狂犬病毒

摘要： 狂犬病是由狂犬病病毒感染引起的、致死率非常高的一种动物源性传染病。狂犬病毒在自然界的宿主包括犬、猫等食肉目动物和蝙蝠。在我国,犬是狂犬病的主要传染源,其次为猫。狂犬病毒主要通过破损的皮肤及黏膜侵入人体,常见的方式是被发病动物咬伤或抓伤。另外,接触发病动物的唾液和分泌物也有可能被感染。

摘要： 目的对本室研发的1株狂犬病减毒株CTN181-3的免疫学特性进行研究。方法以小鼠和金黄地鼠为模型,口腔或肌肉免疫1次后考查暴露前免疫;以金黄地鼠为模型,肌肉免疫考查暴露后免疫。结果CTN181-3株经小鼠和金黄地鼠分别口腔或肌肉免疫1次均能产生高滴度的中和抗体和良好的攻击保护效果;经小鼠口腔和肌肉免疫早期即开始产生细胞因子IFN-γ和IL-2,诱发有效的细胞免疫。以金黄地鼠为模型的暴露后免疫结果显示:肌肉免疫1次的保护率为50%,而免疫2次的保护率可达100%。结论CTN181-3株具有良好的体液免疫和细胞免疫保护效果,而且暴露后2次免疫不必接种免疫球蛋白即可达到100%有效保护,其免疫性强、保护效果好,是一种很有应用前景的狂犬病动物用候选疫苗株。

摘要： 一、什么是狂犬病?狂犬病又名恐水症,是由狂犬病毒引起的一种侵犯神经系统为主的急性人兽共患传染病(在动物和人之间传播的疾病),宿主或易感动物主要包括犬科、猫科及翼手目动物(蝙蝠)。二、狂犬病传播途径是什么?狂犬病病毒主要通过暴露的皮肤或黏膜侵入人体,也就是说,得狂犬病要有两个必要条件,即皮肤或黏膜有损伤和接触的动物携带狂犬病病毒。三、动物狂犬病有什么症状?一是狂暴型,分三期,前驱期、兴奋期和麻痹期。前驱期表现精神沉郁、怕光喜暗,反应迟钝,不听主人呼唤,不愿接触人,食欲反常,喜咬吃异物,吞咽伸颈困难,唾液增多,后肢无力,瞳孔散大。

摘要： 狂犬病是由狂犬病毒(RABV)感染引起的一种古老的人兽共患病,但其至今仍对全球的公共卫生健康造成严重威胁。全球每年约有59000人死于狂犬病,该病主要发生于一些非洲和亚洲的发展中国家,中国是狂犬病高发国家之一。RABV是一种典型的嗜神经病毒,其在进入中枢神经系统(CNS)后开始大量复制,造成宿主的神经损伤,最终致其死亡。狂犬病的病死率几乎100%,目前无有效治疗方法,主要原因是RABV的致病机制尚未完全解析。

摘要： 目的对实验室研发的1株狂犬病减毒株CTN181-3的致病性和基因型特性进行研究。方法用小鼠脑内、口腔接种法和金黄地鼠口腔接种法测定病毒毒力。将病毒通过乳鼠脑内、豚鼠颌下腺和细胞连续传多代,测定传代后病毒的遗传稳定性。对CTN181-3进行全基因组测序,并与其亲本株进行对比分析。结果CTN181-3对实验动物毒力高度减弱,对3周龄小鼠无论脑内或口腔接种均无致病性,对2周龄小鼠也表现出脑内低毒力;口腔接种8周龄金黄地鼠亦无发病死亡。遗传稳定性方面,经1~3 d龄乳鼠脑内连续传5代或豚鼠颌下腺传4代,传代增殖后的病毒滴度虽高达7.10 lg PFU/mL或7.63 lg PFU/mL,对小鼠脑内接种仍保留无致病力的弱毒特性;在BSR细胞和Vero细胞上分别传10代,表型特性稳定。全基因组测序结果分析显示CTN181-3株与国内近年来分离株的同源性高于其他疫苗株与国内分离株的同源性。CTN181-3株与其原始的亲本株CTN-1比较,发生8个氨基酸位点的突变,其中G276 L→V和L1496 M→W氨基酸的突变在CTN181株未发生,为CTN181-3株所特有。因此,这2个位点的氨基酸突变应该是CTN181-3株比CTN181株毒力更弱、遗传稳定性更高的分子基础。结论CTN181-3株的神经毒力高度减弱,毒力稳定,是一种很有应用前景的动物用狂犬病候选疫苗株。

