crp基因缺失株生物学特性的测定
- 陈松彪;张春杰;程相朝;廖成水;李静;郁川;龙塔
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：鼠伤寒沙门菌是一群非适应性或泛嗜性的沙门菌，具有广泛的宿主，是目前世界各国分离率最高的菌型之一。该菌能引起各种哺乳动物以及人类发生全身性感染，具有重要的公共卫生意义。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344△crp基因缺失株为研究对象，研究crp基因缺失后引起的减毒机制,对crp缺失株耐酸碱性、耐盐性、运动性、生物生物被膜主要成分以及黏附和入侵等方面的测定。细菌运动性检测结果表明：该缺失株较亲本菌株相比失去了运动性能力，这与Javier等构建的爱德华菌的crp基因缺失株的结果相一致，笔者推测该基因可能与细菌鞭毛的形成有关。耐酸碱性试验结果表明：crp缺失菌株在酸性和碱性环境中均会影响其生长，PH值在8以上或者在4以下均对其生长有显著的影响，在培养24h后的结果表明crp基因缺失株表现出对碱性环境的耐受性更强，耐盐性试验结果显示crp基因缺失株对高盐的耐受性降低，说明该基因可能与细菌细胞膜的耐高渗能力有关。
8.辽宁省猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其遗传变异分析
- 周铁忠;王娜;王辉暖;高慎阳;董筱萍;程迪;孙佳楠;王楠楠;王瑞
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的以仔猪腹泻、呕吐、脱水和高致死率为临床特征的一类急性、接触性肠道传染病.近年来在全国呈大规模流行,采用传统疫苗免疫,已经不能完全预防本病的发生,为查明辽宁地区PEDV流行毒株的来源及变异情况,对辽宁某地区采集的腹泻仔猪病料进行病毒分离鉴定和遗传变异分析,研究结果为建立有针对性的防控措施提供依据;进一步研究该病毒的致病性、免疫原性特征以及开发相应疫苗奠定基础.通过细胞传代分离毒株，经电镜观察、RT-PCR、中和试验、TCID50和理化性质测定等方法对病毒进行鉴定，针对PEDV高度变异区的S基因进行了克隆、测序和同源性分析，结果发现经Vero细胞盲传至第五代时，开始出现细胞病变，继续传代至18代，细胞病变仍然稳定.利用DNAStar分析发现，PEDVLN-J毒株的S基因和其他许多地方毒株均有较高的同源性，构建系统进化树发现该毒株与HB-2011-1、BJ-2001-2、CHGD-01亲缘关系较近，说明辽宁地区流行的PEDV属于输入性传播。基因序列和氨基酸比对未见较大变异。因此，在防制过程中，应重点考虑加强输入猪只的检疫及选择相应疫苗进行免疫预防。但需要强调的是近年来辽宁PED的发病率较高，仔猪死亡率也很高，需要不断分离鉴定及分析更多的流行毒株，以确证本地区PEDV流行毒株的遗传来源和变异情况。
9.银杏叶提取物对雏鸭的生产性能及血清中生长激素、甲状腺素含量的影响
- 徐之勇;陈小盘;汪文阁;栗森娥;褚颜姣;郭彩虹;唐海蓉
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：本试验目的是为研究日粮中添加不同含量地银杏叶提取物(EGB)对雏鸭生产性能及血清中生长激素、甲状腺素含量的影响.将1日龄樱桃谷肉鸭健雏160只,随机分为4组,每组40只,分别采食基础日粮(Ⅰ组)和3种EGB含量不同(Ⅱ组,EGB含量为0.1％;Ⅲ组,EGB含量为0.2％;Ⅳ组,EGB含量为0.3％)的试验日粮,于3周龄和6周龄时,称量雏鸭体重求平均值,同时翅静脉采血,分离血清,采用放射免疫技术检测血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)及生长激素(GH)的含量.结果表明，饲粮中添加银杏叶提取物能明显提高血浆中T3/T4值及GH的含量，显著地促进雏鸭的生长。其中以添加0.2%的量为最佳。
