犬冠状病毒

摘要： 为了解犬冠状病毒(CCoV)的基因组特征和遗传变异情况,本试验利用RT-PCR方法从患病犬肠道内容物中鉴定出一株CCoV,命名为BM35。通过RT-PCR方法扩增S、E、M、N和ORF7基因,然后对测序结果拼接并进行系统进化树和遗传重组分析。结果显示:BM35的3'端序列长度为8 870 bp;遗传进化树分析发现BM35与浙江株B639/ZJ/2019、台湾株NTU336、日本株FC1和越南株HCM47处于同一独立分支;重组分析发现BM35与台湾株NTU156和越南株HCM47在S基因发生重组。本研究有助于深入了解国内CCoV流行毒株的分子特性,为后续CCoV诊断试剂和疫苗的开发提供依据。

摘要： 犬冠状病毒病是犬的一种传染病,临床上以出现呕吐,腹泻,血便为典型症状,做好与犬细小病毒和犬胰腺炎鉴别诊断,本病主要通过接触病犬或病犬分泌物感染,大多通过治疗可以治愈,本文通过用1例病犬为引,简要介绍犬冠状病毒的诊断及治疗的一些体会。犬冠状病毒使犬产生轻重不一的胃肠炎症状,临床症状为呕吐腹泻、厌食等,是当前对犬危害较大的一种传染病。

摘要： 犬冠状病毒病是由犬冠状病毒引起的一种犬急性肠胃炎,主要以犬只呕吐、腹泻、脱水为主要患病特点。犬冠状病毒没有物种特异性、不同年龄的犬均可被感染。犬冠状病毒感染有明显的季节性。在春初、秋末及冬季为犬冠状病毒病的高发季。本文主要从犬冠状病毒的病原体特征、流行病学、发病机制、临床症状、诊断方法及防治措施6个方面对犬冠状病毒进行综述。以期为犬冠状病毒引发的各种疾病的综合防治提供理论参考。

摘要： 1只1岁比熊犬进食后多次呕吐,排便先硬后稀,精神沉郁,通过临床检查、试剂盒检测及血常规检查进行诊断,初步确诊为犬冠状病毒病,对症治疗3 d,呕吐症状仍存在,遂进行血常规检查、生化检查及cPL检测,确诊该犬还患有胰腺炎,并及时调整治疗方案。结果表明:患犬为犬冠状病毒病并发胰腺炎,根据该犬的实际情况采取对症治疗和对因治疗的措施,患犬预后良好。

摘要： 旨在原核表达犬冠状病毒(CCoV)的刺突(S)蛋白,以此为包被抗原,通过优化条件建立CCoV血清抗体间接ELISA检测方法。首先,将CCoV的S基因序列克隆至原核表达载体pColdⅠ中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达。Western-blot验证蛋白大小约为28 ku,纯化后作为包被抗原,通过优化条件建立检测CCoV抗体的间接ELISA,抗原包被最佳质量浓度为4μg/mL;待检血清稀释度为1∶160时D_(450)最高;酶标抗体最佳稀释度为1∶3000;TMB最佳显色时间为20 min;最佳封闭液为50 g/L脱脂奶粉溶液;阴阳性临界值为D_(450)=0.214;与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒的阳性血清均不发生交叉反应,表明特异性好;批内变异系数最大值为4.531%,批间变异系数最大值为2.908%,表明重复性好;该方法能检测到640倍稀释的血清,表明敏感性较高。应用该方法对161份临床犬血清进行检测,发现阳性率为98.7%,说明CCoV的感染率较高。本研究为CCoV抗体检测提供了有效工具。

摘要： 为快速检测犬冠状病毒,研究利用胶体金免疫层析技术制备和评价犬冠状病毒抗原检测卡。试验通过将胶体金标记的CCV Ab1和鼠IgG涂布于聚酯纤维膜上作为标记垫,生物素耦联的CCV Ab2处理在样品垫上,链霉亲和素和羊抗鼠IgG包被于NC膜上分别为检测线和质控线,与吸水纸和PVC底板制备犬冠状病毒抗原胶体金检测卡,并对其评价。结果:该检测卡不与其他病毒发生交叉反应,可检测浓度低至2 ng/mL的样本,24月是稳定的。结论:该测试板具有良好的特异性、灵敏度、重复性和稳定性,并且与RT-qPCR的结果较符合。因此,该检测卡能快速、准确地检测犬冠状病毒,为动物临床诊断和治疗提供参考。

