RT-PCR法

摘要： 目的:对比ELISA法和RT-PCR法在麻疹病毒检测中的应用效果,分析两种检测方法的临床价值.方法:纳入我市CDC监测疑似麻疹患者200例为研究对象,采集患者的血清标本与咽试子标本,均进行酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测免疫球蛋白IgM与实时定量PCR核酸检测,对比两种检测方式的结果.结果:ELISA法阳性率43.0％,RT-PCR法阳性率59.0％,RT-PCR在出诊3d内的阳性检出率达到94.07％,ELISA法为50.0％,差异有统计学意义P<0.05.结论:RT-PCR法用于麻疹病毒检测具有快速、准确度高等优势,并且对于初诊期麻疹风疹IgM为阴性的患者可进一步检测确诊,临床应用价值显著.

摘要： 为考察不同部位牛肉肌纤维类型的差异、比较两种肌纤维分型方法、研究肌纤维类型对宰后成熟过程中组织蛋白酶活性的影响,选取新疆褐牛冈下肌、菱形肌、背最长肌、背阔肌、腰大肌、股二头肌、半腱肌、腓肠肌共8个部位的牛肉,分别用ATPase染色法和RT-PCR法检测肌纤维类型组成和MyHC基因相对表达量,用Image-Pro Plus6.0软件分析ATPase染色图像,计算各类型肌纤维的面积和直径,并检测各部位牛肉宰后成熟0、3、7、9、11、14 d时组织蛋白酶B、L、H活性.结果 表明:新疆褐牛不同部位肉的肌纤维类型组成不同,两种肌纤维类型的分型方法在确定Ⅰ型肌纤维数量时呈极显著相关,在8个部位牛肉中,均没有发现MyHCⅡb型基因的表达,ATPase染色法确定的ⅡB型肌纤维数量百分比与RT-PCR法确定的MyHCⅡx型基因表达百分比呈显著正相关,与MyHCⅡa型基因表达百分比呈极显著负相关.两种确定肌纤维类型的方法存在一定的相关性,ATPase染色法确定的ⅡB型肌纤维可能与RT-PCR法确定的MyHCⅡx基因相对应.在宰后成熟过程中,各部位牛肉组织蛋白酶活性基本表现为先升高、后降低的趋势,不同部位的牛肉达到活性最大值的时间不同;组织蛋白酶H活性非常低,相比于组织蛋白酶B和L,其在宰后成熟中的作用可以忽略不计,组织蛋白酶L活性是B活性的2.5 ～4倍,在宰后成熟中起更重要的作用.Ⅰ型肌纤维数量与宰后9、11d组织蛋白酶B和L活性呈显著甚至极显著正相关关系,在新疆褐牛各部位肉中含有的Ⅰ型肌纤维越多,组织蛋白酶活性越高,越有利于牛肉宰后成熟嫩化.

摘要： 目的:观察并记录Twist、P53及E-cadheri在乳腺癌患者体内的表达情况,探讨Twist在乳腺癌患者体内的表达与P53及E-cadheri之间的关系。方法本项研究随机选取在我院确诊为乳腺疾病患者80例为研究对象,其中包括新发良性乳腺疾病患者20例(纤维腺瘤和乳腺病)与新发乳腺癌患者60例,新发良性乳腺疾病患者为对照组,在乳腺癌患者中随机选取30例患者检查癌组织为A组,另外30例患者检查癌组织旁的组织为B组。搜集并详细记录每位患者的临床资料与病例信息。采用RT-PCR法检测Twist mRNA、P53 mRNA、E-cadherim RNA表达情况。结果:Twist mRNA及P53 mRNA在癌组织中的表达水平高于对照组与只检查癌组织旁的组织的B组,E-cadherim RNA在癌组织中的表达水平低于对照组与只检查癌组织旁的组织的B组,差异在统计学方面有意义(P0.05)。在本次研究中,癌组织中Twistm RNA的表达水平与P53 mRNA的表达呈正相关关系(r=0.537,P=0.004),癌组织中Twist mRNA的表达水平与E-cadheri mRNA的表达呈负相关关系(r=-0.499,P=0.001)。结论:Twist可能诱导了乳腺癌体内P53的生成,抑制了E-cadheri的产生,从而加速乳腺癌病程。