摘要： 2021年元旦,已经席卷全球的传染病新冠肺炎在河北省石家庄市出现了小规模的爆发,严重影响了我们的日常生活:集体活动被取消;公共交通被暂停;人们禁足在家;学校停课……那么我们该如何与导演这一切的"罪魁祸首"新冠病毒进行有效对抗呢?什么是病毒?流感病毒、狂犬病毒、乙肝病毒、埃博拉病毒……这些都是大家耳熟能详的病毒。它们有什么特点,又是如何致病的呢?科学家认为,病毒是目前地球上已知的形态最微小、结构最简单的微生物。

摘要： 狂犬病毒、伪狂犬病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒是引起犬科动物重要传染病的5种病毒,严重威胁着犬科动物的健康,是出入境犬科动物重点筛查的致病因子.为提升口岸进出境犬科动物检疫工作效率,建立了上述5种病毒微流控芯片检测方法.在建立5种病毒环等温扩增检测技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)的基础上,将这些LAMP检测体系固化在同一块塑料芯片上,制备了同步高通量快速检测微流控芯片,并将其应用于临床检测.结果显示:微流控芯片检测方法具有良好的特异性,含有目的基因的阳性样本仅在芯片上相应病毒反应槽出现显著扩增,而其他病毒反应槽未出现扩增,彼此无交叉反应;微流控芯片的敏感性与LAMP方法一致;通过检测不同时期收集的感染犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒临床样本,证实建立的微流控芯片检测方法具有良好的稳定性和可靠性.与现有核酸检测方法相比,微流控芯片可以在受试核酸上样40 min内完成上述5种犬病毒的快速筛查,从而满足进出境犬科动物快速检疫的需求.

摘要： 通常情况下群众对狂犬病“望而生畏”,什么是狂犬疫苗?狂犬病怎样预防?狂犬病的典型临床表现为恐水症,故狂犬病又称恐水病,初期对声、光、风等刺激敏感而喉部有发紧感,进入兴奋期可表现为极度恐怖、恐水、怕风、发作性咽肌痉挛、呼吸困难等,最后痉挛发作停止而出现各种瘫痪,可迅速因呼吸和循环衰竭而死亡。人狂犬病主要通过患病动物咬伤、抓伤或由粘膜感染引起,在特定的条件下还可通过呼吸道气溶胶传染。受染动物唾液内含狂犬病毒。传染动物主要是犬(超过90%),其次是猫,目前对该病尚无特殊有效的治疗方法,病死率几乎100%。接种狂犬疫苗是预防狂犬病最为经济且有效的措施。对于大部分与猫狗等宠物有接触的人群来说,都会有感染狂犬病的风险,接种狂犬疫苗可以有效的提高人体对狂犬病毒的免疫力,降低感染病毒的风险,狂犬病疫苗是人被动物咬伤后接种的狂犬疫苗和抗狂犬病血清,预防感染狂犬病。因此,为了预防狂犬病、提升狂犬疫苗接种率,做好狂犬疫苗接种的护理宣教显得非常重要。如何做好狂犬疫苗接种护理宣教工作?

摘要： 本书以科普漫画的形式,介绍人类与天花病毒、流感病毒、狂犬病毒、乙肝病毒、冠状病毒等11种病毒的斗争历史,包括这些病毒是如何被发现又是如何影响我们身体的,人类在抵抗这些病毒的过程中又发生了哪些故事。本书以风趣幽默的叙述揭开病毒的神秘面纱,展现对病毒最真实最客观的认知,反思人类与自然万物的关系。