10.细胞学检查——从临床病理学到解剖病理学的桥梁
- 何丹
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：临床病理学和解剖病理学是病理学的两大分支.临床病理学是通过采集血液、尿液、粪便、分泌物及细胞学样本,运用一定的设备和技术,对疾病做出临床诊断.而解剖病理学是结合了组织样本的处理和剖检技术,对病因和疾病发展的过程做出病理学判断.这两大分支学科对于动物疾病的诊断都具有至关重要的作用,但在兽医临床工作中,二者常处于脱节的状态.本文对兽医临床病理学中的细胞学检查进行介绍,并将其与组织切片中的细胞特征和构型进行对比,从而探讨二者的相关性和联合应用价值.对于不同病因和病理过程的诊断，细胞学和组织病理学诊断具有各自的局限性和优势。细胞学样本的质量高低直接决定了对结构判读的可能性，而对于某些特殊的病理过程，组织切片可能漏查细胞内一些细微的特征。作为兽医病理学家，有必要综合理解临床病理学和解剖病理学方法和应用范围，才能对临床病例进行准确的诊断。
11.携带TAT-Apoptin重组减毒鼠伤寒沙门菌的表达鉴定及其对B16F10细胞增殖影响
- 陈桂华;程相朝;郁川;廖成水;余祖华;何雷;贾艳艳;李静;翟崇凯;田文静;龙塔
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：鉴于改良型TAT-Apoptin利用TAT转导功能提高Apoptin蛋白的抗肿瘤作用研究受限于给药途径与有效的抗原递呈系统的支撑，而减毒鼠伤寒沙门菌不仅可作为肿瘤基因治疗的载体，并且能够选择性积聚在肿瘤组织。本研究以TAT-Apoptin和减毒鼠伤寒沙门菌ΔcrpΔasdSL1344为切入点，研究减毒鼠伤寒沙门菌携带Apoptin协同抗肿瘤作用。以构建好的PMD-19T-Apoptin为模板，运用PCR技术克隆TAT-Apoptin融合基因，并将其连到pYA3493，转化至大肠杆菌X6097感受态细胞，进行PCR和酶切鉴定，阳性重组质粒送上海生物工程有限公司测序。本研究为进一步探明减毒鼠伤寒沙门菌稳定携带TAT-Apoptin协同抗肿瘤作用研究奠定了基础，从而为减毒沙门菌协同Apoptin在肿瘤治疗的应用提供新的思路与途径。
12.副猪嗜血杆菌病的PCR诊断与病理组织学观察
- 张东超;弓建芳;谷禹;王金萍;李留安;金天明
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：目的：本研究旨在对临床发现的天津地区某规模猪场疑似副猪嗜血杆菌病猪进行PCR诊断和病理组织学观察,以期为该疫病的诊断和病理组织学研究提供借鉴和参考.rn 方法：病料采自2014年10月天津地区某猪场40日龄左右的疑似副猪嗜血杆菌病猪.根据发病猪的流行病学调查、临床症状和病理剖检特点进行初步诊断.采集病猪主要病变组织器官进行细菌分离,并对分离菌进行PCR检测和测序;将病变明显组织用10％的福尔马林固定并制作HE病理组织切片,在光学显微镜下观察其病理组织学变化.rn 结果：经副猪嗜血杆菌16SrRNA基因（AY362910）序列设计的特异性引物扩增出650bp左右的特异性目的条带，PCR产物测序结果和GeneBank中的副猪嗜血杆菌Bakos B26株基因序列同源性高达99%，表明该猪病由副猪嗜血杆菌引起。病理组织学观察可见肺脏组织出血，肺泡间质增宽，心脏和肝脏严重出血、淤血和充血，肾小球萎缩和淀粉变性，炎性细胞浸润。结果表明，副猪嗜血杆菌对猪各组织器官均有不同程度的损伤，尤以肺脏病变最为严重。rn 结论：随着猪场的集约化和规模化，副猪嗜血杆菌病逐渐成为猪场的主要细菌性疾病之一，给养殖业带来了极大的经济损失。由于副猪嗜血杆菌病常继发其它呼吸道病，且其病原菌对营养条件要求极高，因此，副猪嗜血杆菌的分离培养条件要求也相当高，这给疾病的确诊带来了极大的困难。PCR诊断方法可根据16SrRNA基因序列对副猪嗜血杆菌进行特异性检测，病理组织学研究可为副猪嗜血杆菌病的临床诊断提供基本的病变特点，因此，PCR检测和病理组织学观察对副猪嗜血杆菌病的诊断具有极其重要的意义。