摘要： 目的 探讨不同方法检验腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的价值.方法 选择2016年12月至2017年12月接受检验的50例腹泻患者粪便样本为研究对象,将其随机分为对照组和试验组,每组25例,对照组使用培养法,试验组则应用RT-PCR法,对比两组小肠结肠炎耶尔森菌检验阳性率.结果 试验组耶尔森菌检验阳性率60.00％,高于对照组的20.00％,差异有统计学意义(P<0.05).结论 腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验采用RT-PCR法与培养法比较,准确率更高,更加有利于病情判断.

摘要： 目的 分析自然早产胎盘中细胞凋亡抑制因子生存素(survivin)表达水平及其定量检测在自然早产中的诊断价值.方法 选择2015年12月-2016年12月福田医院住院部分娩的60例胎盘,其中自然早产30例(观察组),足月产30例(对照组).采集胎盘,对两组分别采用细胞凋亡抑制因子survivin免疫检测和survivin mRNA定量测定逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法并进行比较.结果 观察组胎盘survivin因子阳性表达率为26.67％(8/30),survivin-mRNA基因阳性表达率为16.67％(5/30),对照组分别为53.33％(16/30)、50.00％(15/30),差异具有统计学意义(P＜0.05).观察组胎盘survivin因子阳性细胞百分比为(57.10±4.82)％,survivin-mRNA相对表达量(0.68±0.23),对照组分别为(72.06±7.59)％、(2.09±0.47),差异具有统计学意义(t分别为11.102、4.910,P＜0.05).结论 适时监测诱发孕妇早产的survivin因子,及早治疗干预,有助于避免早产的发生,提高新生儿的生存质量.

摘要： 目的 探索联合使用RT-PCR及免疫组织化学染色法(IHC)同时检测胃癌淋巴结微转移(LNM),分析胃癌淋巴结微转移对胃癌临床诊治的影响.方法 选取接受手术的pN0期胃癌患者32例.应用IHC和RT-PCR法联合检测术后淋巴结CK20的表达,分析LNM与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、浸润深度、分化程度等临床病理资料的关系.结果 经IHC法检测出6例患者、共14个淋巴结中CK20阳性,LNM阳性率为21.87％;经RT-PCR法检测出10例患者、共23个淋巴结中CK20 mRNA阳性,LNM阳性率为31.25％.两种方法均为阳性的患者7例,RT-PCR法呈阳性而IHC阴性的患者4例,IHC结果阳性而RT-PCR法阴性患者1例.此研究共检出11例患者存在LNM.不同分化程度pN0期胃癌LNM间差异有统计学意义(P＜0.05),低分化胃癌较中-高分化胃癌更易出现LNM.结论 胃癌LNM与分化程度有关,低分化胃癌较中-高分化胃癌更易出现微转移,临床医生给低分化胃癌患者采用缩小手术治疗方式时需慎重.IHC和RT-PCR法联合检测胃癌INM可提高微转移的检出率.

摘要： 华中农业大学植物科学技术学院和江阴苏利化学股份有限公司研究人员采用斑点酶联免疫吸附法（DotELISA）和RT-PCR法,对2013～2014年采自湖北省7个地区的966份疑似感染病毒的蔬菜样本进行了黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）、

摘要： 对宁夏发生6起临床怀疑为牛传染性支原体肺炎的疫情进行诊断。采集牛肺脏病变区和牛鼻腔棉拭子，采用RT-PCR法和序列比对进行初步鉴定和诊断。结果表明，外调牛经长途贩运后，1周内可发病，肺脏呈大理石样变，病原在同群牛之间可迅速传播。调查结果表明，在引进牛群时应对引进牛逐只进行牛传染性支原体肺炎检测;不要从疫区引进牛;对阳性牛扑杀和无害化处理，同时对检测阴性牛紧急隔离可以有效阻止疫情扩散和蔓延。