摘要： 目的:探讨综合护理措施对于狂犬病人免疫球蛋白接种患者不良反应与心理状况的影响.方法:选择2020年6月～2021年4月本院急诊科收治的64例狂犬病人免疫球蛋白接种患者作为研究对象,按照随机数字表将其划分为两组,每组各32例.两组均行狂犬病人免疫球蛋白接种,对照组采取常规接种护理,研究组在常规接种护理的基础上应用综合护理.通过汉密尔顿焦虑量表(HAMA)与汉密尔顿抑郁量表(HAMD)比较两组护理干预前后的心理状况.同时,比较两组患者的不良反应情况.结果:护理干预后,研究组HAMA与HAMD量表评分较对照组低(P<0.01).研究组不良反应发生率3.13％较对照组25.00％低(P<0.05).结论:综合护理措施能够有效改善狂犬病人免疫球蛋白接种患者的不良心理状况,降低不良反应概率,适于临床应用.

摘要： 环二核苷酸(Cyclic dinucleotide,CDN.)是一种在细菌和后生动物体内普遍存在的小分子第二信使,可结合内质网固有受体干扰素基因激活因子(stimulator of interferon genes,STING),激活机体于扰素通路,从而启动宿主免疫应答.干扰素通路调节先天性和适应性免疫应答,在抗狂犬病毒(RABV)感染过程中发挥重要作用.与单独免疫灭活狂犬病毒相比，灭活病毒与2'3'-cGAMP共同免疫可显著上调DCs表面组织相容复合物分子和共剌激分子表达，提升抗原呈递效率;促进B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖与活化;增强RABV特异性VNA反应，且改变机体TH1型/TH2型免疫应答倾向性。

摘要： 目的:探讨建立无血清无动物源性培养基(VP-SFM)培养Vero细胞和狂犬病毒CTN-1V株的工艺,以期为生产中采用VP-SFM培养狂犬病毒提供一定的实验依据.rn 方法:采用VP-SFM培养Vero细胞和CTN-1V株,绘制病毒增殖曲线;比较不同代次的Vero细胞在VP-SFM中培养狂犬病毒滴度和效力;通过细胞生长、细胞病变观察、病毒增殖等指标检测来进行无血清和含血清培养CTN-1V株的比较;在250mL spin-ner flask中加入2g/L cytodex1,培养Vero细胞,细胞生长72小时按照0.02m.o.i接种CTN-1V株,收获狂犬病毒.rn 结果:采用VP-SFM培养CTN-1V株,病毒增殖良好;不同代次的Vero细胞在VP-SFM中培养的狂犬病毒滴度和效力均无显著性差异(P＞0.05);Vero细胞分别经无血清和含血清培养的病毒滴度和抗原含量比较均无显著性差异(P＞0.05);Vero细胞在VP-SFM上培养的狂犬病毒效力明显高于DMEM上,具有显著性差异(P＜0.05);搅拌瓶微载体系统培养Vero细胞和狂犬病毒,细胞贴壁均匀,生长良好,种毒后第4d起收获病毒,每天收获1个有效体积,可连续收获7-8次,平均病毒滴度为6.50lgFFU/mL、平均病毒效力为6.77IU/mL;平均抗原含量为2.57μg/mL.rn 结论:初步结果显示无血清培养狂犬病毒的结果不差于传统的含血清培养;初步建立了微载体系统、无血清培养Vero细胞和狂犬病毒的工艺.

摘要： 本文通过分析我国境内6株狂犬病毒的核蛋白基因和糖蛋白基因,了解狂犬病毒街毒株与疫苗株在核苷酸和氨基酸序列水平的差异,为有效地控制狂犬病疫情提供科学的依据.结果表明，6株狂犬病毒街毒株均属基因1型，其N、G基因在核苷酸及推导的氨基酸水平上均有变异，但与CTN疫苗株关系最近，表明CTN株可能为我国境内流行的狂犬病毒提供良好的保护。

摘要： 为了解狂犬病毒的致病特性，本研究选择分离自中国的不同毒力的三株狂犬病毒(CTN, aG,HN10)进行致病特性对比研究。其中CTN为高度致弱的减毒疫苗株病毒，aG为中等致弱的疫苗株病毒;而HN10为毒力极强的街毒株病毒。本研究选择7日龄乳鼠为研究对象，分别以脑内接种的方式感染三株病毒，取发病后濒死前的乳鼠脑组织，通过病理学染色、免疫组织化学染色、实时定量PCR及流式细胞术等手段分别从病理结构变化、细胞凋亡、神经突触完整性和炎症反应四个方面人手，旨在揭示不同毒力狂犬病毒致死乳鼠的真正原因。结果表明，不同毒力的狂犬病毒感染乳鼠后所导致致死性结果的原因各不相同。