摘要： 狂犬病毒、伪狂犬病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒是引起犬科动物重要传染病的5种病毒,严重威胁着犬科动物的健康,是出入境犬科动物重点筛查的致病因子.为提升口岸进出境犬科动物检疫工作效率,建立了上述5种病毒微流控芯片检测方法.在建立5种病毒环等温扩增检测技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)的基础上,将这些LAMP检测体系固化在同一块塑料芯片上,制备了同步高通量快速检测微流控芯片,并将其应用于临床检测.结果显示:微流控芯片检测方法具有良好的特异性,含有目的基因的阳性样本仅在芯片上相应病毒反应槽出现显著扩增,而其他病毒反应槽未出现扩增,彼此无交叉反应;微流控芯片的敏感性与LAMP方法一致;通过检测不同时期收集的感染犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒临床样本,证实建立的微流控芯片检测方法具有良好的稳定性和可靠性.与现有核酸检测方法相比,微流控芯片可以在受试核酸上样40 min内完成上述5种犬病毒的快速筛查,从而满足进出境犬科动物快速检疫的需求.

摘要： 犬冠状病毒可引起呼吸道疾病和胃肠道疾病,不过致死率不高,经过一定的治疗可以恢复健康.本文通过几个案例来看患病动物的诊断与治疗.

摘要： 为了全面了解犬冠状病毒(CCoV)分离毒株JS1706和JS1712基因组3'端主要结构蛋白基因和非结构蛋白基因的分子特征,本研究设计了8组引物进行RT-PCR扩增,产物经测序和拼接后,获得了约8.7 kb基因组片段,该基因组结构及其编码蛋白顺序为5'-S-3abc-E-M-N-7ab-3'.对CCoV JS1706、JS1712株8.7 kb基因组核苷酸序列与α冠状病毒属参考毒株的相同区域核苷酸序列进行比对,结果表明,2个分离株与CCoVⅡ型参考毒株相似性最高(83.4％～93.1％),其次为FCoVⅡ型参考毒株(87.1％～87.9％)、TGEV参考毒株(86.1％～86.8％)、CCoV Ⅰ型参考毒株(72.0％～72.1％)和FCoV Ⅰ型参考毒株(67.5％～69.9％).JS1706、JS1712毒株与同属冠状病毒参考株的结构蛋白S、E、M和N蛋白氨基酸相似性分别为46.4％～95.2％、75.6％～100％、82.8％～99.2％和78.5％～99.7％.说明同属内冠状病毒的S基因变异度大,E、M、N基因相对保守.根据基因组3'端8.7 kb核苷酸序列和S蛋白氨基酸序列相似性比对结果,JS1706和JS1712毒株均与泛嗜型原型株CB/05相似性最高,分别为93.0％～93.1％、94.8％～95.2％,其他结构蛋白包括E、M和N氨基酸序列比对也发现与CB/05株的相似性较高,分别为97.6％～100％、92.4％～93.1％和97.9％.S蛋白氨基酸序列的进一步分析表明,JS1706和JS1712毒株的S蛋白N端有一些特有氨基酸,S蛋白氨基酸序列中没有明显的S1/S2蛋白酶切位点(RRARR),但在958-963位氨基酸有S2'裂解位点特征基序(KRKYRS).基于S蛋白氨基酸序列构建的系统发育进化树分析显示,CCoV JS1706和JS1712株与CCoVⅡa亚型参考毒株和FCoVⅡ型参考毒株聚集形成一个分枝.CCoV JS1706和JS1712株非结构蛋白的编码基因ORF3abc和ORF7,其结构、大小与经典疫苗株INSAVC-1相似,无明显插入、缺失和移码突变.本研究有助于深入了解国内CCoV流行毒株的分子特性,为后续分子流行病学调查、诊断试剂和疫苗研发奠定了基础.