摘要： 对宁夏发生6起临床怀疑为牛传染性支原体肺炎的疫情进行诊断。采集牛肺脏病变区和牛鼻腔棉拭子，采用RT-PCR法和序列比对进行初步鉴定和诊断。结果表明，外调牛经长途贩运后，1周内可发病，肺脏呈大理石样变，病原在同群牛之间可迅速传播。调查结果表明，在引进牛群时应对引进牛逐只进行牛传染性支原体肺炎检测;不要从疫区引进牛;对阳性牛扑杀和无害化处理，同时对检测阴性牛紧急隔离可以有效阻止疫情扩散和蔓延。

摘要： 对宁夏发生6起临床怀疑为牛传染性支原体肺炎的疫情进行诊断。采集牛肺脏病变区和牛鼻腔棉拭子，采用RT-PCR法和序列比对进行初步鉴定和诊断。结果表明，外调牛经长途贩运后，1周内可发病，肺脏呈大理石样变，病原在同群牛之间可迅速传播。调查结果表明，在引进牛群时应对引进牛逐只进行牛传染性支原体肺炎检测;不要从疫区引进牛;对阳性牛扑杀和无害化处理，同时对检测阴性牛紧急隔离可以有效阻止疫情扩散和蔓延。

摘要： 对宁夏发生6起临床怀疑为牛传染性支原体肺炎的疫情进行诊断。采集牛肺脏病变区和牛鼻腔棉拭子，采用RT-PCR法和序列比对进行初步鉴定和诊断。结果表明，外调牛经长途贩运后，1周内可发病，肺脏呈大理石样变，病原在同群牛之间可迅速传播。调查结果表明，在引进牛群时应对引进牛逐只进行牛传染性支原体肺炎检测;不要从疫区引进牛;对阳性牛扑杀和无害化处理，同时对检测阴性牛紧急隔离可以有效阻止疫情扩散和蔓延。

摘要： 对宁夏发生6起临床怀疑为牛传染性支原体肺炎的疫情进行诊断。采集牛肺脏病变区和牛鼻腔棉拭子，采用RT-PCR法和序列比对进行初步鉴定和诊断。结果表明，外调牛经长途贩运后，1周内可发病，肺脏呈大理石样变，病原在同群牛之间可迅速传播。调查结果表明，在引进牛群时应对引进牛逐只进行牛传染性支原体肺炎检测;不要从疫区引进牛;对阳性牛扑杀和无害化处理，同时对检测阴性牛紧急隔离可以有效阻止疫情扩散和蔓延。

摘要： 根据Genbank上的猪呼肠孤病毒S2基因序列，通过Primer5.0设计了2对特异性引物，扩增的片段大小分别为1329 bp和288 bp，从而建立了一种能直接从猪粪样中特异、灵敏地检测猪呼肠孤病毒的巢式RT-PCR方法。2012年2月至3月，从广东部分地区5个不同猪场采集了共55个样本(其中4个场的样本来自确诊为猪流行性腹泻的阳性猪)，用巢式RT-PCR方法检测猪呼肠孤病毒。结果表明，巢式RT-PCR方法较普通RT-PCR更能灵敏地从猪粪样品中检出猪呼肠孤病毒，为该病毒的分离和临床检测提供了基础。同时，初步检测结果显示猪呼肠孤病毒与猪流行性腹泻病毒的共感染率较高，其间是否存在相互影响有待深入研究。

摘要： 根据Genbank上的猪呼肠孤病毒S2基因序列，通过Primer5.0设计了2对特异性引物，扩增的片段大小分别为1329 bp和288 bp，从而建立了一种能直接从猪粪样中特异、灵敏地检测猪呼肠孤病毒的巢式RT-PCR方法。2012年2月至3月，从广东部分地区5个不同猪场采集了共55个样本(其中4个场的样本来自确诊为猪流行性腹泻的阳性猪)，用巢式RT-PCR方法检测猪呼肠孤病毒。结果表明，巢式RT-PCR方法较普通RT-PCR更能灵敏地从猪粪样品中检出猪呼肠孤病毒，为该病毒的分离和临床检测提供了基础。同时，初步检测结果显示猪呼肠孤病毒与猪流行性腹泻病毒的共感染率较高，其间是否存在相互影响有待深入研究。