摘要： 为建立一种简便、快速、直观检测狂犬病毒抗体的红细胞凝集试验方法，本研究采用重叠延伸(SOE)PCR法将抗人红细胞H抗原单链抗体基因(2E8ScFv)和狂犬病毒G基因主要抗原表位区(KG基因)拼接成融合基因2E8KG，进而构建原核表达质粒pET-Trx-2E8KG。通过原核表达、纯化、复性获得既能够与人不同血型红细胞结合，又能够与狂犬病毒(RV)高免血清反应的双功能融合蛋白。以此双功能融合蛋白为检测抗原，以人“O”型红细胞作为指示细胞，建立了快速检测狂犬病毒G抗体的方法。通过方阵滴定试验筛选出检测抗原最佳稀释度为1：16，对应的工作浓度为106．26ug／mL，血清最佳稀释度为1：16，作用时间25min。利用该方法检测犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)阳性血清均无凝集，与RV标准阳性血清反应出现强凝集，表明该方法特异性强。用不同批次制备的检测抗原重复检测狂犬病毒阳、阴性血清，检测结果完全一致，具有很好的重复性。将红细胞凝集试验与荧光抗体病毒中和试验(FAVNT)作平行比对，通过对临床1225份犬血清的检测，结果发现血凝价大于或等于1：16(相当于FAVNT试验中和效价0．5IU／ml)为免疫抗体合格;红细胞凝集试验检测结果与FAVNT方法一致性分析的Kappa值为0．78>0．75，检测结果的符合率为88．82％。本研究利用双功能融合蛋白建立的检测犬狂犬病抗体红细胞凝集试验诊断试剂盒，操作简单、结果准确、灵敏度高且特异性强，可以用于犬狂犬病抗体的检测，大面积开展疫苗免疫效果评估，满足了基层快速、简便、可现场使用的要求。

摘要： 目的：建立RT-PCR方法，用于检测可疑犬只唾液中的狂犬病毒，为狂犬病的快速诊断提供技术支持。方法：根据GenBank中登录的狂犬病毒(RV)N基因序列，设计合成一对特异性引物，以RV弱毒株Flury-HEP为模板，建立了一种快速检测RV的RT-PCR检测方法，并应用于RV诊断。结果：以此对引物进行PCR扩增能得到与理论设计值大小一致的342bp的特异性条带，犬瘟热病毒(CPV)、犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒(CCV)、腺病毒(CAV)扩增结果均为阴性；最低可检出约1.3pg的病毒核酸；重复性试验结果表明，其检测重复性好，对77份犬唾液标本及64份大熊猫粪便样品用所建立的RT-PCR方法检测，检测到1例大熊猫样品为阳性。结论：建立的RT-PCR检测法,特异性强,敏感度高,重复性和稳定性均好,结果可靠,值得推广应用。

摘要： 应用杂交瘤技术获得4株分泌抗狂犬病毒(Rabies vi rus，RV)单克隆抗体细胞株，并对其特性进行分析。经鉴定，它们所分泌的抗体类型为IgG1，腹水效价为1：105-1：107，ELISA法和间接免疫荧光(IFA)检测结果表明：该4株单抗对RV有良好的特异性，对正常Vero细胞及人白蛋白和其他细胞培养物无非特异性反应。将这些单抗腹水进行Protein G亲和层析纯化后获得的纯化抗体用于制备反相亲和层析柱，并以反相亲和层析法纯化RV以获得高纯度RV抗原。应用纯化的RV建立胶体金免疫层析法(GICA)检测RV抗体血清，结果显示，GICA与标准ELlSA法比较的总符合率为96.1％。