摘要： 犬细小病毒和犬冠状病毒在宠物临床上对犬具有很强的致病性,发病率一直居高不下,若两种病毒同时感染犬的话,其对犬造成的危害更大,病情也更为复杂,在病犬的治疗上将会面临更大的考验.本论文通过对一例西伯利亚雪橇犬混合感染犬细小病毒与犬冠状病毒病例的分析与讨论,以期为混合感染病例的治疗提供一定的指导和参考.

摘要： 犬冠状病毒(CCoV)是引起犬急性胃肠炎的重要病原,临床方面表现为呕吐,血便和严重脱水等临床症状,对幼犬危害严重,导致幼犬高的死亡率和发病率.近年来研究表明CCoV在犬中的感染非常普遍,且宿主范围很广.本研究从一只6个月病死犬中通过细胞分离,噬斑纯化和间接免疫荧光等方法鉴定出2株犬冠状病毒,HIJ-071和HIJ-073.遗传进化分析显示皿J-071和皿J-073与1型和2型CCoV亲缘关系较远，而与2型FCoV亲缘关系相近。

摘要： 犬冠状病毒病是由犬冠状病毒(CCoV)引起的一种急性、高度接触性胃肠道传染病.目前,CCoV已经呈现出全球流行趋势,给养犬业带来极大的危害.为了明确黑龙江地区CCoV的流行现状及遗传进化性,对201份腹泻犬粪便拭子样品,采用RT-PCR方法针对CCoV M和S基因片段进行扩增,对扩增序列进行测序及分子进化性分析.本研究揭示，黑龙江地区腹泻犬中同时存在CCoV-Ⅰ型、CCoV-Ⅱa亚型和CCoV-Ⅱb亚型，且CCoV-Ⅱ型毒株具有较高的感染率及遗传多样性。

摘要： 本文对中西医结合治疗犬冠状病毒病及体会进行了介绍。文章围绕犬冠状病毒病发病情况、流行特点、临床症状、病理变化、治疗方法等进行了论述。

摘要： 本文对国内分离的犬冠状病毒(CCV)DXMV、V1和V2流行株膜蛋白(M)基因进行了扩增、测序和遗传进化分析.3个CCV流行株M基因全长均为792bp,编码263个氨基酸,其中前17个氨基酸为信号肽.DXMV、V1和V2流行株与Insavc-1疫苗株M基因相比,核苷酸的同源性分别为92.6％、90.9％和91.6％,推导的氨基酸序列的同源性分别为92.5％、92.0％和92.3％,其变异主要在出现M基因前1/3区城内,其中74-76、120-124和131-135三个区域变异较大.国内DXMV、V1、V2、NJ1和NJ1-175个流行株M基因核苷酸同源性为96.6％,推导的氨基酸序列同源性为96.4％,显示出很高的保守性.基于M基因的分子进化分析表明,目前国内绝大多数CCV流行株都属于CCV基因Ⅱ型,只有Fox3-1和Rac2-1两个流行株为基因Ⅰ型.另外,将DXMV株M基因亚克隆到pET28a中,在BL21(DE3)中实现了M蛋白包涵体形式的表达,表述量约占菌体蛋白的10.2％.

摘要： 将大熊猫犬冠状病毒(CCV DXMV)和犬冠状病毒NL-18株人工感染初生幼犬,两组接毒幼犬出现相同的临床症状,并在5天内陆续全部死亡,呈现出相同的剖检变化和病理组织变化.用大熊猫犬冠状病毒荧光抗体(CCV DXMV-FA)染色死亡幼犬小肠,肝脏和脾脏的冰冻切片,结果在以上脏器中均检测到了舍有荧光的细胞.由此说明,CCV DXMV在幼犬体内定植并复制,侵害机体相应的组织.

摘要： 以在E.coli高效表达的犬冠状病毒核蛋白为抗原,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗犬IgG为二抗,建立了检测犬冠状病毒抗体的间接ELISA方法.经方阵滴定确定出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的重组N蛋白抗原包被酶标板,用10﹪的兔血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清.结果表明应用重组N蛋白作为诊断用抗原具有特异性强、稳定性高、成本较低等特点.

