鳗弧菌

摘要： 为了研究大菱鲆(Scophthalmus maximus)中趋化因子(Chenokine)的特征及其在大菱鲆免疫过程中发挥的作用,设计了本文中的实验.本实验从大菱鲆基因组和转录组数据库中鉴定了一个硬骨鱼特有的趋化因子CC亚家族成员—CCL34,并选取大菱鲆的8个健康组织以及2种细菌感染后的肠道和皮肤组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对其表达特征进行研究.序列分析结果显示该趋化因子全长mRNA包含1个327 bp的5'非编码区(UTR),1个246 bp的3'非编码区,和1个编码103个氨基酸残基长度为312 bp的开放阅读框(ORF).此CCL34基因含有4个外显子和3个内含子.通过系统发育分析、共线性分析,将该大菱鲆趋化因子命名为CCL34.实时荧光定量PCR表明CCL34在大菱鲆健康组织中普遍表达,尤其在肾脏、肝脏、皮肤中有高水平表达.鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)感染后,肠道组织CCL34基因表达量较对照组显著性上调(p<0.05),这表明CCL34可能在大菱鲆的肠道粘膜免疫中起重要作用.本研究为趋化因子家族功能的研究奠定了基础,为增强鱼类免疫力和抗病能力提供了理论依据.

摘要： 为探究鳗弧菌和迟钝爱德华氏菌对短蛸肝脏菌群结构的影响,从烟台附近海域采集短蛸样品,取对照组、注射迟钝爱德华氏菌组、注射鳗弧菌组短蛸的肝脏组织,提取DNA后进行16S rRNA基因扩增子测序,基于生物信息学方法分析与比较样品间的菌群结构,并利用PICRUSt软件对菌群的功能进行预测。3组样品测序后共获得217287条有效序列,迟钝爱德华氏菌组与对照组共有的运算分类单元(OTU)为373个,鳗弧菌组与对照组共有的运算分类单元为166个;Alpha指数显示,对照组肝脏的微生物群落多样性最高,鳗弧菌组最低;门水平上,对照组中的优势菌群是变形菌门(46.2%)、拟杆菌门(13.32%)等,迟钝爱德华氏菌组的核心菌门为变形菌门(43.33%)、软壁菌门(31.33%)等,而鳗弧菌组核心菌门软壁菌门比例高达95.95%;属水平上,对照组的核心菌属由支原体属(9.01%)、短波单胞菌属(5.74%)、Gp4(5.16%)等构成,迟钝爱德华氏菌组丰度最高的4个属依次为支原体属(31.28%)、乳球菌属(9.49%)、肠杆菌属(6.07%)和单胞菌属(3.71%),鳗弧菌组丰度最高的为支原体属(95.94%);聚类热图显示,对照组与迟钝爱德华氏菌组聚为一支,鳗弧菌组单独聚为一支,对照组与迟钝爱德华氏菌组菌群分布较类似;PICRUSt预测结果显示,短蛸肝脏菌群主要功能与新陈代谢类功能有关,注射病菌后,代谢类和细胞通路类功能丰度变低。试验结果显示:短蛸肝脏具有稳定的菌群结构,维持短蛸正常的免疫和代谢活动;注射病菌后肝脏菌群的多样性与丰度发生变化,其中鳗弧菌组变化较大,表明鳗弧菌对短蛸肝脏菌群产生了较大影响。试验结果可为短蛸养殖过程中细菌性疾病的准确诊断与防控提供基础资料。