摘要： 目的：分析广西16株狂犬病毒P基因序列特点，探讨广西狂犬病高发的可能原因。方法：2005-2008年在广西14个市采集健康犬脑标本3961份，用直接免疫荧光法(DFA)和RT-PCR法检测狂犬病毒，P基因PCR扩增阳性者进行序列测定和分析。结果：16株狂犬病毒完成P基因序列测定，核苷酸及氨基酸同源性分别为86％～100％和93％～100％，属于基因I型狂犬病毒;广西境内至少存在3条狂犬病毒传播链;16株狂犬病毒P基因序列推导的氨基酸序列多个位点发生变异。结论：广西存在多个I型狂犬病毒株系的流行，可能是近几年广西狂犬病持续高发的原因之一。

摘要： 目的：评价狂犬病毒表位区段抗原在疫苗免疫效果评价中的应用价值。方法：通过生物信息学筛选确定优势表位抗原区段，对其进行克隆表达，以间接ELISA方法初步检测了其在疫苗免疫效果评价中的应用价值。结果:获得了狂犬病毒糖蛋白表位区段抗原和核蛋白表位区段抗原。间接ELISA方法初步检测结果显示以糖蛋白表位区段抗原包被与进口试剂盒的符合率为72.2％，以核蛋白表位区段抗原包与进口试剂盒的符合率为67.8％。两种不同抗原之间存在交叉互补性，联合两种抗原与进口试剂盒的符合率为77.8％。结论:可能需要将两种抗原区段进行融合表达或者联合使用进行包被，进一步提高与进口试剂的符合率。

摘要： 本文对一株弱毒株CTN-181以蚀斑技术挑选得到的20个病毒克隆株进行了毒力、免疫原性和遗传稳定性三方面的研究，毒力实验中以对不同日龄小鼠的脑内致病力作为评价依据。经过致病性、有效性、遗传稳定性三方面的验证，已基本掌握了其生物学特征，且达到了WHO关于口服狂犬病疫苗候选毒株实验条件下的相关要求，可用于进一步开展田间试验。

摘要： 本发明涉及强力地中和RABV和非RABV狂犬病毒属病毒二者感染的抗体和其抗原结合片段。本发明还涉及与抗体和抗原结合片段结合的抗原位点，以及编码这样的抗体和抗体片段的核酸和产生这样的抗体和抗体片段的无限增殖化B细胞和培养的浆细胞。另外，本发明涉及本发明的抗体和抗体片段在筛选方法以及在诊断、预防和治疗RABV感染和非RABV狂犬病毒属病毒的感染中的用途。

摘要： 本发明提供一种利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建伪狂犬病毒复制非必需基因插入突变，并获得表达外源基因的重组伪狂犬病毒的方法。本发明将CRISPR/Cas9基因编辑系统导入细胞后，通过预先筛选的靶序列识别病毒基因组，对感染细胞的伪狂犬病毒基因进行编辑和重组。该方法构建的重组伪狂犬病毒在特定基因部位插入目的外源基因，而不影响病毒自身的复制，且构建过程中利用标记正向或反向筛选重组病毒，显著提高了重组病毒的获得效率，为构建表达外源基因的重组伪狂犬病毒疫苗奠定了基础。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑系统构建的重组伪狂犬病毒的方法可用来快速构建重组病毒活载体疫苗，具有重要的应用价值。

摘要： 本发明涉及狂犬病毒G蛋白表位，和与其特异性结合的中和狂犬病毒的结合分子。在本发明中，鉴定出了狂犬病毒G蛋白的不同表位位点，并发现与该表位位点结合的结合分子及结合分子的鸡尾酒保留了针对各种狂犬病毒的中和活性。

摘要： 本发明涉及强力地中和RABV和非RABV狂犬病毒属病毒二者感染的抗体和其抗原结合片段。本发明还涉及与抗体和抗原结合片段结合的抗原位点，以及编码这样的抗体和抗体片段的核酸和产生这样的抗体和抗体片段的无限增殖化B细胞和培养的浆细胞。另外，本发明涉及本发明的抗体和抗体片段在筛选方法以及在诊断、预防和治疗RABV感染和非RABV狂犬病毒属病毒的感染中的用途。