摘要： 根据Genbank上的猪呼肠孤病毒S2基因序列，通过Primer5.0设计了2对特异性引物，扩增的片段大小分别为1329 bp和288 bp，从而建立了一种能直接从猪粪样中特异、灵敏地检测猪呼肠孤病毒的巢式RT-PCR方法。2012年2月至3月，从广东部分地区5个不同猪场采集了共55个样本(其中4个场的样本来自确诊为猪流行性腹泻的阳性猪)，用巢式RT-PCR方法检测猪呼肠孤病毒。结果表明，巢式RT-PCR方法较普通RT-PCR更能灵敏地从猪粪样品中检出猪呼肠孤病毒，为该病毒的分离和临床检测提供了基础。同时，初步检测结果显示猪呼肠孤病毒与猪流行性腹泻病毒的共感染率较高，其间是否存在相互影响有待深入研究。

摘要： 根据Genbank上的猪呼肠孤病毒S2基因序列，通过Primer5.0设计了2对特异性引物，扩增的片段大小分别为1329 bp和288 bp，从而建立了一种能直接从猪粪样中特异、灵敏地检测猪呼肠孤病毒的巢式RT-PCR方法。2012年2月至3月，从广东部分地区5个不同猪场采集了共55个样本(其中4个场的样本来自确诊为猪流行性腹泻的阳性猪)，用巢式RT-PCR方法检测猪呼肠孤病毒。结果表明，巢式RT-PCR方法较普通RT-PCR更能灵敏地从猪粪样品中检出猪呼肠孤病毒，为该病毒的分离和临床检测提供了基础。同时，初步检测结果显示猪呼肠孤病毒与猪流行性腹泻病毒的共感染率较高，其间是否存在相互影响有待深入研究。

摘要： 利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒的NS3基因406bp的特异性片段，回收并纯化PCR产物，用地高辛标记，制备核酸探针。特异性试验结果表明，该探针仅与鸭黄病毒的核酸特异性杂交，而与鸭瘟病毒、H9N2禽流感病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、减蛋综合症病毒的核酸杂交均为阴性。敏感性试验表明，该探针对鸭黄病毒的RNA最低检出限量为100 pg／μL。对疑似黄病毒感染鸭的肝脏、肺脏、脾脏、输卵管、卵泡膜和泄殖腔棉拭子进行检测，以卵泡膜的检出率最高。该研究为鸭坦布苏病毒感染的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。

摘要： 本发明涉及一种用多个光学单元(106、107)来监视在多个样本腔室(101-104)中的实时PCR反应的光学检测系统。由于光学单元相对于样本腔室的相对运动，可组合颜色多路复用和空间多路复用，以便在PCR的处理期间光学检测在样本中的病原体和输送定量结果。

摘要： 本发明的电极对的干燥方法包含将正极材料涂布于集电体来制造正极的步骤；将负极材料涂布于集电体来制造负极的步骤；借助隔板来一组或多组地层叠上述正极和负极来制作电极对(7)的步骤；将上述电极对(7)收容于容器的步骤；并且还包含以下干燥步骤中的至少一个：使用冷冻干燥法干燥上述正极和负极中的至少任一方的步骤；以及使用冷冻干燥法干燥收容了上述电极对的容器的步骤。由此，可提供不会在隔板上产生褶皱等不良，且可缩短电极对的干燥时间的电极对的干燥方法、锂离子二次电池的制造方法、双电层电容器的制造方法以及锂离子电容器的制造方法。

摘要： 本发明涉及一种碱法和亚铵法混合草浆黑液、碱法和亚铵法混合浓缩草浆黑液及其制备方法，主要是将碱法草浆黑液和亚铵法草浆黑液混合后进行浓缩的工艺及其获得的产品，采用该生产工艺蒸发浓缩黑液，能源消耗少，产生的浓黑液的固含物中，主要为碱木素和木素磺酸铵及黄腐酸类物质，因此其用途广泛，可以作为多种具有很高经济价值产品的原料，还可用于制备优秀的减水剂，也可以加入少量交联剂，用于制备木质素固沙剂。