摘要： Toll样受体(Toll like receptor,TLR)是非常重要的病原体模式识别受体,它通过识别微生物特异性分子模式来控制针对病原体的宿主免疫应答,在先天免疫和获得性免疫中起重要作用.迄今为止,已经在动物中发现脊椎动物TLR的22个主要家族成员.尽管以前的研究已经鉴定了几个大菱鲆的Toll样受体基因(tlr2,tlr8,tlr9),但大菱鲆Toll样受体的深入研究可能会为检测大菱鲆适应性免疫应答反应提供有力依据.从之前的高通量测序数据库中可获得大菱鲆tlr3基因序列,但对其结构特征及其在黏膜免疫应答中的表达特征的研究依然欠缺.为更好地了解大菱鲆tlr3,本文鉴定其基因结构,预测蛋白质结构特征并进行系统进化分析,研究其在不同病原菌侵染黏膜屏障中的表达模式.结果表明:大菱鲆Tlr3包括13个亮氨酸富集的重复序列(LRR,leucine-rich repeats)和一个Toll样白介素-1受体(TIR),与牙鲆Tlr3同源性最高.进化树分析表明,大菱鲆Tlr3与牙鲆亲缘关系最接近.大菱鲆tlr3基因在健康组织中普遍表达,但是表达水平在8种检测组织中差异较大.大菱鲆tlr3在鳗弧菌和海豚链球菌侵染后的黏膜组织中均有表达上调的趋势.这些发现表明大菱鲆tlr3在受到包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌在内的广谱病原体感染的免疫应答中可能具有不可替代的作用.下一步可应用细菌学和免疫组织化学技术进一步研究黏膜组织上的主要细菌入侵位点,并确定侵染后大菱鲆TLRs的配体特异性.

摘要： 溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征.RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应.为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)T6SS的调控作用,本研究构建了MHK3?rpoS突变株,检测了部分表型特征的变化;利用lacZ半乳糖苷酶报告基因检测了突变株hcp1和hcp2在转录水平的变化;进行Western blot并定量分析突变株Hcp在翻译水平的变化;并通过细菌拮抗实验检测了突变株杀菌能力的变化.结果显示,MHK3?rpoS突变株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性与MHK3野生株相比无显著差异(P>0.05),而平台早期的菌膜形成能力有显著上升(P<0.05);在各生长时期,MHK3?rpoS的hcp1和hcp2在转录水平的表达量均较MHK3有显著上升(P<0.01),最高时分别为MHK3的1.79倍和1.94倍;在翻译水平上,MHK3?rpoS在胞内和胞外Hcp的分泌均有显著升高(P<0.05),最高时分别为MHK3的1.59倍和1.31倍;同时,MHK3?rpoS对大肠杆菌(Escherichia coli)E5的杀菌能力约为MHK3的1％.研究表明,rpoS对鳗弧菌MHK3株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性均无显著调控作用,但对平台早期的菌膜形成能力具有一定的负调控作用,在转录和翻译水平上也负调控Hcp的表达.而在杀菌能力上,rpoS发挥一定的正调控作用.说明菌株的杀菌能力强弱并非直接与Hcp的表达和分泌量正相关.本研究为进一步阐明T6SS的调控机制及其介导的杀菌作用机制提供了新思路,并丰富了其理论基础.

摘要： 以鲎血为主要原料制备鲎试剂是我国鲎资源开发的关键产业链.我国鲎种群数量逐年下降,为实现鲎资源的保护和可持续利用,开展对中国鲎造血作用机理的相关研究刻不容缓.实验向中国鲎体内注射N-乙酰半胱氨酸(NAC)和灭活鳗弧菌(V),比较注射后0、6、12、24、48h时中国鲎的血淋巴细胞总数、活性氧含量及非特异性免疫酶活性变化.结果显示,与对照组相比,注射NAC后血淋巴细胞总数(THC)、活性氧(ROS)活性和丙二醛(MDA)含量均有下降趋势,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化酶(T-AOC)、溶菌酶(LZM)、碱性磷酸酶(AKP)活性均有升高趋势.NAC与不同浓度V共同刺激下,THC、ROS、MDA含量相对仅注射NAC的下降有所减缓,其他酶活性有所升高.而血蓝蛋白(HC)在整个实验中无明显变化.6～48h,NAC组的THC、ROS与V组、NAC和V共刺激组相比呈降低趋势,共同刺激下SOD活性显著高于其他组.48h,NAC、V及共刺激下CAT、T-AOC组间无显著差异,但均高于对照组.NAC+106V的MDA含量在48h时最低,AKP活性在12～48 h呈升高趋势,而NAC组的LZM活性在48h最高.注射NAC可降低THC、ROS,共刺激可缓和下降,V组THC、ROS升高,但其余血淋巴参数均提高.研究表明,NAC和V均能刺激中国鲎血淋巴细胞的免疫机能;机体内的ROS含量对中国鲎血淋巴细胞增殖及再生起着重要作用.