摘要： 本发明涉及强力地中和RABV和非RABV狂犬病毒属病毒二者感染的抗体和其抗原结合片段。本发明还涉及与抗体和抗原结合片段结合的抗原位点，以及编码这样的抗体和抗体片段的核酸和产生这样的抗体和抗体片段的无限增殖化B细胞和培养的浆细胞。另外，本发明涉及本发明的抗体和抗体片段在筛选方法以及在诊断、预防和治疗RABV感染和非RABV狂犬病毒属病毒的感染中的用途。

摘要： 本发明公开了双标准曲线狂犬病毒阳性标准品质粒及其在定量检测狂犬病毒中的用途。该阳性标准品质粒的构建方法包括：分别以鼠源GAPDH基因以及狂犬病毒株的基因组为模板进行PCR扩增得到鼠源GAPDH基因片段以及狂犬病毒基因片段；将扩增的两种基因片段分别与pMD18‑T载体可操作性的连接，即得。本发明进一步公开了采用所构建的双标准曲线狂犬病毒阳性标准品质粒建立双标准曲线荧光定量RT‑qPCR方法，该方法可以对样品狂犬病毒的表达量进行准确检测，能够在狂犬病毒复制的任意时间检测鼠源细胞的复制或小鼠中狂犬病毒的表达情况，具有耗时短、特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点。

摘要： 本发明提供了一种狂犬病毒的单克隆抗体2F2及通用型狂犬病毒抗体快速检测试纸，属于生物检测技术领域，所述单克隆抗体2F2的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的单克隆抗体2F2特异性结合狂犬病毒G蛋白，将单克隆抗体2F2制备成试纸条具有快速、准确、灵敏、特异和低成本优点。

摘要： 本发明涉及抗猪伪狂犬病毒技术领域，尤其是涉及辣蓼黄酮乙酸乙酯部分在抗猪伪狂犬病毒中的应用及抗猪伪狂犬病毒的药物。本发明研究发现辣蓼黄酮乙酸乙酯部分具有体外抗猪伪狂犬病毒的效果，FEA通过阻断猪伪狂犬病毒、抑制猪伪狂犬病毒增殖和直接灭活猪伪狂犬病毒这三种作用方式抗PRV。本发明研究发现FEA对PRV有一定抑制作用，主要通过抑制病毒增殖及直接灭活病毒两种方式发挥抗病毒效果，且呈剂量依赖性，对于PK‑15细胞，FEA浓度100μg/mL～200μg/mL范围内抗病毒效果最好。本发明研究发现FEA对PRV感染的PK‑15细胞有较强保护作用，能够减轻细胞病变程度，提高细胞活性，恢复正常的细胞单层现象。

摘要： 本发明公开了一种应用狂犬病毒G蛋白快速定量检测狂犬病毒抗体的方法、G蛋白的编码基因及试纸，属于生物技术领域。以优化的狂犬病毒G蛋白的核苷酸序列如SEQ NO.1所示，表达纯化获得G蛋白，以此G蛋白制成用于检测狂犬病病毒抗体的G蛋白胶体金试纸。该试纸从一端至另一端依次包括：样品垫、金垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫，其彼此相互重叠并贴于PVC底板的上表面。本发明的优点：不仅能够检测犬血清中的狂犬病病毒抗体，也可以检测猫血清中的狂犬病病毒抗体，且分离血清不用稀释；通过定量检测，可以准确获得狂犬病病毒抗体的浓度，对疫苗免疫效果的评价更客观准确。

摘要： 本发明提供一种利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建伪狂犬病毒复制非必需基因插入突变，并获得表达外源基因的重组伪狂犬病毒的方法。本发明将CRISPR/Cas9基因编辑系统导入细胞后，通过预先筛选的靶序列识别病毒基因组，对感染细胞的伪狂犬病毒基因进行编辑和重组。该方法构建的重组伪狂犬病毒在特定基因部位插入目的外源基因，而不影响病毒自身的复制，且构建过程中利用标记正向或反向筛选重组病毒，显著提高了重组病毒的获得效率，为构建表达外源基因的重组伪狂犬病毒疫苗奠定了基础。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑系统构建的重组伪狂犬病毒的方法可用来快速构建重组病毒活载体疫苗，具有重要的应用价值。