摘要： 本发明涉及一种用多个光学单元(106、107)来监视在多个样本腔室(101-104)中的实时PCR反应的光学检测系统。由于光学单元相对于样本腔室的相对运动，可组合颜色多路复用和空间多路复用，以便在PCR的处理期间光学检测在样本中的病原体和输送定量结果。

摘要： 在通过固定小数点数实现共轭梯度法的情况下降低产生溢出的概率。初始化部(12)生成向量p→0、r→0和值ρ0各自的隐匿值。第一计算部(13)生成向量a→i‑1的D倍的值的隐匿值。第二计算部(14)生成值γi‑1的D倍的值的隐匿值。第三计算部(15)生成值αi‑1的隐匿值。第四计算部(16)生成向量d→i的D倍的值的隐匿值。第五计算部(17)生成向量x→i的隐匿值。第六计算部(18)生成向量r→i的隐匿值。第七计算部(19)生成值ρi的D倍的值的隐匿值。第八计算部(20)生成值βi的隐匿值。第九计算部(21)生成向量p→i的隐匿值。

摘要： 本公开提供了一种用于制备多不饱和烃(例如E,E‑法呢醇、醋酸法呢酯和角鲨烯)的方法，其通过碱催化加成将二烷基胺加成至3‑亚甲基‑1‑烯(例如法呢烯)。本公开还提供了包括一种或多种用本公开的方法所制备的法呢烯衍生物的组合物。

摘要： 本发明的电极对的干燥方法包含将正极材料涂布于集电体来制造正极的步骤；将负极材料涂布于集电体来制造负极的步骤；借助隔板来一组或多组地层叠上述正极和负极来制作电极对(7)的步骤；将上述电极对(7)收容于容器的步骤；并且还包含以下干燥步骤中的至少一个：使用冷冻干燥法干燥上述正极和负极中的至少任一方的步骤；以及使用冷冻干燥法干燥收容了上述电极对的容器的步骤。由此，可提供不会在隔板上产生褶皱等不良，且可缩短电极对的干燥时间的电极对的干燥方法、锂离子二次电池的制造方法、双电层电容器的制造方法以及锂离子电容器的制造方法。

摘要： 本发明涉及一种碱法和亚铵法混合草浆黑液、碱法和亚铵法混合浓缩草浆黑液及其制备方法，主要是将碱法草浆黑液和亚铵法草浆黑液混合后进行浓缩的工艺及其获得的产品，采用该生产工艺蒸发浓缩黑液，能源消耗少，产生的浓黑液的固含物中，主要为碱木素和木素磺酸铵及黄腐酸类物质，因此其用途广泛，可以作为多种具有很高经济价值产品的原料，还可用于制备优秀的减水剂，也可以加入少量交联剂，用于制备木质素固沙剂。

摘要： 本发明揭示一种将图像作为多个对象的集合体,在该各对象单元处对图像数据进行处理、使其多路转换,形成多路数据的多路转换方法,其特征在于具有将图像分解为多个主对象,指定各主对象的对象指定步骤、根据需要将所指定的主对象分解为更细小的副对象,以此将主对象分解为多个阶层、进行指定的步骤、使每一个指定的主对象及/或副对象信息包化并给予信息包编号的步骤,以及将分为阶层的内容作为阶层化信息附加于多路数据的步骤,还揭示重放以这种数据多路转换方法多路转换过的多路数据的多路数据重放方法以及使用该多路数据重放方法的多路数据重放装置。

摘要： 本发明提供一种电极用组合物的制造方法、使用通过该制造方法获得的电极用组合物的全固态二次电池用电极片及全固态二次电池的各制造方法，所述电极用组合物的制造方法中，所述电极用组合物含有有机溶剂、活性物质、相对于上述有机溶剂中的活性物质的吸附率为50％以上的粒子状聚合物粘合剂A及相对于上述有机溶剂的溶解度为2质量％以上的聚合物粘合剂B的包含至少两种聚合物的粘合剂、及无机固体电解质，所述电极用组合物的制造方法包括将上述活性物质与上述粒子状聚合物粘合剂A与上述有机溶剂三者的混合物、上述聚合物粘合剂B及上述无机固体电解质混合的步骤。