摘要： 核酸适配体是采用分子进化技术从随机寡核苷酸文库中筛选得到的对靶目标有较高亲和力的寡核苷酸序列.研究核酸适配体筛选过程中高频序列的进化多样性,对于提高筛选效率,掌握核酸适配体的进化规律具有重要意义.利用Margalef丰富度指数、Shannon-Wiener多样性指数、Pielou均匀度指数、Berger-Parker优势度指数,研究了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)核酸适配体筛选产物中高频序列的进化多样性,结果表明,随着筛选进行,高频序列的种类数、丰富度、多样性、优势度和均匀度在前六轮都呈现较为剧烈的波动,之后种类数、丰富度、多样性、优势度呈现逐步增加的趋势,而均匀度则呈逐步下降的趋势,说明竞争力强的序列在筛选竞争中逐渐占据优势,其种类数量不断增加;利用相对重要性指数(IRI)对高频序列进行了计算分析,根据IRI值可将高频序列分为5类:优势序列,重要序列,常见序列,一般序列和少见序列,其中前三种序列是筛选进化中的相对优势种群;最后对IRI较高的7种核酸适配体进行了二级结构预测,结果显示其二级结构中存在着大小、数量不等的环状结构,这些环的大小数量可能与其结合位点相关.相关研究结果对于鳗弧菌的病害防控及核酸适配体的筛选都具有重要意义.

摘要： CC趋化因子受体3(CCR3)是CC型趋化因子的受体,属于G蛋白耦联受体(GPCRs)家族成员,与过敏等多种炎性疾病密切相关.为探讨香鱼CCR3 (PaCCR3)在响应鳗弧菌感染时的表达变化,从转录组测序数据中获得了PaCCR3基因全长cDNA序列.序列分析表明,PaCCR3具有7次跨膜结构,与胡瓜鱼CCR3氨基酸序列同源性最高(84.6％).系统进化树分析表明,哺乳类、两栖类和鱼类CCR3单独成簇,鱼类CCR3形成一个大簇;PaCCR3与胡瓜鱼CCR3进化相关性最高.实时荧光定量PCR结果显示,PaCCR3基因mRNA在单核/巨噬细胞(MO/MΦ)中表达量最高;鳗弧菌感染后肝、脾和头肾中PaCCR3基因mRNA表达量显著上调;且香鱼MO/MΦ经鳗弧菌体外刺激后,PaCCR3基因mRNA的表达量显著上调.Western blot分析表明经鳗弧菌体外刺激后,香鱼MO/MΦ中PaCCR3蛋白的表达量也显著增加.综上,PaCCR3基因mRNA及其编码蛋白响应于病原体感染而被诱导表达.研究结果首次揭示了香鱼CCR3基因mRNA及蛋白的表达响应于鳗弧菌侵染,它可能通过介导MO/MΦ的功能活性参与免疫应答,可为深入探究鱼类CCR3的功能及作用机制提供新的切入点.

摘要： 组织蛋白酶B作为一种溶酶体半胱氨酸样蛋白酶,在中华绒螯蟹的抗病原体感染中起着重要的作用.本研究克隆了EsCatB基因序列,并对其多态性进行了鉴定.从60个个体中鉴定出19个单核苷酸多态性(SNP)位点,均为同义突变.通过对抗性组和易感组中等位基因频率和基因型频率的分布差异进行统计分析,表明EsCatB编码区1个SNP(852 C/T)与中华绒螯蟹对鳗弧菌的抗性显著相关(P<0.01).SNP(852 C/T)位点的基因型频率(P=0.003)和等位基因频率(P=0)在易感组和抗性组间差异显著.具有TT基因型和T等位基因的中华绒螯蟹对鳗弧菌具有较高的抗性.因此,EsCatB编码序列中的SNP位点(852 C/T)可作为一种分子标记,促进中华绒螯蟹抗鳗弧菌的选择选育.