13.2014年北京地区啮齿类实验动物质量的病理学评价
- 李超;周向梅;赵德明;杨利峰
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：实验动物的标准化对动物实验研究结果的敏感性、准确性及可重复性具有重要影响.本实验室历年承担北京市实验动物质量抽查中的病理学检查任务,本文从病理学角度评价啮齿类实验动物的健康情况,为实验动物标准化饲养提供建议,确保相关科研结果的准确性.本文主要对2014年10月北京市15家实验动物单位的啮齿类实验动物病理学抽检情况进行统计分析.采集啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠后经甲醛钙液固定,通过石蜡切片HE染色、PAS染色、冰冻切片油红O染色后于显微镜下观察.实验动物病理学检测基本健康，此次检测发现主要病变发生于肝脏和肺脏。通常肝脏病变反映进食情况，而数据显示不论动物级别如何，肝脏均有一定程度病变，说明肝脏损伤可能与饲料有关，肺脏病变主要反映饲养环境空气情况。普通级动物肺脏病变较其他级别严重，说明其空气及垫料有待改善，原因可能有垫料不合格、饲养密度过大等。而北京地区秋季的雾霾严重，空气欠佳，对实验动物肺脏也有所影响。
14.PEDV感染猪小肠上皮细胞通过TLR2、TLR3及TLR9途径激活NF-κB
- 曹丽艳;李广兴
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致猪流行性腹泻(PED)的致病因子,可引发严重腹泻和脱水,诱发高死亡率和发病率,严重影响了世界各国养猪业的发展,并造成了严重的经济损失.为了阐明PEDV感染和疾病发生的分子机制,有必要深入研究PEDV与宿主天然免疫系统之间的相互作用.转录调节核因子NF-κB在调节宿主免疫应答方面发挥着重要的作用.本研究中，首次报道在猪小肠上皮细胞（IECs）中PEDV感染能激活NF-κB。在PEDV感染的细胞中，NF-κB激活特征表现在NF-κB从细胞质转移到细胞核，而且增强NF-κB调节基因的表达。NF-κB的激活随病毒感染的进程及剂量的增加而增强。紫外灭活的PEDV不能诱导NF-κB的激活。为了进一步揭示PEDV诱导NF-κB激活的机制，研究了NF-κB激活的上游信号通路，即视黄酸诱导基因基因Ⅰ样受体（RLRs）和TLRs信号通路。通过小分子RNA干扰（siRNA）试验，结果表明PEDV可能通过TLRs信号通路中的接头分子TRIF和MyD88激活NF-κB，而与RLRs相关的RIG-I信号通路无关。再次通过对TLRs家族中TLR2，TLR3，TLR4，TLR8及TLR9基因沉默，发现在PEDV感染的细胞中TLR2，TLR3及TLR9基因沉默能明显抑制NF-κB调节基因的表达及NF-κB的核易位，而TLR4和TLR8基因沉默并没有影响PEDV诱导NF-κB的激活。通过NF-κB荧光素酶报告系统对PEDV编码的结构蛋白的筛选，发现PEDV核蛋白N能够诱导NF-κB的激活。进一步通过对N蛋白基因缺失突变体的研究表明，PEDV N蛋白的中间区域是激活NF-κB所必须的区域。而且TLR2信号通路参与PEDVN蛋白诱导NF-κB的激活。总之，这些发现为PEDV感染激活NF-κB的分子机制提供了新的理论依据。
15.不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导SPF鸡主要细胞因子的表达
- 曹志伟;朱梅胜;王建琳;尹燕博