摘要： 从重庆某动物园死亡的大熊猫肝脏中分离到一株病毒,经鉴定为犬冠状病毒(命名为CCV DXMV).本实验根据CCV K378和CCV Insavc-1株基因序列设计合成了普通PCR引物SF-SR和SF-SR,以及半套式引物SF-SR、SRI、SFI、SF-SR和SFI,分段扩增了CCV DXMV 81-1 166位以外的S基因,得到了368bp、792bp、737bp、1 178bp和985bp 5个基因片段.将纯化的RCR产物分别克隆到pGEM-T载体中,通过筛选和鉴定,获得了S基因的克隆质粒,将阳性重组粒送生物公司测序.将CCV DXMV和其它株CCV及TGEV HN2002和FIPV 79-1 146的全S基因序列进行分析比较,并绘制了进化树.结果表明,该株病毒与CCV K378的同源性最高,达到99.4﹪;而与CCV 23/03的同源性最低,为56.9﹪;与FIPV和TGEV分别有90.4﹪和82.1﹪的同源性.

摘要： 自2003年7月至2004年4月间收集犬粪样129份,其中南京地区家庭单养的腹泻犬粪样43份,犬场群养健康犬粪样30份;沈阳地区群养健康犬粪样39份;昆明地区群养健康犬粪样12份,腹泻粪样5份;安微某养殖场健康狐粪样61份、貉粪样24份.用套式PCR(RT-nPCR)方法检测犬冠状病毒(CCV)并进行基因型鉴定.结果显示,健康犬粪样中Ⅱ型CCV的检出率南京为80.0﹪(24/25),沈阳为87.2﹪(34/39),昆明为100﹪(12/12),健康狐粪样为70.5﹪(43/61)貉为91.7﹪(22/24),地区之间差别不大,但都高于南京和昆明腹泻犬粪便中CCVⅡ型检出率,41.9﹪(18/43)和40.0﹪(2/5).Ⅰ型CCV的检出结果:南京和沈阳的犬粪样中没有检测到Ⅰ型CCV;1份昆明腹泻犬粪样为CCVⅠ型阳性;29份狐粪样为CCVⅠ型阳性,其中25份同时也是CCVⅡ型阳性,两型混合感染率为41.0﹪;16份貉粪样为CCVⅠ型阳性(66.7﹪),同时也是CCVⅡ型阳性.对部分Ⅰ型和Ⅱ型CCV阳性样本进行测序分析,结果显示,所得Ⅱ型CCV序列都与CCV 1-71及来自中国大熊猫CCV的M基因序列有很高的同源性,分别在96.5~99.5﹪和95.8~99.1﹪之间,与TGEV的同源性(93.4~97.2﹪)高于Ⅰ型FCoV代表株UCD1(77.8~81.6﹪)和Ⅱ型FCoV代表株FIPV 79-1683(75.9~79.7﹪).狐源与貉源CCVⅠ型序列与GenBank上Ⅰ型CCV同源性最高(96.7﹪~98.1﹪).来自昆明的Ⅰ型CCV序列在系统进化树上处于Ⅰ和Ⅱ型CCV之间,可能是一个新的变异株.本研究证实在国内健康犬、狐、貉群中普遍存在CCV的感染,CCVⅡ型的感染较为普遍,CCVⅠ型感染呈局域型分布,并首次从貉粪样中检测到CCV.

摘要： 以32P标记犬冠状病毒特异性RT-PCR产物制成核酸探针，与CCVNL-18株、犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒、狂犬病病毒反转录产物、正常CRFK细胞以及做10～10 000倍稀释的CCV NL-18株反转录产物杂交，进行核酸探针的敏感性和特异性试验。结果表明，该探针仅与CCV NL-18株反转录产物呈阳性杂交，与对照病毒和正常细胞反转录产物均呈阴性反应。初步应用试验结果，该探针可与国内CCV分离病毒YS1、CI1株杂交，且可从8份腹泻犬粪便中检出5份CCV阳性病料。本研究为在我国开展犬冠状病毒感染的分子流行病学调查和临床诊断提供了一种敏感，特异的检测方法。