摘要： 从具有明显出血症状且濒临死亡的草鱼的肝脏和脾脏中分离到一株细菌,开展16S rDNA测序和序列比对,并对该菌株进行了药敏试验和耐药分析。结果显示,该分离菌为鳗弧菌(Vibrio anguillarum),命名为w7株;基于16S rDNA序列,构建了系统进化树,结果显示w7株与V. anguillarum 775株亲缘关系最近;最小抑菌浓度检测结果表明,w7株对氟甲喹具抗性,对恩诺沙星、盐酸多西环素和磺胺甲噁唑+甲氧苄啶较为敏感。在对由于细菌感染引起出血症状的草鱼进行治疗前,应先进行分离菌的药敏试验和耐药性分析,最终选择敏感性药物进行治疗。

摘要： 为了寻找影响鳗弧菌(Vibrio anguillarum)表型变化的基因,本研究使用转座子mini-Tn10(pLOF/Kana)构建了鳗弧菌M3突变株文库,筛选影响表型变化的菌株及相关基因,证明这些表型变化的突变子与毒力存在一定的相关性.对M3突变文库的1152突变子进行筛选,获得泳动能力改变的突变子1个(编号为6G_1),酪蛋白酶活性发生改变的突变子3个(编号为5A_11、7B_12和7E_12),明胶酶活性发生改变的突变子1个(编号为7H_1),以及菌膜形成能力发生显著变化的突变子3个(编号为5E_2、6A_2和6E_12).对转座子插入位点进一步分析显示,一个磷酸二酯酶相关基因突变引起泳动能力增强(P＜0.05),leuD、rseB和thiQ突变引起酪蛋白酶活性显著减弱(P＜0.05),potD突变引起明胶蛋白酶活性显著减弱(P＜0.05),leuO、ilvH和grpB的突变引起菌膜形成能力明显减弱(P＜0.05).对这些表型变化的突变子进行毒力感染,发现野生型M3是6G_1突变子的半数致死剂量(Lethal dose 50％,LD50)的2.04倍,该突变子毒力相对增强.5A_11、7B_12和7E_12的突变子LD50分别为野生型M3的2.96、3.25和3.36倍.7H_1的LD50是野生型M3的1.25倍,5E_2、6A_2和6E_12的LD50分别为野生型M3的3.34、4.08和1.84倍,这些突变子毒力相对减弱.本研究结果为进一步阐明鳗弧菌的发病机制提供了理论基础.

摘要： 以灭活鳗弧菌(SMW5)全菌为抗原,应用杂交瘤技术,制备了鳗弧菌单克隆抗体3株,分别命名为1H9、1C12、6F8,细胞亚类分别为IgG2a、IgM、IgG2b,其中1H9腹水效价为1∶6.4×105.制备鳗弧菌(SMW5)兔多克隆抗体,效价为l∶3.2×105.应用纳米胶体金颗粒标记单克隆抗体1H9并制备金标垫,抗鳗弧菌(SMW5)兔多克隆抗体与羊抗鼠抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜,分别作为检测线T和质控线C,建立鳗弧菌的胶体金免疫层析快速检测方法.经过对试纸条的特异性和灵敏度测定,结果表明:试纸条与嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌、创伤弧菌、副溶血弧菌、副溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌,7种水产常见病原菌没有交叉反应,与鳗弧菌特异性反应,检测灵敏度为6.3×104cfu·mL-1,检测所需时间低于10min.所制备的鳗弧菌胶体金免疫层析检测试纸条具有快速、简便、特异性高和适应基层生产推广应用等优点.

摘要： 本研究检测了分离自发病大菱鲆、半滑舌鳎及鲤鱼的22株病原鳗弧菌毒力基因的携带情况,并建立了病原鳗弧菌的分子生物学检测方法.以angM、tonB、vahl、vah4ClaA、empA、virA、rtxA为靶基因设计特异性引物,结果表明22株病原鳗弧菌均可扩增出empA、vah1、vah4flaA、rtxA、tonB基因目的条带,目的条带大小分别为248bp、493bp、603bp、435bp、441bp及195bp,未扩增出virA和angM基因;以所检出的vah4和rtxA两种毒力基因为靶基因设计的两对特异性引物进行的双重PCR扩增,同一PCR反应体系可扩增出603bp和441bp两条目的条带,且灵敏度为2.4×103CFU/mL,6株对照菌无任何扩增条带;以yah4设计的4条特异引物进行的LAMP扩增,病原鳗弧菌可扩增出阶梯状条带,反应产物加入SYBR GreenⅠ荧光染料后反应液呈现明显的绿色阳性反应,6株对照菌无阶梯状扩增条带且呈现橙色阴性反应,灵敏度为2.4×101CFU/mL,LAMP检测灵敏度是双重PCR的100倍.LAMP技术与PCR比较,操作简便、快速、灵敏性高且不需昂贵仪器,LAMP检测鳗弧菌的方法更适合于养殖生产实际应用.