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：本研究拟用筛选的不同致病性H9N2亚型禽流感病毒毒株(C/SD/196/11和C/SD/818/10)感染SPF鸡,应用实时荧光定量RT-PCR方法对鸡IFN-α、TNF-和H9N2亚型禽流感病毒进行动态测定,以研究不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导SPF鸡肺脏中主要细胞因子表达差异.：本研究通过实时荧光定量RT-PCR方法来检测鸡感染H9N2亚型禽流感病毒后肺脏中IFN-α、TNF-α和H9N2亚型禽流感病毒的动态变化，以研究细胞因子的变化与H9N2亚型禽流感病毒的复制及致病性的相关性。本研究结果发现，强弱毒株均可诱导SPF鸡肺脏产生IFN-α和TNF-α，而较强毒株较较弱毒株明显诱导了IFN-α和TNF-α的表达；总体分析认为，不同致病性毒株均可在SPF鸡肺脏内进行复制，也可诱导IFN-α和TNF-α的产生，但不同致病性毒株之间存在较明显差异。
16.乳酸杆菌对溃疡性结肠炎雏鸡血液中白细胞数量和盲肠扁桃体内树突状细胞成熟情况的影响
- YU Zhi-qiang;于志强;GAO Xue-li;高雪丽;LIU Chao-nan;刘超男;LV Xiao-ping;吕晓萍;ZHENG Shi-min;郑世民
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：为探究乳酸杆菌对雏鸡溃疡性结肠炎的预防及治疗作用,本实验以1日龄SPF雏鸡为研究对象,灌服乳酸杆菌微胶囊连续3天,在10日龄时用100mg/kg体重的2,4,6-三硝基苯磺酸乙醇混合液,通过灌肠途经,建立2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的雏鸡溃疡性结肠炎动物模型.对血液中白细胞总数、嗜酸性粒细胞和盲肠扁桃体中树突状细胞数量的变化进行了较全面系统的检测,结果发现,乳酸杆菌应用雏鸡白细胞总数和嗜酸性粒细胞数明显低于结肠炎模型雏鸡,而树突状细胞数明显高于结肠炎模型雏鸡,说明乳酸杆菌对雏鸡溃疡性结肠炎具有一定的预防和治疗作用,该项研究为溃疡性结肠炎的预防和治疗提供了新的思路和理论依据.
17.绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立
- LIU Yue;刘月;ZHANG Yufei;张宇飞;SUN Xiaolin;孙晓林;LIU Shuying;刘淑英
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：为了制备抗绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)囊膜蛋白(ENV)胞质尾区(CT)的单克隆抗体,利用生物信息学分析绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白氨基酸序列,根据分析结果合成多肽,将此多肽分别连接钥孔血蓝蛋白(CT-KLH)和牛血清白蛋白(CT-BSA),用CT-KLH作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合.建立间接ELISA方法筛选分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8E5,亚类为IgG2a/κ.间接ELISA检测培养上清效价为6.4×103腹水效价为1×105.Western blot及免疫组化结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体能识别JSRV抗原,与其发生特异性反应.试验结果证明,单抗8E5是OPA的重要诊断试剂,为更深入地研究JSRV及其蛋白的生物学功能奠定了基础,应用8E5细胞株分泌的单克隆抗体建立了JSRV-ENV的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性,重复性和敏感性良好,为快速检测诊断绵羊肺腺瘤和研究囊膜蛋白功能奠定了基础.