摘要： 建立CPV和CCV双重PCR方法，即一次实验可同时快速鉴别诊断CPV和CCV两种病毒感染的检测技术，为预防和控制这两种疾病提供快速诊断方法。本试验结果表明，在进行CPV和CCV单项PCR基础上，通过对反应条件的优化可以建立了CPV和CCV双重PCR的快速特异的鉴别诊断方法。在一个PCR反应体系中同时快速、准确地鉴定和区分CPV和CCV两种病毒，提高了检测效率，同时又可将两者相互鉴别，具有很好的临床应用价值。

摘要： 一种冠状病毒假病毒的包装系统，包括Fluc、EGFP双报告基因置换GP基因的水泡性口炎病毒VSV载体、表达冠状病毒刺突蛋白S的装配细胞，所述双报告基因选自荧光素酶和荧光蛋白，荧光素酶报告基因优选Fluc基因；上述包装系统采用一步法包装方法可快速包装出单周期感染、低背景值、高滴度、相较于慢病毒介导的假病毒系统具备检测快速特性的假病毒，可用于COVID‑19(SARS‑CoV‑2)、SARS(SARS‑CoV)、MERS等冠状病毒及其他病毒的研究；上述假病毒可通过病毒污染分布模型、搭建场景、取样检测的步骤的评估消杀剂效力，为消杀剂的评价提供安全、便捷、有效的工具方法，具备广泛的应用价值。

摘要： 一种犬流感病毒、犬冠状病毒和犬呼肠孤病毒的三重PCR检测方法，包括：1)查找犬流感病毒CIV、犬冠状病毒CCOV和犬呼肠孤病毒CRV的保守区序列；2)根据GenBank上公布的CIV病毒的M基因、CCOV病毒的L1基因和CRV病毒的M基因序列信息，分别设计上下游引物对；3)进行三重PCR反应，反应体系中，引物为2.5‑5μmol/L，模板量为1‑5ng/μL，其中，3组引物的添加量符合扩增CIV病毒的引物：扩增CCOV病毒的引物：扩增CRV病毒的引物＝1：0.5‑1：1。利用本发明，可对单一样品同时进行三种不同病原的检测，具有灵敏性高、特异性强、省时省力等优点，以方便快速、准确地进行相关流行病学监测。

摘要： 本发明提供一种用于犬冠状病毒与犬细小病毒的杂交瘤细胞株及单克隆抗体和应用，属于生物检测技术领域。为了提供用于检测犬冠状病毒和犬细小病毒的杂交瘤细胞株及其产生的单克隆抗体。本发明提供一种杂交瘤细胞株，杂交瘤细胞株3G4和杂交瘤细胞株5H8，所述杂交瘤细胞株3G4的保藏号为CGMCC No.45197，所述杂交瘤细胞株5H8的保藏号为CGMCC No.45198。单克隆抗体制备的三联胶体金检测试纸条灵敏度高，特异性好，从而更准确快速地检测犬冠状病毒和犬细小病毒。

摘要： 本发明公开了一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡、试剂盒及其制备方法和使用方法，属于犬细小病毒和犬冠状病毒检测技术领域。该检测卡包括塑料外壳，其中塑料外壳上设有加样孔和观察窗，塑料外壳内装有犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条，犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、底板，金标垫上固定有胶体金标记的抗犬细小病毒单克隆抗体和胶体金标记的犬冠状病毒单克隆抗体，硝酸纤维素膜依次设有包被犬细小病毒多克隆抗体和犬冠状病毒多克隆抗体的检测线和包被羊抗小鼠IgG的质控线。该试剂盒通过对犬粪便或呕吐物样本的免疫层析实验，以快速检测犬只是否感染犬细小病毒和/或犬冠状病毒。

摘要： 本发明公开了一种检测犬冠状病毒和犬细小病毒的核酸组合物、试剂盒及应用，涉及病原体检测技术领域。其包括用于检测犬冠状病毒的第一核酸组合物和用于检测犬细小病毒的第二核酸组合物，该组合物可以用于犬消化道病毒实时荧光定量PCR的检测，经发明人验证该核酸组合物检测病原体的特异性好，且灵敏度高，对于两种病原体的最低检测限均达到5×102copies/mL，有利于患犬的早期诊断或治疗。基于上述核酸组合物可以制备相应的检测试剂盒以及检测试剂。