摘要： 用超声波打碎鳗弧菌M3的基因组DNA，收集大小为1~3 kb的DNA片段，进行DNA片段末端平滑(Blunting)和5’端磷酸化(Kination)反应，与去磷酸化的平末端载体pUC118连接转化人肠杆菌，构建一个小片段文库并测序。测序发现有4个克隆(命名为W2、W3、W5和W11)的插入片段序列与鳗弧菌angR基因序列有97%~100%的同源性。对W2克隆片段测通并与其他克隆片段拼接后，得到了angR基因包括两个编码序列在内的大部分序列。设计一段引物扩增鳗弧菌M3菌株angR基冈同源片段，与自杀质粒pNQ705连接后转化大肠杆菌S17-1。含重组质粒的E.coli S17-1与鳗弧菌M3接合反应将重组质粒与M3基因组发生同源重组，导致鳗弧菌M3菌株angR基因插入失活，成功构建了M3突变株。用突变株人工感染金鱼检测突变株毒力，发现毒力比野生株下降了近2个数量级，证明angR基因对鳗弧菌M3的毒力作用明显。

摘要： 本研究选用栉孔扇贝为实验材料，在注射鳗弧菌感染后，测定了其血清和肝脏抗氧化酶和水解酶活性的变化，并测定了血细胞活性氧含量的变化，以期从免疫方面了解弧菌对扇贝产生毒害的机理，为扇贝健康养殖和疾病防治提供理论依据。本实验研究结果发现，栉孔扇贝注射鳗弧菌后体内酸碱性磷酸酶活性升高，说明鳗弧菌对栉孔扇贝的ACP和ALP活性有明显的刺激作用，激发了扇贝的免疫反应。

摘要： 从某养殖场患病的大菱鲆病灶和肝肾等组织分离到一株病原菌YC-01,经人工感染健康大菱鲆后,其皮下、鳍基部、及口部皮下出血,皮肤溃烂、腹部膨胀等,与自然发病大菱鲆的症状相同.药敏实验结果表明,菌必治、氟哌酸、呋喃妥因、复达欣、红霉素、卡那霉素,对YC-01有较强的抑制作用,该菌株对四环素、磺胺类、青霉素等抗生素有耐药性.经过光镜和电镜的综合形态观察,生理生化特征测试,标准菌种比对等,可将病原菌CY-01鉴定为鳗弧菌.

摘要： 从自然发病的大菱鲆(Scophthalmus maximus)体内分离的病原菌，TL01，经鉴定为鳗弧菌，回接感染实验表明对大菱鲆有较强的致病性，TL01对大菱鲆腹腔感染的半数致死量LD50是2.32cfu/g；由鲈鱼分离的鳗弧菌W-1对大菱鲆腹腔感染的半数致死量LD50是3.04×103 cfu/g；血清学试验表明，W-1和TL01都属于02血清型。用福尔马林灭活的鳗弧菌疫苗分别以浸泡、注射接种的方式对海水养殖大菱鲆鱼苗进行免疫，定期检测血清中特异性抗体，4周后用鳗弧菌悬液(3.7x108cfu/mL)0.2mL腹腔注射感染免疫鱼，结果表明灭活鳗弧菌疫苗用2种方式免疫后都能刺激大菱鲆产生特异性免疫反应，其中注射免疫组在1周后即可产生特异抗体，在6周内仍维持较高水平，最高达1228.8，免疫4周后人工感染后的免疫保护力为91.70％；浸泡免疫组在3周后才产生抗体凝集价，凝集抗体效价最高36，免疫保护力为33.30％。