18.某鸡群禽网状内皮组织增生症的调查分析
- 徐阿慧;钟奇;胡艳欣;张国中
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：禽网状内皮增殖病是由禽网状内皮增殖病病毒(REV)引起的以网状细胞增生为主要特征的一组综合征,包括急性网状细胞增生症、矮小综合征和淋巴组织及其他组织慢性肿瘤增生型疾病.2015年3月份峪口禽养殖厂有一起疑似典型的网状内皮增生症的病例来中国农业大学畜禽疾病诊断中心就诊,本研究拟通过大体剖检、组织病理学观察及PCR技术对该疾病进行诊断,并通过分离该病毒综合分析该病毒的特点.大体剖检病变特点：病鸡极度消瘦,羽毛蓬乱,鸡冠苍白。增生型和坏死型肝、脾肿大，其表面有大小不等的灰白色结节和弥漫性病变，外周神经肿大，法氏囊萎缩，有腹膜炎。病理组织学检测结果：肝和脾组织均可见肿瘤细胞弥散性或团块样浸润，肿瘤细胞中包含大量网状细胞，大的空泡状淋巴细胞浸润和增生，同时可见核分裂相。PCR鉴定结果：分离病料病毒，提取前病毒DNA进行PCR扩增，对产物进行1％琼脂糖凝胶电泳，多重PCR结果只在282bp处出现一条亮带。综上可确诊该鸡群为网状内皮增生病毒感染。
19.永生化猪胎盘滋养层细胞系的细胞鉴定
- Zhang Hongling;张洪玲;Huang Yong;黄勇;Zhao Xiaomin;赵晓民;Tong Dewen;童德文
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：滋养层细胞是构成胎盘屏障的重要组成部分,也是某些病原微生物的主要靶细胞.但是,原代滋养层细胞的增殖能力随着传代次数的增加而逐渐降低,限制了某些持续性研究的开展.本研究将携带有人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的pCI-neo-hTERT质粒导入到原代猪胎盘滋养层细胞内(Porcine placental trophoblast cells,PTCs),建立永生化的猪胎盘滋养层细胞(hTERT-PTCs),为研究猪繁殖障碍相关疾病提供细胞模型.研究结果表明，通过转染外源性的hTERT基因可以使猪胎盘滋养细胞获得永生化，永生化的猪胎盘滋养细胞能够保留与原代滋养层细胞基本一致的关键生物学特性和功能，并且没有获得肿瘤转化特性，符合细胞建系要求，可以作为研究母猪繁殖障碍性疾病致病机制的细胞模型。
20.MPTP对E.tenella宿主细胞凋亡的影响
- 徐之勇;郑明学;张妍;崔小珍;杨莎莎;李珊;刘瑞丽
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：研究目的：探讨线粒体通透性转变孔(MPTP)对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)宿主细胞凋亡的作用,为进一步研究鸡球虫病损伤机制提供理论依据.rn 研究方法：取鸡胚盲肠进行上皮细胞培养并对球虫子孢子进行扩繁,然后将体外培养的贴壁率达到90％以上的鸡胚盲肠上皮细胞(6孔板)分为3组,分别为空白对照组(C组),非处理组(T0组)和处理组(T1组).C组为不接种且不加药组;T0组为接种子孢子不加药组;T1组为接种子孢子且添加环孢菌素A(Ciclosporin A,CsA)组.于接种子孢子后4h、24h、48h、72h、96h、120h取样,每组设5个重复,采用Annexin V-FITC/PI荧光标记流式细胞技术分别测定C组、T0组以及T1组宿主细胞的早期凋亡率以及晚期凋亡和坏死率.rn 研究结果：与对照组比较，在接种E.tenella子孢子后4h，非处理组细胞的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率均显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）降低，24h至120h时，非处理组细胞的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率均显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）升高，均说明处于发育前期的E.tenella抑制了宿主细胞的凋亡，以有利于其在细胞内发育，在发育中后期，明显促进了细胞凋亡以有利于E.tenella扩散；与非处理组比较，在接种子孢子后24h～120h，处理组细胞的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率均显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）降低，说明CsA，作为一种特异的MPTP开放性抑制剂，可明显降低宿主细胞的凋亡率，进一步表明抑制MPTP的开放可明显降低宿主细胞的凋亡率。rn 研究结论：MPTP开放度下降导致宿主细胞的凋亡率明显降低。表明MPTP在调节E.tenella宿主细胞线粒体凋亡通路中起着至关重要的作用。
21.恒河猴蜡样芽孢杆菌感染引起肾病的病理诊断报告
- LI Heng;李恒;SHE Ruiping;佘锐萍;WU Qiaoxing;吴桥兴;SHI Ruihan;石蕊寒;HU Fengjiao;胡凤娇;LI Wei;李威;ZHANG Yang;张洋
- 《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会》 | 2015年
摘要：本研究采用组织病理学、超微病理学、分子生物学结合病原学检测方法对北京某研究中心的病死恒河猴进行了观察分析,结果表明该恒河猴因蜡样芽孢杆菌感染,引起渗出性肺炎,肾病,最终因呼吸障碍而死亡.