摘要： 本发明公开了一种犬型钩端螺旋体、黄疸出血型钩端螺旋体、犬冠状病毒三联灭活疫苗。本发明采用我国分离的犬型钩端螺旋体、黄疸出血型钩端螺旋体和犬冠状病毒流行株经灭活后加入佐剂研制而成。本发明涉及病原体的分离培养、鉴定、灭活方法、生产工艺、疫苗保存和免疫方法。犬三联灭活疫苗用于预防犬型钩端螺旋体病、黄疸出血型钩端螺旋体病和犬冠状病毒病，免疫犬后可产生较高的抗体，对强毒攻击具有很好的保护作用。钩端螺旋体为人畜共患传染病，犬为人类的伴侣动物，宠物犬与人类密切接触，因此，该三联灭活疫苗具有较好的社会效益和重要的公共卫生意义。

摘要： 犬瘟热病毒抗体、犬细小病毒抗体和犬冠状病毒抗体联合检测卡，涉及犬病毒检测领域。本实用新型是为了解决目前无法同时对犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒三种病毒性疾病进行检测的问题。它包括顶层、检测层和底层，顶层为长方形的腔体，顶层的上表面开有圆形的加样孔和长方形观测窗；顶层的底面开有检测层放置窗；检测层嵌固在顶层的底面；顶层和检测层形成的整体固定在底层的上表面；检测层包括犬瘟热病毒抗体检测条、犬细小病毒抗体检测条和犬冠状病毒抗体检测条和对照条，且三种检测条和对照条依次连接，并设置在顶层的底面的检测层放置窗的正下方。本实用新型适用于犬病毒检测。

摘要： 本实用新型公开了一种快速检测犬细小病毒与犬冠状病毒的双联检测卡，包括检测卡本体；所述检测卡本体包括底板；所述底板表面对称胶接有用于检测犬细小病毒的第一NC膜和用于检测犬冠状病毒的第二NC膜；所述第一NC膜和第二NC膜外侧分别固定有一吸收垫；所述第一NC膜和第二NC膜上方还盖设有透明卡盖；所述第一NC膜和第二NC膜的透明卡盖之间设置有标记组件；所述标记组件上方压合固定有顶盖；所述标记组件包括支撑座，及粘附于支撑座外围的过滤纸，及对称设置于支撑座两侧的第一标记垫和第二标记垫；本实用新型的快速检测犬细小病毒与犬冠状病毒的双联检测卡，采用双联卡可实现同步分流检测，且检测操作更加简便，检测效率高。

摘要： 本实用新型公开了一种快速检测犬细小病毒与犬冠状病毒的双联检测卡，包括壳体，所述壳体上方和下方分别设置有上面壳和下面壳；所述壳体中间上、下布置分别不只有放置CPV-Ag试纸卡和CCV-Ag试纸卡的第一凹槽和第二凹槽；所述上面壳靠近试纸卡进入端设置有检测CPV-Ag的第一加样孔，所述下面壳上设置有靠近试纸卡进入端设置有检测CCV-Ag的第二加样孔；所述上面壳和下面壳上分别设置有上观察窗和下观察窗，所述上观察窗和下观察窗一侧均设置有检测线“C”和质控线“T”。本实用新型的目的在于提供一种灵敏度高、操作简单，检测时间短，能够同时检测犬冠状病毒、犬细小病毒的双联卡。

摘要： 本实用新型公开了一种犬细小及犬冠状病毒含量检测免疫层析试剂条双联卡，包括回型板、凹槽和放置槽，所述回型板内固定连接有填充块，所述凹槽内部固定连接有轴承，所述放置槽内固定连接有测试卡。该犬细小及犬冠状病毒含量检测免疫层析试剂条双联卡设置有凹槽、轴承、转轴、扭簧和防护板，且凹槽、轴承、转轴和扭簧在防护板的两侧对称设置有两组，由于防护板的俯视横截面形状与通孔的俯视横截面形状一致，通过防护板对通孔进行密封，防止通孔内进入杂质，当需要将样品导入通孔，通过两侧轴承和转轴的作用旋转防护板，使通孔不在密封，将样品导入完成后，在扭簧的作用下防护板复位，继续对通孔进行密封，不会对该装置的使用造成影响。