摘要： 为了探讨金属蛋白酶在鳗弧菌致病中的作用，设计PCR引物扩增并克隆了牙鲆致病性鳗弧菌的金属蛋白酶结构基因。根据得到的金属蛋白酶基因设计PCR引物扩增同源片段，亚克隆于自杀质粒pNQ705，转化具有接合功能的大肠杆菌S17-1。含重组自杀质粒的S17-1与野生型鳗弧菌M3接合，同源重组插入鳗弧菌金属蛋白酶基因使其失活。PCR及序列分析证明了重组自杀质粒的正确插入。经血清学鉴定，该突变株保持野生型菌株的菌体抗原，但生长速率明显幔，其胞外产物蛋白图谱与野生型的有较大区别，蛋白酶的比活也大大下降，特征性的36KD金属蛋白酶条带消失。金属蛋白酶突变株的构建为研究鳗弧菌的致病机理打下了基础。

摘要： 利用双层琼脂平板法分离获得蛭弧菌LBd02-1，并对其生物学特性进行了初步研究，为其在生物防治上应用提供理论依据。研究结果表明，蛭弧菌LBdO2-1对嗜水气单胞菌、鳗弧菌、大肠杆菌和霍乱弧菌等革兰氏阴性菌有较好的裂解作用;对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌等革兰氏阳性菌的裂解能力较弱。本实验以鳗弧菌为宿主菌，探索了不同条件(温度、盐度、Ca2+、Mg3+)下蛭弧菌LBd02-1对鳗弧菌的裂解效果。实验结果表明，蛭弧菌LBd02-1在温度为25～30°C和盐度为10～30时对鳗弧菌的裂解效果较佳;在Ca2+浓度为5～10mmol／L和Mg2+浓度为0.5～2mmol/L时，蛭弧菌LBd02-1的裂解能力也较好。而本实验的研究结果为进一步的研究奠定了一定的基础，为以后的生产应用提供了条件。

摘要： 介绍了海水养殖鱼类的主要细菌性病原体和疫苗研制开发现状，并对活菌疫苗的开发策略、技术路线和发展趋势进行了评述。结合所承担的863计划项目的进展结果，评价了鳗弧菌减毒活茵疫苗的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离的长尾噬菌体科(Siphoviridae)噬菌体Vib‑ANP‑1(保藏编号：KCTC 13075BP)，其具有特异性杀死鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的能力并且包括由SEQ.ID.NO:1表达的基因组，并且涉及一种使用包含作为活性成分的上述噬菌体的组合物来预防和治疗鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染的方法。

摘要： 本发明涉及一种核酸适配体，尤其涉及一种具有靶向抑制鳗弧菌的核酸适配体H10，核酸序列如SEQ.NO.1所示。以及所述的核酸适配体H10在制备鳗弧菌抑制剂中的应用。本发明以鳗弧菌为靶标，选取Cell‑SELEX技术筛选出的适配体（H10）对其进行抗菌功能进行分析。具有筛选周期短、化学合成简便、能替代抗生素等作用，具有较好的应用前景。为进一步开展抑制性适配体的研究提供理论基础。

摘要： 本发明涉及一种核酸适配体，尤其涉及一种具有靶向抑制鳗弧菌的核酸适配体H11，核酸序列如SEQ.NO.1所示。以及所述的核酸适配体H11在制备鳗弧菌抑制剂中的应用。本发明以鳗弧菌为靶标，选取Cell‑SELEX技术筛选出的适配体（H11）对其进行抗菌功能进行分析。具有筛选周期短、化学合成简便、能替代抗生素等作用，具有较好的应用前景。为进一步开展抑制性适配体的研究提供理论基础。

摘要： 本发明涉及一种鳗弧菌鞭毛蛋白基因敲除的方法，利用交叠PCR技术获得了上下游同源臂的融合片段，采用混合孵育的方式完成了重组质粒的转化，并利用二次同源重组技术有效敲除了鳗弧菌的鞭毛蛋白FlaB。本发明简单易行，极大的提高了基因敲除的效率，为鳗弧菌的基因敲除提供了技术支持，同时也为鞭毛蛋白的生物学功能研究提供新的思路。

摘要： 本发明涉及一种核酸适配体，尤其涉及一种具有靶向抑制鳗弧菌的核酸适配体H7，核酸序列如SEQ.NO.1所示。以及所述的核酸适配体H7在制备鳗弧菌抑制剂中的应用。本发明以鳗弧菌为靶标，选取Cell‑SELEX技术筛选出的适配体（H7）对其进行抗菌功能进行分析。具有筛选周期短、化学合成简便、能替代抗生素等作用，具有较好的应用前景。为进一步开展抑制性适配体的研究提供理论基础。

摘要： 本发明是一种用于鳗弧菌（Vibrio anguillarum）特异性识别的ssDNA核酸适配体，所述核酸适配体的核苷酸序列为Apt‑Va01和Apt‑Va02中所示的DNA片段的核苷酸序列。本发明还详细阐述了对该核酸适配体的筛选方法。本发明提供了一条特异性强，亲和力高，检测限低的鳗弧菌核酸适配体，能够快速的对鳗弧菌菌体细胞进行检测，可被应用于食品加工、水产养殖、医学诊断、环境检测等过程中鳗弧菌的快速检测。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离的长尾噬菌体科(Siphoviridae)噬菌体Vib‑ANP‑1(登录号：KCTC 13075BP)，其具有特异性杀死鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的能力并且包括由SEQ.ID.NO:1表达的基因组，并且涉及一种使用包含作为活性成分的上述噬菌体的组合物来预防和治疗鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染的方法。

摘要： 本发明涉及一种鳗弧菌菌株及其应用方法，具体涉及一种鱼类鳗弧菌MN菌株，该菌株分离自大菱鲆(Scophthamus maximus)鱼体中，是一种具有较强毒力的野生菌株，其保藏编号为：CGMCC No.7198。该菌株制备的灭活菌体、菌蜕成分、减毒菌株、保护性抗原、抗原亚单位、抗原决定簇或抗原基因表达载体的表达产物的任何一种或一种以上的疫苗抗原可应用于该菌免疫技术的应用中；免疫应用中疫苗抗原的接种可以采用注射免疫、创伤免疫、浸浴免疫或口服免疫的方式，疫苗抗原可以单独使用，也可以与佐剂混合使用，也可以制成单一制剂但与佐剂同时使用，还可以与佐剂不同时使用。

摘要： 本发明公开一种耗时短、效率高，灵敏度高，可直接应用于临床的同时检测水产动物中哈维氏弧菌和鳗弧菌的双重PCR方法。可同时检测哈维氏弧菌和鳗弧菌的双重PCR方法，制备被检测物的DNA模板并置于反应管中；将鳗弧菌引物和哈维氏弧菌引物放入a步骤的反应管中进行双重PCR反应，所述鳗弧菌引物的浓度为1-20pmol/μl，所述哈维氏弧菌引物的浓度为1-20pmol/μl；所述鳗弧菌引物引物序列为：Rpo-F:5’-AGACCAAGAGATCATGGATT-3’、Rpo-R:5’-AGTTGTTCGTATCTGGGATG-3’、所述哈维氏弧菌引物序列为：Tox-F:5’-GAAGCAGCACTCACCGAT-3’、Tox-R:5’-GGTGAAGACTCATCAGCA-3’。

摘要： 本发明属于蟹类分子标记筛选技术领域。针对鳗弧菌感染中华绒螯蟹患病，具体公开了一种与中华绒螯蟹抗鳗弧菌关联的SNP分子标记、引物对、筛选方法及应用，所述分子标记序列如SEQ ID NO:3所示，且其852位碱基处存在一个T或C的等位基因突变。以设计SEQID NO:1所述的正向引物和SEQ ID NO:2所述的反向引物的引物对，以鳗弧菌感染中华绒螯蟹基因组DNA为模板扩增CatB基因；设计如SEQ ID NO:4所述的正向引物和如SEQ ID NO:5所示的反向引物，以基因组DNA为模板进行PCR扩增反应，对目的条带清晰无杂带的PCR产物进行测序筛选得到。本发明中与中华绒螯蟹抗鳗弧菌相关的SNP分子标记有利于推进中华绒螯蟹遗传育种，为中华绒螯蟹的抗菌选育工作提供新思路。